荧光定量PCR在结核分枝杆菌检测中的应用价值

目的比较荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)与抗酸染色、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,探讨FQ-PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法对311例临床确诊的肺结核病患者和40例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用FQ-PCR法、痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌。结果FQ-PCR、抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为47.0%(146/311)、28.3%(88/311)、35.4%(110/311),特异性分别为100.0%、100.0%、95.2%,以FQ-PCR检测的阳性率最高。结论FQ-PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

应用流式细胞仪检测结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性

目的利用流式细胞仪检测结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性。方法利用结核分枝杆菌水解FDA的特点,用FDA标记经过左氧氟沙星作用后的标准菌株H37RV和临床分离菌株,利用流式细胞仪检测标记了FDA的菌株的荧光强度,并与比例法结果进行比较。结果 40株结核分枝杆菌的流式细胞仪所得药敏试验结果与比例法基本一致(p>0.05)。结论流式细胞仪检测结核分枝杆菌药敏实验的方法极大地缩短了获得药敏结果的时间,可以考虑作为常规项目开展。     

成都地区1396例结核分支杆菌的耐药性分析

[目的]分析成都地区结核分枝杆菌(MTB)对一线和二线抗结核药物的耐药性,初步探讨该地区严重耐多药结核杆菌(XDR-TB)的情况。[方法]将成都地区2007年1月～2008年12月期间3325例肺结核患者的痰液进行分离培养、菌型鉴定,获得1396株MTB,采用绝对浓度法对4种一线和4种二线抗结核药物进行耐药性检测。[结果]1396株MTB对一线抗结核药物的总体耐药率为33.1%(95%可信区间为30.6%～35.6%),其中耐多药结核菌株211株(15.1%),严重耐多药结核菌株10株(0.72%);对二线药物的总体耐药率为12.3%(95%可信区间为10.6%～14.0%)。[结论]成都地区结核分枝杆菌对二线抗结核药物的耐药情况严重,耐多药结核菌株中严重耐多药结核菌株的比例过高。表明持续开展MTB的耐药性监测十分重要。     

糖尿病并发肺结核病患者痰菌阳性相关因素分析

目的：探讨和分析糖尿病并发肺结核病痰涂片和培养检查阳性的相关因素。方法：收集并整理1991—2002年天津市结核病控制中心登记的糖尿病并发结核病患者的资料，分析痰涂片和培养检查阳性患者和阴性患者一般情况及病情特征的异同。结果：患者确诊年龄越大，痰菌阳性率越低；初治者菌阳率高，复治患者菌阳率低；随着空洞数的增加，检出痰菌阳性率增大；与Ⅲ Ⅴ型组相比，浸润型肺结核(Ⅲ型)和慢性纤维空洞型肺结核(Ⅳ型)患者痰菌阳性率增高，结核性胸膜炎(Ⅴ型)痰菌阴性率增加；患者有咳嗽、发热、咳痰等症状，痰菌阳性率增加。结论：糖尿病合并肺结核患者痰涂片或培养检查结果与确诊年龄、结核复发、空洞数、肺结核型别及结核症状等指标有统计学联系。     

自制培养基结核分枝杆菌快速生长及临床应用观察

[目的]观察结核分枝杆菌在自制培养基上的生长情况,建立快速培养方法.[方法]将改良罗氏培养基的成分进行改进自制5种培养基,每种3支,每支接种菌量10-3 mg,观察结核分枝杆菌标准株生长情况.并以第5号培养基3种成分不同浓度,做正交叉实验,得出最佳浓度.收集临床标本,在自制培养基上培养观察.[结果]结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上,菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短,两者差异均具有显著性（P＜0.01）.第5号培养基以25%牛肉浸液,20%当归浸液,20%党参浸液的浓度最佳,结核分枝杆菌标准株接种后d 3～5开始生长,d 7～9出现典型的＂菜花状＂菌落.临床标本接种在改良罗氏及自制培养基上,阳性分离率差异无统计学意义（t=0.09,P＞0.05）,两种培养基在典型菌落形成的平均天数差异有统计学意义（t=6.828,P＜0.001）.[结论]结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快,培养时间短,为该菌培养提供了一种新的快速培养基,在临床上有一定的实用价值,值得进一步研究、推广.     

糖尿病合并结核感染诊断中结核分枝杆菌检测方法的比较

目的比较糖尿病合并结核感染诊断中四种结核分枝杆菌检测方法,包括金胺O荧光染色涂片法,BacT/ALERT3D快速培养法,噬菌体生物扩增法和荧光定量PCR法。方法收集糖尿病合并结核感染患者的痰标本,分别采用上述四种方法进行结核分枝杆菌检测。结果涂片法、快速培养法、噬菌体法和PCR法的阳性率分别为27.5%,38.3%,36.7%和39.2%。结论在糖尿病合并结核感染诊断中,与传统的涂片法和培养法相比,噬菌体生物扩增法和荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有快速、敏感性高、特异性高等特点。     

PCR法检测食品中的致病性小肠耶尔森氏菌

目的：快速准确地检测致病性小肠耶尔森氏菌（YE）。方法：根据该菌染色体上ail基因顺序设计一对引物、通过聚合酶链反应直接检测食品中的致病性YE，扩增产物经电泳，出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的170bp的ail基因片断的条带，即判定该样品为阳性，结论：本法特异性强，灵敏度高，能在60小时内出结果，可适用于食品中的YE的快速检验。     

广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌gyr基因突变特点

目的分析广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌临床菌株的gyr基因突变特点,为进一步研究结核分枝杆菌耐喹诺酮类药物的分子机理提供地区性资料。方法采用绝对浓度法测定结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性,应用DNA直接测序法检测结核分枝杆菌gyr基因的突变情况。结果23株左氧氟沙星耐药株中,15株存在gyrA基因突变,突变率为65.2%,突变位点包括89位、90位、91位和94位;1株存在gyrB基因突变,突变率为4.3%,突变位点为511位。结论广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌临床菌株的gyr基因突变情况与其它地区存在差异。     

噬菌体生物扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值

目的对噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值进行评价分析,为今后的临床及检验工作提供可靠的理论依据。方法抽取在2009年1月²013年12月间我院收治的临床确诊涂阴肺结核患者200例,对其痰液标本分别展开噬菌体生物扩增法和罗氏培养法进行结核分枝杆菌检测,并对检测结果进行对比分析。结果经对比发现,噬菌体生物扩增法对结核分枝杆菌的检出率较罗氏培养法检出率显著升高(p<0.05)。结论采取噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌的临床价值显著,可使肺结核诊断率得到显著提高,降低误诊和漏诊发生率。     

应用聚合酶链反应检测肝病患者HBV-DNA和HCV-RNA结果分析

应用聚合酶链反应(PCR)进行HBV-DNA和HCV-RNA检测,了解HCV在各型肝病中感染情况.