鼠疟原虫生物学的研究 Ⅰ.各纯系小鼠对约氏鼠疟原虫、斯氏按蚊系统敏感性的观察(二)

结果二.输血感染各系小鼠的比较10系小鼠,每系12—18只动物(每次实验6只,重复1—2次)。每只鼠腹腔接种500 万红内期原虫。当天(D_0),第二(D_1)和第三天(D_2)连续血检,然后隔日血检,结果见表5。从表5可见,各系小鼠对约氏疟原虫红内期原虫都很敏感。其原虫感染的消长过程     

硝喹治疗食蟹猴疟前后猴抗体水平

用间接荧光抗体技术系统地观察了五只恒河猴感染食蟹猴疟原虫并经硝喹或氯喹治疗后抗疟虫原抗体的动态变化。另外一只未经治疗的带虫猴作为对照。4只恒河猴接种子孢子,虫血症前期都是8天,在虫血症的第五天开始治疗:2只用复方硝喹,2只用氯喹基质。另一只恒河猴(4号)为再次感染,血传接种,虫血症前期2天,在感染后25天用复方硝喹治疗。各猴在开始服药后48～144小时内原虫消失。4只接种子孢子的恒河猴的初次抗体反应,在虫血症的第3—11(平均9)天测到;血传感染的4号猴在虫血症的第7天测到。5只恒河猴首次抗体高峰在感染后19—33(平均24)天测到。子孢子接种各猴的最高抗体水平分别为1:40和1:160。血传接种且虫血症期较长(27天)的4号猴,其最高抗体水平为1:640。经硝喹或氯喹治疗后,各猴上升后的抗体分别在感染后26—63(平均36)天开始下降。经硝喹治疗、无原虫复燃的两只恒河猴,抗体分别在感染后310天及373天转阴;经硝喹治疗而有原虫复燃的一只恒河猴,复燃后抗体水平从已下降到1:20上升到1:80,此水平比首次高峰高一个倍比稀释度,并至观察朋末(464天),抗体仍维持在阳性低水平。     

叶酸对硝喹小肠毒性防护的机制探讨

本文用232只小鼠进行4组实验。(1)灌服硝喹醋酸盐(N,570mg/kg×1)后分别肌注生理盐水(NS组)和叶酸(NF组,8mg/kg×1)。药后96h,NS组小肠绒毛显著减少、变短、上皮脱落、隐窝细胞退变,而NF组变化轻微。(2)硝喹能显著降低小肠DNA含量,随剂量增大和时间延长(至72h)而越明显。(3)分别伍用时酸及甲酰四氢叶酸钙后,与NS组比较,小肠DNA含量降低未见明显差异。(4)伍用叶酸后[~3H]TdR参入小肠DNA量比NS组增多。以上结果提示叶酸能加速DNA合成。从而有利于小肠粘膜上皮细胞的修复。     

蒿甲醚、周效磺胺、乙胺嘧啶和伯喹伍用单剂治疗猕猴肝囊原虫血症

为探寻治疗猕猴肝囊原虫血症的有效方法,分别采用伍用蒿甲醚150 mg、周效磺胺500 mg、乙胺嘧啶35 mg和伯喹7.5 mg一次性给药;伍用周效磺胺500mg、乙胺嘧啶35mg和伯喹7.5 mg一次性给药的试验方法.服药后12 d,动物外周血中原虫转阴,持续约40 d后出现"复燃".在没有伍用蒿甲醚的猕猴中,其原虫血症仅有程度上降低,且只持续15 d.结果表明,伍用蒿甲醚、周效磺胺、乙胺嘧啶和伯喹能有效地抑制肝囊原虫血症.     

硝喹对鼠约氏疟原虫红内期超微结构的影响

感染约氏疟原虫的小鼠,灌服单剂量的硝喹(1mg/kg)后30min到24h,用光镜和透射电镜动态观察了红内期疟原虫的形态变化。结果发现,在光镜下,有些晚期滋养体核大而不能分裂,有些原虫胞浆中有散在的圆形红色颗粒,这些红色颗粒可能是电镜中观察到的自噬泡或膜性残体。在电镜下,最早观察到的是原虫线粒体肿胀,基质空化,粗面内质网扩张和排列紊乱,核糖体脱落和解聚。随后原虫膜性结构增生,在胞浆中形成多层螺纹膜或髓鞘样结构,核膜肿胀,增生,核周间隙增宽。药物作用晚期,原虫结构瓦解,形成大量自噬泡。结果表明,硝喹干扰了疟原虫的膜系统,胞浆系统和细胞核的结构和功能,从多个环节发挥其抗疟效应。     

复方磷酸萘酚喹片治疗非洲恶性疟疾35例

目的观察复方磷酸萘酚喹片治疗非洲恶性疟的临床效果。方法以显微镜血检恶性疟原虫阳性患者为观察对象。复方磷酸萘酚喹片顿服成人总量含磷酸萘酚喹400 mg及青蒿素1 000 mg。服药后按时测量体温和血检疟原虫。随访28d,观察治疗效果。结果复方磷酸萘酚喹片治疗非洲恶性疟35例,平均退热时间为(36.7±16.3)h,原虫转阴时间为(58.1±15.3)h,治愈率为97.3%,服药后除少数(2例)出现恶心、胃部不适外,无其它不良反应。结论复方磷酸萘酚喹片治疗非洲恶性疟具有良好的效果。     

鞘内注射大麻素受体2激动剂JWH015对骨癌痛小鼠痛行为的影响

目的 观察鞘内注射大麻素受体2(CB2)激动剂JWH015对骨癌痛小鼠痛行为的影响.方法 雄性C3H/HeN小鼠32只随机分为4组(n=8):空白组(C),假手术组(s),DMSO(D,二甲基亚砜)组和JWH015(J)组.D组和J组在小鼠右侧股骨远端骨髓腔接种溶于最小必需培养基(α-MEM)的NCTC2472谘骨性纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型;s组接种不含细胞的α-MEM;c组不予任何处理.在接种肿瘤细胞后的第14天按照分组D组和J组分别鞘内注射DMSO 5μl和溶于20%DMSO的JWH015 1 μg;S组注射DMSO.各组于接种前,接种后的3d、5d、7d、10d、14d以及给药后的1h、6h、24h、48h、72h测定小鼠的机械性缩足阈值(FWMT)和热缩腿潜伏期(FWTL).结果 与术后14d给药前的基础值[PWMT(0.45±0.09)g,PWTL(11.87±1.1)s]相比,鞘内注射JWH015后6h小鼠骨癌痛即缓解[PWMT(1.20±0.21)g,PWTL(15.35±2.42)s](P<0.05);24h缓解作用达到高峰[PWMT(1.85±0.28)g,PWTL(18.80±2.93)s](P<0.05);在72h作用衰退到给药前水平[PWMT(0.48±0.10)g,PWTL(11.83±1.19)s]P>0.05).结论 鞘内注射JWH015能够显著改善骨癌痛小鼠的痛行为.     

蒿甲醚、周效磺胺、乙胺嘧啶和伯喹伍用单剂治疗猕猴肝囊原虫因症

为探寻治疗猕猴肝囊原虫血症的有效方法，分别采用伍用蒿甲醚150mg、周效磺胺500mg、乙胺嘧啶35mg和伯喹7.5mg一次性给药，伍用周效磺胺500mg、乙胺嘧啶35mg和伯喹7.5mg一次性给药的试验方法。服药后12d，动物外周血中原虫转阴，持续约40d后出现“复燃”。在没有伍用嵩甲醚的猕猴中，其原虫血症仅有程度上降低，且只持续15d。结果表明，伍用蒿甲醚、周效磺胺、乙胺嘧啶和伯喹能有效地抑制肝囊原虫血症。     

μ-和δ-阿片受体对神经元树突棘可塑性调节的动态观察

目的 探讨μ阿片受体(MOR)和δ阿片受体(DOR)在海马神经元树突棘可塑性调节中的功能角色.方法 用磷酸钙共沉淀法将编码绿色荧光蛋白EGFP的质粒转染到5-9DIV原代培养海马神经元,EGFP标记的神经元发育到2周时,随机挑选形态健康的神经元作为观察目标,使用倒置荧光显微镜对同一视野活细胞定时定位观察MOR受体促进剂吗啡和DOR受体促进剂DPDPE给药前及给药后3 h、24 h、72 h树突棘形态大小及密度变化.结果 1.吗啡组和吗啡+DPDPE组,从形态学观察,部分树突棘在给药后24～72h内逐渐变小,甚至消失;2.吗啡组加药后3h树突棘的密度无明显变化(P＞0.05),24h后降低了28%,72h后降低了37%(P＜0.01);吗啡+DPDPE组加药后3 h树突棘的密度无明显变化(P＞0.05),24h后降低了27%(P＜0.05),72h后降低了38%(P＜0.01);DPDPE组和对照组在给药后3～72h树突棘的密度无明显变化(P＞0.05);而DPDPE单独给药组和对照组神经元树突棘形态大小、密度在各时间点均无明显变化.结论 本实验表明阿片MOR受体参与了神经元树突棘可塑性的调节,动摇了树突棘的稳定性,而DOR受体无显著作用,同时MOR和DOR受体在对神经元可塑性调节方面也无协同作用.     

复方萘酚喹对伯氏疟原虫ANKA株红内斯超微结构的影响

为观察复方萘酚喹及其各单药 (磷酸萘酚哇、双氢青蒿素、甲氧苄啶 )对伯氏疟原虫ANKA株红内期超微结构的影响 ,将感染伯氏疟原虫ANKA株的小鼠分别以复方萘酚喹 2 6 0mg·kg- 1·d- 1× 1d (内含磷酸萘酚喹 149mg、双氢青蒿素 37mg、甲氧苄啶 74mg) ,磷酸萘酚喹 149mg·kg- 1·d- 1× 1d ,双氢青蒿素 180mg·kg- 1·d- 1× 1d和甲氧苄啶 1152mg·kg- 1·d- 1× 1d灌胃给药。给药后 1、 2、 4、 8、 12和 2 4h ,采血作标本 ,经包埋 ,切片 ,染色后 ,用电镜镜检。结果 :复方萘酚喹于给药 2h后多数晚期滋养体出现质膜肿胀、破裂 ,有的呈空腔状 ;食物泡膜肿胀 ;线粒体膜肿胀、分层、剥离 ;色素颗粒变形。给药 4h后进一步加剧。 8h后小部分晚期滋养体结构已经融化崩解 ,内容物结构模糊。 12h后绝大多数晚期滋养体结构已完全破坏或消失。结论 :复方萘酚喹对伯氏疟原虫红内期超微结构的影响较其组分中各单药起效更快、力度更强和作用相对彻底。     

硝喹对约氏疟原虫卵囊和子孢子作用的观察

本文对硝喹在鼠疟孢子增殖期作用的超微结构进行了观察。扫描电镜观察表明,卵囊数量减少,个体较小,晚期卵囊退化,外形不规则;透射电镜观察显示,核膜肿胀,核基质浓缩,自噬泡明显可见,线粒体空泡变,残余体增多。子孢子核膜增厚,空泡变。     

Observation on the effects of nitroquine on the oocysts and sporozoites of Plasmodium yoelii

The effects of nitroquine on the sporogony of Plasmodium yoelii werestudied with electron microscope.The drug was given by feeding female mosqui-toes directly in the form of mixture with sucrose solution.Scanning electronmicroscopic studies revealed that the oocysts were smaller and markedly degener-ated.Surface of the oocysts was rough and uneven.Under transmission electronmicroscope,the cytoplasm of the affected oocysts contained vacuoles.Mitochondrial and nuclear membrane was damaged.The number of residualbodies increased.Formation of sporoblast did not occur in most of the affectedoocysts.The nuclear membranes of the degenerated sporozoites became thick-ened and the density of nucleus matrix markedly decreased.The results indicatedthat nuclei and the membrane system were mainly affected.     

IL-1、IL-6和活化枯否细胞培养上清液对约氏疟原虫红外期发育的影响

目的:研究IL-1、IL-6和活化枯否细胞(Kc)产物对约氏疟原虫红外期(EEF)发育的影响.方法:大鼠腹腔注射IL-1、IL-6或合用,3 h后接种子孢子(Sp),42 h后观察EEF发育情况;建立大鼠肝细胞-约氏疟原虫体外培养模型,Sp接种后2 h加IL-1、IL-6及激活后Kc培养上清,观察对EEF发育的影响.结果:IL-1组、合用组Sp发育率明显降低,IL-6组无明显下降;IL-1、IL-6明显抑制培养的EEF发育;激活Kc培养上清也可抑制EEF发育,EEF成熟度低、体积小.结论:IL-1、IL-6在体内外和接种Sp前后均可抑制EEF的发育.     

IL-12在约氏疟原虫感染中作用的初步实验研究

目的:探讨IL-12在约氏疟原虫感染中的作用.方法:尾静脉注射法感染IL-12基因敲除小鼠和B6小鼠约氏疟原虫(17XNL),于感染后的第0、2或4、6天取小鼠尾静脉血,检测血清中的细胞因子;从感染后的第2天起,隔日检测小鼠虫体血症水平.结果:与B6小鼠相比,IL-12基因敲除小鼠在感染后虫体血症水平增长迅速且水平高;清除感染需时较长,但仍能完全清除虫体而存活.在感染后的第0、2、6天血清中无IL-12、IFN-γ,而B6小鼠IL-12、IFN-γ(D4)水平均较高.两者在TNF-α水平上无差别.结论:尽管IL-12对小鼠感染约氏疟原虫后的存活很重要,但无IL-12的小鼠感染约氏疟原虫后仍能存活.     

Morphology and Degeneration of Exoerythrocytic Form of Plasmodium y.yoelli and Host-cell Reactions in Rats and Mice

The exoerythrocytic forms(EEF)of Plasmodium y.yoelli BY265 in the liver of rats and mice are morphologically similar,however,the size of the matured EEF in rats is far much larger thanthat in mice.In the sections of the liver of both animals,which weremade 48-65 hours after the inoculation of sporozoites,two types ofdegenerated EEF,one type with and the other without white cellinfiltration,can be found.Degeneration occurs in 6.6% of EEF inrats and 5.8% in mice.Once the normally developed parasites becomematured and ruptured,large amount of white cells are attracted andaccumulated to form local foci of infiltration.     

腹腔单核细胞对约氏疟原虫感染红细胞的免疫作用

目的检测腹腔单核细胞对约氏疟原虫感染红细胞(靶细胞)的免疫作用.方法用皂化约氏疟原虫感染的鬼形红细胞(SPRBC)腹腔注射免疫小鼠2次.3周后,用感染红细胞(PRBC)作为靶细胞注入腹腔,90 min后洗取腹腔细胞,用扫描电镜观察腹腔单核细胞的变化和对靶细胞的作用效应.结果腹腔细胞在靶细胞注入90 min后呈现各种激活状态:(1)腹腔单核细胞大小不均一,细胞表面绒毛变的细长浓密且有细胞间联接;(2)部分腹腔单核细胞胞浆摊展(呈"煎蛋"样)或呈"细胞炸弹"样;(3)延展或片状的绒毛和摊展的胞浆可粘附包卷靶细胞,并可使其因密集穿孔而受损.结论小鼠经约氏疟原虫感染的鬼形红细胞免疫后,其腹腔单核细胞对红内期疟原虫具有免疫保护作用.     

应用Feulgen染色及显微分光光度计探讨乙胺嘧啶对约氏疟原虫卵囊的作用机理

本实验应用 Feulgen 组化染色研究乙胺嘧啶作用后约氏疟原虫卵囊内核酸含量的变化,并在显微分光光度计下进行 DNA 含量测定。结果显示,对照组早、中期卵囊内含有丰富的 DNA 颗粒,晚期卵囊内形成大量成熟的子孢子。而用药组卵囊发育迟缓,胞浆内来见清晰的 DNA 团块,仅见色素堆积,部分卵囊形成黑孢子。用药组卵囊的 DNA 平约含量亦明显低于对照组。初步说明,乙胺嘧啶可抑制疟原虫卵囊的 DNA 合成,从而阻止了蚊体内疟原虫的继续发育成熟.     

蚊血细胞对正常和退变之约氏疟原虫卵囊的反应及其在卵囊黑化中之作用

感染约氏疟原虫之斯氏按蚊，饲以1％二氟甲基鸟氨酸，使卵囊发生退变，第11天电镜下分别观察退变卵囊及对照组正常发育之卵囊外周血细胞之反应。结果表明，对照组中正常发育卵囊之周围无明显血细胞反应，但个别退变卵囊有血细胞趋附；用药组中卵囊均呈不同程度之退变，有的已开始黑化，其周围均有一个或多个血细胞，均属颗粒类细胞。血细胞胞浆内及血细胞与卵囊之间均有许多具微管结构之颗粒，提示卵囊退变后可诱使血细胞趋附，后者并可释放颗粒物质或许还有他种物质，促使包被卵囊和黑化卵囊。