肺炎链球菌溶血素经死亡受体/Fas途径和线粒体途径诱导RAW264.7细胞凋亡

目的:探讨肺炎链球菌溶血素(Pneumolysin,Ply)对小鼠RAW264.7细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法:Ply蛋白加入RAW264.7细胞培养上清与细胞共孵育。倒置显微镜观察Ply对RAW264.7细胞形态的影响。MTT法检测Ply对RAW264.7细胞的增殖抑制。Annexin V法检测细胞凋亡率。分光光度法检测Caspase-3、8、9活性。免疫细胞化学法检测到Bax、Fas、Bcl-2蛋白的表达。结果:Ply对小鼠RAW264.7细胞有明显的增殖抑制作用,呈剂量和时间依赖性;1μg/ml Ply处理RAW264.7细胞24小时后,可见典型的凋亡形态学改变;1μg/ml Ply处理RAW264.7细胞1小时和3小时后,细胞凋亡率分别为32.90%和51.56%(P<0.05);1μg/ml Ply蛋白处理RAW264.7细胞24小时,Caspase-3、8、9活性均比对照组升高(P<0.05);免疫细胞化学法检测到Bax、Fas表达较对照组增强,Bcl-2表达减弱(P<0.01)。结论:Ply可诱导小鼠RAW264.7细胞凋亡,诱导凋亡的机制可能是通过死亡受体/Fas途径和线粒体途径双重机制的介导实现。     

槲皮素对毒胡萝卜素诱导的巨噬细胞内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制

目的: 研究槲皮素(quercetin, Que)对毒胡萝卜素(thapsigargin, TG)诱导的巨噬细胞RAW264.7内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制。方法: 1 μmol/L TG作用RAW264.7细胞24 h诱导内质网应激,不同浓度Que(80、120或160 μmol/L)与TG共同作用后,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率及[Ca²⁺]_i,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化,Western blotting法检测糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)的表达;Western blotting法检测Que(160 μmol/L)和(或)磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)抑制剂LY294002(15 nmol/L)与TG共同作用时GRP78和CHOP的表达。结果: Que能够抑制TG诱导的RAW264.7细胞内质网应激损伤,与TG组相比,细胞存活率升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),[Ca²⁺]_i降低(P<0.05),GRP78及CHOP表达减少(P<0.05);LY294002单独作用可抑制TG诱导的GRP78及CHOP表达上调(P<0.05),但与Que联合应用与二者单独使用时抑制作用无显著差异。结论: Que可以抑制TG诱导的RAW264.7细胞内质网应激凋亡途径,该作用可能与其抑制PI3K信号通路从而降低CHOP蛋白的表达有关。     

亥茅酚苷对脂多糖诱导巨噬细胞一氧化氮和白介素6表达的影响北大核心CSCD

目的:探讨亥茅酚苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7炎症介质及细胞因子(NO、IL-6)释放的影响。方法:应用LPS(1μg/ml)刺激RAW264.7细胞,采用不同浓度亥茅酚苷(20、40、80μg/ml)干预,Griess试剂法测定NO释放量;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定IL-6释放,用免疫印迹法(Western blot)检测细胞一氧化氮合酶(i NOS)的表达,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析i NOS、IL-6 mRNA的表达。结果:亥茅酚苷各剂量组(20、40、80μg/ml)均能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO、IL-6的释放(P<0.01),并下调i NOS蛋白、i NOS mRNA、IL-6 mRNA的表达。结论:亥茅酚苷对LPS诱导的巨噬细胞NO、IL-6释放和i NOS表达有抑制作用,具有一定的抗炎活性。     

糖尿病患者低密度脂蛋白通过激活caspase-12途径诱导小鼠巨噬细胞凋亡

目的:研究糖尿病患者低密度脂蛋白(low density lipoprotein from diabetes mellitus patients,DM-LDL)对小鼠巨噬细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡途径关键分子caspase-12的影响,以探讨其对鼠巨噬细胞凋亡的诱导作用及机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,给予DM-LDL(25、50和100 mg/L)处理24 h;分别以正常人来源的低密度脂蛋白(normal low density lipoprotein,n-LDL;50 mg/L)和ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM; 4 mg/L)处理24 h的巨噬细胞作为阴性和阳性对照组;另外以ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA; 5 mmol/L)预处理细胞1 h,然后给予DM-LDL(100 mg/L)处理24 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞活力和凋亡情况,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒测定培养液中LDH的活性,Western blot法检测caspase-12蛋白的表达。结果:与TM相似,DM-LDL明显导致细胞活力下降、LDH释放和细胞凋亡率增加(P0.05),同时显著增强caspase-12的活性,在50和100 mg/L浓度时作用更明显(P0.01)。PBA预处理可抑制DM-LDL所诱导的巨噬细胞活力下降、LDH释放和凋亡增加(P0.05),同时抑制DM-LDL所致的caspase-12活化(P0.05)。结论:DM-LDL可导致小鼠巨噬细胞RAW264.7的凋亡,其机制可能与活化caspase-12途径有关。     

RIP3对BCG感染后小鼠巨噬细胞凋亡的调控作用研究

目的:探讨受体相互作用蛋白3(RIP3)在卡介苗(BCG)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡过程中的调控作用。方法:构建RIP3腺病毒干扰载体并感染巨噬细胞,并用BCG进行感染。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;利用流式细胞术对细胞凋亡率、线粒体膜电位及活性氧含量进行检测;通过Western blot检测RIP3及凋亡相关蛋白的表达水平。结果:BCG感染RAW264.7细胞后,细胞活力下降且RIP3蛋白表达量显著上调(P0.01)。而与BCG单独感染组相比,BCG感染结合RIP3干扰处理组细胞凋亡率及活性氧含量降低,线粒体膜电位升高,同时促凋亡蛋白Bax与cleaved caspase-3的蛋白水平显著升高,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量显著降低(P0.01)。结论:在BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7的过程中,RIP3参与了BCG诱导的RAW264.7细胞的凋亡,且该过程可能是通过线粒体途径实现的。     

Annexin 1抑制BCG诱导的巨噬细胞RAW246.7细胞炎性应答及凋亡

目的建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用。方法用BCG感染RAW246.7细胞。用RT-q PCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达。Western blot检测ANXA1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;用MTT检测细胞存活率;用ELISA检测细胞的凋亡率;ELISA试剂盒检测细胞因子IL-6和TNF-α的含量。结果 ANXA1在BCG感染的巨噬细胞RAW246.7中明显下调(P0.05),并呈时间依赖性。ANXA1高表达显著降低BCG刺激诱导的炎性细胞因子IL-6和TNF-α的表达水平(P0.05)。此外,过表达ANXA1明显提高BCG感染的巨噬细胞的存活率(P0.05),并抑制细胞凋亡,通过上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达同时下调促凋亡蛋白Bax的表达水平(P0.05),并降低caspase-3的蛋白表达量(P0.05)。结论 ANXA1能够抑制BCG刺激诱导巨噬细胞的炎性应答进程及凋亡,为结核病的临床研究和治疗提供了理论基础。     

超声介导携氧载紫杉醇微泡对乏氧巨噬细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对乏氧巨噬细胞增殖和凋亡的影响。方法筛选超声辐照小鼠巨噬细胞RAW264.7合适的超声参数,用Co Cl2诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7乏氧模型,将乏氧巨噬细胞随机分为对照组(controlgroup)、紫杉醇组(PTX group)、甲氨蝶呤组(MTX group)、超声组(US group)、携氧脂质微泡组(OMBs group)、携氧载紫杉醇脂质微泡组(OPLMBs group)和超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡组(OPLMBs+US group),分别进行干预。采用MTT法检测各处理组巨噬细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡。结果超声强度为0.5 W/cm2,连续作用30 s时细胞存活率为(95.85±2.36)%。超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡组增殖抑制率及凋亡率分别为(46.01±2.35)%和(27.64±1.36)%,明显高于其它各处理组(P0.05)。结论超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡能明显抑制乏氧巨噬细胞的增殖、诱导其凋亡,可为RA体内实验研究提供思路。     

瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护机制

目的 观察瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护机制,探讨磷酸肌醇3位羟基激酶/AKT(P13-K/AKT)和胞桨型磷脂酶XZ(cPLA2)信号转导通路是否参与瘦素保护机制.方法 以IPS诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,采用Annexin V-FTTC/PI双染色法流式细胞仪检测PI3-K/AKT特异性抑制剂LY294002 和 cPLA2 抑制剂AACOCF3对细胞凋亡的影响,以RT-PCR检测cPLA2 mRNA和caspase3 mRNA的表达,用cPLA2活性试剂盒检测cPLA2的活性.结果 瘦素可以保护LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡,使胸腺细胞存活率由58%上升到65%,LY294002(10 μmol/L)和AACOCF3(10 μmol/L)可以明显抑制瘦素的保护作用,使胸腺细胞的存活率分别降至60%(P＜0.05)和62%(P＜0.05).RT-PCR表明加入瘦素后cPLA2 mRNA和caspase3 mRNA的表达下降.cPLA2活性试剂盒表明leptin可抑制cPLA2的活性.结论 瘦素抑制LPS诱导的胸腺细胞凋亡同时依赖IP3K/AKT和cPLA2途径.     

人参皂苷Rg1对小鼠腹腔巨噬细胞的影响

目的研究人参皂苷Rg1对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,并探讨其作用机制。方法无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,制备单细胞悬液,加入不同终浓度的人参皂苷Rg1 4 h后,细菌脂多糖LPS(10μg/ml)作用24 h,直径1μm的微球(1×1010/L)结合流式细胞术分析Rg1对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响;Griess试剂盒检测NO的释放;H2DCFDA染色检测ROS的含量;Fluo-4/AM染色检测Rg1对Ca2+超载的影响;Sytox R Green染色,荧光酶标仪检测Rg1对CHX、CTX诱导的细胞凋亡的影响。结果 10、20μmol/L的Rg1时能明显抑制LPS诱导的巨噬细胞NO和ROS的产生以及吞噬微球的能力;10μmol/L的Rg1能显著抑制Ion诱导的的巨噬细胞Ca2+的超载以及CHX、CTX诱导的细胞的凋亡。结论 Rg1具有显著的抗炎作用,并可抵抗多种因素诱导的细胞凋亡,为进一步开发为免疫治疗药物提供了依据。     

雪胆素甲通过破坏微丝结构诱导LPS活化的RAW264.7细胞凋亡

目的分析雪胆素甲(CuIIa)对脂多糖(LPS)活化的RAW264.7巨噬细胞的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法MTS法检测CuIIa对RAW264.7细胞增殖的作用,相差显微镜观察CuIIa对LPS活化的细胞形态的影响,荧光显微镜观察CuIIa对细胞骨架的影响,流式细胞仪检测亚二倍体(凋亡)峰的变化,免疫印迹检测Cleaved caspase-3、生存素以及G-actin与F-actin的变化。结果 CuIIa能明显抑制RAW264.7细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,但单独CuIIa不能有效诱导细胞凋亡。CuIIa使LPS活化的伸展细胞收缩变圆,伪足突起消失,G-actin水平下降,细胞内发生严重的Actin聚集,说明微丝结构被破坏。随着CuIIa浓度的增加,其诱导LPS活化的RAW264.7细胞处于sub-G0/G1(凋亡峰)的数量明显增加。免疫印迹分析显示CuIIa使Caspase-3明显活化,生存素急剧下降。结论 CuIIa可能通过引起Actin聚集而破坏微丝细胞骨架,诱导LPS活化的RAW264.7细胞发生凋亡,从而发挥其抗炎效应。     

小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响

目的：探讨小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的作用，同时应用流式细胞术及原位末端核苷酸标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果：不同浓度的小檗碱对NIT-1胰岛β细胞作用呈剂量依赖性：低浓度小檗碱（≤5 μmol/L） 对细胞无明显毒性，随浓度升高毒性作用明显。在培养基中加入高糖高脂及低浓度的小檗碱共同培养24 h, 小檗碱组细胞凋亡率低于高糖高脂组（P<0.01）。结论：小檗碱能抑制高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡。     

Activation of peritoneal macrophages by berberine-type alkaloids in terms of induction of cytostatic activity

The antitumour alkaloids, berberine and coralyne were investigated in terms of their ability to induce chemiluminescent responses and cytostatic activity in macrophages against tumour cells in vitro. Berberine hydrochloride and sulfate, and coralyne chloride, which had no direct tumoristatic activities at a concentration of less than 0.15 micrograms/ml, activated macrophages to inhibit the incorporation of tritiated thymidine into EL4 leukemic cells. The activation of cytostatic macrophages by berberine was not augmented by the addition of a suboptimal dose of macrophage activating factor (MAF). Furthermore, a marked chemiluminescent response of macrophages was induced by treatment with berberine as well as with MAF or lipopolysaccharide. These results show that berberine and coralyne are potent macrophage activators for inducing cytostatic activity against tumour cells in vitro.     

小檗碱对人高转移肺癌系（PG）细胞增殖的影响及机制研究

目的：通过离体实验初探小檗碱对高转移性人肺癌细胞株（PG）增殖能力的影响，并探讨其作用机制。 方法： 用MTT法测定小檗碱对PG细胞增殖能力的影响。用流式细胞术测定小檗碱对PG细胞细胞周期及凋亡的影响。用激光共聚焦显微镜观察小檗碱诱导PG细胞氧自由基的产生。 结果： 小檗碱能够抑制PG细胞增殖，且随药物浓度增加抑制效应增强，呈浓度依赖性(P<0.05，P<0.01)。小檗碱对PG细胞细胞周期具有阻滞作用，40 mg/L的小檗碱能引起PG细胞的凋亡。小檗碱作用6 h、12 h只有在终浓度大于或等于10 mg/L时开始产生氧自由基，低浓度的小檗碱作用24h后就能诱导氧自由基的产生。 结论： 小檗碱对PG细胞增殖具有抑制作用，后者可能与调节细胞内活性氧自由基产生从而影响细胞周期进程有关。     

腺病毒介导胞嘧啶脱氨酶基因联合黄连素对直肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨黄连素联合腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶自杀基因(Ad-CD)对直肠癌细胞的体外杀伤作用.方法:用重组腺病毒介导外源CD基因转染到人直肠癌细胞株HR-8348,检测病毒的转导效率和CD基因表达.用四甲基偶氮唑盐(MTT法)检测黄连素联合Ad-CD基因对HR-8348细胞存活率及体外旁观者效应的影响.结果:在250μg/ml 5-氟胞嘧啶(5-FC)浓度下,0 1、 0 3、 3 0、 30 0μmol/L浓度的黄连素联合5-FC对直肠癌细胞生长抑制率分别为27 7%、 42 4%、 52 3%、 56 3%.3 0μmol/L浓度的黄连素可作为参考用药浓度.在转染和未转染CD基因的HR-8348混合体系中,黄连素联合CD/5-FC对直肠癌细胞具有更强的抑制作用.结论:黄连素可以增强自杀基因系统对直肠癌细胞的杀伤作用,可作为一种增效剂应用于直肠癌的治疗.     

小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究

目的：研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响，探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法：MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用；流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化；激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响；流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果：小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖，且存在剂量依赖关系；使细胞在G0-G1期的比例明显增多；使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块，同时使细胞内钙增多；并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论：小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0-G1期，抑制活化HUVEC的增殖：诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制，阻止新生血管形成，发挥其抗肿瘤作用。     

小檗碱对胰岛β细胞的保护作用及其机制研究

 目的:探讨小檗碱对胰岛β细胞的保护作用及可能机制。方法: 采用四氧嘧啶(Axn)诱导INS-1胰岛β细胞损伤模型,并以不同浓度的硫酸小檗碱进行干预。将细胞分为对照组（Con组）、损伤组（Axn组）、低剂量小檗碱组（LBer组,小檗碱浓度为15 μmol/L）、中剂量小檗碱组（MBer组,小檗碱浓度为45 μmol/L）及高剂量小檗碱组（HBer组,小檗碱浓度为100 μmol/L）。流式细胞术观察各组细胞凋亡情况,Western blotting免疫印迹法分别观察各组PTEN/PI3K/Akt信号通路、HNF-1α/PDX-1信号通路活化情况以及激活型caspase-3的水平;酶联免疫吸附法（ELISA）观察各组基础胰岛素释放及葡萄糖刺激后胰岛素的释放水平。结果: 与Con组相比,Axn组凋亡率显著升高,但小檗碱干预后凋亡水平显著降低,且呈浓度依赖性。与Con组相比,Axn组PTEN表达水平明显升高,而PI3K/Akt活性被抑制,激活型caspase-3水平显著升高;而小檗碱处理则能逆转上述PTEN通路的促凋亡作用,且显示出浓度依赖性;与Con组相比,Axn组HNF-1α/PDX-1信号通路活性显著下降,但小檗碱处理则能提高该通路活性,表现出浓度依赖性。与Con组相比,Axn组基础及葡萄糖刺激下胰岛素释放水平均显著降低,而小檗碱处理则能显著恢复上述胰岛素释放水平,呈浓度依赖性。结论: 小檗碱对四氧嘧啶损伤的INS-1胰岛β细胞具有保护作用,表现为对其凋亡的抑制与胰岛素分泌功能的恢复,分别与影响细胞内PTEN/PI3K/Akt及HNF-1α/PDX-1信号通路有关。     

Microcalorimetric investigation of the toxic action of berberine on Tetrahymena thermophila BF5

Tetrahymena thermophila (T. thermophila) BF₅ produces heat through growth and metabolism. By microcalorimetry, the power‐time curves of the metabolism of T. thermophila BF₅ at 28 °C were measured and some quantitative parameters were obtained from these curves. Then the action of berberine on this microbe was investigated. Furthermore, the minimum inhibitory concentration (MIC) of berberine against T. thermophila BF₅ growth was obtained by tube dilution method. Berberine of different concentrations had various actions on T. thermophila BF₅ growth: a low concentration (25 μg/ml) of berberine began to inhibit the growth of T. thermophila BF₅ and a high concentration (450 μg/ml) of berberine completely inhibited T. thermophila BF₅ growth. The toxic action of berberine could also be expressed as half‐inhibitory concentration IC₅₀, i.e., 50% effective in this inhibition. The value of IC₅₀ was 175.60 μg/ml, while the MIC of this compound against T. thermophila BF₅ was 20.76 mg/ml. Berberine has strong toxic action on T. thermophila BF₅ growth. The microcalorimetric method for the assay of toxic action is quantitative, inexpensive and versatile. (© 2010 WILEY‐VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim)     

黄连素对缺氧复氧诱导大鼠心肌细胞内Nrf2/Keap1的影响

目的　探讨黄连素(BR)对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤后凋亡的影响及其作用机制。 方法　将培养的H9c2心肌细胞随机分为：正常对照组(NC组)、单纯药物组(BR组)、缺氧/复氧组(H/R组)、药物低剂量LBR组(1.5×10-6 mol/L)及高剂量HBR组(1.5×10-4 mol/L)。处理结束后,用MTT比色法检测H9c2心肌细胞的活力,用Hoechst33258染色检测细胞核形态的变化,用Western blot法检测Nrf2, Keap1蛋白的表达。 结果　与NC组比较,单纯BR对H9c2心肌细胞无影响。与H/R组比较,低、高剂量BR组细胞的活力明显上升(65.2±1.6%; 82.3±1.4%) (P<0.01),心肌细胞的凋亡率明显减少(P<0.05),Western blot的结果显示,BR可明显促进抗氧化相关蛋白Nrf2表达,抑制Keap1的表达。 结论　 BR对H9c2心肌细胞H/R损伤后的凋亡具有显著的抑制作用,可能与其促进抗氧化核转录因子Nrf2表达有关。     

活化蛋白C对脂多糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞凋亡的影响研究

目的：观察不同剂量活化蛋白C(APC)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）凋亡的作用。方法:将培养成功的HUVECs通过LPS（1 mg/L）孵育诱导细胞凋亡模型，并给予APC（10 μg/L）或APC（50 μg/L）建立药物治疗组，同时设立正常对照细胞组和单独LPS（1 mg/L）诱导细胞凋亡组。应用电镜观察细胞超微结构；DNA ladder与TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡情况；Annexin-Ⅴ/PI双标记行流式细胞仪测定定量观察细胞凋亡率。同时采用MTT法测定细胞存活率和Western blotting测定增殖细胞核抗原（PCNA），以观察细胞的增殖变化。结果:通过细胞形态，DNA ladder和TUNEL荧光染色发现单独LPS诱导组的细胞可见明显的凋亡现象，而通过APC治疗组的细胞凋亡改变明显减轻和细胞凋亡率下降，同时细胞存活率和PCNA表达率增高，尤其在50 μg/L时，与单独LPS诱导组细胞比较差异显著（P<0.05）。结论:APC拮抗LPS诱导的血管内皮细胞凋亡并促进细胞的增殖，发挥保护细胞的作用。     

小檗碱对人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的作用

目的：观察小檗碱对人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的作用，以探讨小檗碱抑制肿瘤生长与转移的机制。 方法： 用小檗碱与体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共同孵育，以MTT法检测细胞的增殖活性，免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，荧光染色法观察凋亡细胞核形态，用Rhodamine123染色，激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位。 结果： 不同浓度小檗碱与HUVEC共同孵育可明显抑制HUVEC的增殖(P<0.05，P<0.01)，呈现一定的浓度依赖性和时效性；20 mg/L小檗碱与HUVEC共同孵育48 h，可显著降低细胞核PCNA的表达（P<0.01），并可见凋亡细胞数增多、线粒体膜电位明显降低（P<0.01）。 结论： 小檗碱抑制血管内皮细胞的增殖，并促进血管内皮细胞凋亡，从而抑制肿瘤血管形成，可能是小檗碱抑制肿瘤生长与转移的机制之一。