金属蛋白酶组织抑制因子功能、表达及在头颈部肿瘤中作用的研究进展

组织金属蛋白酶抑制因子（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔａｎａｓｅｓ，ＴＩＭＰｓ）通过特异性抑制在肿瘤细胞外基质破坏中起主要作用的金属蛋白酶，在细胞外基质的代谢调节中对肿瘤的侵袭和转移起着重要作用。其表达调控主要受各种生长因子及免疫调节因子的影响，并与Ｃ－ｅｔｓ原癌基因家族及ｒａｓ癌基因有关。ＴＩＭＰ真核表达载体的构建、在不同细胞中的表达及有关ＴＩＭＰ在肿瘤细胞中各水平的检测为肿瘤的基因治疗及肿瘤预后的判断提供了新的途径。     

三种基质金属蛋白酶在鼻息肉组织中的表达

目的 探讨三种基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘ ｅｍｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）与鼻息肉发病的关系。方法 采用免疫组化法对ＭＭＰｓ成员中ＭＭＰ２、ＭＭＰ９及ＭＭＰ３在３２例鼻息肉组织中的表达进行研究。结果 正常鼻粘膜未见有三者的表达,鼻息肉组织中ＭＭＰｓ阳性细胞主要位于基底膜附近的细胞。上皮细胞、血液细胞及浸润的炎细胞表达ＭＭＰ９;成纤维细胞、浸润的炎细胞和上皮细胞表达ＭＭＰ２;少部分     

基质金属蛋白酶MMP9及其抑制剂TIMP1在喉癌中表达的意义

为探讨基质金属蛋白酶ＭＭＰ９及其抑制剂ＴＩＭＰ１在喉癌中表达的意义。我们采用免疫组化法对它们在３６例喉癌中的表达进行研究，结果显示：ＭＭＰ９有ＴＩＭＰ１的阳性表达率，淋巴结转移组明显高于淋巴结转移组，Ｔ３￣Ｔ４期高于Ｔ１￣Ｔ２期，研究结果表明，ＴＩＭＰ１增高的程度不足以抑制ＭＭＰ９的活性，ＭＭＰ１与喉鳞癌的浸润及转移相关，在只粘膜癌变癌细胞突破基底膜呈和浸润性生长中起到重要的作用。     

头颈部鳞状细胞癌与纤维蛋白溶解因子的关系

用免疫组化方法检查３１例头颈部鳞癌患者癌组织内ｔ－ＰＡ、１１－ＰＡ、ＰＡＩ－－１、ＰＩ及ＴＧＦ－ｐ的定位，并对上述因子的定位与局部癌浸润、原发肿瘤的范围和颈淋巴转移的相关性进行研究。以酶抗体技术对头颈鳞状细胞癌中；①尿激酶型ＰＡ（１１－ＰＡ），属蛋白酶，也是蛋白酶激活物；②组织型ＰＡ（ｔ－ＰＡ），较Ｕ－ＰＡ更具血栓特异性；③ＰＡＬＩ；④纤溶酶抑制因子（ＰＩ）；⑤ＴＧＦ－ｐ进行定位，并探讨它们与肿瘤浸润、大小（即ＵＩＣＣ标准中ＴＮＭ分期中的Ｔ，原发癌的侵犯范围）以及淋巴结转移的关系。共检查了３１例…     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：①不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响：实验组三组细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ＜０．０１）；其中扩增倍数最高者为ＭＰＳ组，与ＣＤ３组相比，Ｐ＜０．０５。②不同免疫调节剂诱导的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性比较：在培养一周时，实验组三组对ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性均高于对照组，以ＣＤ３组及ＭＰＳ组杀伤活性最高，其杀伤活性均为５５．５％；于培养第二周，ＣＤ３组杀伤ＨＥＰ－２细胞活性仍较高，其他实验组细胞杀伤活性均明显下降。结论：免疫调节剂ＭＰＳ和ＣＤ３单克隆抗体均可通过增强ＬＡＫ细胞体外增殖和杀瘤活性而提高肿瘤过继免疫治疗效果。     

膜型基质金属蛋白酶—1在喉鳞癌中的表达

目的：检测膜型基质金属蛋白酶－１（ＭＴ１－ＭＭＰ）在喉鳞癌中的表达情况。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了４５例喉鳞癌患者ＭＴ１－ＭＭＰ转录水平的表达情况，并对其中１８例探讨了ＭＴ１－ＭＭＰ表达与喉鳞癌生存率的关系。结果：ＭＴ１－ＭＭＰ在喉鳞癌组织中的表达量与癌旁和安全缘比较有显著的统计学差异；ＭＴ１－ＭＭＰ表达量与肿瘤的病理分级无关；临床分期Ⅱ期和Ⅲ期之间ＭＴ１－ＭＭＰ表达差异显著；淋巴结转移组中Ｍ     

自身免疫性内耳病动物模型的抗内耳特异性抗体谱系分析

目的 为明确哪几种膜迷路蛋白成分参与了实验性自身免疫性内耳病（ａｕｔｏｍｍｕｎｅｉｎｎｅｒ－ｅａｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＩＥＤ）的形成。方法 以同种内耳组织抗原免疫豚鼠，建立自身免疫性内耳病动物模型。用免疫转印迹技术（Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ）检测动物血液中抗膜迷路蛋白抗体。结果 豚鼠膜迷路蛋白成分复杂，ＳＤＳ－ＡＰＧＥ电泳至少可分出５种，但免疫后大多数动物（１５／２０）体内仅产生了抗６８ｋＤ和１     

分枝杆菌多糖促人LAK细胞增殖及对喉癌HEP－2细胞杀伤活性的研究

为探讨分枝杆菌多糖（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）在体外对ＬＡＫ细胞（ｌｙｍ－ｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒｃｅｌｋｉｎｅ）活性的影响，以提高ＬＡＫ细胞杀瘤活性、减少ＩＬ－２（白细胞介素－２）用量和毒副作用。通过ＭＴＴ法测定不同浓度ＩＬ－２、不同浓度ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞促增殖能力的影响；以细胞计数法测定不同浓度ＩＬ－２、ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞扩增倍数的影响；应用乳酸脱氢酶法测定不同条件刺激的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性的作用。结果证明小剂量ＩＬ－２（２×１０５Ｕ／Ｌ）诱导ＬＡＫ细胞过程中加入ＭＰＳ０．４ｍｇ／Ｌ能显著增强ＬＡＫ细胞的增殖和杀伤喉癌ＨＥＰ－２细胞的活性。其扩增倍数及杀伤活性均显著超过单纯应用ＩＬ－２（１０６Ｕ／Ｌ）诱导的ＬＡＫ细胞。通过检测不同条件下诱导的ＬＡＫ细胞表型，显示ＭＰＳ联合ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞ＣＤ２５百分率明显增高，提示ＭＰＳ可能通过促进ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２膜受体表达，提高ＬＡＫ细胞增殖及杀伤活性。因此，ＭＰＳ可望作为一种新型免疫调节剂用于抗肿瘤治疗     

分泌性中耳炎患儿腺样体免疫状态的探讨

本文通过体外细胞培养的方法，研究了１０例分泌性中耳炎（ＯＭＥ）患儿腺样体的免疫状态，测定体外腺样体淋巴细胞自发性ＤＮＡ合成（ＳＤＳ）及在植物血凝素（ＰＨＡ）刺激下可溶性白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）释放，并以阻塞性睡眠性呼吸暂停综合征患儿作对照。结果，ＯＭＥ患儿腺样体淋巴细胞ＳＤＳ（１７３３５±７０１２ｃｐｍ）较对照组（９３８２±４５５４ｃｐｍ）明显增高（Ｐ＜０．０５），ｓＩＬ－２Ｒ的释放（８６４±２４１ｕ／ｍｌ）也较对照组（４３８±１４５ｕ／ｍｌ）增高（Ｐ＜０．０５），说明ＯＭＥ患儿腺样体淋巴细胞活性较高，可能导致局部免疫异常而引起ＯＭＥ。     

基质金属蛋白酶和细胞黏附因子与头颈部鳞癌转移的相关性研究

头颈部鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )是人类 10大最常见的肿瘤之一 ,虽然肿瘤的诊断和治疗水平有很大的提高 ,但是肿瘤的转移和浸润仍是目前临床治疗的最大障碍。本研究通过显示基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＭＭＰ) 2、 9及其组织抑制剂 (ｔｉｓｓｕｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＴＩＭＰ) 1,细胞黏附因子 4 4变异体 6 (ｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ 4 4ｖａｒｉａｎｔ6 ,ＣＤ4 4ｖ6 )在头颈部鳞状细胞癌的表达 ,试图了解肿瘤转移和浸润的分子…     

基质金属蛋白酶及其在中耳胆脂有吸收发病机理的研究

基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）是机体内细胞外基质降解的重要蛋白水解酶系统,它们参与组织的再造和器官的形成。其基因表达的异常可导致细胞及其基质中蛋白水解酶活性增强,造成一些病理过程的发生。本文着重介绍了ＭＭＰｓ的生物学特性及其在骨基质降解和中耳胆脂瘤骨吸收发病机理中的作用。     

喉咽癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及 …

目的 研究多药耐药基因及其产物Ｐ－糖蛋白、多药耐药相关蛋白基因的表达与喉咽癌２临床病理特征之间的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链式反应技术,检测了２５例晚期喉咽癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达;采用免疫组化ＳＡＢＣ法对６０例患者喉咽癌标本ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ进行检测。结果 初治喉问罪 癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为４８％和３８．３％,在ＲＴ－ＰＣＲ检测     

初始音强度差对听力正常青年人畸变产物耳声发射的影响

目的 探讨初始音强度差对听务正常青年人畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）幅值的影响,为临床应用ＤＰＯＡＥ提供最佳的刺激强度组合。方法 用ＩＨＳ Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２型耳声发射仪对听务正常青年人３９耳进行了ＤＰＯＡＥ测试,分别记录Ｌ１为７５,６５,５５ｄＢ ＳＰＬ,强度差Ｌ１－Ｌ２为０,５,１０,１５,ｄＢ ＳＰＬ时,不同Ｌ１－Ｌ２值对ＤＰＯＡＥ幅值的影响。     

EB病毒特异性DNA酶的纯化制备

目的 纯化ＥＢ病毒特异性ＤＮＡ酶（ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ）为鼻咽癌血清学诊断方法－血清ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ抗体的检测奠定基础。方法 采用多重纤维素柱层析对用联合化学诱导的方法制备的ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ粗提物进行纯化。 结果 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测中,从粗提物到纯化终产物,蛋白质带逐渐减少直至单一条带。其分子量为５２ｋＤ,其对应的每豪克蛋白质酶单位分别为５．４６,４９．１９,１３４．８６,３９１,２５,９６     

CD44s及CD44v 6在喉鳞癌组织中的表达

目的：探讨标准型ＣＤ４４（ＣＤ４４ｓ）及变异型ＣＤ４４（ＣＤ４４ｖ６）在喉鳞癌的表达与临床病理特征的关系,及其在喉鳞癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测４６例喉鳞癌及２０例癌旁正常组织中ＣＤ４４ｓ和ＣＤ４４ｖ６的表达情况。结果：ＣＤ４４ｓ在喉鳞癌淋巴结转移者（９４．４％）及Ｔ３－４者（９６．２％）的表达水平,较无淋巴结转移者（６７．９％）及Ｔ１－２者（５５．０％）高;ＣＤ４４ｖ６在喉鳞     

喉癌中p16基因突变和甲基化的研究

目的 探讨ｐ１６基因在喉癌发生发展中的作用和在喉癌中的失活机制。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙ－ｓｉｓ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染方法和ＰＣＲ甲基化敏感内匹酶方法检测３２例喉癌和相应癌旁组织的ｐ１６基因第１,第２外显子突变和甲基化热点区域部分内切酶     

豚鼠畸变产物微音器电位与畸变产物耳声的发射的相关？…

为探讨畸变产物微间电位（ＤＰＣＭ）是否畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）引发，将豚鼠的ＤＰＯＡＥ和ＤＰＣＭ同时叠加，发现在较高强度的声刺激下（ｆ０＝１００６Ｈｚ，ｆ０＝２０１１Ｈｚ，ｆ０＝４０３３Ｈｚ），ＤＰＣＭ叠加结果与ＤＰＯＡＥ各峰有一一对应的关系，ＣＭ的２ｆ１－ｆ２峰相对值（与ｆ１峰比值）比ＤＰＯＡＥ的２ｆ－ｆ２要小得多。较低声强刺激时（ｆ０＝１００６Ｈｚ〈５０ｄＢ，ｆ０＝２０１１Ｈｚ〈６０ｄＢ     

鼻咽癌患者单个核细胞mIL-2R表达和血清sIL-2R水平的检测及意义

目的：探讨ＩＬ－２Ｒ与鼻咽癌发生、发展的关系。方法：应用间接免疫荧光法和ＥＬＩＳＡ法对６２例鼻咽癌、２１例鼻咽良性病变和２６例健康对照者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）经植物血凝素（ＰＨＡ）刺激后的ｍＩＬ－２Ｒ和血清ｓＩＬ－２Ｒ水平进行检测。结果：１）鼻咽癌患者ｍＩＬ－２Ｒ表达显著低于鼻咽良性病变和健康对照组（Ｐ＜０．０５）;２）鼻咽癌患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于鼻咽良性病变和健康对照组（Ｐ＜０．０１）;３）与无远处转移的鼻咽癌患者相比,有远处转移的鼻咽癌患者血清ｓＩＬ－２Ｒ显著升高（Ｐ＜０．０１）;４）鼻咽良性病变与健康对照组之间ｍＩＬ－２Ｒ表达和ｓＩＬ－２Ｒ水平无显著差异。结论：结果提示ｍＩＬ－２Ｒ表达低下和ｓＩＬ－２Ｒ异常升高在鼻咽癌患者机体免疫抑制中可能起重要作用。     

正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射特性

目的 研究正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）的特性。方法 采用ＣＥＬＥＳＴＡ ５０３型耳声发射分析仪对２６只正常清醒豚鼠（３５耳）进行ＤＰ图及ＤＰ输入／输出曲线（ＤＰ－Ｉ／Ｏ）的测试，随机选择１１只正常清醒豚鼠（２０耳）进行ＤＰＯＡＥ的重复测试，用ＳＰＳＳ１０．０对数据进行统计分析。结果 在ＤＰ图中，当初始音强度Ｌ１／Ｌ２为 ７０／６５ ｄＢ ＳＰＬ时，正常清醒豚鼠的 ＤＰＯＡＥ幅值随测试频率ｆ０从０．７５－８ｋＨｚ的增加而逐渐升高（２７．９０±１．９６－5０．６５±０．７１）。在 ＤＰ－Ｉ／Ｏ中，当ｆ０分别为４、６、８ ｋＨｚ时，正常清醒豚鼠的ＤＰＯＡＥ幅值随Ｌ１／Ｌ２从７０／６５以５ｄＢ－挡降至１５／１０ ｄＢ ＳＰＬ而呈线性下降（Ｐ＜０．０１），在Ｌ１／Ｌ２为５５／５０或６０／５５ ｄＢ ＳＰＬ处出现饱和或低谷，同一Ｉ／Ｏ曲线上Ｌ１／Ｌ２分别从７０／６５及５５／５０ ｄＢ ＳＰＬ递减至阈值的Ｉ／Ｏ斜率（分别记为ＫＴ及ＫＬ）均接近于１，且ＫＬ大于ＫＴ（Ｐ＜０．０１）。重复测试的ＤＰＯＡＥ幅值差异小（＜ １ｄＢ ＳＰＬ）且无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论 正常清醒豚鼠ＤＰＯＡＥ测试充分表现了其捡出率高、反应幅值大     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：（１）不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响。实验组三且细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ〈０