蚯蚓纤溶酶的分离纯化及抗栓活性研究

目的摸索蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶的抗血栓活性。方法采用分步盐析、透析、凝胶色谱和亲和色谱法分离纯化蚯蚓纤溶酶 ;此酶的体内抗栓活性检测采用动静脉旁路血栓形成抑制实验法。结果分离纯化得到的蚯蚓纤溶酶比活高 ,为 16 0 5IU/mg ;蚯蚓纤溶酶的体内血栓形成抑制效果比尿激酶作用显著。 结论该法分离纯化工艺简单 ,特异性好 ,纯化的纤溶酶比活高 ;体内抗栓活性比尿激酶作用显著     

糖链对蚯蚓纤溶酶纤溶活性的影响

应用以大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)为配基的亲和色谱从赤子爱胜蚓中分离了蚯蚓纤溶酶,亲和介质Sepharose-4B对蚯蚓纤溶酶的吸附量为0.04 ms/g,以糖苷酶A去除固定在SBTI上的蚯蚓纤溶酶的糖链.辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(ConA-HRP)亲和印迹和Schiffs染色结果表明.蚯蚓纤溶酶的糖链已基本去除,去除糖链后蚯蚓纤溶酶的活性降低约30%.     

蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用

目的　观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法　采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果　蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0～ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论　蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。     

蚯蚓纤溶酶的纯化及pH值、温度和胰蛋白酶对其纤溶活性的影响

目的纯化并鉴定蚯蚓纤溶酶 ,研究pH、温度和胰蛋白酶对其纤溶活性的影响。方法以赤子爱胜蚓为材料 ,采用硫酸铵盐析、DEAESepharoseCL 6B离子交换色谱、SephadexG 75凝胶过滤和制备电泳等分离技术纯化蚯蚓纤溶酶 ;利用纤维平板和聚丙烯酰胺凝胶电泳研究pH、温度和胰蛋白酶对蚯蚓纤溶酶纤溶活性的影响。结果分离得到纤溶酶 4种单一组分 :EFE 1、EFE 2、EFE 3、EFE 4 ;分子量分别为 2 70 0 0、2 80 0 0、2 30 0 0、330 0 0 ;4种组分对温度的适应范围较广 ;pH值对其纤溶活性的影响不尽相同 ,但都在pH低于 1.5时纤溶活性完全丧失 ;胰蛋白酶对纤溶酶 4种组分均无降解作用 ,对其纤溶活性无影响。结论纤溶酶口服药制剂宜制成肠溶型     

一种测定蚯蚓纤溶酶活力的简易方法

在全面考查温度、底物浓度、酶浓度和酶促反应时间等条件的基础上，改进了用合成底物BAEE测定蚯蚓纤溶酶的方法。该法重复性好，测试条件易于控制，可用于蚯蚓纤溶酶生产的质量控制。     

均匀设计在蚯蚓纤溶酶肠溶片研究中的应用

应用均匀设计研究蚯蚓纤港酶肠溶片的处方和工艺，以片剂酶活力不改变为指标观察处方工艺，成功地获得了使蚯蚓纤溶酶活力基本不改变的肠溶衣片剂最佳处方和工艺。     

关于蚯蚓中所含溶栓酶稳定性的观察

目前市场上大力宣传并用于临床的药物溶栓胶囊,据介绍用冷冻干燥法从蚯蚓中制取的冷冻干燥粉,主要治疗脑血栓及脑血栓引起的后遗症……等.之所以用于血栓病是蚯蚓冷冻干燥粉中含有胶原酶,纤溶酶、纤溶酶原激活物.胶原酶主要作用于血栓坚硬的外壳胶原蛋白,使之切开分解而溶化.纤溶酶对血栓内部纤维蛋白发生降解作用,纤溶酶原激活物可激活纤溶酶原变成纤溶酶,加强降解血栓的作用,三者合用共同加速了血栓的溶解.     

蚯蚓纤溶酶的亲和层析纯化及部分性质

用牛血纤溶酶原Ｓｅｐａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析方法从蚯蚓粗提物丙酮粉中分离纯化一种纤维蛋白溶解酶。该酶为糖蛋白，含糖量约为１．４３％，Ｍｒ为３００００。实验结果表明此酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的间接溶解纤维蛋白的双重作用，并对人血凝块有明显的溶解作用。１％ＰＭＳＦ对酶有显著的抑制作用，说明此蚯蚓纤溶酶为典型的丝氨酸蛋白酶类酶。     

纤溶酶的提取及其理化性质与溶栓作用的研究

以鲜蚯蚓为实验材料,解剖取消化管前1/3部位,加10倍生理盐水捣碎制成匀浆,离心制成纤溶酶粗提取液。采用纤维蛋白平板法测试纤溶酶的活力,研究不同温度、PH值对纤溶酶活力的影响。实验证明58℃,PH8.0纤溶酶活力量强。并将其这一特性用于溶栓丸的制作工艺中。     

蚯蚓溶栓酶制剂的致突变研究

蚯蚓溶栓酶制剂的致突变研究山西医学院（０３０００１）孙天佑，谭佩娇，刘志艳，白桂花蚯蚓溶栓酶制剂是由双胸蚓组织中提取制备的多组分酶蛋白，含有多种纤维蛋白溶解酶及纤溶酶原激活物，具有抗凝、促纤溶作用，改善血液流变学功效（降低全血、血浆粘度及血小板聚集性...