丝裂霉素C对膀胱肿瘤细胞株HSP70的诱导作用

目的研究丝裂霉素C对膀胱肿瘤细胞株TBC-1 HSP70的诱导作用。方法丝裂霉素C作用与TBC-1于2h后,观察在不同时间点0、8、24、48、72hTBC-1的HSP70的表达情况。结果丝裂霉素C化疗TBC-1后不同时间点0、8、24、48、72h的HSP70的表达OD值分别为0.306±0.005、0.255±0.009、0.203±0.018、0.237±0.029、0.239±0.020。正常TBC-1的HSP70表达OD值为0.247±0.022。结论丝裂霉素C可以诱导膀胱肿瘤细胞株TBC-1的HSP70的表达增高。     

BCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1杀伤作用的实验研究

目的研究BCG激活的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1的杀伤作用。方法分离人外周血中的淋巴细胞,分别经BCG和IL-2刺激,检测淋巴细胞的增殖及其对TBC-1的杀伤活性。结果BCG刺激的淋巴细胞于不同效靶比40∶1、20∶1、10∶1对TBC-1的杀伤活性分别为(42·36±3·86)%、(29·19±2·39)%、(14·36±1·68)%。结论BCG刺激的淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞株TBC-1有杀伤作用。     

木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞的影响

目的研究木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞体外增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法不同浓度木犀草素作用于指数生长期膀胱肿瘤T24细胞后应用MTS比色法检测细胞增殖的抑制作用。通过DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况。结果浓度为0.01～0.04mg/mL的木犀草素对体外培养的膀胱肿瘤T24细胞有明显的抑制作用。DNA凝胶电泳结果显示:空白对照组没有出现DNA"梯带";其他4组(除木犀草素0.004mg/mL组)均出现不同程度的DNA"梯带",显示出细胞凋亡的特征。结论木犀草素在浓度为0.01～0.04mg/mL时对膀胱肿瘤T24细胞有通过诱导细胞凋亡的方式抑制细胞生长的作用,可能具有治疗膀胱肿瘤的临床价值。     

塞来昔布对膀胱癌细胞T24 增殖的影响

目的观察塞来昔布对人膀胱癌细胞T24增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度塞来昔布（25、50、100和200μmoL·L^-1）分别作用于人膀胱癌细胞T24不同时间（24h、48h和72h）,MTT检测T24细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR和Western-blot检测T24细胞中COX-2表达的变化。结果塞来昔布对膀胱癌T24细胞抑制作用存在剂量、时间依赖性,200μmoL·L^-1塞来昔布作用72h时抑制率达75.7±1.9%,明显高于其它各组（P〈0.05或0.01）;半定量RT-PCR和Western-blot方法显示塞来昔布可显著降低T24细胞中COX-2mRNA和蛋白水平（P〈0.05）,且呈时间依赖性。结论塞来昔布可通过减少COX-2的表达抑制人膀胱癌细胞T24的增殖,并呈时间和剂量依赖性。     

大黄素体外抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖的实验研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法采用倒置显微镜观察细胞生长,DAPI染色观察凋亡细胞;CCK-8法检测不同浓度的大黄素作用不同时间对BIU-87细胞增殖的抑制作用;JC-1检测线粒体跨膜电位并衡量线粒体去极化的比例以及caspase-9活性检测探讨大黄素抑制BIU-87细胞增殖的作用机制。结果不同浓度(10,20,40,60,80μmol·L-1)的大黄素均可抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖,且抑制率呈浓度依赖和时间依赖关系;大黄素作用BIU-87细胞24、48、72小时后半数抑制浓度(IC50)分别为:(46.27±2.32)μmol·L-1、(34.79±1.75)μmol·L-1、(25.58±1.24)μmol·L-1。随大黄素作用时间以及剂量的增加,BIU-87细胞凋亡率增加,线粒体跨膜电位逐渐下降,作用12小时后caspase-9活性随药物浓度增加而增加。结论大黄素能有效地抑制人膀胱癌BIU-87细胞的增殖,其可能机制为通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

HER2在膀胱肿瘤中的表达及其单抗诱导膀胱肿瘤细胞凋亡

目的为探讨膀胱肿瘤的HER2表达阳性率及其与肿瘤分级的关系,以及抗HER2单克隆抗体对HER2表达阳性细胞株的增殖影响。方法用免疫组织化学法检测43例膀胱肿瘤标本和肿瘤细胞株的HER2表达量,用不同浓度的抗HER2单抗和阿霉素作用于HER2表达阳性和阴性的细胞株,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测抗HER2单抗作用后肿瘤细胞的凋亡率。结果43例膀胱移行细胞癌标本中,I级12例,HER2高表达者0例;II级14例,HER2高表达者2例（14％）;III级17例,HER2高表达者13例（76％）。T24细胞株HER2高表达,BIU87阴性。抗HER2单抗对HER2表达阳性的细胞株增殖抑制呈剂量和时间依赖性,并能诱导HER2表达阳性的肿瘤细胞凋亡,但对HER2表达阴性的细胞株无明显作用,P〈0．05／P〈0．01。阿霉素对四株细胞均有细胞毒作用,P〉0．05。结论分化较差的移行细胞癌HER2阳性率高,抗HER2单抗能够选择性诱导HER2高表达的膀胱肿瘤细胞株凋亡。     

大黄素逆转肿瘤细胞多药抗药性的作用

目的：研究中药成分大黄素的核苷转运抑制活性和对肿瘤细胞多药抗药性的逆转作用。方法：采用［³H］-胸苷掺入法测定核苷转运抑制作用, 采用MTT法检测细胞毒作用, 采用流式细胞术测定P-糖蛋白的功能和表达。 结果：大黄素能抑制小鼠艾氏腹水癌细胞对［³H］-胸苷的跨膜转运,其IC₅₀为9.9　μmol.L^-1。大黄素能增强抗癌药物5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和氨甲蝶呤对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒作用并能部分逆转人乳腺癌细胞MCF-7/Adr对阿霉素的抗药性。大黄素增加罗丹明123在MCF-7/Adr细胞中的蓄积并减少其外排,长时间作用降低了P-糖蛋白的表达。结论：大黄素逆转抗药性的作用与抑制核苷转运、降低P-糖蛋白的功能和表达相关。大黄素作为抗肿瘤生化调节剂用于逆转肿瘤细胞多药抗药性的作用值得进一步研究。     

Hsa-miR-340对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨和研究hsa-miR-340表达上调对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡能力的影响。方法化学合成hsa-miR-340模拟物,瞬时转染膀胱癌T24细胞,以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测hsamiR-340在膀胱癌T24细胞中相对表达量,确定能够转染成功并有较高的转染率后,分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞计数仪,分析转染hsa-miR-340模拟物前后对膀胱癌T24细胞的增殖及凋亡能力的影响。结果①hsa-miR-340模拟物可在膀胱癌T24细胞中表达,并以RT-PCR验证相对含量较高,差异有统计学意义(P<0.05)。②增殖实验中分别在48h和72h时把实验组与阴性对照组和空白对照组相对比,膀胱癌T24细胞生长增殖明显受抑制且差异有统计学意义(P<0.05),说明hsa-miR-340过表达后,能使T24细胞增殖能力受到有效抑制。③hsa-miR-340模拟物转染T24细胞48h后,以流式细胞仪检测T24细胞凋亡率,分别为实验组(11.37±0.41)%、阴性对照组(6.72±0.32)%、空白对照组(6.62±0.23)%,比较后差异有统计学意义(P<0.05),说明hsa-miR-340过表达使T24细胞的凋亡显著增加。结论 hsa-miR-340可能参与膀胱癌的进展。     

大黄素甲醚对胰腺癌SW1990细胞的杀伤作用及其机制

目的观察大黄素甲醚对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 Western印迹检测不同浓度大黄素甲醚干预后PI3K/Akt信号通路蛋白水平,MTT检测不同浓度、时间下,大黄素甲醚对SW1990细胞增殖的影响。流式细胞术检测大黄素甲醚对SW1990周期及凋亡的影响。结果与NC组比较,Physcion组m TOR及p-Akt表达水平呈剂量依赖性下降,Akt表达呈剂量依赖性上升,其中5、50μmol/L组与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);Physcion组细胞存活率呈时间依赖性下降,在48、72、96h时,与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Physcion组SW1990存活率呈剂量依赖性下降,其中0.5、5、50μmol/L组与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);与NC组比较,Physcion组停留在G1、G2期细胞比例减少,S期细胞比例升高(P<0.05);Physcion组凋亡率高于NC组(P<0.01)。结论大黄素甲醚通过抑制Akt磷酸化,调控PI3K/Akt通路,降低胰腺癌细胞存活率,促进其凋亡。     

大黄素诱导HK-2细胞凋亡的机制探讨

 目的：探讨大黄中游离蒽醌大黄素诱导人近曲小管上皮细胞（HK-2）的细胞凋亡作用机制。方法：体外 培养HK-2细胞,利用MTT法评价大黄素对HK-2细胞的增殖抑制作用,利用TUNEL染色检测大黄素对HK-2细胞凋亡的影响, 流式细胞技术检测大黄素对HK-2细胞线粒体膜电位的影响,凋亡相关蛋白检测采用Western Blot分析;结果：大黄素作 用HK-2细胞48 h后,明显抑制细胞的增殖,IC50值为130.65 μmol•L-1。大黄素浓度为80 μmol•L-1时促使细胞凋亡, 线粒体膜电位降低,Western Blot分析凋亡相关蛋白显示,大黄素作用HK-2细胞后,抑制细胞外信号调节激酶1/2 （extracelluar signal regulated kinase 1/2,ERK1/2）的磷酸化,并且呈现明显的剂量和时间效应关系,细胞内 Bcl-2表达降低,Bax没有明显的变化,致使促凋亡基因蛋白占优势,细胞向促调亡的方向发展,细胞色素c释放增加, 从而使Caspase-8活化,激活下游Caspase-3,引起细胞的凋亡;大黄素对HK-2细胞的损伤效应可能是通过MAPK/ERK信号 转导通路抑制ERK磷酸化,而导致了细胞凋亡。结论：大黄素能够引起HK-2细胞的凋亡,其机制可能涉及MAPK/ERK信号 转导通路抑制途径。     

腺病毒介导HSV-tk/GCV系统诱导ScaBER细胞凋亡的实验研究

目的 HSV-tk／GCV系统体外诱导膀胱癌队ScaBER细胞凋亡的作用，探讨其治疗膀胱癌的机制。方法 采用了带有CMV(人巨细胞病毒早期蛋白启动子)启动子驱动HSV-tk基因的重组腺病毒载体，体外转染ScaBER细胞后加入不同浓度更昔洛韦(GCV)，MTT法检测对癌细胞生长的抑制作用。应用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞凋亡的形态学，流式细胞仪定量检测细胞凋亡的查分率，琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片断。结果 当MOI＝100时，MTT法表明HSV-tk／QCV系统作用于ScaBER细胞，能明显抑制细胞生长，呈时间、剂量依赖性。ScaBER细胞的IC50为3．23mg/L。透射电镜下可见凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳呈梯形条带。结论 HSV-tk／QCV系统对细胞有较强细胞毒作用，并可以诱导ScaBER细胞凋亡，诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的主要机制之一。HSV-tk／GCV系统是一种治疗膀胱癌的新方法。     

降低Raf1表达促进膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的 下调T24膀胱癌细胞株中Raf1的表达,观察癌细胞株的细胞凋亡情况.方法 使用SiRNA干扰方法阻断Raf1在T24膀胱癌细胞株中的表达,随后用流式细胞仪观察细胞凋亡情况,使用westem-blot法确认细胞凋亡途径.结果 使用SiRNA干扰后Raf1表达显著降低,随之凋亡细胞数量明显增高,western-blot法确认Raf1表达降低后Caspase-3和PARP蛋白被激活.结论 Raf1表达抑制促使T24细胞凋亡,其凋亡通路是通过Caspase-3和PARP途径,此研究可能对膀胱癌的治疗提供新思路.     

蟾酥注射液诱导人膀胱癌细胞T24、BIU-87凋亡的研究

目的验证蟾酥注射液的抗癌活性。方法将T24细胞、BIU-87细胞分别接种于RPMI1640培养液中37℃孵育,并在多个时间点取细胞悬液加入AO／EB染料染色,在荧光显微镜下观察。结果在0、3、6、12、24和48h时,T24细胞的凋亡率分别为3．0％、12．5％、59．5％、66,5％、70．O％和63．5％,BIU-87细胞的凋亡率分别为2．0％、13．5％、55．5％、62．5％、68．5％和64．0％。结论蟾酥注射液可显著诱导T24细胞、BIU-87细胞凋广,在体外具有抗癌活性。     

膀胱肿瘤T24/ADM细胞多药耐药模型的建立及其耐药性的鉴定

目的建立人膀胱肿瘤T24/ADM细胞多药耐药系以及对其耐药性进行鉴定。方法用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法培养膀胱肿瘤T24/ADM多药耐药细胞。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测不同药物对膀胱肿瘤T24/ADM细胞多药耐药性,流式细胞术定量检测细胞P糖蛋白(P-gp)的表达变化。结果T24/ADM细胞对ADM有明显的耐药性,耐药指数(RI)16.3,并对其他药物也产生耐药性。T24/ADM细胞P-gp的表达率明显增高(P<0.01)。结论经鉴定人膀胱肿瘤T24/ADM细胞具有多药耐药特性。     

香菇多糖对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用

目的探讨香菇多糖对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响以及作用机制。方法配制不同浓度（0、10、100、500、1000、2000μmol／L）的香菇多糖溶液,每个浓度取100μl为不同浓度组,分别作用于经培养处理后的BIU-87细胞,检测各组细胞的增殖和凋亡情况、线粒体膜电位变化以及活性氧含量。结果BIU-87细胞的OD值随香菇多糖浓度的增大逐渐降低,各组OD值与对照组（0μmol／L）比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;不同浓度的香菇多糖对BIU-87细胞捌亡率无显著影响（P〉0．05）,但细胞死亡率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;BIU-87细胞线粒体膜电位水平随着香菇多糖浓度的增大呈下降趋势,除10μmlol／L组外,其余各组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;活性氧水平则随着香菇多糖浓度的增大而呈上升趋势,各组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论香菇多糖可使人膀胱癌BIU-87细胞线粒体膜电位去极化,诱发细胞内活性氧的产生,导致细胞死亡,从而抑制肿瘤的生长。     

紫草素对膀胱癌细胞T24增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的:探讨紫草素抑制T24细胞生长的作用及其机制。方法:MTT法测定紫草素对T24细胞的生长抑制实验;用RT-PCR、westen-blot法检测不同浓度的紫草素作用于T24细胞时,对COX-2 mRNA和蛋白表达的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:25、50和75μmol/L紫草素均能抑制T24细胞生长,诱导凋亡,并呈明显的量效关系和时间依赖性,紫草素能够抑制COX-2 mRNA和蛋白的表达。结论:紫草素能明显抑制T24细胞增殖,促其凋亡,其机制可能与COX-2表达下调有关。     

大黄素衍生物的合成及其应用研究进展

大黄素拥有利尿、引起血管舒张、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性。但由于大黄素本身水溶性差、毒副作用大等缺点．近年来对大黄素的结构修饰得到了广泛的关注。本文综述了近年来国内外大黄素衍生物的最新合成进展,重点介绍一些具有较高生物活性的大黄素衍生物的合成报道。