丹参滴注液中酚酸类活性成分在中空纤维膜超滤过程中迁移规律研究

研究考察丹参滴注液超滤工艺中有机膜对丹参酚酸类成分的适宜性;采用UPLC分析丹参滴注液中9个酚酸类活性成分在聚醚砜(PES)中空纤维膜和聚砜(PS)中空纤维膜超滤过程中的迁移规律。通过对3批分别经2种膜超滤前后的丹参滴注液进行组分结构特征分析,结果表明经PES膜超滤后丹参滴注液中的9个酚酸类活性成分相对超滤前无明显变化;经PS膜超滤后,丹参滴注液中的丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、异阿魏酸、迷迭香酸这5个成分含量无明显变化,而丹酚酸D、丹酚酸B、紫草酸含量均下降了约20%,另丹酚酸A含量明显降低,平衡时最终含量仅有原液中的20%左右。因此,重点对丹酚酸A在超滤膜中迁移特殊性进行深入研究,结果发现,超滤过程中2种膜均会造成丹酚酸A的损失,在PS膜中丹酚酸A损失更多;在对膜进行洗涤再生时发现,乙醇洗涤液中能检测到丹酚酸A,而水洗液中未检测到,说明超滤过程中丹酚酸A的损失主要为吸附作用。该结果提示丹参滴注液中的酚酸类有效成分在膜超滤工艺过程中的迁移不完全遵守膜孔径的相对分子质量通过规律,同时可能受膜材料结构、膜结构与成分结构间的相互作用等因素影响,在膜的超滤过程中表现出不同的迁移行为规律。     

大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺研究

目的:利用大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸,提高制剂中生药含量。方法:采用酸碱浸泡的方式对大孔吸附树脂进行前处理;采用气相色谱法对树脂洗脱液中的残留物进行检测;采用显色反应对树脂吸附力进行判定及对洗脱条件进行优选。结果:基本确定D101型大孔树脂富集、纯化丹参总酚酸工艺条件与参数。结论:大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺可行,能够使丹参总酚酸的含量达到50%以上。     

超滤技术应用对注射用辅料的影响研究

目的:研究超滤技术应用时对常见7种注射用辅料的含量影响.方法:以压力、温度、溶液浓度及超滤膜截留分子量四因素进行正交设计.结果:超滤过程中溶液的吐温-80含量有明显变化,其中浓度因素有显著性影响,丙二醇、甘油、葡萄糖、甘露醇、乳糖及羟丙基-β-环糊精的含量没有明显变化.结论:各注射用辅料,除表面活性剂类吐温有一定损失外,均可适用于超滤.     

注射用丹参多酚酸中主要成分的降解动力学分析

目的:探索注射用丹参多酚酸中主要活性成分(丹酚酸B和迷迭香酸)在不同pH和温度下的降解规律.方法:采用HPLC测定迷迭香酸、丹酚酸B含量,研究二者在不同pH(1～13)和温度(60,70,80,90℃)下含量变化,通过化学动力学法计算降解动力学参数.结果:丹酚酸B与迷迭香酸在不同pH和温度下降解反应均属于一级动力学反应,降解速率随pH及温度的升高而增加.丹酚酸B和迷迭香酸在水溶液中的降解活化能(Ea)分别为48.54,49.83 kJ· mol-1,在注射用丹参多酚酸中则分别为95.19,83.56 kJ· mol-1.结论:丹酚酸B与迷迭香酸在碱性条件及高温条件下易降解,与对照品相比较,二者在注射用丹参多酚酸中更为稳定.     

注射用丹参多酚酸稳定性研究及其稳定性指示性分析方法的建立

目的:研究注射用丹参多酚酸降解产物并建立其稳定性指示性分析方法。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对注射用丹参多酚酸的主要成分进行定性研究,建立可同时测定注射用丹参多酚酸原成分及其降解产物的稳定性指示性分析方法;系统考察注射用丹参多酚酸主要成分在高温、氧化、金属离子、光照等物理化学条件下的稳定性。结果:共鉴定了注射用丹参多酚酸中13个主要活性成分并进行峰面积半定量分析;注射用丹参多酚酸在高温、氧化、三价金属离子条件下均不稳定;在高温、氧化、光照、三价离子和二价离子条件下分别新增降解产物6,4,3,4,1个。所建立的稳定性指示性分析方法能同时测定注射用丹参多酚酸中主要成分及其活性成分的降解产物,分离效果良好。结论:推测注射用丹参多酚酸中主要成分降解机制为大分子多元酚酸类化合物通过苯并呋喃开环、酯键的水解、脱去丹参素等一系列反应降解成如丹参素、原儿茶醛等小分子成分。所建立的稳定性指示性分析方法可用于中药注射剂注射用丹参多酚酸稳定性质量控制。     

近红外漫反射光谱法快速测定注射用丹参多酚酸中的水分

目的:利用近红外漫反射光谱分析技术对注射用丹参多酚酸中的水分进行无损、快速的定量分析.方法:以注射用丹参多酚酸为分析对象,用光纤测定近红外漫反射光谱,采用偏最小二乘法( PLS)建立定量校正模型.结果:53份样品的原始光谱经二阶导数预处理,选取11 993.1 ～6 098.8 cm-1和5450.7～4 598.2 cm-1谱段,建立注射用丹参多酚酸(冻干)水分定量校正模型并分析,结果R2为0.9911,内部交叉验证均方差(RMSECV)为0.210,最佳维数为4.10份样品用于外部验证,预测误差均方差(RMSEP)为0.243.结论:该方法分析快速、简便,结果准确可靠,可实现大批量样品的快速测定,对中药制剂的质量分析有一定的参考价值.     

注射用丹参多酚酸与12种常用注射剂的配伍稳定性

考察注射用丹参多酚酸与12种临床常用注射剂的配伍稳定性。方法模拟注射用丹参多酚酸和各注射剂临床使用剂量,紫外分光光度法、HPLC法考察配伍后溶液的理化指标及酚酸类成分含有量的变化情况。结果碳酸氢钠注射液与注射用丹参多酚酸接触后,颜色和p H值发生明显变化;盐酸普罗帕酮注射液、盐酸左氧氟沙星与注射用丹参多酚酸接触后立刻产生沉淀,紫外图谱和指纹图谱发生明显变化;盐酸法舒地尔注射液与注射用丹参多酚酸接触后立刻产生沉淀,紫外图谱发生明显改变;氨茶碱和二羟丙茶碱注射液不溶性微粒书超标和指纹图谱发生明显变化。结论注射用丹参多酚酸在与盐酸普罗帕酮注射液、氨茶碱注射液、二羟丙茶碱注射液、盐酸法舒地尔注射液、碳酸氢钠注射液和盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液配伍使用时可能会对药物疗效和安全性产生隐患,应予以特别注意。     

分光光度法测定注射用丹参川芎嗪中丹参总酚酸的含量

目的:建立注射用丹参川芎嗪中丹参总酚酸的含量测定方法.方法:以丹酚酸B为对照品,用分光光度法测定丹参总酚酸的含量.结果:丹酚酸B线性范围2.5～50μg·mL-1,回收率为100.6%,RSD为1.44%.结论:此方法简单、准确、快速,可作为注射用丹参川芎嗪的质量控制方法.     

一标多测在注射用丹参多酚酸盐品质评价中的应用研究

中药注射剂优质标准的建立有助于提升产品的品质,通过建立整体质量控制方法,能够反映中药注射剂的内在品质。该文采用一标多测方法,建立了同时测定注射用丹参多酚酸盐中间体和制剂中丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸的多成分定量控制方法,以评价产品品质。采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱,以0.1%磷酸-乙腈为流动相,等度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温20℃,检测波长286 nm,以丹酚酸B为内参物,建立其与迷迭香酸、紫草酸之间的相对校正因子(fs/i)。在建立的QAMS方法中,丹酚酸B与迷迭香酸、紫草酸的fs/i分别为0.58和0.94。采用该方法涵盖分析了注射用丹参多酚酸盐中约80%~85%的药效物质;通过分析连续4年15批注射用丹参多酚酸盐中间体和18批注射用丹参多酚酸盐制剂中丹酚酸类成分含量,发现注射用丹参多酚酸盐中间体和制剂的丹酚酸B质量分数分别为77.1%~81.5%,70.5%~80.1%,迷迭香酸和紫草酸二者总质量分数约为6%;其中迷迭香酸与紫草酸的比例分别为(3.4∶1~10∶1)和(2.5∶1~5∶1),制剂中二者比例稳定性明显优于中间体。通过建立一标多测方法,为注射用丹参多酚酸盐品质评价提供了的切实可行的整体质量评价方法。     

大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺研究

目的:研究D101大孔树脂分离纯化丹参总酚酸的工艺条件及参数。方法:采用正交实验法,以大孔树脂柱上总酚酸的保留率作为考察指标,对影响总酚酸纯化效果的主要因素进行考察。结果:水洗液体积及上样液中总酚酸质量对树脂柱上总酚酸的保留率具有显著影响。采用大孔树脂分离纯化丹参粗提物中总酚酸,树脂柱上总酚酸的保留率可达87.52%,纯化后样品中总酚酸含量达到77.74%,总酚酸含量比粗提物中总酚酸含量提高了3.6倍。结论:采用大孔树脂分离纯化丹参总酚酸的方法是可行的,可应用于丹参总酚酸的工业化生产。     

色差计法测定注射用丹参多酚酸溶液的颜色

目的:利用色差计建立注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。方法:采用《中华人民共和国药典》2010版附录XIA"溶液颜色检查法"第三法(色差计法)测定溶液的颜色。结果:该方法精密度和重复性良好,3 h内色差值△E*的RSD值为1.28%。测定的6批样品均小于黄色3号标准比色液(Y3)。结论:相比目视法,该方法将溶液颜色进行了量化检测、数据直观准确,可作为注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。通过色差法对中药注射剂质量进行控制将成为一种趋势,对提高中药注射剂安全性具有重要意义。     

丹七片中丹酚酸B的含量测定

丹七片收载于部颁标准第1册,由丹参、三七组成,其中丹参为君药,且丹参的化学成分主要为脂溶性和水溶性两大类.水溶性成分主要为酚酸类物质有:丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹参酸甲(丹参素)、丹参酸乙、丹参酸丙、琥珀酸等,该类成分具有抗凝、抗血栓、抗心脑缺血等作用,为丹参中治疗心血管疾病的主要有效成分.原标准很低,不能很好控制该品种的质量.经文献查阅,采用HPLC法测定丹酚酸B的含量方法较多1～5],但丹七片中丹酚酸B的含量测定未见报道.为了更好地控制本制剂的质量,确保临床疗效,我们采用HPLC法对制剂中丹酚酸B的含量进行测定.方法如下:     

注射用丹参多酚酸中鞣质类物质的排除性检测

目的:利用高效液相色谱法对注射用丹参多酚酸中的鞣质类成分进行排除性检测.方法:采用高效液相色谱法检测水解前后丹参多酚酸样品中没食子酸、儿茶素和鞣花酸.没食子酸液相色谱条件:色谱柱Venusil XBP C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相甲醇-0.05％磷酸水溶液(5:95)等度洗脱,流速0.8 mL· min-,柱温30℃,检测波长271 nm.儿茶素液相色谱条件:色谱柱Venusil XBP C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05％磷酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,检测波长271 nm.鞣花酸液相色谱条件:色谱柱Venusil XBP C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2％磷酸溶液(18∶ 82),流速1.0 mL· min-1,柱温40℃,检测波长254 nm.结果:水解前后的丹参多酚酸样品的色谱图中,在没食子酸标准品的色谱峰位置,没有相应峰出现;水解后样品中,儿茶素、鞣花酸标准品位置的附近有可疑峰存在,水解后的样品中加入相应对照品再次测定,可确认可疑峰并非儿茶素和鞣花酸的峰.结论:丹参原药材在经过制剂工艺中的聚酰胺树脂柱处理后,其中的鞣质类成分已经被除去,得到的注射用丹参多酚酸中没有鞣质类成分或含量极低.     

聚酰胺树脂分离纯化丹参总酚酸的研究

目的:研究聚酰胺树脂分离纯化丹参总酚酸的工艺条件及参数。方法:以丹参总酚酸的吸附量和洗脱率为指标,确定丹参总酚酸最佳分离纯化条件。结果:聚酰胺(60～100目)树脂分离纯化丹参总酚酸的最佳工艺条件为:上样质量浓度为3.5 g.L-1,洗脱溶剂为40%乙醇。纯化后丹参总酚酸含量为98.41%。结论:聚酰胺(60～100目)树脂分离纯化丹参总酚酸是可行的。     

掌叶大黄多糖超滤工艺优选

目的:探讨超滤膜技术分离纯化掌叶大黄多糖的可行性工艺.方法:采用正交设计法优选超滤前离心条件;以超滤压力、料液温度及料液浓度为考察因素,以粗多糖得率和含量为考核指标,均匀设计优选超滤工艺参数.结果:最佳超滤条件为药液以3 000 r-min -1离心处理12 min,用分子截留量10万的膜,超滤压力为0.05 ～0.09 MPa,药液温度40℃,药材与提取液质量比1∶10 ～1∶30,pH 6.0,超滤膜先用tween-80(5 g·L-1)处理10 min.结论:优化所得超滤工艺与未超滤相比有较高的多糖得率和含量.超滤技术可用于纯化、富集掌叶大黄多糖,具有产业化开发前景.     

USMM技术在丹参提取分离中的应用探讨

目的:探讨USMM联用技术在丹参活性成分提取分离中的应用.方法:采用SFE-CO2提取分离丹参酮类脂溶性成分,超声提取丹参酚酸类水溶性成分,膜分离与大孔树脂纯化丹参水提物,以丹参活性成分的转移率及纯度为考察指标,探索USMM技术在丹参提取分离中的可行性.结果:丹参SFE-CO2萃取工艺稳定、可行;丹参SFE渣超声提取物丹参酚酸类成分提取率高;大孔树脂纯化技术能提高丹参活性成分的纯度;膜分离及膜分离与大孔树脂技术联用对丹参酚酸的纯化工艺还有待进一步研究.结论:USMM技术应用于丹参活性成分提取分离基本可行.     

丹参素在加温加速条件下的含量变化规律研究

目的 :探讨加温加速条件下丹参素在其对照品及丹参注射液中的含量变化规律 ,为丹参素的稳定性研究提供参考资料。方法 :采用HPLC法测定丹参素含量 ,经典恒温加速试验法考察丹参素在对照品溶液与丹参注射液中的含量变化。结果 :在加温加速试验条件下 ,对照品中的丹参素含量降低 ;而注射液中的丹参素含量反而增高。结论 :丹酚酸类化合物在加速试验条件下能水解生成丹参素 ,含丹参制剂在以丹参素为指标预测及评价其稳定性时 ,对此应引起足够重视。     

不同纯化方法对丹参水提取液中丹酚酸B的含量影响

目的:考察不同纯化方法对丹参水提液中丹酚酸B含量的影响,以优选出丹参水提取液的最佳纯化方法。方法:以丹酚酸B含量和浸膏得率为考察指标,对乙醇沉淀法、高速离心法和大孔树脂吸附法3种纯化方法进行了比较。结果:大孔树脂吸附法处理后所得到的丹酚酸B的含量最高,浸膏得率最低;乙醇沉淀法处理后丹酚酸B的含量最低,浸膏得率居中;高速离心法处理后丹酚酸B的含量居中,但浸膏得率最高。结论:大孔树脂吸附法为丹参水提液的最佳纯化方法。     

注射用丹参多酚酸大鼠体内药物代谢动力学研究

目的研究不同给药剂量注射用丹参多酚酸中迷迭香酸、丹酚酸B在大鼠体内的药代动力学特征。方法注射用丹参多酚酸以低(10 mg/kg)、中(25 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量以及累积剂量(25 mg/kg,连续给药7天)对大鼠进行静脉注射给药,以氯霉素作为内标物,采用UPLC-DAD-MS/MS分析手段检测血浆中迷迭香酸、丹酚酸B的浓度,绘制药物浓度-时间曲线并计算药代动力学参数。结果不同剂量注射用丹参多酚酸给药后,迷迭香酸和丹酚酸B的药代动力学行为均符合开放性二室模型一级动力学过程。结论该方法准确度高,专属性强,分析速度快,适用于注射用丹参总酚酸中迷迭香酸、丹酚酸B在大鼠血浆中的药代动力学分析。研究结果可为注射用丹参多酚酸的体内过程研究及其临床合理使用提供参考。     

丹参总酚酸在裸鼠皮肤中的代谢稳定性研究

目的:考察丹参总酚酸在裸鼠皮肤中的代谢稳定性,为丹参酚酸类成分的透皮制剂研究提供科学依据。方法:HPLC法测定生理盐水对照组和裸鼠皮肤匀浆实验组在32℃,300 r/min条件下保温24 h丹参总酚酸中丹酚酸B的含量,评价丹参总酚酸在裸鼠皮肤中的代谢稳定性。结果:32℃,300 r/min条件下24 h内丹酚酸B在生理盐水对照组及裸鼠皮肤匀浆组降解百分率分别为9.98%、15.92%(P0.05)。丹酚酸B在生理盐水中的降解过程符合一级动力学方程,半衰期为66.87 h。结论:丹参总酚酸在裸鼠皮肤中不稳定,具有较明显的代谢作用。