应用聚合酶链反应对三种性传播疾病病原体的检测分析

应用聚合酶链反应对三种性传播疾病病原体的检测分析王泽民贺伟罗夏李治刘淑华（内蒙古医学院第一附属医院皮肤科）我科于１９９５年应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，主要对淋球菌（ＮＧ）、沙眼衣原体（ＣＴ）、解脲支原体（Ｕｕ）三种性传播疾病病原体进行检测，现报告...     

实时荧光聚合酶链反应检测患儿手足口病病原体临床研究

目的 分析实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)在检测患儿手足口病病原体中的应用效果.方法 回顾性分析2015年6月—10月间在我院初诊为手足口病的86例患儿的临床记录资料,采集疱疹液、咽拭子标本,用荧光聚合酶链反应检测肠道通用型病毒(EV-U)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16),并与酶联免疫吸附试验(ELISA)的检测结果进行比较.结果 FQ-PCR法检测EV-U的阳性率为77.91%,其中<3岁组患儿阳性42例(87.5%),3岁~6岁组阳性25例(65.79%);ELISA检测EV-U阳性率为61.63%,其中<3岁组阳性29例(60.42%),3岁~6岁组阳性24例(63.16%);FQ-PCR法和ELISA法检测EV-U的阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 实时荧光聚合酶链反应在检测患儿手足口病病原体中的应用效果显著,值得推广.     

聚合酶链反应检测女性泌尿生殖道3种性病病原体

聚合酶链反应检测女性泌尿生殖道３种性病病原体广东省深圳市人民医院（５１８０２６）李芳芳关键词聚合酶链反应检测分类号Ｒ７３０．４３非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）自６０年代以来，在国外发病率急骤上升，在欧、美已超过淋病而居住传播疾病（ＳＴＤ）首位［１］。我国自...     

荧光定量聚合酶链反应检测HCV-RNA

丙型肝炎病毒 (HCV)是引起输血后肝炎的主要致病因子 ,在血中含量极微 ,免疫学标志仅有抗 HCV一项 ,而且抗 HCV出现较晚或不出现 ,所以单凭血清学诊断是不够的。为此 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测血清中HCV RNA ,是确诊HCV感染的有效方法之一 ,可为制订治疗方案及疗效观察提供确切依据。1　材料与方法1 1　材料1.1.1　标本 :88份血清标本来源于哈尔滨医科大学第一临床医学院临床确诊的丙型肝炎患者。1.1.2　试剂 :①丙型肝炎 (HCV)核酸扩增 (PCR)荧光检测试剂盒 ,包括 :引物序列、荧光探针序列、RNA提取液、逆转录…     

荧光定量聚合酶链反应检测淋病奈瑟菌

目的　评价荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术检测淋病奈瑟菌的临床应用。方法　采用FQ -PCR技术检测疑似淋病患者泌尿生殖道标本 80例 ,并同时进行淋病奈瑟菌培养 ,对两种方法的检测结果进行比较分析。结果　测试 80例标本 ,FQ -PCR法 30例为阳性 ,DNA拷贝数从 3× 10 5/ml至 6× 10 10 /ml不等 ,阳性率为 37.5 %(30 / 80 ) ;培养法 2 4例阳性 ,阳性率 30 .0 % (2 4/ 80 ) ;FQ -PCR较培养法差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。结论　FQ -PCR技术可定量检测标本中的DNA拷贝数 ,较培养法简单、敏感、准确 ,对于淋病的早期确诊 ,治疗期间疗效的判断具有重要价值     

荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的价值

目的分析使用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测结核分支杆菌的应用价值。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院临床各科室各类结核病或疑似结核病患者检测标本178例,使用FQ-PCR法进行结核分枝杆菌脱氧核糖核酸检测,标本同时进行抗酸染色显微镜下观察。结果 FQ-PCR法和抗酸染色涂片法对不同来源标本检测结核分枝杆菌的结果存在较好的一致性(Kappa=0.615,P<0.01)。使用FQ-PCR法检测结核分枝杆菌的阳性检出率为12.9%,抗酸染色涂片法的阳性检出率为6.2%,二者比较差别有统计学意义(χ2=4.682,P<0.05)。结论 FQ-PCR法检测标本中的结核分枝杆菌的灵敏度高于传统的抗酸染色涂片法,可作为结核病病原学诊断的优先方法。     

荧光定量-聚合酶链反应检测性传播性疾病病原体结果分析

用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)检测2202份泌尿生殖道分泌物中的UU、CT、NG.了解性传播性疾病中解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)以及淋病奈瑟菌(NG)的感染情况.三种病原体中,UU的阳性率居于首位,明显高于NG的阳性率,而CT与NG的阳性率差异无显著性.混合感染阳性率不高,由UU或CT引起的混合感染率与由NG引起的混合感染率差异无显著性.     

PCR-SSCP法快速检测鉴定临床病原菌的探讨

目的：探讨利用PCR—SSCP快速检测和鉴别临床病原菌的方法。方法：采用细菌保守的16s rRNA基因为模板，以PCR—SSCP方法检测病原菌，并以普通PCR法和PCR—RFLP法作比较。结果：普通PCR法很难从电泳图谱中鉴别细菌；PCR—RFCP法电泳图谱虽呈多态性，但仍有部分细菌图谱相同和相似，不易区分；经PCR—SSCP电泳出来的细菌图谱差异明显，可以互相区分。结论：PCR—SSCP技术能快速简便地检测、鉴别病原菌。     

聚合酶链反应检测二甲苯集菌的24小时尿结核分枝杆菌

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测二甲苯集菌的２４小时尿结核分枝杆菌。方法：应用ＰＣＲ检测６６例疑似泌尿系结核患者二甲苯集菌的２４小时尿结核分枝杆菌,并与常规留取尿标本检测结果作比较得阳性２１例（３１．８％）,后者阳性１１例（１６．７％）,二者差异（Ｐ〈０．０５）。结论：ＰＣＲ检测尿结核分枝杆菌时,应多留取尿液送检,并经浓缩集菌后作ＰＣＲ,以提高检出阳性率。     

用聚合酶链反应技术检测流产和死胎组织的巨细胞病毒与弓形虫

作者通过人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）分离、套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及限制酶切分析、弓形虫分离及一次性ＰＣＲ，对不明原因的流产、死胎组织进行ＨＣＭＶ与弓形虫检测。结果发现，２８份流产、死胎组织中，１例死胎肺组织ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，但病毒分离阴性；１例胎儿心、肺、脑、肝、肾、眼组织弓形虫ＤＮＡ阳性，其脑、肺、眼、肝组织经动物接种后，在小白鼠腹水中找到弓形虫滋养体，但心、肾结果阴性。结果提示：临床上有些不明原因的流产、死胎可能是由于胎儿感染ＨＣＭＶ或弓形虫所致。ＰＣＲ技术较常规病原体分离敏感、快速，适合于ＨＣＭＶ／弓形虫感染所致流产、死胎的早期诊断。     

性传播疾病治疗后病人前列腺炎病原体的检测

①目的 了解性传播疾病治疗后病人慢性前列腺炎病原体感染的情况。②方法 随机抽取205例性传播疾病治疗后病人的前列腺液，进行病原体检测。③结果 205例慢性前列腺炎病人中非炎症性前列腺炎115例，占56．10％。90例检出病原体，检出率为43．90％；其中细菌性前列腺炎57例(27．80％)，非细菌性前列腺炎33例(16．0g％)。④结论 性传播疾病治疗后病人前列腺炎大部分为非炎症性的，性传播性疾病的病原体不是导致前列腺炎的主要病原体。     

应用荧光定量PCR技术快速检测淋球菌

目的：应用荧光定量PCR(FQ-PCR)快速、准确地测定淋球菌，探讨该法的淋球菌阳性检出率及其敏感性和特异性。方法：对190例疑诊为淋病者，取尿道或宫颈内分泌物，同时进行FQ-PCR和培养法检测。结果：以FQ-PCR和培养法检测结果为“扩大金标准”，FQ-PCR检测显示特异性为100％(16／16)，敏感性为100％(174／174)，培养法显示其特异性为100％(16／16)、敏感性为85．05％(148／174)。70例确诊患者经正规治疗后24周随访检测显示：FQ-PCR阴转率为74．28％(52／70)，而培养法阴转率为100％(70／70)。结论：FQ-PCR检测淋球菌具有快速、准确、敏感、特异等优点，但不能作为淋病治愈的判断标准。     

聚合酶链反应检测慢性乙肝患者血清唾液及尿液中HBV DNA

采用聚合酶链反应检测０１０例慢生乙肝患者血清、唾液及尿液中ＨＢＶＤＮＡ结果，血清中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率最高，为８０％，显著高于唾液于尿液（Ｐ值均小于０．０１）。ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ组与ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ组比较，前者血清及唾液中ＨＢＶＤＮＡ检出率明显高于后者。ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ组与其他模式组比较，前者只有血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性显著高于后者，结果提示：ＨＢＶＤＮＡ阳性率与ＨＢＶＭ存在状态密     

荧光定量聚合酶链反应检测女性生殖道分泌物沙眼衣原体等病原体

目的:检测女性生殖道分泌物中淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)的数量,以了解本地区上述3种病原体感染现状。方法:用荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)检测了121份标本的NG—DNA和149份标本的CT—DNA与UU—DNA。结果:NG阳性率为49.6％(60/121),其阳性标本的平均拷贝数为3.61×10~5拷贝/ml;CT阳性率为23.5％(35/149),其阳性标本的平均拷贝数为9.59×10~4拷贝/ml;UU阳性率为34.3％(51/149),其阳性标本的平均拷贝数为4.11×10~5拷贝/ml。结论:FQ—PCR具有简便、快速、准确的优点,是目前快速诊断淋菌、非淋菌性阴道炎可靠准确的方法。     

PCR对可疑慢性淋病病人淋病奈瑟菌的检测

①目的明确临床上可疑慢性淋病病人的病原学诊断。②方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对７６例可疑慢性淋病病人的尿道分泌物进行了淋病奈瑟菌检测，并与传统的细菌分离培养法的敏感性进行了比较。③结果聚合酶链反应测出阳性标本２２份（２８．９％），分离培养法测出阳性标本８份（１０．５％）。两种方法敏感性比较，差异有显著性（χ２＝１２．０７，Ｐ＜０．０１）。④结论与细菌培养法相比ＰＣＲ敏感而快速，是明确慢性淋病病原学诊断和指导治疗的好方法。     

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。     

PCR检测细菌的侵袭相关基因

目的：探讨ＰＣＲ检测细菌的侵袭相关基因方法的效果。方法：检测５４份腹泻患者粪便标本，采用ＰＣＲ法扩增志贺菌与大肠埃希菌的侵袭相关基因ｉａｌ。结果：ｉａｌ基因阳性率３３．３％，常规细菌培养鉴定方法阳性率２４．１％，前者缩短了检测时间，提高了灵敏度。结论：用ＰＣＲ方法检测细菌的侵袭相关基因可能更适于临床检验、流行病学调查，并可早期指导临床治疗