新生儿皮质第一层PV免疫反应Cajal-Retzius和非Cajal-Retzius神经元的分布

目的　研究Cajal Retzius(CR)和非Cajal Retzius(NCR)神经元在新生儿大脑 13个皮质区的分布、相应密度和可能的亚型。方法　采用免疫组织化学方法检测新生儿大脑皮质神经元数目及分布。结果　 (1)PV免疫反应阳性CR细胞见于所有的新皮质区 ,这些区域在第一层深部也发现PV ir水平纤维丛。 (2 )许多PV irCR细胞显示退行性变的明显标志。 (3)除大的CR细胞外 ,小的PV irNCR神经元也出现在新皮质区。它们包括不同的形态学种类 ,可以区分为几种亚型。结论　NCR细胞高密度地出现于第一感觉区 3、1、17和 4 1区。由于PV irNCR细胞密度在各区的差异 ,PV irCR与PV irNCR的比率在第一感觉区相对较低。目前对出生早期大鼠躯体感觉皮质的研究报道第一层存在复杂的相关的神经元间自发作用的时空模式。一个很大的可能性就是区域多样的神经元活性可能在不同脑区皮质环路中起主要作用。     

维生素D依赖性钙结合蛋白-D25K样阳性神经元在人胎儿和新生儿脊髓和背根神经节内的表达和分布

目的：观察24～27w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节(DRG)内维生素D依赖性钙结合蛋白-D28K(CB)样阳性神经元的表达和分布。方法：采用免疫细胞化学ABC法对24～27w人胎儿和新生儿进行观察。结果：(1)CB样阳性产物的表达在胎儿DRG和脊髓灰质的神经元胞体及树突内可观察到。在脊髓各段有不同分布；(2)新生儿脊髓和DRG内CB样阳性胞体的数量、大小及染色强度均有所增加，但在空间分布上无大的变化。结论：人胎儿的脊髓和DRG在发育的24～27w至出生时，CB样阳性神经元的表达在定位分布上无差异，但随年龄增长，CB样阳性神经元的数量、大小和染色强度均有所增加。     

维生素D依赖性钙结合蛋白-D28K样阳性神经元在人胎儿和新生儿脊髓和背根神经节内的表达和分布

目的 :观察 2 4～ 2 7w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节 (DRG)内维生素D依赖性钙结合蛋白 D2 8K(CB)样阳性神经元的表达和分布。方法 :采用免疫细胞化学ABC法对 2 4～ 2 7w人胎儿和新生儿进行观察。结果 :( 1 )CB样阳性产物的表达在胎儿DRG和脊髓灰质的神经元胞体及树突内可观察到。在脊髓各段有不同分布 ;( 2 )新生儿脊髓和DRG内CB样阳性胞体的数量、大小及染色强度均有所增加 ,但在空间分布上无大的变化。结论 :人胎儿的脊髓和DRG在发育的 2 4～ 2 7w至出生时 ,CB样阳性神经元的表达在定位分布上无差异 ,但随年龄增长 ,CB样阳性神经元的数量、大小和染色强度均有所增加。     

人胎儿和新生儿脊髓和DRG内nNOS阳性神经元的表达和分布

目的：观察24～27w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节(DRG)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达和分布。方法：ABC免疫细胞化学方法。结果：(1)24～27w人胎儿胸髓和腰1～3节段的中间带外侧核和前角Ⅷ层和Ⅸ层内可观察到nNOS阳性神经元。颈、胸、腰各段DRG内nNOS免疫阳性神经元占DRG细胞总数的84％～88％。(2)新生儿脊髓和DRG内nNOS免疫阳性神经元的分布情况与上述胎儿相似。但DRG内nNOS免疫阳性神经元的体积有所增加,数量明显减少,约占DRG细胞总数的70％～73％。结论：人胎儿脊髓和DRG在发育的24～27w至出生时,nNOS阳性神经元的表达在定位分布上无差异,但随胚胎发育阳性神经元的数量明显减少。     

出生前人脑海马结构含GABA神经元的分布和发育

本实验采用免疫细胞化学方法研究了１４～３８ 周人胎海马结构含ＧＡＢＡ 神经元的分布和发育。主要结果有：（１）早在１４周时便有许多含ＧＡＢＡ 神经元分布于海马和齿状回各部；（２）１４～２２ 周海马脑室带和中间带含ＧＡＢＡ 神经元的密度逐渐减少，２２ 周及以后这两部位仅见少量含ＧＡＢＡ 神经元，其它层含ＧＡＢＡ 神经元的密度在出生前发育过程中呈现先逐渐减少，后逐渐增加，最后又下降的规律；（３）在各发育阶段，含ＧＡＢＡ 神经元主要分布于海马的锥体层、始层以及齿状回的多形层和门区，而含ＧＡＢＡ 神经元的密度由ＣＡ１ 区向ＣＡ３ 区逐渐降低；（４）许多含ＧＡＢＡ 纤维出现于１４～２２ 周海马分子腔隙层及１８～３８ 周海马始层；（５）在各发育阶段，海马伞内可见许多含ＧＡＢＡ 纤维和少量含ＧＡＢＡ 神经元。以上结果提示：人类海马结构在胚胎时期含ＧＡＢＡ 神经元的出现和分化较早，且在发育过程中至少部分含ＧＡＢＡ 神经元和纤维的存在是暂时性的；至少部分传出纤维含有ＧＡＢＡ。     

加压素能和宫缩素能神经元在新生儿下丘脑的分布

本文用ABC法对加压素样和宫缩素样神经元在新生儿下丘脑的分布进行了观察。结果发现,两者的神经元集中分布于视上核、室旁核及副大细胞分泌核。根据两者的分布特点,又将视上核、室旁核和副大细胞分泌核再分为若干分区,各分区均以加压素样神经元为主,约占总数的80～90％。本文结果提示加压素样和宫缩素样神经元在下丘脑的分布具有动物种属和年龄特征。     

丙烯酰胺对仔鼠大脑额叶皮质神经元DCX和SYN表达的影响

目的:探究丙烯酰胺(acrylamide,ACR)暴露对仔鼠大脑额叶皮质神经元发育的影响。方法:孕鼠随机分为4组,自怀孕第6 d起对照组和实验组分别给予蒸馏水和(50,100,200)μg/ml ACR饮水,直至仔鼠出生21 d。免疫组织化学法观察仔鼠额叶皮质神经元微管相关蛋白(doublecortin,DCX)和突触素(synaptophysin,SYN)的表达情况。结果:ACR实验组和对照组额叶皮质神经元均有DCX和SYN的表达。DCX和SYN免疫阳性产物均为棕黄色颗粒状,表达于胞浆内。与对照组相比,ACR染毒高剂量组(200μg/ml)DCX表达显著减少(P0.05),而低、中剂量组(50μg/ml和100μg/ml)的减少不明显,无统计学意义(P0.05);与对照组相比,ACR实验组SYN的表达显著降低,呈剂量依赖性,且组间差异明显(P0.05)。结论:ACR染毒可能是通过降低DCX和SYN的表达,干扰神经元的迁移分化和突触的形成,从而影响额叶皮质的发育。     

嗅觉剥夺对成年豚鼠梨状皮质NeuN和CB表达的影响

目的观察嗅觉功能剥夺后对成年豚鼠两侧梨状皮质神经元特异性核蛋白(NeuN)、维生素D依赖性钙结合蛋白(CB)表达的影响。方法将20只豚鼠随机分成两组,通过电烙铁损伤左侧外周鼻孔区建立嗅觉功能剥夺模型,饲养3周和6周之后灌注取材,采用尼氏染色与免疫组织化学技术观察各个时间点豚鼠自身两侧梨状皮质尼氏体、NeuN和CB的表达情况。结果 3周组与6周组嗅觉未剥夺侧梨状皮质尼氏体的密度、CB~+细胞密度均显著高于剥夺侧(P0.05);3周组与6周组嗅觉未剥夺侧梨状皮质NeuN~+细胞密度低于剥夺侧,差异有统计学意义(P0.05)。结论嗅觉功能活动对成年豚鼠梨状皮质神经元的表达有重要作用。     

脑源性神经营养因子经由环磷酸腺苷反应元件结合蛋白磷酸化对缺氧大鼠胚脑皮质神经元细胞的保护作用

转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(Cyclic AMP response element-binding protein,CREB)是胚脑皮质神经元细胞内脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)诱导基因表达的重要调节因子.我们前期的研究表明BDNF对缺氧性神经元损伤具有保护作用,为了阐明BDNF对缺氧性神经元损伤的保护作用是否经过了核蛋白CREB的磷酸化,本研究采用蛋白质免疫印迹法检测单纯缺氧组和BDNF干预组胚脑皮质神经元细胞内CREB及Ser133磷酸化CREB在不同时间点表达水平的变化.结果显示缺氧及BDNF均能刺激胚脑皮质神经元细胞内Ser133磷酸化CREB表达增加,在不同缺氧时间点BDNF干预组Ser133磷酸化CREB表达水平较单纯缺氧组明显增强 (P＜0.01), BDNF干预组1 h后Ser133磷酸化CREB表达至高峰,以后持续表达维持6 h以上,维持时间较单纯缺氧组明显延长;在缺氧0～3 h, BDNF干预组细胞内总CREB表达水平与单纯缺氧组基本一致;随着缺氧时间的延长,单纯缺氧组细胞内CREB表达明显减少,以第5～6 h最明显.结果表明,BDNF对缺氧性神经元损伤的保护作用经过了核蛋白CREB的磷酸化.