病毒性肝炎T细胞亚群和几种细胞因子变化的研究

为了探讨小儿病毒性肝炎发病的细胞免疫机制，应用不标记抗体桥联酶标技术（ＡＰＡＡＰ法）检测了５６例病毒性肝炎患儿的外周血Ｔ细胞亚群及膜性白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达率。应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法分别检测了４９例病毒性肝炎患儿单个核细胞培养上清液（ＰＢＭＣｓ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白细胞介素６和８（ＩＬ－６、ＩＬ－８）及α干扰素（ＩＦＮ－α）浓度。结果显示：甲型肝炎（简称甲肝）急性期、慢性乙型肝炎（简称乙肝）及丙型肝炎（简称丙肝）组与正常对照比较，ＣＤ４细胞降低，ＣＤ８细胞升高。用植物血凝素（ＰＨＡ）刺激前，甲肝急性期患儿ｍＩＬ－２Ｒ表达率明显高于其他各组，用ＰＨＡ刺激后，各组ｍＩＬ－２Ｒ表达率均显著高于刺激前，但乙肝及丙肝组ｍＩＬ－２Ｒ表达率与正常对照比较则明显降低。甲肝急性期、乙肝及丙肝患儿ＰＢＭＣｓＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－８均较正常对照组升高，而α干扰素（ＩＦＮ－α）均较正常对照组降低。甲肝恢复期ＣＤ４、ＣＤ８和ＰＨＡ刺激前ＰＢＭＣ上ｍＩＬ－２Ｒ表达率以及上述各细胞因子水平均恢复正常。提示细胞免疫功能紊乱与小儿病毒性肝炎的发病及肝损害过程有关。     

干扰素α等对白细胞介素2活化的脐血体外杀伤白血病细胞株的增 …

目的 评价干扰素α（ＩＦＮ－α）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）对白细胞介素２（ＩＬ－２）活化的脐血体外杀伤白血病细胞株作用的影响。方法 采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和半固体培养法。结果 三种细胞因子中仅ＩＬ－２可活化脐血产生对体外培养的白血病细胞株的杀伤作用：ＩＦＮ－α、ＴＮＦ－α与ＩＬ－２联合应用，可产生协同效应，其杀伤率明显高于单用ＩＬ－２活化组４到１０个百分点；ＩＬ－２单独或联合ＩＮＦ－α，不影     

新生儿肿瘤坏死因子α基因表达及其调控

为了探讨γ干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素１２（ＩＬ－１２）、活化Ｔ细胞核因子（ＮＦ－ＡＴ）活性与新生儿肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）基因表达调控的关系，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术测定１２例新生儿脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）ＴＮＦ－α、信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）、ＩＦＮ－γ及其ｍＲＮＡ和ＩＬ－１２ｐ４０ｍＲＮＡ表达水平，并用电泳迁移率转换试验（ＥＭＳＡ）检测８例新生儿ＣＢＭＣ的ＮＦ－ＡＴ活性。结果：新生儿ＣＢＭＣ中ＴＮＦ－α、ｍＲＮＡ、ＩＦＮ－γ及其ｍＲＮＡ、ＩＬ－１２ｐ４０ｍＲ－ＮＡ表达水平均较成人低下，ＮＦ－ＡＴ活性也较成人明显低下。提示：缺乏ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１２调节作用可能是新生儿ＣＢＭＣ产生ＴＮＦ－α不足的重要原因；ＮＦ－ＡＴ活性低下可能与新生儿Ｔ细胞转录ＴＮＦ－α及ｍＲＮＡ不足有关。     

白细胞介素1和垂体—肾上腺皮质轴在原发性肾病综合征中的变化

采用逆转录聚合酶链反应等技术观察１８例肾病患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及３例肾穿组织中白细胞介素１β（ＩＬ－１β）ｍＲＮＡ表达，ＰＢＭＣ上清液中ＩＬ－１β，血浆ＡＣＴＨ及皮质醇水平的变化。结果：（１）患儿血浆皮质醇明显低于正常对照，ＡＣＴＨ与正常对照组比差异无显著意义；（２）ＰＢＭＣ中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达及其上清液中ＩＬ－１β都明显低于正常，（３）病肾组织中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达明显高于正常     

白细胞介素1和垂体－肾上腺皮质轴在原发性肾病综合征中的变化

采用逆转录聚合酶链反应等技术观察１８例肾病患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及３例肾芽组织中白细胞介素１β（ＩＬ－１β）ｍＲＮＡ表达、ＰＢＭＣ上清液中ＩＬ－１β、血浆ＡＣＴＨ及皮质醇水平的变化。结果：（１）患儿血浆皮质醇明显低于正常对照，ＡＣＴＨ与正常对照相比差异无显著意义；（２）ＰＢＭＣ中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达及其上清液中ＩＬ－１β都明显低于正常；（３）病肾组织中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达明显高于正常，且与ＰＢＭＣ上清液ＩＬ－１β水平呈负相关趋势。结果提示：原发肾病综合征患儿有ＩＬ－１β、垂体－肾上腺皮质轴、及其间调节网络的紊乱。     

过敏性紫癜白细胞介素2水平及其受体表达

采用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测急性期过敏性紫癜患儿白细胞介素２（ＩＬ－２）水平，同时用抗Ｔａｃ单克隆抗体以ＡＰＡＡＰ方法检测外周血淋巴细胞中白细胞介素２受体阳性细胞（ＩＬ－２Ｒ￣＊）及用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示急性期过敏性紫癜患儿ＩＬ－２水平和ＩＬ－２Ｒ￣＋细胞均比正常对照组显著降低（Ｐ＜０．０１），血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平与正常对照组相比显著升高（Ｐ＜０．０１）。提示，在过敏性紫癜的发病机制中ＩＬ－２和ＩＬ－２Ｒ具有重要意义。     

白细胞介素2激活脐血单个核细胞体外抗肿瘤活性的实验研究

为探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）激活脐血单个核细胞（ＡＣＢ）对白血病细胞株ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的杀伤作用以及脐血被激活后能否保持其造血祖细胞生成活性（ＰＣＡ），采用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷前标记释放法和半固体培养等方法对其进行了研究。结果：ＩＬ－２激活的脐血细胞具有明显的抗肿瘤活性，且不影响其ＰＣＡ。ＩＬ－２激活脐血细胞的最适条件为：（１）细胞浓度为１×１０６ｍｌ；（２）ＩＬ－２浓度为１０００Ｕ／ｍｌ；（３）效靶比为１００１；（４）体外培养７２小时。脐血经ＩＬ－２激活后免疫表型发生明显变化，产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）及白细胞介素６（ＩＬ－６），且生成大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ）。ＬＧＬ与Ｋ５６２细胞作用后，后者呈凋亡特征。研究结果为临床应用ＡＣＢ治疗白血病提供了实验依据。     

脐血造血调节因子活性的研究

探讨脐血中造血调节因子含量，来源及其与造血细胞间间的关系。方法：双抗夹心酶联免疫肿附（ＥＬＩＳＡ）法和细胞因子依赖细胞株增殖反应ＭＴＴ法测定脐血和脐血细胞培养上清中颗粒细胞集落刺激因了（Ｇ－ＣＳＦ）、颗粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦα），并观察脐血造血调节因子与脐血（ＣＦＵ－ＧＭ、ＭＮＣ、ＷＢＣ相关关系。结果：正向造血调节因子Ｇ－ＣＳ     

一氧化氮与Ⅰ型辅助细胞因子在过敏性紫癜中的作用

目的观察过敏性紫癜（ＨＳＰ）患儿急性期的一氧化氮（ＮＯ）及Ⅰ型辅助细胞（ＴＨ１）因子水平,以探讨其在该病全身血管炎发病机制中的作用。方法用镉还原法测定血浆ＮＯ水平,用ＥＬＩＳＡ法检测血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）培养上清中白细胞介素－２（ＩＬ－２）及干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）水平。结果ＨＳＰ急性期血浆ＮＯ水平较对照组明显增高（Ｐ＜００５）,血浆ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ与正常对照组比较无显著性差异（Ｐ＞００５）,但患儿的ＰＢＭＣ培养上清的ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ明显低于正常对照组（Ｐ＜００５）。结论ＮＯ及ＴＨ１细胞因子在ＨＳＰ全身血管炎的发生、发展中起作用     

病毒性心肌炎与血清可溶性白介素—2受体和肿瘤坏死因子—α活…

本组通过双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，检测病毒性心肌炎急性期５２例，恢复期４２例，慢性期１８例血清可溶性白介素２－受体（ｓＩＬ－２Ｒ）肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）活性，探讨其在发病中的作用，结果显示：ｓＩＬ－２Ｒ在急性期，慢性期显著升高（Ｐ〈０．００１）。恢复期与对照组无显著差别，ＴＮＦ－α在急性期，恢复期，慢性前期均高于对照组，且以急性期为显著（Ｐ〈０．００１），提示ｓＩＬ－２Ｒ，ＴＮＦ－α参与心肌     

干扰素及白细胞介素2在轮状病毒胃肠炎中的动态变化

动态观察３０例轮状病毒（ＲＶ）胃肠炎患儿外周血单个核细胞，在ＲＶ体外诱导下干扰素（ＩＦＮ）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的变化，以及与疾病康复之间的关系。结果表明：在发病早期ＩＦＮ和ＩＬ－２淋巴因子可同时出现，但两者分泌高峰不同步，ＩＦＮ在急性期，ＩＬ－２在恢复期；腹泻恢复时间与ＩＬ－２Ｒ达高峰时间呈正相关（ｒ＝０．７４５７，Ｐ＜０．０１），与ＩＬ－２Ｒ水平呈负相关（ｒ＝０．５６８８，Ｐ＜０．０５）．提示：ＲＶ可激活机体ＩＦＮ和ＩＬ－２系统，两者相继在体液免疫之前达高峰，在ＲＶ胃肠炎的康复和保护机制中可能具有极其重要的作用。     

胰岛素样生长因子1对新生儿脐带血单个核细胞产生细胞因子？…

目的 研究胰岛素样生长因子１（ＩＣＦ－１）对新生儿免疫功能的影响。方法 利用无血清、无激素培养系统,体外培养１０例健康足月顺产儿脐带血单个核细胞（ＣＢＭＣ）。１０例健康成人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）为正常对照,观察ＩＧＦ－１对ＣＢＭＣ细胞因子产生的影响。结果 与正常组比较,植物血凝素（ＰＨＡ）诱导的ＣＢＭＣＩＬ－２、ＩＬ－４、干扰素γ（ＩＦＮ－γ）、ＩＬ－１０和ＩＬ－１２水平显著低下（Ｐ值均〈０     

毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞产生IL-4、IL-6和IL-10水平研究

采用ＥＬＩＳＡ法测定２０例毛细支气管炎（毛支）患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）产生Ｔｈ２类细胞因子水平。结果表明，毛支组ＩＬ－４、ＩＬ－６和ＩＬ－１０水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１，０．０１，０．０５），即Ｔｈ２类细胞因子水平增高。提示毛支患儿可能存在与哮喘相似的免疫功能异常，即Ｔｈ亚群功能失衡，并与发病密切相关。     

干扰素α等对白细胞介素2活化的脐血体外杀伤白血病细胞株的增强作用

目的评价干扰素α（ＩＦＮα）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）对白细胞介素２（ＩＬ２）活化的脐血体外杀伤白血病细胞株作用的影响。方法采用３ＨＴｄＲ掺入法和半固体培养法。结果三种细胞因子中仅ＩＬ２可活化脐血产生对体外培养的白血病细胞株的杀伤作用；ＩＦＮα、ＴＮＦα与ＩＬ２联合应用，可产生协同效应，其杀伤率明显高于单用ＩＬ２活化组４到１０个百分点；ＩＬ２单独或联合ＩＮＦα，不影响脐血造血祖细胞的活性（ＰＣＡ），ＴＮＦα单独或联合ＩＬ２应用则对ＰＣＡ有明显抑制作用，抑制程度在６０％左右。结论ＩＮＦα、ＴＮＦα均能协同ＩＬ２活化脐血，提高活化脐血的抗肿瘤活性；ＩＦＮα联合ＩＬ２不影响脐血ＰＣＡ。     

生长激素对机体免疫功能的作用

目的探讨生长激素（ＧＨ）在免疫调节中的作用。方法以ＮＫ细胞、白细胞介素（ＩＬ）１α和ＩＬ２活性、肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）含量及ＴＮＦαｍＲＮＡ表达等为指标，对去垂体大鼠及生长激素缺乏症（ＧＨＤ）患儿在ＧＨ治疗前后的免疫指标进行了观察。结果⑴去垂体鼠淋巴细胞数量、ＮＫ细胞活性、ＩＬ１α和ＩＬ２活性均明显下降，ＧＨ可使上述指标得到不同程度的恢复；⑵去垂体鼠大肠杆菌内毒素诱导的ＴＮＦα合成明显降低，巨噬细胞ＴＮＦαｍＲＮＡ表达亦大幅度下降，ＧＨ可使大肠杆菌内毒素诱导的ＴＮＦα合成增高２．５倍以上，ＴＮＦαｍＲＮＡ表达亦明显增高；⑶ＧＨＤ患儿ＮＫ细胞活性明显降低，经ＧＨ治疗３个月后恢复到正常水平；⑷ＧＨＤ患儿ＩＬ１α和ＩＬ２活性偏低，治疗后两者有逐渐增高的趋势。结论ＧＨ有一定的免疫调节作用。     

白细胞介素-4基因修饰Raji细胞促进肿瘤特异细胞毒性T细胞杀伤活性

目的探讨人白细胞介素（ＩＬ）４基因修饰对伯基特淋巴瘤细胞株———Ｒａｊｉ的体外生物学特性、肿瘤特异性细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）杀伤活性的影响及其机制。方法采用逆转录病毒介导基因转染法将人ＩＬ４ｃＤＮＡ导入Ｒａｊｉ株并筛选获得高效价表达ＩＬ４的克隆,观察ＩＬ４表达克隆形态学特征、体外增殖反应及其诱导的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）增殖反应和ＩＬ２、干扰素（ＩＦＮ）γ基因表达及ＣＴＬ杀伤活性。结果ＩＬ４基因修饰对Ｒａｊｉ的体外生物学特性无明显影响,但明显促进正常人ＰＢＭＣ增殖及ＩＬ２、ＩＦＮγ基因表达,其诱导建立的ＣＴＬ杀伤活性明显增强,效应细胞：靶细胞比例为３０∶１时,ＩＬ４基因修饰可使Ｒａｊｉ细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性上升２～３倍。结论外源性ＩＬ４基因表达产物可能作用于瘤细胞和（或）ＰＢＭＣ,通过诱导ＩＬ２、ＩＦＮγ等细胞因子促进ＣＴＬ反应,并增强其杀伤活性。     

急性淋巴细胞性白血病患儿脑脊液中肿瘤坏死因子及可溶性白细？…

用ＲＡＩ和ＲＬＩＳＡ法对２５例急性淋巴细胞白血病患儿脑脊液肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）进行测定，１０例中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）患儿脑脊液中ＴＮＦ及ＳＩＬ－２Ｒ测定值均明显高于无ＣＮＳＬ的白血病患儿及对照儿（Ｐ〈０．００１），并且二者在ＣＮＳＬ患儿脑脊液中的增高程度呈正相关（ｒ＝０．６４３，Ｐ〈０．０５）。无ＣＮＳＬ组与对照组脑脊液ＴＮＦ、ＳＩＬ－２Ｒ的测定值     

前炎症细胞因子及IgG亚类在支气管哮喘发病中的作用

目的：探讨前炎症细胞因子（ＰＩＣ）及ＩｇＧ亚类在儿童支气管哮喘发病中的作用。方法：采用ＥＬＩＳＡ方法检测哮喘不同病期（发作期３５例,稳定期１８例）和２８例正常对照组血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）诱生ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α水平和血清ＩｇＧ亚类浓度。结果：哮喘发作期血清ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α显著升高,随病情缓解渐降低。发作期哮喘ＩｇＧ亚类缺陷检出率为２８．５７％（１０／３５）,以Ｉ     

小儿支气管哮喘时NO自由基与氧自由基的作用初探

采用镉还原柱层析和比色法测定了１７例哮喘患儿血浆亚硝酸／硝酸根离子（ＮＯ－２／ＮＯ－３）水平，另用生物学活性法测定了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）水平。结果：小儿哮喘发作期血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３、ＭＤＡ及ＴＮＦ水平明显升高（Ｐ分别＜０．０５或００１）；在缓解期ＮＯ－２／ＮＯ－３和ＭＤＡ水平恢复正常（Ｐ＞０．０５），ＴＮＦ水平虽有明显降低，但仍高于对照组（Ｐ＜０．０１）；而ＳＯＤ水平在急性发作期明显降低（Ｐ＜０．０１），缓解期恢复正常（Ｐ＞０．０５）。提示：哮喘发作时不仅有氧自由基增多，而且还有一氧化氮自由基增加，它们相互作用，共同损伤气道上皮等肺组织，加重炎症反应，导致气道高反应性而引起和（或）加重哮喘发病     

哮喘患儿白细胞介素2,6的检测及其意义

采用克隆化小鼠细胞毒性Ｔ淋巴细胞系（ＣＴＬＬ）及ＥＢ病毒转化的Ｂ淋巴母细胞样细胞株（ＣＥＳＳ）生物学活性法，分别测定了正常儿及哮喘患儿外周血淋巴细胞产生白细胞介素２，６（ＩＬ－２，６）的水平，以及其他多项免疫学指标，并在动物模型上进行验证，以探讨ＩＬ－２，６在哮喘免疫发病机理中的作用。结果表明：轻中症哮喘患儿ＩＬ－２，６的活性水平高于对照组（ＩＬ－２：２１２８８±６１８１；１６１５２±３４１１，Ｐ＜０．０５；ＩＬ－６：１７３．１８±５０．７８；１２０．５３±３５．０９，Ｐ＜０．０１），而哮喘持续状态时显著低于对照组（ＩＬ－２：１００５２±４０１５，Ｐ＜０．０１；ＩＬ－６：６６．８２±１１．１８，Ｐ＜０．０１）。提示ＩＬ－２，６可能是哮喘气道高反应性的重要介质，在哮喘的免疫发病机制中占有重要地位。