北京市朝阳区2011年儿童A组溶血性链球菌超抗原基因的分子流行病学研究北大核心CSCD

目的描述2011年北京市朝阳区儿童A组溶血性链球菌（GAS）的超抗原分子流行病学特征,分析超抗原基因与emm型别和GAS相关疾病的关系。方法从猩红热、咽炎及扁桃体炎患儿的咽拭子分离培养获得71株GAS,应用PCR法检测这些GAS是否携带8类超抗原基因（speA、spel、$sa、speC、speJ、speG、spell和SMEZ）;PCR扩增emm基因片段并测序,进行emm型别鉴定;分析超抗原基因、emm型别和GAS所致疾病之间的相互关系,应用,检验进行显著性分析。结果71株GAS的超抗原基因检出率从高到低分别为speC（100．0％）、SMEZ（100．0％）、s50（97．2％）、speG（95．8％）、speH（80．3％）、spel（80．3％）、speA（15．5％）和speJ（12．7％）;71株GAS中检出emml2．0型菌株62株、emml．0型7株、emm22．0型1株、emm75．0型1株;spel和渺H基因与speA和speJ基因在emml2．0型与emml．0型菌株中的分布差异有统计学意义（P均〈0．05）;spel和spetf基因在猩红热患儿和咽炎扁桃体炎患儿中的分布差异有统计学意义（P均〈0．05）;未发现emm型别在不同的疾病中的分布有差异。结论北京市朝阳区儿童携带的GAS超抗原基因的检出率与地域有一定关系;不同emm型别的GAS对超抗原基因的携带有一定的选择性,尤其是针对噬菌体携带的超抗原基因;较emm型别,超抗原基因能更好地建立菌株与疾病之间的关系。     

儿童链球菌感染分离株emm分型及超抗原基因谱的变迁

目的通过对1993-1994年和2005-2006年359株儿童A族溶血性链球菌(GAS)分离株进行emm分型及8种超抗原基因检测,探讨不同时期儿童GAS感染分离株emm分型及超抗原基因的变化。方法采用PCR法对2个时期359株儿童GAS分离株进行emm分型及8种超抗原基因扩增。结果 emm1和emm12在不同时期均为主要流行型,其他型别不断变化。与1993-1994年比较,2005-2006年GAS菌株emm型较集中,emm1和emm12显著增多(Pa<0.01)。携带6种或6种以上超抗原基因的GAS分离株从46.53%(1993-1994年)增加到78.39%(2005-2006年),ssa,speH和speJ基因的携带率明显增加(P<0.05),而speA基因的携带率显著下降(P<0.05)。超抗原emm基因谱与emm分型之间有密切关系,相同的emm型在不同的时期携带不同的超抗原基因,emm型的分布和超抗原基因谱与GAS感染性疾病之间无显著性联系。结论儿童链球菌感染分离株emm分型及超抗原基因谱随年代变迁。此数据为制备符合我国GAS感染的疫苗提供依据。     

北京地区猩红热样红斑患儿咽部A族链球菌分离株的 emm基因型和超抗原分布特征

目的分析北京地区猩红热样红斑患儿咽拭子分离的A族链球菌(GAS)的基因特征。方法回顾性研究。收集2019年6月至2020年2月在首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科就诊的猩红热样红斑患儿咽部GAS分离株, 采用PCR和测序检测菌株emm基因分型和超抗原基因(speA、speB、speC、speF、speG、speH、speI、speJ、speK、speL、speM、ssa和smeZ)。组间比较采用χ2检验或Fisher′s确切概率法。结果共收集147株GAS菌株, emm型别主要为emm1.0型76株(51.70%)和emm12.0型60株(40.82%), 其他7种emm型的菌株均少于5株。speF、smeZ、speG、speC、speB和ssa的检出率高, 分别为100.00%(147/147株)、100.00%(147/147株)、99.32%(146/147株)、95.24%(140/147株)、94.56%(139/147株)、92.52%(136/147株), speA、speJ、speI、speH和speM检出率低, 分别为51.70%(76/147株)、49.66%(73...     

A群链球菌抗原快速检测法在儿童A群链球菌感染性疾病诊断中的应用

目的:探讨A群链球菌(GAS)抗原快速检测法在儿童GAS感染中的临床应用价值。方法:收集2015年1月至2019年12月在深圳市儿童医院门诊和住院部就诊的疑为GAS感染的患儿44 733例。采集所有患儿的咽拭子标本,用BinaxNOW Strep A Test试剂进行GAS抗原快速检测,其中有346例患儿的咽拭子先接种...     

川崎病患儿血清金黄色葡萄球菌相关超抗原研究

目的检测川崎病(KD)患儿血清金黄色葡萄球菌相关超抗原,探讨KD的病因。方法 2010年1月至2010年10月在成都市儿童医院住院的70例KD患儿为研究对象,分别用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测KD患儿、42例急性感染性疾病患儿(IC)和48例健康儿童(HC)血清中金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)、中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)、肠毒素(SE)、A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)、人金黄色葡萄球菌抗原(HSPA-Ag)和人A组链球菌抗原(HASP-Ag)。取KD组和IC组患儿的静脉血、咽分泌物及粪便做细菌培养。结果 KD组SPA和TSST-1分别为(1.93±0.35)μg/mL和(6.50±1.15)μg/mL,IC组SPA和TSST-1分别为(1.19±0.24)μg/mL和(6.78±1.03)μg/mL,HC组SPA和TSST-1分别为(1.27±0.29)μg/mL和(5.42±0.92)μg/mL;3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组间SE、ASP、HSPA-Ag、HASP-Ag比较,差异均无统计学意义。70例KD患儿中血培养阳性8例(11.4%);咽拭子培养阳性4例(5.7...     

14株致儿童猩红热A族β溶血性链球菌多位点序列分型

目的 对A族β溶血性链球菌(beta-haemolytic group A streptococcus isolates,GAS)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST).方法 应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对来源于2007年北京和上海两地区分属于不同emm分型及其亚型、且对大环内酯类抗生素高水平耐药的14株致儿童猩红热GAS的 7对等位看家基因进行扩增,并将目的 基因产物测序,然后将所测得的每对等位看家基因的基因序列提交到MLST网站,获得相应的由7对等位看家基因组成的等位基因谱,最后将等位基因谱再次提交到MLST网站,确定GAS临床分离株MLST序列分型(sequence type,ST).结果 St5240、emm1.0型及其亚型GAS等位基因图谱为4-3-4-4-4-2-4,属于ST28型;emm4.0型GAS等位基因谱为5-7-8-5-15-2-1,属于ST38型;emm12.0型及其亚型GAS等位基因谱为5-2-2-6-6-2-2,属于ST36型;emm22.0型GAS等位基因谱为9-8-1-1-1-3-4,属于ST46型.结论 致2007年北京和上海两地区儿童发生猩红热的14株GAS分属于ST28、ST38、ST36及ST46四个不同的克隆系.     

风湿热的一级预防及急性链球菌咽炎的诊治——美国心脏学会儿童心血管疾病委员会风湿热、心内膜炎和川崎病组及美国儿科学会2009年指南节选

急性风湿热一级预防的主要方法是合理诊断并应用足量抗生素治疗A组乙型溶血性链球菌咽炎.A组乙型溶血性链球菌咽炎依靠临床表现和实验室检查结果综合诊断,其金标准是咽培养.治疗上首选青霉素,对青霉素过敏者,可口服头孢菌素、庆大霉素或大环内酯类/氮杂内酯类药物.     

B组链球菌的耐药性及红霉素耐药基因检测研究

目的探讨北京和广州地区B组链球菌（GBS）抗生素耐药菌谱及对红霉素耐药机制。方法GBS菌193株,其中140株和47株GBS分别来自北京和广州地区正常妇女阴道拭子标本,6株GBS菌株来自北京地区新生儿感染性肺炎和脑膜炎患儿体液标本中培养分离。应用标准的KB纸片法对临床常用7种抗生素耐药性检测。应用PCR法对102株（包括57株敏感株及45株耐药株）GBS进行红霉素耐药基因ermB、mefA检测。结果193株GBS菌均对青霉素类、头孢菌素类抗生素敏感;但青霉素和氨苄青霉素中介率均为17％;北京地区GBS的红霉素和林可霉素耐药率从1998年到1999年分别从8％增加到16％和从20％增加到28％;广州地区1999年分离的GBS菌株对红霉素和林可霉素耐药率分别为45％和26％,与北京地区1998、1999年分离的GBS菌株的红霉素耐药率比较,差异有统计学意义（P=0．000）。在45株红霉素耐药GBS菌中有40株同时对林可霉素耐药,5株表现为红霉素耐药而林可霉素敏感。20株GBS红霉素耐药仅含有ermB基因;13株红霉素耐药株仅含有mefA基因;同时含有ermB和mefA基因有6株。6株耐药株未能检测到ermB和mefA基因。结论青霉素、氨苄青霉素可作为治疗GBS感染首选药物;头孢菌素类抗生素可作为二线的选择药物。而红霉素和林可霉素作为预防和治疗GBS感染的药物应用价值应重新给予评价。在我国ermB基因介导的核糖体靶位点改变在GBS耐药机制中可能起主要作用。     

深圳市2016年至2018年猩红热A族链球菌 emm基因型及基因组多态性分析

目的明确导致猩红热的A族链球菌(GAS)流行型别, 比较不同emm型别GAS的基因结构及基因变异性, 阐明猩红热病原学的流行、进化规律。方法回顾性研究。收集2016年1月1日至2018年5月31日深圳市儿童医院诊断为猩红热的儿童咽拭子标本, 保存GAS菌株, 进行emm基因分型, 选取在分型上具有代表性的菌株进行全基因组测序, 通过比较基因组学分析, 描述GAS菌株基因组多态性, 并基于单核苷酸多态性(SNP)位点分析构建遗传进化树, 阐明菌株之间的进化关系。2组比较采用秩和检验。结果在导致儿童猩红热的176株GAS分离株中, 共检测到8种emm型别, emm12.0及其亚型(108/176株, 61.4%)占比最高, 其次为emm1.0及其亚型(53/176株, 30.1%), 两者共占91.5%。以GCA-900984775为参考序列进行比较基因组分析显示, GAS菌株基因组之间存在丰富的SNP和插入或缺失(InDel)多态性, emm12.0型菌株SNP数[183(163, 213)个]大于emm1.0型菌株SNP数[63(54, 75)个], 差异有统计学意义(P<0.0...     

儿童侵袭性A组β溶血性链球菌感染的临床特点及细菌耐药性北大核心CSCD

目的分析儿童侵袭性A组β溶血性链球菌感染的临床特点及细菌耐药性．以提高诊断和治疗水平。方法回顾性分析2004年1月至2011年12月住院的19例侵袭性A组β溶血性链球菌感染患儿的病史和细菌药敏试验资料。由正常无菌部位分离出A组β溶血性链球菌诊断为侵袭性A组β溶血性链球菌感染。结果19例患儿中男15例,女4例,男女比例为3．75：1;年龄1d～14岁,中位年龄4岁;入院时病程4h～10d;平均住院时间12．2d;冬春季发病13例,社区获得性感染18例。临床诊断脓肿10例;化脓性腹膜炎4例;链球菌中毒休克综合征伴脓胸3例;脓气胸和新生儿败血症各1例。3例存在基础疾病,其中2例为车祸外伤,1例为先天性食管闭锁、气管食管瘘。检出A组13溶血性链球菌前人住重症监护病房5例,人住时问1～32d;4例接受气管捅管、机械通气,通气时间8h～24d;2例曾接受外科手术。5例合并其他病原感染,其中4例腹腔脓液同时培养出大肠埃希菌,1例呼吸道分泌物检出副流感病毒I型。16例有发热,热程3～14d;外剧血白细胞升高18例,下降1例。C反应蛋白均升高,其中16例在14～160mg/L,3例,〉160mg/L。自19例患儿无菌部位共检出20株A组B溶血性链球菌,其中10株分离白脓肿切开术后脓液,各有4株分离白血液和腹水,2株分离自同一患儿的胸水。所有菌株对头孢唑林、左氧氟沙星及万古霉素敏感;对青霉素和头孢噻肟的耐药率分别为10．0％和15．4％;对红霉素和克林霉素的耐药率分别为55．0％和70．0％。3例治愈,14例好转,2例死亡,其中1例死于链球菌中毒休克综合征继发多器官功能障碍,1例死于基础疾病继发多器官功能障碍。结论儿童侵袭性A组β溶血性链球菌感染以脓肿最常见,也可导致严重的链球菌中毒休克综合征甚至死亡。青霉素和头孢菌素仍是敏感的抗菌药物。     

新疆吐鲁番及布尔津两地学龄儿童上呼吸道A族链球菌带菌情况调查

目的：调查新疆学龄儿童A族链球菌（GAS）上呼吸道带菌情况。方法：分别在新疆吐鲁番市区和布尔津县两地采用随机整群抽样的方法,抽取9~12岁儿童478名。每季度进行1次咽拭子培养,共4次。结果：采集咽拭子标本共计1 827人次,分离出196株GAS,全年平均带菌率10.7%。其中吐鲁番市为3.7%~16.5%,布尔津县为4.7%~21.4%。两地间带菌率差异有统计学意义（χ2=6.5749,P＜0.05）。两地带菌率均以冬季最高,依次为秋季、春季、夏季。两地各季节间GAS带菌率比较,除秋季差异有统计学意义外,其余3季差异无统计学意义。男性儿童与女性儿童带菌率比较差异无统计学意义（P＞0.05）;不同民族GAS带菌分别为：汉族分离出133株,维吾尔族分离出22株,哈萨克族分离出41株,各民族间带菌率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：新疆地区吐鲁番及布尔津学龄儿童GAS的带菌率较高,带菌率与季节和民族有关。布尔津县带菌率较吐鲁番市高。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：616-618］     

关注欧美多国A族链球菌感染疫情

2022年末世界卫生组织通报多国猩红热等A族链球菌（group A Streptococcus,GAS）感染增多，以10岁内儿童多见，死亡病例也超过预期，引起了国际社会的普遍关注。该文梳理此次GAS疾病暴发的现状，以及发生的原因和应对措施，希望能引起我国临床工作者的重视，提高认知和警惕性，及早发现新型冠状病毒感染（coronavirus disease 2019）管控措施优化后可能出现的感染性疾病异常的流行病学变化，以保障儿童健康。[中国当代儿科杂志，2023,25 (4):333-338]     

成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植/感染分离株的流行病学研究

目的调查成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植/感染分离株的流行病学特征。方法 2004年1月—2009年4月,以成都市健康儿童、门诊呼吸道感染患儿和金黄色葡萄球菌感染住院患儿为研究对象,采集鼻拭子或感染部位标本进行培养,并对分离的金黄色葡萄球菌进行药敏实验,应用PCR方法检测菌株的PVL毒力基因和mecA耐药基因,对菌株进行多位点序列分析(MLST)。结果培养分离金黄色葡萄球菌定植株174株、感染株51株。门诊呼吸道感染患儿金葡菌的多重耐药率分别为,定植株59.3%,感染株52.9%;PVL基因阳性率分别为,定植株55.6%(15/27),感染株80.4%(41/51);mecA耐药基因阳性率分别为,定植株11.1%(3/27),感染株62.7%(32/51)。对健康儿童定植株以及感染株进行MLST分析,共发现33个ST类型,定植株以ST121、ST59和ST398为主,感染株以ST121、ST88和ST398为主;这些菌株属于15个克隆类型,以CC121、CC59和CC398为主。结论成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植和感染分离株具有较高的PVL毒力基因和mecA耐药基因携带率,具有明显不同于其他地区的独特的遗传背景。     

儿童呼吸道感染肺炎链球菌耐药性及pbp2B与TEM基因的研究

目的：了解广州地区儿童呼吸道感染肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)的耐药情况以及SP中青霉素耐药相关基因TEM与pbp2B的流行分布及突变情况。方法：采用E-test和K-B纸片法对44株SP分离株进行药敏试验;PCR扩增SP中的TEM基因及pbp2B,并对pbp2B基因进行测序,结果与SP青霉素敏感株R6进行序列比对分析。结果：①44株SP对青霉素的敏感率仅为11.4％,不敏感率高达88.6％。对红霉素耐药率已达100％,对克林霉素、复方新诺明的耐药性也在90％以上。但对头孢曲松、阿莫西林、亚胺培南仍敏感,耐药率分别为0,2.6%和3.9%。未发现对氧氟沙星、万古霉素耐药菌株。②44株SP的pbp2B基因扩增序列与R6敏感株相比较,5株青霉素敏感株99%以上的核苷酸序列相同,未发生氨基酸的替换。39株青霉素不敏感株均发生核苷酸序列的改变,核苷酸序列突变率为13.2％～23.1%,约6.5％～10.9%的氨基酸发生了替换。根据氨基酸在Ser391-Thr492片段之间的突变情况,可将39株青霉素不敏感株分为四型,其中Ⅰ型突变30株,Ⅱ型突变7株,Ⅲ型和Ⅳ型各1株。44株SP均未检出TEM型β-内酰胺酶耐药基因。结论：广州地区儿童呼吸道感染SP多重耐药情况较严重,青霉素、红霉素已不适宜作为SP感染的临床一线用药,阿莫西林及第三代头孢菌素可作为SP感染的经验用药。pbp2B基因突变是广州地区儿童SP对青霉素耐药的主要机制之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：623-626］     

广州地区儿童A族链球菌流行趋势连续7年调查

目的 探讨广州地区学龄儿童A族链球菌(GAS)流行特点和流行趋势.方法 1988年9月-1994年8月连续7年,以及2005年10月,用整群随机抽样方法,在广州地区城乡选择8～13岁的学龄儿童共1 907人,其中市区和农村地区每年各约200人,男女大致各半.每月做1次咽拭了血平板GAS培养(共17 819人次),阳性菌株进行T分型和OF分型;每3个月抽血1次(共5 854人次),用微量法测定血清抗DNA酶B抗体水平.结果 ①GAS年均带菌率:农村为18.2%,明显高于城市14.6%(χ2=43.547,P0＜0.001);GAS年均感染率:农村为34.1%,城市为32.1%(χ2=2.647,P＞0.05);城乡带菌率及感染率均以秋、冬、春季较高,夏季较低.②研究期内,GAS带菌率和感染率农村呈下降趋势,城市则略呈缓慢上升趋势;1992年以前农村GAS带菌率和感染率均明显高于城市(P＜0.01),1992年后农村GAS带菌率和感染率均低于城市,除1993-1994年度带菌率差异无统计学意义外,其他年度差异均有统计学意义.③GAS阳性儿童中,只有6.9%有典型症状,10.7%症状不典型,82.4%无症状.④1年内有近50%的儿童曾携带GAS,同一个体1年多次(月)带菌现象非常普遍,约35%的儿童带菌2次以上,26%带菌3次以上,有的连续12个月带菌.⑤研究期内,学龄儿童咽部流行的GAS的主导菌株依次为T6、4、1、11、8/25/1MP19和5/25/44,城乡两地流行的主导菌型差异较大,不同年份GAS T型分布差异也有统计学意义.结论 广州地区儿童GAS的流行很普遍,及时诊断和合理治疗GAS咽炎患儿、加强医疗卫生保健、改善居住环境是预防风湿热流行的关键.     

我国部分地区儿童A组链球菌耐药性的研究

目的 探讨我国部分地区学龄儿童Ａ组溶血性链球菌（ＧＡＳ）对抗生素耐药的流行状况。方法 采用ＶＵＴＥＫ自动微生物鉴定系统,测试３７６株从９￣１１岁学龄儿童咽部分离出的ＧＡＳ,吉林９７株、湖北８４株、四川８１株、广州农村６２株、广州城市５２株。结果 四省总耐药率６７．３％,主要耐药依次为四环素６５．７％、红霉素４３．３％、氯林可霉素３４．０％、氯霉素６．９％、氮苄青霉素０．５％,未发现对青霉素、头孢噻     

Age-associated differences in prevalence of group A streptococcal type-specific M antibodies in children

Our prior studies of the molecular epidemiology of group A streptococcus (GAS) pharyngitis indicated that the most common emm types associated with pediatric pharyngitis in North America were 12, 1, 28, and 4. We previously reported that the proportions of pediatric pharyngitis due to emm types 12 and 4 decreased with increasing age throughout childhood. We hypothesized that this is due to age-associated acquisition of antibodies to the amino-terminal type-specific region of common GAS M proteins during childhood. We sought to demonstrate this in sera from healthy children by using ELISAs for M 12, 1, 28, and 4. Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) using chemically synthesized peptides copying amino-terminal type-specific regions of the M proteins were performed on sera from four age groups of healthy children (group I: 3–6 years, group II: 7–10 years, group III: 11–14 years, group IV: 15–18 years). ELISA data were correlated with opsonophagocytic assays for a subset of sera and M 1 GAS. Sera from healthy 12–20-month-old children were used as negative controls. Our results showed that the highest percentage of positivity was for M12, which also showed progressive seropositivity in older children. For the other serotypes, the highest seroprevalence rates were in the 11–14-year-old age group. The presence of ELISA antibodies against M1 correlated with opsonophagocytic activity, a previously studied indicator of immunologic protection.     

2004年肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌耐药监测

目的监测2004年呼吸道常见致病菌肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌对抗生素的耐药性。方法抗生素药敏试验采用E_test法和K_B法。结果肺炎链球菌对青霉素不敏感率为32.9%,对头孢克洛、头孢呋辛和头孢曲松分别为25.0%、26.4%和5.7%,对红霉素、阿齐霉素和克林霉素不敏感率>90%;流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌对氨苄青霉素耐药率分别为14.3%和56.6%,但前者β_内酰胺酶阳性率为14.3%,而后者为90.8%,两者对其他β_内酰胺酶类耐药率较低。结论呼吸道致病菌对抗生素的耐药性正在增加,连续监测抗生素的耐药性对经验治疗呼吸道感染非常必要。     

2000-2002年三家儿童医院分离的肺炎链球菌血清型分布及其对β内酰胺类抗生素敏感性的变化

目的 了解当前我国儿童人群中肺炎链球菌血清型分布,及不同血清型菌株对B内酰胺类抗生素的敏感性变化,评估疫苗在预防肺炎链球菌感染及控制其耐药性流行中的价值。方法 以2000-2002年于北京、上海和广州三家儿童医院门诊分离的625株肺炎链球菌为研究对象,应用简易棋盘式肺炎链球菌分型系统检测血清型,分析肺炎链球菌7价结合疫苗（4、6B、9V、14、18C、19F和23F）覆盖率;采用E—test最小抑菌浓度（MIC）法检测分离菌株对5种B内酰胺类抗生素的敏感性。结果最常见的血清型／群为19群,共121株（19．4％）,其次是23群（15．4％）、6群（13．3％）、14型（6．6％）和15群（4．3％）。140株（22．4％）不能分型,还有117株（18．7％）属于其他28种少见的血清型／群。肺炎链球菌7价结合疫苗覆盖约360株,占57．6％;其中,血清型／群4、9和18分别有1、6和12株,共计占3．0％。常见血清型／群中,19群和23群与青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）明显有关,其他血清型／群与PNSP无明显相关。结论 常见的血清型为19群、23群、6群、14型和15群,19群和23群与PNSP明显相关。肺炎链球菌7价结合疫苗可覆盖多数分离株。