肺癌患者TCR Vβ亚家族表达及记忆性T细胞表达的研究

目的 探讨肺癌患者外周血T细胞及胸水肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的T细胞受体(TCR)Vβ亚家族及记忆性T细胞的表达情况.方法 分离健康人和肺癌患者的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD45RO和CD28的表达情况,统计分析Vβ24个亚家族及记忆性T细胞的特点.结果 43例肺癌患者外周血TCR Vβ亚家族主要...     

AML-M1型患者TCR Vβ T细胞家族表达抑制情况

目的 了解急性髓细胞白血病Ｍ１亚型（ＡＭＬ－Ｍ１）患者ＴＣＲ Ｖβ亚家族Ｔ细胞的分布特点。方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ扩增８例Ｍ１患者外周血的单个核细胞的ＴＣＲ Ｖβ２４个亚家族基因,分析了其ＴＣＲ Ｖβ亚家族的利用情况。结果 不同标本中可检测到２～８Ｖβ亚家族的Ｔ细胞,不同患者中Ｖβ亚家族Ｔ细胞颁不尽相同。结论 Ｍ１患者外周血ＴＣＲ Ｖβ Ｔ细胞家族表达部分受抑制,提示患者细胞免疫功能的部分缺陷。     

CML患者外周血TCR Vδ亚家族T细胞的谱系变化研究

目的 了解慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者慢性期(chronic phase,CP)和缓解期(complete remission,CR)外周血T细胞受体(T cell receptor,TCR)Vδ亚家族T细胞的分布和克隆性情况.方法 利用RT-PCR扩增8例CML-CP和8例CML-CR患者外周血T细胞中8个Vδ亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解TCR Vδ亚家族T细胞的分布和利用情况;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性.10例健康人外周血作为对照.结果 8例CML-CP患者外周血T细胞平均表达(3.25±0.89)个Vδ亚家族,主要以Vδ1、Vδ2和Vδ3的表达为主,而8例CR期患者则平均表达(3.50±0.76)个Vδ亚家族,主要集中在Vδ1、Vδ2、Vδ3和Vδ8中表达;两组与健康对照组(3.50±0.52)比较无统计学意义.此外,Vδ8表达频率在CML-CR患者(5/8)中略高于健康人(3/10)和CML-CP患者(2/8).基因扫描绝大多数患者和健康人外周血TCR Vδ亚家族T细胞均存在克隆性增殖现象,主要以Vδ1-Vδ3为主,但在CML-CR患者中,表达V87亚家族的两例样本均呈克隆性增殖,这在10例健康人中均未检测到.结论 3组样本的外周血T细胞中TCR Vδ谱系和克隆性增殖类似,提示CML患者T细胞免疫抑制可能并不主要累及TCR Vδ谱系变化,并在CML-CR期所出现了一些不同的Vδ表达和克隆模式.     

中老年男性非小细胞肺癌患者TCR Vβ基因表达谱分析

目的分析非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）T细胞受体（TCR）Vβ基因在中老年男性患者外周血的表达情况。方法分离健康人及患者外周血的T细胞,用流式细胞术分析TCR Vβ各亚家族表达谱,统计分析其特点。结果患NSCLC的中老年男性外周血中TCR Vβ部分亚家族高表达,其中CD8＋TCR Vβ3、4、9表达有统计学意义（P均〈0.05）,同时CD8＋TCR Vβ3与Vβ4两基因表达有相关性;r=0.541,P=0.008。结论患NSCLC的中老年男性CD8＋TCR Vβ在外周血呈倾斜性分布,推测与肿瘤表位特异性表达有关。     

再生障碍性贫血儿童TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA—DRB1＊15的关系

【目的】探讨再生障碍性贫血（再障）儿童TCR Vβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA—DRB1＊15的关系。【方法】再障儿童17例（SAA14例，MAA3例），采用RT—PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCR Vβ24个亚家族基因的表达和克隆性，SSP—PCR检测HLA—DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4—22个Vβ亚家族，而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例（包括初诊SAA4例，CR4例，复发1例和MAA3例）再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖，但个体间差异较大，正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA—DRB1＊15（＋）患儿中4例（80％）有寡克隆T细胞，而12例HLA—DRB1＊15（-）患儿中仅3例（25％）见寡克隆T细胞，两组比较差异具有显著意义（P〈0．05）。伴寡克隆T细胞的6例S从儿童经免疫抑制治疗后达CR；不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗，其中CRI例，PR2例、无效1例，死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖，寡克隆T细胞多见于SAA，尤其是HLA—DRB1＊15（＋）的SAA儿童。TCR VβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值。     

再生障碍性贫血儿童TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA—DRB1＊15的关系

 【目的】探讨再生障碍性贫血（再障）儿童TCR Vβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA—DRB1＊15的关系。【方法】再障儿童17例（SAA14例，MAA3例），采用RT—PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCR Vβ24个亚家族基因的表达和克隆性，SSP—PCR检测HLA—DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4—22个Vβ亚家族，而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例（包括初诊SAA4例，CR4例，复发1例和MAA3例）再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖，但个体间差异较大，正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA—DRB1＊15（＋）患儿中4例（80％）有寡克隆T细胞，而12例HLA—DRB1＊15（-）患儿中仅3例（25％）见寡克隆T细胞，两组比较差异具有显著意义（P〈0．05）。伴寡克隆T细胞的6例S从儿童经免疫抑制治疗后达CR；不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗，其中CRI例，PR2例、无效1例，死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖，寡克隆T细胞多见于SAA，尤其是HLA—DRB1＊15（＋）的SAA儿童。TCR VβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值。     

AML—M5b外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点

目的研究AML—M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族表达及克隆性增殖特点，并分析分选的患者T细胞经体外诱导、活化及短期培养后其TCR Vβ亚家族的利用及克隆性增殖情况。方法运用RT—PCR-基因扫描技术分析初治AML—M5b患者外周血T细胞TCR Vβ亚家族利用和克隆性增殖，免疫磁珠分选患者T淋巴细胞，体外利用自体白血病DC细胞联合CD3单抗、CD28对T细胞进行诱导、活化，并对诱导后T细胞进行TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖分析。结果9例患者T细胞在体外获得增殖，TCR即分析显示患者外周血T细胞均表达部分Vβ亚家族，体外诱导前后的T细胞TCR Vβ亚家族表达和克隆性增殖特点不完全相同，有部分出现新的邯亚家族表达及克隆性增殖，有部分Vβ亚家族在诱导前后始终表现为克隆性增殖，体外杀伤性分析发现诱导后的T细胞对自体白血病细胞具有一定的识别作用。结论AML—M5患者TCR Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布和克隆性增殖，部分Vβ亚家族T细胞在诱导前后始终保持克隆性增殖状态，可能是机体针对白血病相关抗原的特异性CTL，体外诱导活化及短期培养后患者T细胞TCR Vβ亚家族表达数量增加，并出现新的克隆性增殖Vβ亚家族T细胞，提示体外诱导活化能够产生白血病患者自体的白血病特异性CTL。     

肺癌患者外周血T细胞亚群检测的临床意义

肺癌的发生与机体的免疫状况有关。本文采用免疫荧光技术检测了肺癌病人外周血中Ｔ细胞亚群的分布情况 ,目的是从细胞免疫的角度探讨肺癌患者的免疫状态及发病机理 ,为临床的综合治疗提供理论依据。1　材料与方法1 1　对象及材料　 1998年 1～ 8月 38例已确诊收住我院的肺癌患者 ,年龄 33～ 88岁 ,平均 56 5岁 ,其中男 33例 ,女 5例。正常对照 30例 ,男 19例 ,女 11例 ,均为健康体检者。ＣＤ3,ＣＤ4 ,ＣＤ8及荧光标记抗鼠免疫球蛋白 (天津血研所制 )。淋巴细胞分离液 (上海试剂二厂 ,批号 970 710 )。1 2　方法　 ( 1)分离单个核细胞 :取肝…     

外周血T细胞亚群表达和晚期非小细胞肺癌预后的关系

目的探讨外周血T淋巴细胞和晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的关系。方法49例晚期不可手术的NSCLC患者,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群,统计学分析T细胞亚群和生存的关系。结果CD8 T细胞表达和Ⅳ期NSCLC的生存时间相关。结论简单的外周血T细胞分类检测并不能很好地判断预后,我们应该将T细胞按功能进一步细化检测,这样可能可以更准确地判断患者的细胞免疫功能状态。     

手术对肺癌患者外周血T细胞亚群的影响

现代免疫学认为，机体的免疫功能由极其复杂精细的免疫调节网络所控制，其中任何一个环节出现异常，都会影响到机体的正常免疫防御功能。肿瘤免疫主要以细胞免疫为主，其中胸腺依赖性淋巴细胞即T淋巴细胞为重要的一环。本研究通过测定肺癌患者术前及术后一段时期内外周静脉血T淋巴细胞及其亚群的动态变化，探讨手术对肺癌患者细胞免疫的影响。     

TCR Vβ7.1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用

目的研究TCRVβ7.1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RTPCR方法扩增TCRVβ7.1基因并构建Vβ7.1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs),流式细胞仪检测转染效率,DNALadder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCRVβ7.1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞受体β链V区家族的表达及意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血T淋巴细胞受体β链V区(TCR BV)各家族谱系的表达及其临床意义方法选择32例CHB患者(CHB组)及20例健康体检者(健康对照组),分别采集其外周血、肝素钠抗凝,分离单个核细胞,提取RNA并应用RT-PCR扩增TCR RV的24个家族,进行两组间扩增产物定量分析结果 CHB组△Ct5、△Ct7、△Ct15、△Ct22、△Ct23值与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)结论 CHB组TCR BV 24个家族BV5、BV7、BV15、BV22、BV23的扩增产物含量均较健康对照组下降,提示T淋巴细胞免疫应答可能参与CHB的发病过程     

建立九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡方案

目的 建立九色流式方法检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态的方案。 方法 用细胞膜表面抗体CD3、CD4、CD8、CD95、CD69、磷脂结合蛋白Annexin-Ⅴ、TCR Vβ抗体试剂盒和细胞核染料DAPI建立九色流式染色方案。用1例健康成年人外周血标本分别进行抗体滴度实验、最适检测电压选择、单色染色和缺一色染色,确定条件后,对8例健康成年人外周血标本进行检测分析。 结果 根据细胞分群情况选择了合适的抗体滴度和检测电压,单色染色和缺一色试验确定了适宜补偿,建立了九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态的方案;采用此方案检测的8例健康成年人标本,TCR Vβ亚群分布与TCR Vβ抗体试剂盒说明书及文献报道分布一致,并能分析各TCR Vβ亚群细胞活化及凋亡状态。 结论 建立的九色流式方案可检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态,操作简便,结果可靠。     

甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响

2细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01).3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖.结论 甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用.     

TCR Vβ17．1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用

目的研究TCR Vβ7．1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RT-PCR方法扩增TCR Vβ7．1基因并构建Vβ7．1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs)，流式细胞仪检测转染效率，DNA Ladder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCR Vβ7．1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。     

非小细胞肺癌患者外周血中调节性T细胞的表达

目的探讨外周血CD4+CD25high调节性T细胞及其表面膜型TGF-β1的表达与非小细胞肺癌的关系。方法招募非小细胞肺癌患者41人,正常对照42人。采用流式细胞技术分析外周血中CD4+CD25high调节性T细胞数量及膜型TGF-β1的表达。ELISA法测定血清TGF-β1浓度。结果非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞数量较正常人明显增多(4.52%±1.61%比2.95%±1.19%,P<0.001),接受化疗后,该群细胞数量明显减少(5.23%±1.41%比3.20%±1.14%,P<0.001),CD4+CD25high调节性T细胞数量与肺癌临床分期及血清TGF-β1浓度呈正相关(r=0.789、0.832,P均<0.001)。肺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞表面表达的膜型TGF-β1也较正常人多(18.81%±8.78%比13.78%±4.94%,P=0.002),与临床分期也呈正相关(r=0.705,P<0.001)。结论CD4+CD25high调节性T细胞与非小细胞肺癌关系密切,CD4+CD25high调节性T细胞的数量及其表面的膜型TGF-β1是反应肿瘤...     

晚期恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群的测定及临床意义

<正> 恶性肿瘤患者常伴有免疫功能障碍,近来对免疫调节细胞在恶性肿瘤中的作用,已日益受到关注。单克隆抗体的应用为人们认识T淋巴细胞亚群体提供了条件,T细胞亚群的失衡与恶性肿瘤有着密切的关系。本文报告33例晚期恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群的变化以初步探讨其临床意义。