表皮生长因子对体外培养大肠癌细胞间通讯的影响

表皮生长因子对体外培养大肠癌细胞间通讯的影响刘国龙，张万岱，周殿元，李金瀚，宋于刚细胞间可通过缝隙连接（Ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎ）传递信息物质和维持细胞间的连接。缝隙连接的缺如或功能低下均可导致细胞的生长失控和恶性转化。有一种信息小分子物质可被荧光物质...     

宫颈癌整合素β1的表达与其侵袭性的关系

目的探讨整合素β1（INTβ1）在宫颈癌浸润和转移中的作用机制。方法采用免疫组织化学SP法,分别测定16例正常宫颈、16例宫颈原位癌、46例宫颈浸润癌组织中整合素β1的表达。结果1.宫颈浸润癌INTβ1的阳性表达与原位癌和正常宫颈比较、原位癌和正常宫颈比较有明显差异（p＝0.013,p＝0.000;p＝0.037）。2.宫颈癌ⅡA期整合素β1的阳性表达与Ⅰ期比较,有明显差异﹙p＝0.011﹚。组织学分级G3整合素β1的阳性表达与G1比较有明显差异（p＝0.025）。宫颈癌淋巴结转移组整合素β1与无淋巴结转移组比较,有明显差异（p＝0.024）。结论宫颈癌发生发展中,整合素β1表达增强可能发挥了重要作用。     

整合素β-1对实体瘤细胞耐药的影响研究

目的：初步探讨附分子β－1整合素对肿瘤耐药的影响。方法：采用人肺腺癌细胞株A549，分别以不同浓度阿霉素诱导建立耐药细胞株，采用MTT法检测肿瘤细胞结合纤维粘连蛋白（FN）及阻断β－1整合素后对肿瘤细胞耐药的影响。结果：经致死剂量的阿霉素作用，MTT法检测药物敏感的肿瘤细胞抑制率为97．1％，耐药细胞株为45．2％，与纤维粘连蛋白结合后，药物敏感细胞株抑制率为68．5％，耐药细胞株为56．4％，阻断β－1整合素后与纤维粘连蛋白结合，药物敏感细胞株抑制率达到94％，耐药细胞株为49．4％，与纤维粘连蛋白结合后，肿瘤细胞抑制率明显下降（P＜0．05）；阻断β－1整合素功能后，肿瘤细胞抑制率显著上升，结论：肿瘤细胞与细胞外基质作用是造成肿瘤耐药的原因之一，阻断肿瘤细胞与细胞外基质的作用可以逆转肿瘤耐药。     

全反式维甲酸对脑胶质瘤细胞缝隙连接细胞间通讯功能的影响

目的 观察大鼠脑胶质瘤C6细胞缝隙连接细胞间通讯（GJIC)功能，并研究全反式维甲酸(ATRA)对C6细胞GJIC功能的影响。方法 (1)全反式维甲酸(ATRA)上调(36胶质瘤细胞GJIC功能；(2)划痕荷载染料传输实(SLDT)检测C6细胞ATRA处理前、后的细胞GJIC功能强弱；(3)光学显微镜观察ATRA处理前、后的细胞形态学变化。结果 (1)C6细胞GJIC功能低下；(2)ATRA上调C6胶质瘤细胞GJIC功能；(3)上调C6胶质瘤细胞GJIC功能后细胞增殖受到抑制。结论 (1)ATRA是C6细胞GJIC功能上调剂之一；(2)GJIC功能强弱可影响肿瘤细胞增殖。     

β_1整合素与肿瘤的关系

β1整合素是一类介导细胞与细胞外基质、细胞与细胞间黏附的黏附分子。β1整合素的表达不仅与肿瘤细胞黏附侵袭有关,而且其结构或表达水平的改变与细胞增殖、凋亡密切相关。β1整合素在多种肿瘤发生、发展中表达异常,介导肿瘤的浸润、转移及扩散。对β1整合素的深入研究可为肿瘤的诊治提供新的思路。     

整合素β1基因对RAW264.7细胞摄脂功能的影响

目的初步探讨整合素β1基因在RAW264.7细胞摄脂过程中的作用。方法针对整合素β1基因的不同靶点设计并化学合成3条具有阳性转染率的siRNA,用脂质体法转染RAW264.7细胞,并根据转染的方式将实验分为空白对照组、转染siRNA阴性对照组、脂质体对照组和转染筛选出的阳性转染率最高的siRNA组。用Cy3标记siRNA荧光显微镜下检测转染效率,Real-time PCR筛选沉默效率最高的siRNA,细胞黏附性实验检测细胞黏附性的改变,脂质油红O化学染色法检测细胞的脂质摄取量的变化,上述检测均重复测定3次。结果成功将siRNA转染入RAW264.7细胞,并成功筛选出沉默效率最高(65%)的siRNA为siRNA1,转染后实验组整合素β1mRNA表达明显低于其他组,细胞的黏附性从其他组的70%以上降低到53%,泡沫细胞转化率由其他组的90%以上显著降低到17%,摄脂能力显著降低,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论整合素β1基因明显影响RAW264.7细胞的摄脂功能,进而影响RAW264.7细胞向泡沫细胞的转化。     

耐药肿瘤细胞β-1整合素表达及对细胞凋亡的影响研究

目的：探讨耐药肿瘤粘附分子β－1整合素的表达以及其对细胞凋亡的影响。并寻找逆转耐药的途径。方法：采用人肺腺癌细胞株A549及耐阿霉素细胞株A549－ADR，免疫组化方法检测耐药细胞β－1整合素的表达；TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响。结果：耐药细胞β－1整合素表达水平高于敏感细胞（P＜0．01）；敏感细胞及耐药细胞FN后其凋亡率较未结合FN细胞明显降低（P＜0．01）；用抗β－1整合素抗体阻断与FN结合耐药细胞株β－1整合素，其凋亡率与未阻断β－1整合素，但与FN结合的耐药株相比，有显著差异（P＜0．001）。结论：耐药肿瘤细胞β－1整合素表达增加，成为耐药表型；其机制主要通过抑制细胞凋亡产生耐药；阻断其作用可以逆转肿瘤耐药。     

α5β1整合素在大肠癌中的表达与大肠癌细胞生物行为学的关系

OBJECTIVE: To study the correlation between the expression of integrin alpha5beta1 in colorectal carcinomas and the differentiation and metastasis of the tumor cells. METHODS: The expression levels of integrin alpha5beta1 were detected immunohistochemically in 81 pairs of cancerous and non-cancerous tissues of patients with colorectal cancer. RESULTS: The expression of integrin alpha5beta1 was significantly higher in the samples of colorectal carcinomas, than in non-cancerous tissues (P<0.05). Lower expression levels were detected in moderately or well differentiated colorectal carcinomas than in poorly differentiated ones (P<0.05). No significant relation was noted between the expression of integrin alpha5beta1 and lymph node metastasis of the colorectal carcinomas (P>0.05). CONCLUSION: Alpha5beta1 expression is significantly associated with the carcinogenesis and differentiation of colorectal carcinomas, but not with their lymph node metastasis, and the expression level might be used as a valuable pathological indicator for the carcinogenesis and progression of colorectal carcinomas.     

TGFβ1对人血管内皮细胞整合素β3及粘着斑激酶表达的影响

目的　观察转化生长因子 β1 ( TGFβ1 )对培养的人血管内皮细胞表面整合素 β3 表达及粘着斑激酶 ( focal adhesion kinase,FAK)活性的影响。方法　采用细胞 - EL ISA和免疫沉淀 -蛋白质酪氨酸激酶活性测定法。结果　 1ng/ m l、5 ng/ ml及 10 ng/ ml浓度的 TGFβ1 分别作用于培养的人血管内皮细胞 ( ECV30 4) 6、2 4和 48小时后 ,其细胞表面整合素 β3 蛋白的表达均增加 ( P<0 .0 5 ) ,且呈剂量依赖性。 5 ng/ m l和 10 ng/ m l的 TGFβ1 作用于培养的 ECV30 46小时和 2 4小时后 ,细胞中 FAK活性明显增高 ( P<0 .0 5 )。结论　 TGFβ1 促进血管内皮细胞表面整合素 β3 的表达和 FAK活性增高 ,可能是单核细胞和内皮细胞之间粘附功能增加 ,血管增生的机制之一     

整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达作用

目的 检测整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达情况,探索干细胞相关因子与肿瘤的关系.方法 采用免疫组织化学及细胞学染色方法检测整合素β1在人皮肤鳞状细胞癌组织及人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431中的表达,全反式维甲酸(ATRA)诱导鳞状细胞癌细胞分化,RT-PCR检测分化前后整合素β1变化水平.结果 在高分化鳞状细胞癌中,整合素β1在肿瘤团块外周基底样细胞呈连续性表达,内侧至团块中央可见散在或岛屿状阳性细胞;在低分化鳞状细胞癌组织中,岛屿状阳性细胞明显增多,呈弥漫分布;在A431细胞中,整合素β1散在表达于肿瘤细胞.ATRA诱导24h和48h后,ATRA处理组整合素β1与内参照β-actin的RT-PCR产物电泳光密度值之比分别为0.071±0.025和0.029±0.018,明显低于对照组的0.148±0.027和0.136±0.011(P<0.05).结论 整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织培养肿瘤细胞中具有异质性表达模式,并随肿瘤细胞分化程度增高而表达下降,提示整合素β1与皮肤鳞状细胞癌发生及可能存在的肿瘤干细胞具有密切关系.     

α5β1整合素在大肠癌中的表达与大肠癌细胞生物行为学的关系

目的研究整合素α5β1在大肠癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、转移等生物学行为的关系。方法用免疫组化EV二步法检测81例大肠癌及相应癌旁组织石蜡标本整合素α5β1的表达情况。结果在81例大肠癌组织中整合素α5β1表达量与相应的癌旁组织相比差异有显著性(P<0.05),癌旁组织中整合素α5β1的表达量明显降低。低分化大肠癌组织中整合素α5β1的表达量高于高分化大肠癌,有显著性差异(P<0.05)。整合素α5β1在大肠癌的表达与是否有淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论整合素α5β1的表达与大肠癌癌变及癌细胞的分化关系较密切,与癌组织发生淋巴结转移的关系不明显。整合素α5β1的表达量可作为大肠癌发生、发展过程中的一种较有价值的病理学指标。     

整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力研究

目的 构建人整合素(integrin)β1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pGenesil-integrinβ1),建立integrin β1剔降血管内皮细胞株,观察integrin β1对EA.hy926细胞株增殖的影响.方法 合成integrin β1 siRNA模板,经退火后插入到pGenesil-1荧光载体.阳性重组质粒经DoTAP转染至EA.hy926细胞中.蛋白印迹观察pGenesil-integrinβ1表达载体对目的蛋白integrin β1 表达的抑制效率,绘制转染基因前后细胞生长曲线.结果 经酶切、测序验证,pGenesil-integrinβ1重组质粒构建成功.转染细胞后,可明显抑制integrin β1的表达.整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢,与EA.hy926细胞株相比,生长曲线右移.结论 成功构建了pGenesil-integrin β1 重组质粒,建立了integrin β1下调细胞株,下调integrin β1表达对血管内皮细胞增殖产生负调控作用.     

β1-整合素与乳腺癌细胞凋亡关系的实验研究

目的探讨乳腺癌细胞凋亡与β1-整合素作用的关系.方法人乳腺癌细胞SK-BR-3在培养中以不同浓度的抗β1-整合素单克隆抗体的作用下,观察其对TNF-α诱导的凋亡并计算凋亡率.结果加入凋亡诱导剂后,凋亡细胞由正常生长的2.85±0.41增加到25.62±1.41(P＜0.01);而加入抗β1-整合素单克隆抗体的实验组凋亡细胞数明显减少,且随加入抗体浓度的增加而再度减少.结论TNF-α对SK-BR-3人乳腺癌细胞凋亡的诱导作用可能是由β1-整合素参与的介导作用实现的,且存在着一种在一定范围内的量、效依赖关系.     

β1整合素及纤维粘连蛋白与肺癌细胞凋亡关系的实验研究

目的 研究β1整台素及纤维粘连蛋白与人肺癌细胞凋亡之间的关系．方法 体外无血清培养条件下，以培养在包被纤维粘连蛋白底物上的人肺腺癌SPC-A-1细胞为靶细胞、用不同浓度抗β1，整台素单克隆抗体阻断β1整合素与纤维粘连蛋白相互作用，采用苏木素-伊红(HF)染色．吖啶橙荧光染色，DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况，并计算凋亡指数。结果 抗β1整合素单克隆抗体列SPC-A-1细胞凋亡有明显的促进作用，在一定的范围内，呈时间、剂量依赖性。结论 肺癌细胞凋亡与β1整合素受体有密切关系，且β1整台素受体与其特异配体纤维粘连蛋白的相互作用能促进细胞生存，当二者作用阴断导致肺癌细胞凋亡。     

胰腺癌组织中蛋白激酶Cα、整合素β1的表达

目的：探讨胰腺组织中蛋白激酶Cα（PKCα）和整合素β1的表达及其临床意义.方法：采用免疫组织化学SP方法,检测56例胰腺癌（高、中分化36例,低分化20例;TNM分期Ⅰ～Ⅱ期24例,Ⅲ～Ⅳ期32例;有淋巴结转移30例,无淋巴结转移26例）及23例正常胰腺组织中PKCα和整合素β1的高表达情况.结果：胰腺癌组织中PKCα和整合素β1高表达率分别为62.50%和71.43%,均高于正常胰腺组织（21.74%,43.48%;P均＜0.05）;PKCα高表达与胰腺癌分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关,整合素β1高表达与胰腺癌TNM分期和淋巴结转移有关.在胰腺癌组织中,PKCα表达与整合素β1呈正相关.结论：PKCα和整合素β1的表达和（或）功能异常可能共同参与胰腺癌的发生发展,联合检测2种蛋白对于预测胰腺癌转移潜能具有一定参考价值.     

整合素β1在恶性肿瘤组织中的研究进展

整合素β1是细胞粘附分子家族中比较重要的一类分子,是介导细胞和细胞外基质的相互作用的主要的受体,参与细胞信号传导,细胞黏附、迁移,控制细胞分化、增殖及调节及肿瘤血管生成等多个过程。本文就整合素β1在恶性肿瘤的发生、发展中的异常表达及其作用作一综述。     

缝隙连接细胞间通讯对顺铂疗效的影响研究进展

缝隙连接(gap junction,GJ)是细胞间直接进行信息交换的重要通道,由其介导的通讯方式缝隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)在细胞的新陈代谢、内环境稳定、增殖和分化等生理过程中发挥着关键的调节作用[1].顺铂是临床治疗肿瘤中广泛应用的化疗药物之一,但是肿瘤细胞对顺铂产生耐药性明显降低顺铂的疗效,关于顺铂耐药性产生的具体原因至今仍未阐明.研究发现GJIC与顺铂的治疗效果之间具有一定的关系,但目前对于这方面的研究还不是很深入,因此,进一步阐明GJIC与顺铂之间的关系对于解决顺铂耐药性问题具有重要的意义.     

TGFβ1对人血管内皮细胞整合素β3及粘着斑激酶表达的影响

OBJECTIVE: To observe the effects of transforming growth factors beta 1 (TGF beta 1) on the expression of integrin beta 3 and the activity of focal adhesion kinase (FAK). METHODS: This study was performed on cultured human endothelial cells (EC) by using cell-ELISA and immunoprecipitation-tyrosine kinase assay respectively. RESULTS: Under the stimulus of TGF beta 1, there a dose-dependent increase in the expression of integrin beta 3 chain in the surface of EC. And after the cultured EC were treated with 5 ng/ml or 10 ng/ml TGF beta 1 for 6 or 24 hours, the FAK activity in EC increased significantly as compared with the control group (P < 0.05). CONCLUSION: The expression of integrin beta 3 and the activity of FAK on EC were regulated by TGF beta 1, and this regulation may be important in cell adherence, angiogenesis, and in the pathophysiology of atherosclerosis.     

转化生长因子β1对软骨样细胞整合素和吞噬细胞糖蛋白-1表达的影响

目的 :检测软骨样细胞 (HEMCSS)α1β1,α2 β1,α5 β13种整合素 (integrins)和吞噬细胞糖蛋白 - 1(CD4 4 )的表达 ,及转化生长因子 β1(TGF - β1)对它们表达水平的影响。方法 :HEMCSS是永生性软骨肉瘤细胞 ,培养于含10 %胎牛血清 ,不含或含 1,5 ,10ng·ml-1的TGF - β1的培养液 ,培养时间 2 4h。共聚焦显微镜观察α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上的表达和分布 ,流式细胞仪检测α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上表达的水平。结果 :共聚焦显微镜结果显示 ,HEMCSS细胞膜表面均有α1β1,α2 β1,α5 β1及CD4 4表达。流式细胞仪检测表明 ,加入TGF - β1,培养HEMCSS细胞 2 4h后可诱导α1β1,α2 β1,α5 β1的表达增加 ,并呈剂量依赖趋势。而 3种不同浓度的TGF - β1培养 2 4h后均减少了HEMCSS细胞CD4 4表达。结论 :TGF - β1可以调节HEMCSS细胞膜上细胞外基质受体的表达 ,从而调节软骨细胞与细胞外基质成分的结合 ,对调节软骨细胞的功能起着重要的作用。