Humanin及衍生物对阿尔茨海默病小鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨Humanin(HN)及衍生物[Gly14]-humanin(HNG)在体内是否存在对实验性阿尔茨海默病(AD)小鼠的神经保护作用及可能的机制。方法选择健康雄性小鼠84只,随机分为假手术组(9只)、β淀粉样蛋白(Aβ)模型组(15只)、HN治疗组(30只)和HNG治疗组(30只)。HN组又分为10 μmol/L HN组和100μmol/LHN组,HNG组又分为10 nmol/L HNG组和100 nmol/L HNG组,4组均于3、7、14天应用免疫组织化学方法观察海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。结果 HN治疗组和HNG治疗组3、7、14天GFAP阳性细胞的表达较假手术组和Aβ模型组均减少。3、14天100 μmol/L HN组GFAP阳性细胞数少于10 μmol/L HN组(P<0.05);3、7、14天100 nmol/L HNG组GFAP阳性细胞数少于10 nmol/L HNG组(P<0.05)。3天100 nmol/LHNG组GFAP阳性细胞数少于100μmol/L HN组(P<0.05)。结论在体内,HN和HNG可以减少因Aβ_(25-35),毒性引起的GFAP的表达,这种改变有时间及剂量依赖性,证实了它们具有神经保护作用。     

褪黑素对Aβ诱导的大鼠脑组织GFAP和S100β蛋白表达的干预作用

目的观察褪黑素(MT)干预β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β蛋白的表达,探讨MT对老年痴呆症(AD)治疗的作用机制。方法 30只大鼠随机分为生理盐水对照组、β淀粉样蛋白(Aβ)诱导AD模型构建组(模型组)和AD模型+MT治疗组(MT组)。动物喂养40d时取大鼠脑组织,用HE染色观察脑组织病理变化,免疫组化染色法检测Aβ标记的脑组织部位以及Aβ对神经细胞毒性作用,同时检测胶质细胞的GFAP和S100-β蛋白的表达水平。结果 HE染色观察脑组织病变在MT组明显轻于模型组;免疫组化结果显示,Aβ的表达水平在模型组和MT组二者间无明显差异,但Aβ对海马CA3区神经元损伤作用在模型组要大于MT组。GFAP和S100β表达水平在模型组则显著高于MT组和正常组(P0.05)。结论用MT干预治疗,可降低AD模型鼠胶质细胞表达GFAP和S100β蛋白的水平,从而起到了减轻大脑神经元细胞的损伤作用。     

阿魏酸钠对大鼠脑白质胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注（I/R）后白质胶质纤维酸性蛋白表达的影响。方法双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑I/R模型。雄性Wistar大鼠45只，随机分为假手术组（n=15），I/R组（n=15），I/R阿魏酸钠治疗组（n=15），每组按I/R2、4、6w3个时间点再分为3组（n=5）。模型制备免疫组化法检测I/R后2、4、6w胼胝体、内囊和脑室周围GFAP的表达。结果I/R后胼胝体、内囊和脑室周围GFAP的表达随时间延长逐渐增多，阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多，较缺血再灌注组减少，6w差异最显著（P〈0.05）。结论大鼠前脑缺血再灌注后白质GFAP表达增多，阿魏酸钠对脑白质缺血性损伤具有保护作用，其机制可能与调节星形胶质细胞活化状态，减轻内皮素对血管损伤有关。     

阿魏酸钠对反复前脑缺血再灌注大鼠海马及额叶胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨内皮素(ET)受体拮抗剂阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注后海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑缺血再灌注模型,HE染色观察阿魏酸钠治疗前后海马CA1区神经元形态学改变,免疫组化法检测缺血再灌注后2、4、6 w海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 阿魏酸钠治疗组海马神经元缺失、变性、坏死较对照组轻,缺血再灌注后海马和额叶GFAP的表达随时间延长逐渐增多,阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多,较缺血再灌注组减少,差异显著(P<0.05).结论 大鼠前脑缺血再灌注后GFAP表达增多,阿魏酸钠能够降低其表达,对脑缺血性损伤具有保护作用.     

电针对脑梗死大鼠神经功能及胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察电针对高血压基础上形成脑梗死大鼠的不同时间点神经功能评分及灶周胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,证实电针对星形胶质细胞(AST)变化的影响是其促进脑梗死功能恢复的机制之一。方法双肾双夹法制备RHRSP模型,双侧肾动脉狭窄术后12周,取血压≥l80mmHg大鼠,电凝法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随机分为MCAO假手术组、MCAO组(模型组)、穴位治疗组、非穴位治疗组,后两组行电针刺激。MCAO后各组分别于1d、3d、7d、14d、21d进行神经功能缺损评分,HE染色观察病理形态变化,GFAP免疫荧光染色观察电针对局灶性脑梗死缺血灶周围GFAP的表达。结果假手术组大鼠在各时间点神经功能缺损评分均为0分;各时间点模型组神经功能评分均高于穴位治疗组,1d时两组差异无统计学意义,3d、7d、14d、21d,两组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3d时模型组大鼠神经缺损症状最重,而电针组随着时间的延长其神经功能缺损评分在逐渐降低。在各时间点模型组与非穴位组无明显差异。HE染色可见穴位治疗组ASI及组织肿胀较模型组明显减轻。在五个时间点模型组和电针组GFAP表达都明显增高,与假手术组比较(P<0.01),电针组GFAP表达均明显低于同时段模型组(P<0.05)。各时间点模型组GFAP表达与非穴位组比较无显著性差异。结论穴位电针治疗能下调脑缺血后GFAP表达,进而改善神经功能。     

瑞香素对脑缺血再灌注大鼠模型胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨瑞香素对大鼠前脑缺血再灌注后海马和皮层胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响.方法反复夹闭大鼠双侧颈总动脉模仿人类脑缺血制备前脑缺血再灌注模型,术后给予瑞香素灌胃治疗,免疫组化法检测脑缺血再灌注后2、4、6 w海马和皮层GFAP的表达.结果瑞香素治疗后,海马和皮层GFAP的表达在2 w时较假手术组和缺血再灌注组高,然后开始下降,4 w时低于缺血再灌注组但高于假手术组,6 w时已低于假手术组;瑞香素治疗组中,随着时间延长,GFAP的表达进行性下降,差异显著.结论大鼠前脑缺血再灌注后应用瑞香素治疗对海马和皮层GFAP表达的影响呈动态变化过程,表现为早期促进表达,后期抑制表达,这种调节作用可能与脑缺血性损伤后神经保护有关.     

大鼠海马内注射β淀粉样蛋白对脑内小胶质细胞活化和神经元凋亡的影响

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法通过立体定位技术将Aβ_(1-42)注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。分别于注射后3、7、14 d,用免疫组织化学和免疫荧光法检测CD11b、MHCⅡ及活化caspase-3的表达。结果海马内注射Aβ_(1-42)后3 d,大鼠脑内CD11b和MHCⅡ阳性小胶质细胞数量[分别为(345.22±75.86)和(200.22±42.88)],较PBS组[分别为(98.61±20.79)和(35.43±12.46)]和Aβ_(42-1)组[分别为(103.44±22.13)和(43.41±15.63)]明显升高(P<0.01),7 d达到高峰[分别为(486.22±81.51)和(223.62±66.99)],表现为明显的激活状态。注射后3 d,大脑皮质、海马的活化caspase-3阳性细胞数量(132.42±31.80)比PBS组(4.41±3.13)和Aβ_(42-1)组(4.85±3.70)明显升高(P<0.01),7 d后更明显(165.24±33.95),以海马更为显著。结论海马内注射A?可以诱导小胶质活化和神经细胞凋亡,有可能作为研究阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病早期的动物模型。     

脑缺血后胶质纤维酸性蛋白表达的变化

胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP )是脑内星形胶质细胞 (astrocyte ,Ast)中间纤维的结构蛋白组成成分 ,由Eng等 (1971)首先从脑内星形胶质细胞中分离出来 ,逐渐被人们看做成熟和反应性星形胶质细胞的特征性标记物 ,Zilles(1991)将其作为全脑所有Ast的特异性免疫组化标记物〔1〕。GFAP在脑缺血后不同时间、不同脑区的表达有明显差异 ,反映了Ast活化程度不同。本文就脑缺血后GFAP的表达作一综述。1　GFAP的生物学特点GFAP是一种线性结构蛋白质 ,与波形蛋白、巢状蛋白一起组成Ast的中间纤维。人GFAP是由 43 …     

阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白对星形胶质细胞的作用

阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知障碍和记忆力损害为主的中枢神经系统退行性疾病,以老年斑(SP),神经元纤维缠结(NFT)和突触丢失为主要病理改变.构成SP的主要成分是β-淀粉样蛋白(Aβ).现在普遍认为AD主要是由大脑特异区域的Aβ神经毒性蓄积所引起[1].星形胶质细胞(Astrocyte,AC)是中枢神经系统的免疫吞噬细胞,是胶质细胞的主要类别,几乎囊括了胶质细胞的所有功能.在神经退行性疾病,如AD和帕金森病患者的大脑中存在大量活化的AC[2].活化后形成的反应性AC既产生和释放神经递质、神经营养因子,也能分泌细胞毒因子、炎症因子、补体蛋白等,参与AD的病理过程[3].<中作者简介一>=王琦(1962-),男,教授,主要从事神经系统退行性疾病病理机制研究.     

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞病研究进展

<正>胶质纤维酸性蛋白免疫球蛋白G(glial fibrillary acidic protein-IgG,GFAP-IgG)存在于多种神经免疫疾病中,例如自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis,AE)、多发性硬化(multiple sclerosis,MS)、视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)等。部分病毒性脑炎、化脓性脑炎、肿瘤患者也可在血清及脑脊液中检出GFAP-IgG^[1-2]。随后的一些研究发现,GFAP-IgG阳性的患者在临床中具有一定的独特性。因此,2016年Fang等[3]根据这类疾病的脑膜脑脊髓炎样表现、病程可反复发作、易合并肿瘤、     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,探讨星形胶质细胞活化在脑缺血耐受中的意义.方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为缺血预处理再缺血组、缺血组和对照组,每组12只,前2组分别在2 h大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)前3 d给予10 min的MCAO预处理或假手术,第2次MCAO后24 h处死,对照组仅给予2次间隔3 d的假手术.比较各组脑梗死体积、组织病理学变化和GFAP表达.结果 缺血预处理后再缺血组和缺血组梗死体积分别为(136.85±14.51)mm3和(281.37±29.93)mm3,前者较后者显著缩小53.15%(P=0.007);同时,缺血预处理再缺血组神经元变性坏死显著减轻,并伴有GFAP表达显著上调(2组免疫组化染色平均吸光度分别为102.66±8.39和86.28±6.19,P=0.009).结论 缺血预处理可诱导脑缺血耐受,促进GFAP表达,星形胶质细胞活化可能是脑缺血耐受产生的机制之一.     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

Objective To observe the effect of focal cerebral ischemic preconditioning on the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and to investigate the significance of astrocyte activation in cerebral ischemic tolerance.Methods Thirty-six healthy male SpragueDawley rats were randomly divided into reischenmic,ischemic and control groups (n = 12 in each group) after ischemic preconditioning.The former two groups received 10 minutes middle cerebral artery occlusion (MCAO) preconditioning or sham operation 3 days before the 2-hour MCAO.The rats were killed 24 hours after the second MCAO.The control group only receivedthe two sham operations with an interval of three days.The infarct volume,histopathological changes,and GFAP expression in each group were compared.Results The infarct volume after ischemic preconditioning in the reischenmic and ischemic groups was 136.85 ± 14.51 mm3and 281.37 ± 29.93 mm3 respectively.The former was significantly reduced 53.15%compared to the latter (P =0.007).At the same time,neuronal degeneration and necrosis was reduced significantly,and GFAP expression was upregulated significantly (the mean absorbance for immunohistochemical staining in both groups was 102.66 ± 8.39 and 86.28 ± 6.19respectively,P = 0.009) after ischemic preconditioning in the reischemic group.Conclusions Focal ischemic preconditioning may induce brain ischemic tolerance and promote GFAP expression.The activation of astrocytes may be one of the mechanisms of cerebral ischemic tolerance.     

雷公藤内酯醇对β-淀粉样蛋白诱导的大鼠小胶质细胞IL-1β和PGE2表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇对β-淀粉样蛋白(Aβ)1-40诱导的大鼠小胶质细胞白细胞介素-1β(IL-1β)及前列腺素E2( PGE2)表达的影响.方法 本实验用Aβ1-40(20μg/ml)诱导体外培养的原代小胶质细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,并给予不同剂量雷公藤内酯醇(终浓度分别为5、25μg/ml)在不同时程(2h、12 h、24 h)进行干预,提取细胞培养上清,采用放射免疫学方法检测IL-1β和PGE2的含量.结果加药后12h,模型组IL-13和PGE2的含量比对照组明显升高(P ＜0.01);5 μg/ml组和25 μg/ml组IL-1β的含量比模型组明显减少(P＜0.01),5μg/ml组PGE2的含量比模型组明显减少(P＜0.01).结论雷公藤内酯醇对Aβ1-40诱导的小胶质细胞IL-1β和PGE2的表达上调有抑制作用.     

星形细胞及胶质纤维酸性蛋白在脑梗死中的作用

文章从神经营养因子与星形细胞的关系、星形细胞活性的分布与卒中后星形细胞活性及脑梗死后电刺激的相关研究进行了综述,阐述了星形细胞及胶质纤维酸性蛋白在脑梗死中的作用。     

3-硝基丙酸诱导沙土鼠脑缺血耐受时海马区胶质纤维酸性蛋白的表达

目的　观察 3 硝基丙酸 (3 nitropropionicacid ,3 NPA)预处理后缺血再灌注不同时间海马区胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)分布、表达的动态变化 ,探讨其与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受的关系。方法　阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型 ,应用免疫组织化学方法观察星形胶质细胞的反应。结果　GFAP的分布随再灌注时间而变化 ,GFAP阳性星形胶质细胞在海马CA1区主要分布于多形细胞层、辐状层、腔隙层、分子层。 3 NPA预处理后脑缺血再灌注 3dGFAP表达增强 ,7、14d维持在较高水平 ,2 8d时有所下降 ,但与对照组比较仍保持在较高水平。结论　 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受中 ,GFAP的表达增强保持在较高水平 ,表明星形胶质细胞增生、活化可能与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受有关。     

PNU上调大鼠皮质星形胶质细胞内源性Cryab抑制Aβ聚集

目的探讨PNU激活星形胶质细胞α7胆碱能受体(α7 n AChRs)上调内源性B-晶状体蛋白(Cryab)并抑制β淀粉样蛋白(Aβ)集聚的现象及其机制。方法分离24 h内新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并鉴定;体外制备Aβ_(1~42)寡聚体;将细胞分为对照组、PNU组、PNU+α7 n AChRs阻断剂(MLA)组、Aβ_(1~42)组、PNU+Aβ_(1~42)组、PI3K信号通路阻断剂LY294002+PNU+Aβ_(1~42)组。用蛋白印迹法检测细胞内Cryab、P-Akt(ser473)、Aβ寡聚体的表达水平。结果 (1)PNU可以显著上调星形胶质细胞内源性Cryab蛋白(P0.05);应用MLA阻断α7 n AChRs后,PNU上调内源性Cryab蛋白的作用被显著抑制(P0.05);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU上调内源性Cryab蛋白的作用被显著抑制(P0.01);(2)PNU能够显著上调磷酸化Akt蛋白水平(P0.05);应用MLA阻断α7 n AChRs后,PNU上调磷酸化Akt蛋白的作用被显著抑制(P0.01);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU上调磷酸化Akt蛋白的作用被显著抑制(P0.01);(3)在细胞裂解液及培养基中,PNU显著增强星形胶质细胞对Aβ聚集的抑制作用(P0.01);使用LY294002阻断PI3K信号通路后,PNU增强星形胶质细胞抑制Aβ聚集的功能显著减弱(P0.01)。结论PNU通过激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚;PI3K/Akt信号通路可能参与PNU激活星形胶质细胞α7 n AChRs上调内源性Cryab蛋白抑制Aβ集聚的过程。     

全反式维甲酸对星形胶质细胞清除淀粉样蛋白的影响及机制

目的：探讨全反式维甲酸（ ATRA）对星形胶质细胞清除淀粉样蛋白（ Aβ）的影响及其机制。方法原代培养星形胶质细胞,使用Aβ42诱导原代星形胶质细胞凋亡,分别加入0．01、0．1、1、10μmol/L ATRA进行干预。采用MTT法检测细胞存活率,ELISA法检测培养基和细胞内Aβ42含量,Western blot 法检测APOE、BACE1表达变化。结果不同浓度的ATRA对Aβ42诱导的星形胶质细胞凋亡作用不同,其中0．1、1μmol/L可以显著抑制Aβ42诱导的星形胶质细胞凋亡（P＜0．05）。细胞外培养基中Aβ含量、细胞内Aβ含量均明显下降（P均＜0．01）。实验组APOE表达上调（P＜0．01）,BACE1表达无明显变化。结论 ATRA可以上调APOE表达,促进星形胶质细胞清除Aβ;低浓度ATRA对星形胶质细胞有保护性作用。     

星形细胞及胶质纤维酸性蛋白在脑梗死中的作用

文章从神经营养因子与星形细胞的关系、星形细胞活性的分布与卒中后星形细胞活性及脑梗死后电刺激的相关研究进行了综述 ,阐述了星形细胞及胶质纤维酸性蛋白在脑梗死中的作用。     

富马酸二甲酯对抗β淀粉样蛋白诱导的大鼠星形胶质细胞的氧化应激反应

目的研究富马酸二甲酯(dimethylfumarate,DMF)通过调节核转录因子-E2相关因子2(Nrf2)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的氧化应激的防御作用和作用机制。方法将大鼠星形胶质细胞分为Aβ组、DMF组、Nrf2组和Nrf2+DMF组。采用RT-PCR检测各组细胞Nrf2、醌氧化还原酶1(Nqo1)、血红素氧化酶1(HO-1)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)mRNA表达水平,采用Western blot检测组蛋白去乙酰酶(HDAC)表达水平。结果 Nrf2组较Aβ组、Nrf2+DMF组较DMF组Nrf2、Nqo1和HO-1 mRNA表达显著降低(P0.05)。DMF组较Aβ组Nrf2、Nqo1和HO-1mRNA表达显著升高,Keap1 mRNA表达显著降低(P0.05)。Nrf2+DMF组较Nrf2组Keap1mRNA表达显著降低(P0.05)。DMF组较Aβ组HDAC表达显著降低(6.41±0.43 vs 9.01±1.54,P0.05),Nrf2+DMF组较Nrf2组HDAC表达显著降低(6.72±0.30 vs 8.76±0.74,P0.05)。结论 DMF可能通过抑制HDAC表达,提高Nrf2水平,从而减弱Aβ诱导的大鼠星形胶质细胞的氧化应激反应。     

碘过量对仔鼠海马GFAP阳性星形胶质细胞的影响

目的探讨碘过量与甲状腺激素对仔一代Wistar大鼠大脑海马星形胶质细胞的形态学影响。方法将断乳后1个月Wistar大鼠随机分为5组(NI、5HI、10HI、50HI、100HI),饮用不同浓度的KIO3碘水,饲养3个月后雌雄合笼,取60日龄仔鼠大脑,应用免疫组织化学技术观察海马CA1、CA2、CA3、CA4区星形胶质细胞,并进行形态计量学分析。结果与NI组比较,50HI、100HI组的海马各区GFAP阳性星形胶质细胞面数密度、平均灰度值和阳性细胞的强阳性率均明显降低。结论长期严重碘过量会影响仔鼠甲状腺激素水平,阻碍其大脑海马星形胶质细胞发育,其机理可能与碘过量所致的甲状腺功能低下有关,但大鼠对碘过量有极强的耐受力,当碘摄入量为正常摄入量的50倍以内时,不会影响仔鼠大脑海马星形胶质细胞的发育。