复方大黄制剂对老龄小鼠大脑皮质和海马ChAT、AchE活性及Ach含量的影响

目的研究复方大黄制剂对老龄小鼠大脑皮质和海马ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性及Ａｃｈ含量的影响,以期从胆碱能神经药理学角度探讨其抗衰老作用机理。方法取１２月龄和３月龄小鼠,随机分组、设立对照。ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性测定分别采用Ｆｏｎｎｕｎ氏法和ＲＲＡ法,Ａｃｈ含量测定采用荧光法。结果该药能显著提高１２月龄小鼠大脑皮质和海马中ＣｈＡＴ活性,并能显著降低ＡｃｈＥ活性,与空白对照组、非大黄气阴口服液组及安慰剂组比较均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１～０．００１）,但对Ａｃｈ含量无显著性影响,对３月龄小鼠也无上述作用。非大黄气阴口服液对１２月龄小鼠无上述影响。结论复方大黄制剂是通过影响老龄小鼠中枢胆碱能神经化学改善其衰老变化的。     

EGb761对阿尔茨海默病大鼠脑内ChAT活性及神经元凋亡的影响

目的观察EGb761(商品名:金纳多)对β淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑内胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及神经元凋亡的影响。方法2004年6～11月,在中国医科大学基因工程研究中心将48只大鼠随机分为Aβ-AD模型组、EGb761早期治疗组、EGb761晚期治疗组和对照组,每组12只。采用Aβ脑室内注射方法制作AD大鼠模型,EGb761早期治疗组同时开始EGb761治疗,EGb761晚期治疗组在2周后开始EGb761治疗,均连续14d。在第30天每组取6只对海马、基底节、额叶皮层、顶叶皮层进行ChAT活性测定,另6只相同部位脑组织进行TUNEL细胞凋亡染色,计算凋亡指数(NAI)。结果Aβ-AD大鼠模型脑组织ChAT活性下降,NAI升高,EGb761早期治疗组和晚期治疗组ChAT活性均高于模型组,NAI较模型组明显降低,差异有显著性意义(P<0·01);EGb761早期治疗组ChAT活性高于晚期治疗组,早期治疗组NAI低于晚期治疗组,差异亦有显著性意义(P<0·01)。结论EGb761治疗可使AD大鼠脑内ChAT活性升高,神经元凋亡减少,有预防和治疗AD作用;早期治疗效果优于晚期治疗。     

大豆异黄酮对AD模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响

目的:探讨大豆异黄酮(SIF)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响。方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和SIF组,每组10只。各组按规定剂量灌胃给药后观察大鼠学习记忆能力的改变、海马形态学的改变以及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化。结果:1.与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),与模型组相比,SIF组大鼠学习记忆能力有所提高(P0.05)。2.假手术组HE染色可见大鼠海马锥体细胞排列整齐、均匀,细胞结构完整,形态正常;模型组可见海马锥体细胞脱失、排列紊乱,结构不清,部分胞核固缩、深染;SIF组海马锥体细胞排列较整齐、均匀,结构尚清晰,形态基本正常。3.与假手术组比较,模型组海马ChAT活性明显降低(P0.05),AchE活性有增加趋势,但无显著差异(P0.05);与模型组比较,SIF组海马ChAT活性明显提高(P0.05),但AchE活性变化不明显(P0.05)。结论:SIF能够改善AD模型大鼠认知功能,提高大鼠脑内ChAT活性,提示药物的作用可能与胆碱递质合成增加有关。     

通经补肾复方对铝诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱的影响

目的 观察通经补肾中药方对铝诱导的AD模型大鼠海马组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及乙酰胆碱(Ach)含量变化.方法 选择健康3月龄SD大鼠84只,随机分为对照组、模型组(分为低、中、高剂量铝饲料组)、中药组(分为低、中、高剂量中药组),每组各12只.模型组在常规饲料中添加不同剂量A1C13·6H20喂饲大鼠,持续染毒3个月,制作AD动物模型.中药组大鼠喂饲含铝饲料,并以通经补肾中药方灌胃.上述实验结束后,处死大鼠,取海马组织,测定海马中的AchE和ChAT的活性及Ach含量.结果 与对照组比较,中、高剂量铝饲料组大鼠海马中AchE的活性明显增高(P＜0.01),ChAT活性明显降低(P＜0.01),Ach含量显著减少(P＜0.01).与高剂量铝饲料组比较,中、高剂量中药组大鼠海马中AchE活性明显降低(P＜0.01),ChAT活性明显升高(P＜0.01),Ach含量明显增加(P＜0.01).结论 铝的过多摄入使大鼠海马Ach减少可能是AD发病的机制之一,中药方可提高海马中ChAT活性,抑制AchE活性,增加Ach的含量,改善大鼠中枢胆碱能系统失衡状况.     

丰富环境训练对低碘大鼠中枢胆碱能神经元的作用初探

对碘缺乏大鼠从生后２５天起给予丰富环境训练，然后在４０日龄时测定脑重量、蛋白质、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、乙酰胆碱转移酶（ＣｈＡＴ）、乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）各亚类。结果表明，丰富环境的后天训练对脑的基本构成、细胞数目无明显改善作用。但后天训练可促进大鼠海马、大脑皮层和小脑胆碱能神经元功能活动，尤其是突触部分得以一定程度地改善。     

地黄益智方对Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响

目的观察地黄益智方对Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响。方法 120只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,地黄益智方小、中、大剂量组,采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1～40复制老年性痴呆模型,造模24 h后开始给药,连续4 w。分别在给药1、3 w后用Morris水迷宫法连续5 d进行定位航行实验,第6天进行空间探索实验,检测各组大鼠学习记忆能力;2、4 w用生化法检测各组大鼠大脑皮层ChAT、AChE的活性变化。结果模型组大鼠明显存在学习记忆功能障碍,其中1 w后第2、4、5、6天与空白组相比有差异(P=0.016、0.000、0.003、0.001),3 w后第1、4、5、6天与空白组相比有差异(P=0.023、0.006、0.005、0.007),地黄益智方各剂量组行为障碍明显轻于模型组。模型组ChAT活性明显降低,2、4 w时与空白组相比有差异(P=0.011、0.024);模型组AChE活性明显增高,2、4 w时与空白组相比有差异(P=0.003、0.010);地黄益智方各剂量组乙酰胆碱转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性改变明显轻于模型组。结论地黄益智方能改善Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力,可能与其调节中枢神经递质ChAT、AChE活性有关。     

丹黄通络胶囊对老年痴呆大鼠学习记忆能力及脑内胆碱能系统的影响

目的 观察丹黄通络胶囊对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及脑内胆碱能系统的影响.方法 采用β淀粉样蛋白(Aβ25-35)侧脑室注射制备AD大鼠模型,用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,采用比色法测定大鼠脑组织中胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶( AchE)的活性,并应用免疫组化法检测海马神经元M1受体的表达.结果 丹黄通络胶囊组大鼠经治疗后,Morris水迷宫实验成绩明显优干模型组(P＜0.05);目脑组织中AchE活力明显降低,ChAT活力明显增强,海马神经元细胞膜上M1受体的平均灰度也明显降低,与模型组相比差异异具有统计学意义(P＜0.01),且呈现一定剂量依赖性.结论 丹黄通络胶囊对AD模型大鼠的学习记忆能力减退具有一定改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能系统有关.     

寿聪胶囊对老年痴呆模型大鼠学习记忆及海马区ChAT的影响

目的 观察寿聪胶囊对老年痴呆(AD)模型大鼠的学习记忆、海马区乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性细胞的表达及病理形态学影响,探讨寿聪胶囊的防治机制.方法 选用Wistar 雄性大鼠随机分成五组:对照组、模型组、脑复康组及寿聪胶囊低、高剂量组.用D-半乳糖和东莨菪碱制备复合AD大鼠模型,应用中药复方制剂寿聪胶囊进行防治.用跳台法测试大鼠的学习记忆能力、免疫组化法观察海马区ChAT阳性细胞的表达变化、光镜下观察脑组织病理形态学的改变.结果 寿聪胶囊组跳台潜伏时间明显延长、触电错误次数显著减少,海马区ChAT的阳性细胞数目显著增多、且染色大多呈阳性,脑组织病理损害明显减轻;与模型组相比均有显著性差异(P＜0.01),与脑复康组相似(P＞0.05).结论 寿聪胶囊能提高AD大鼠学习与记忆能力,减轻脑组织的病理损害,可能与拮抗东莨菪碱所致胆碱能神经系统的功能损害,提高ChAT活性,促进Ach合成有关.     

旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响及机制

目的研究旱莲草对老年痴呆模型大鼠的抗痴呆作用机制。方法选用健康成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、旱莲草低、高剂量组,每组10只。采用皮下注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25~35构建痴呆模型大鼠,同时每天给予生理盐水或不同剂量的旱莲草水提物灌胃治疗8 w。用药结束后,分别观察各组大鼠的学习记忆能力、海马神经元形态学变化及海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、胆碱乙酰转移酶(Ch AT)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)的酶学活性。结果与对照组相比,模型组的反应时间延长,潜伏期缩短,错误次数增加(P0.01);与模型组相比,旱莲草高剂量组反应时间明显缩短,潜伏期明显延长,错误次数显著降低(P0.01);光镜下,与对照组相比,模型组锥体细胞明显减少,细胞排列稀疏,结构不清楚;与模型组相比,旱莲草高剂量组锥体细胞形态结构基本正常,细胞脱失现象较少;与对照组相比,模型组大鼠海马中SOD的活性明显降低,MDA的含量明显增多,Ch AT活性明显下降,ACh E活性明显增加(P0.01);与模型组相比,旱莲草高剂量组大鼠海马中SOD的活性明显增加,MDA的含量明显减少,Ch AT活性明显升高,ACh E活性明显降低(P0.01)。结论旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆功能具有改善作用,其机制可能与改善大鼠海马神经元形态结构,减少神经细胞的丢失,增加SOD的活性,减少MDA的含量,增加Ch AT的活性,降低ACh E的活性有关。     

补肾活血方对自发性高血压大鼠血清残粒脂蛋白含量的影响

目的观察补肾活血方对自发性高血压大鼠（SHR）血清残粒脂蛋白（RLP-C）含量的影响。方法给药12周后,采用免疫沉淀分离法测定空白对照组、川芎组、淫羊藿组及补肾活血方组大鼠血清中RLP-C的含量。结果实验12周,与空白对照组比较,各组大鼠血清RLP-C含量均明显降低（P〈0.01）,与川芎组、淫羊藿组比较,补肾活血方组RLP-C含量明显降低（P〈0.01）,川芎组与淫羊藿组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论补肾活血方、川芎及淫羊藿均能降低SHR血清RLP-C含量,其中补肾活血方作用最强。     

银杏内酯A对海马神经细胞凋亡保护作用的研究

目的探讨银杏内酯A(GKA)对凋亡海马神经细胞的影响及机制。方法用MTT法分析GKA对原代培养海马神经细胞的毒性作用,用浓度分别为0.1、1、10μmol/L的GKA预处理神经细胞6h,再用50μmol/LSNP孵育神经细胞24h;用流式细胞仪分析各组凋亡情况,用RT-PCR和Westernblot分析bcl-2、bax和cpp32 mRNA和蛋白表达水平,用试剂盒测定各组Cpp32活性。结果流式细胞术结果显示GKA实验组凋亡率均显著低于SNP组(P<0.01);RT-PCR结果和WesternBlot结果表明,GKA可以对抗SNP,上调bcl-2表达,下调bax表达,不影响Cpp32表达,但能显著降低Cpp32的活性(P<0.01)。结论GKA可以对抗SNP,对海马神经细胞有保护作用。     

丙酮酸乙酯对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及PI3- K/Akt信号通路的影响

目的探讨丙酮酸乙酯(EP)对缺氧缺血性脑损伤(HIBI)新生大鼠海马神经元凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)/蛋白激酶(Akt)信号通路的影响。方法将7 d龄Wistar大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(HIBI组)、丙酮酸乙酯处理组(EP组,于缺血缺氧前30 min行3 mg/kg EP腹膜内注射)。采用Rice法制备HIBI模型,透射电子显微镜下观察新生大鼠海马区神经元变化;2,3,5-三苯基四氮唑-水合物(TTC)染色法检测缺氧缺血脑组织损伤情况;TUNEL法和双重免疫荧光染色法检测海马神经元凋亡情况;免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法检测海马组织p-Akt和Bcl-2蛋白表达情况。结果模型制备24 h后,sham组神经元结构基本正常,HIBI组神经元呈气蚀性改变,EP组神经元气蚀性变化减少,神经元受损情况改善。模型制备48 h后,与sham组比较,HIBI组梗死面积显著增加(P<0.05);与HIBI组比较,EP组梗死面积显著降低(P<0.05)。sham组TUNEL阳性染色细胞少,而HIBI组TUNEL阳性细胞显著高于sham组(P<0.05);EP组TUNEL阳性细胞数显著降低(P<0.05)。HIBI组双标记阳性细胞比例显著高于sham组(P<0.05);与HIBI组比较,EP组双标记阳性细胞比例显著降低(P<0.05)。与HIBI组比较,EP组p-Akt和Bcl-2的平均光密度值显著高于HIBI组(P<0.05);EP组p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论 EP处理通过激活PI3K/Akt信号通路,促进Bcl-2表达,缓解HIBI引起的神经元凋亡,从而发挥脑保护作用。     

健脾化痰通脉方治疗冠心病血脂异常30例临床观察

目的 观察健脾化痰通脉方对冠心病血脂异常患者临床症状及血脂水平的影响.方法 将60例冠心病血脂异常患者随机分为治疗组和对照组各30例,在常规治疗的基础上,治疗组给予健脾化痰通脉方,每日一剂,分早晚两次温服;对照组给予辛伐他汀20 mg,于每晚睡前口服.疗程均为8周.疗程结束时比较两组中医症状积分变化及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标.结果 健脾化痰通脉方能明显改善冠心病血脂异常患者胸闷、胸痛、气短、体胖多痰、身体困重等临床症状,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);且能明显改善患者各项血脂指标(P<0.01),实验室指标总有效率为73.33%,与对照组比较疗效接近,差异无统计学意义(P>0.05).结论 健脾化痰通脉方能明显改善冠心病血脂异常患者临床症状及各项血脂指标,并具有较高的安全性.     

缺锌对衰老大鼠海马生长抑素mRNA神经元影响的原位杂交组织化学研究

目的为探索缺锌对衰老大鼠海马结构内SS神经元影响的可能机制，研究缺锌和衰老大鼠海马SSmRNA神经元的变化．方法选用Wistar雄性大鼠24只，分为缺锌组（7月龄）、老龄组（24月龄）和对照组（7月龄）．每组各8只．缺锌组以含10mg／kg双硫腙的普食喂养，2w后，采用原位杂交组织化学技术显示海马结构内SSmRNA神经元，光镜下计数各组海马内SSmRNA神经元的数目，采用图像分析技术测定其灰度值和截面积．结果与对照组相比，缺锌和衰老大鼠海马内SSmRNA神经元的数目和灰度值均明显减少和降低．神经元的截面积无明显变化．结论在衰老状态下，海马结构内SSmRNA神经元的基因表达水平降低，这种变化与衰老过程中机体锌水平的降低有密切关系．     

左旋四氢巴马汀对大鼠海马神经元细胞钙超载损伤的保护作用

目的研究左旋四氢巴马汀(l-THP)对氯化钾所致大鼠海马神经元胞内钙超载的影响。方法原代培养大鼠海马神经元细胞,分为4组:空白对照组、l-THP1μmol/L组、l-THP10μmol/L组、l-THP100μmol/L组。应用激光扫描共聚焦显微镜实时扫描,观测大鼠海马神经元胞内钙的荧光强度变化。结果在静息状态下(1～100)μmol/L左旋四氢巴马汀对胞内钙浓度([Ca2+]i)均无影响。左旋四氢巴马汀对60mmol/LKCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有抑制作用。对照组、1μmol/Ll-THP、10μmol/Ll-THP、100μmol/Ll-THP的峰值荧光强度增加分别为(64.3±2.8)%、(46.3±3.1)%、(34.2±1.5)%、(20.8±1.2)%(P0.05)。左旋四氢巴马汀对10mmol/LCaffeine诱导细胞内钙库的钙释放,引起的胞浆钙升高有抑制作用。对照组、lμmol/Ll-THP、10μmol/Ll-THP、100μmol/Ll-THP峰值荧光强度增加分别为(53.9±4.3)%、(48.2±3.9)%、(44.3±4.6)%、(35.5±3.2)%(P0.05)。结论左旋四氢巴马汀可以通过减轻损伤诱发的海马神经元细胞内钙超载程度来保护海马神经元。     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠行为学和海马神经元形态学的影响

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响。方法将60只大鼠随机分为5组:正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼莫地平组。补阳还五汤组药量为50g/(kg·d),尼莫地平组药量为20mg/(kg·d),共给药30d。模型组、假手术组和正常对照组均给予蒸馏水1mL/100g灌胃。治疗后以Morris水迷宫检测其学习记忆行为能力,以HE染色、Nissl染色检测其神经细胞形态学的变化。结果Morris水迷宫实验中,正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼莫地平组的逃避潜伏期分别为:7.67s±3.42s、8.76s±4.03s、29.56s±13.28s、16.96s±7.06s、20.16s±8.89s;探索次数分别为:16.86/min±5.37/min、14.42/min±4.01/min、4.26/min±0.80/min、8.96/min±1.30/min、8.74/min±2.52/min。与正常对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P0.05),平均探索次数显著减少(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组、尼莫地平组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),平均探索次数显著增加(P0.05)。光镜观察显示,补阳还五汤组和尼莫地平组均可见海马CA1区神经元脱失现象明显减轻,数目增多,神经元丢失率明显降低。结论补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤有关。     

Effect of Huoxue Jiedu Recipe on the Apoptosis and Cytokine in Diabetic Retinopathy

<正>Objective To observe the effects of Huoxue Jiedu Recipe(HXJD) on the apoptosis and the expression of NF-_κB and Caspase-3 in the reina tissue of early diabetic rats. Methods The diabetic rat model was established by using one single intraperitoneal injection of streptozotocin     

软脉灵口服液对拟血管性痴呆大鼠学习记忆和海马CA1区神经元凋亡的影响

目的观察软脉灵口服液对实验性血管性痴呆（VaD）大鼠空间学习记忆能力和海马CA1区神经元凋亡的影响。方法选用永久性结扎双侧颈总动脉（2VO）制作VaD模型,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马CA1区的形态学变化,TUNEI．染色观察大鼠海马CA1区的神经元凋亡情况。结果与模型组比较,软脉灵高剂量组逃避潜伏期缩短（P〈0．001）、1min穿越原平台所在位置次数增加（P〈0．001）;软脉灵高剂量组与低剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞比模型组减少（P〈0．01）;与软脉灵低剂量组比较．高剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞更少（P〈0．01）。结论软脉灵口服液能改善拟VaD尢鼠的空间学习记忆能力,减少拟VaD大鼠海马CA1区的凋亡细胞。这些作用呈一定的量效关系。     

红景天苷对子鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨红繁天苷对H2O2诱导子鼠心肌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法在原代培养的SD大鼠子鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型，观察不同剂量红景天苷（10μg／mL、30μg／mL、90μg／mL）对心肌细胞凋亡率、丙二醛（MDA）含量、超氧化特吱化酶（SOD）活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。结果与模型组比较红景天苷不同剂量组可降低心肌细胞凋亡率（P〈0．01），降低MDA含量，增加SOD和LDH活性（P〈0.01），且呈剂量相关性。结论红景天苷对H2O2诱导的子鼠心肌细胞凋亡有抑制作用，其作用机制可能与其抗脂质氧化有关。