瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌Survivin表达的影响

目的 研究瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞株的抑制作用及对Survivin表达的影响.方法 用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理NCI-H520细胞,分别用MTT法检测肺癌细胞抑制率、半定量RT-PCR检测Survivin mRNA水平以及用Western-blotting检测蛋白水平的表达.结果 瑞香狼毒水提取物可显著抑制NCI-H520细胞的生长,随着药物浓度的升高抑制作用逐渐增强.瑞香狼毒作用4 h后细胞内Survivin蛋白的表达水平降低,而Survivin mRNA的表达变化不明显.结论 ①瑞香狼毒水提取物可抑制NCI-H520细胞的生长,并具有浓度和时间依赖性;②瑞香狼毒水提取物可降低NCI-H520细胞的Survivin蛋白表达水平,而对mRNA水平无明显影响.     

复方苦参碱可防治增生性瘢痕

中国人民解放军总医院等单位研究人员针对增生性瘢痕的现代细胞生物学和分子生物学研究发现，成纤维细胞的大量增殖与凋亡抑制及细胞外基质中胶原合成与降解失衡、部分细胞因子的大量产生构成了HS的生物学基础，并且其发生具有一定的血管依赖性。他们在体外培养烧伤后的人增生性瘢痕成纤维细胞，加入不同含量的复方苦参碱，24h后观察细胞形态学，以乳酸脱氢酶（LDH）为指标观察细胞毒性，用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖活性。结果发现。不同含量的复方苦参碱均能改变成纤维细胞形态，抑制成纤维细胞增殖，且作用呈剂量依赖性，含量在300μg／mL以下的复方苦参碱无明显的细胞毒作用。     

姜黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长及功能的影响

目的 探讨姜黄素对人增生性瘢痕(hyperplastic scar)成纤维细胞（fibroblast, FB）增殖及胶原合成的影响,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法 应用组织块法分离培养瘢痕和正常真皮组织的FB,在倒置相差显微镜下观察细胞形态,应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线,测定细胞生长速度;采用不同浓度的姜黄素（0、12.5、25、50和100 μmol/L）刺激瘢痕FB,采用四氮甲基唑盐比色法（MTT法）检测姜黄素对FB生长的抑制效应,采用RT PCR检测姜黄素对FBα1（Ⅰ）前胶原基因的转录活性的影响。结果 细胞生长曲线显示:增生性瘢痕FB倍增时间约为5天,正常皮肤FB后细胞倍增时间为4天,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);MTT检测结果显示：12.5 μmol/L姜黄素作用于增生性瘢痕FB,表现为增殖倾向,其光吸收值（A值）显著地高于正常对照组。而在25～100 μmol/L 的浓度范围内,随着姜黄素药物浓度的增加,其抑制作用逐渐增强,50 μmol/L和100 μmol/L姜黄素能显著抑制瘢痕FB增殖（P<0.05）;此外,50 μmol/L和100 μmol/L姜黄素能够显著抑制瘢痕FBⅠ型胶原合成（P<0.01）。结论 较高浓度的姜黄素能有效抑制增生性瘢痕FB增殖和Ⅰ型胶原合成,对增生性瘢痕可能具有治疗作用。     

水蛭素抑制体外模拟增生性瘢痕模型的实验研究

目的:研究水蛭素对体外人增生性瘢痕模型的收缩能力,成纤维细胞的增殖、胶原分泌等功能的影响。方法:体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB),建立含增生性瘢痕成纤维细胞的胶原网架系统(FPCL),用1、10、50U/ml的水蛭素溶液干预该模型,测定凝胶块收缩指数,利用MTT染色计数活细胞,逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达。结果:浓度为10U/ml和50U/ml水蛭素溶液能够抑制HSFB的活力,使FPCL收缩指数降低,抑制FPCL中HSFBⅠ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达(P<0.05)。结论:水蛭素溶液可抑制体外人增生性瘢痕三维模型的收缩功能和成纤维细胞增殖、分泌胶原功能。     

瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用

目的:　研究瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用。方法:体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法和集落形成法测定,靶细胞采用人胃癌细胞SGC- 790 1、人肝癌细胞BEL- 74 0 2和人白血病细胞HL- 6 0 ;通过提取物对小鼠的移植性肿瘤S180和H2 2生长的影响来评价体内抗肿瘤作用。结果:瑞香狼毒总黄酮提取物对体外培养的肿瘤细胞有较强的抑制作用,体外抗肿瘤活性高于长春新碱;瑞香狼毒总黄酮提取物急性毒性较小,对小鼠移植性肿瘤S180和H2 2的生长也有显著的抑制作用,并和剂量正相关,高剂量组对小鼠移植性肿瘤S180的抑制率为4 5 . 6 4 % ,H2 2的为4 7 .5 9% ,与阳性对照组环磷酰胺的抑制率接近。结论:瑞香狼毒总黄酮提取物具有较强的体内和体外抗肿瘤作用。     

粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：探讨粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法：取手术切除的人增生性瘢痕组织标本,分离培养成纤维细胞,加入不同浓度粉防己碱进行干预,MTT比色法检测各组瘢痕成纤维细胞增殖效应。结果：粉防己碱药物浓度由5μg／ml升至80μg／ml时,瘢痕成纤维细胞增殖活性逐渐降低,呈明显剂量依赖性。结论：粉防己碱对人增殖性瘢痕成纤维细胞增殖具有明显抑制作用。     

粉防己碱对PDGF、TGF-β诱导瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成的抑制作用

目的:探讨粉防己碱对血小板衍生生长因子(PDGF-BB)、转化生长因子β(TGF-β)诱导人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的干预作用.方法:体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞加入PDGF-BB、TGF-β、粉防己碱, 用3H-TdR掺入法和3H-脯氨酸掺入法测定粉防己碱干预下PDGF-BB、TGF-β诱导人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成作用的变化.结果:粉防己碱在不抑制瘢痕成纤维细胞DNA合成的药物浓度(3μg/ml)时即可显著抑制其胶原合成,并可显著抑制PDGF-BB和TGF-β诱导的实验细胞DNA及胶原合成.结论:粉防己碱可抑制PDGF-BB、TGF-β诱导的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成.     

瑞香狼毒系统溶剂法分离提取部位的体外抗肿瘤活性

目的:分离筛选瑞香狼毒中抗肿瘤活性部位.方法:用系统溶剂法对瑞香狼毒95%乙醇提取物进行分离,MTT比色法对分离得到的部位进行体外抗肿瘤活性的测定.结果:石油醚提取物和氯仿提取物对体外培养肿瘤细胞表现出较强的抑制作用,在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性抑制作用,而正丁醇和甲醇提取部位在测定浓度范围内则显示出很弱的抑制作用;在各提取部位中石油醚提取物的体外抗肿瘤作用最强.结论:石油醚提取部位是瑞香狼毒中的体外抗肿瘤活性部位.     

粉防己碱对人皮肤成纤维细胞生长的抑制作用观察

观察粉防己碱对体外培养人皮肤成纤维细胞生长的影响。结果表明：粉防己碱能抑制成纤维细胞生长，抑制作用与浓度、时间呈正相关。据此结果，作者认为粉防己碱在增生性瘢痕的防治中有应用价值。     

苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的体外抑制作用

组织损伤修复是人体自我保护的一个正常病理过程,而过度修复则会出现组织纤维化,影响组织、器官的正常功能,人增生性瘢痕是创伤过度修复的异常结果。苦参碱(matrine,Mat)广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中,近年研究发现其具有较强的抗组织纤维化作用[1],目前关于Mat对人增生性瘢痕成纤维细胞(下文简称为成纤维细胞)作用的报道较少。本实验以成纤维细胞为靶细胞观察不同质量浓度的Mat在体外对该细胞增殖的影响,并对其抗纤维化作用机制进行初步研究。1材料与仪器苦参碱标准品(中国药品生物制品检定所提供);DMEM培养基(Gibco公司产…     

基于网络药理学探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制＊

目的 探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制。方法 首先通过检索中药系统药理数据库和分析平台（TCMSP）筛选瑞香狼毒中的活性成分及其对应的靶蛋白分子,通过IPA软件数据库筛选晚期肝细胞癌相关分子。利用软件网络分析功能分别构建靶蛋白分子和晚期肝细胞癌相关分子的分子网络。通过软件比较功能,分析二者共同作用的生物学通路及作用位点。结果 从中药瑞香狼毒中筛选出4个活性成分,其对应的靶蛋白共18个,从IPA软件中选出晚期肝细胞癌相关基因共40个。前者主要的分子网络功能是与组织损伤、机体异常及心血管疾病相关,后者的分子网络功能主要与癌症、消化道疾病及肝脏疾病相关分子有关,且各自有不同的信号通路富集。对比前5位共有的信号转导通路,发现PI3K/AKT信号通路是共有的重要信号通路之一。PI3KCG、HSP90、PTGS2是瑞香狼毒活性靶蛋白中调控PI3K/AKT信号通路的作用分子。结论 本研究推测瑞香狼毒可能通过PI3KCG、HSP90、PTGS2调控PI3K/AKT信号通路,来抑制肿瘤血管生成,发挥抗肿瘤作用。     

瑞香狼毒提取工艺研究

目的:在建立了指标性成分的含量测定方法基础上,对瑞香狼毒的提取工艺进行优化。方法:以伞形花内酯和东莨菪内酯为指标对提取次数、乙醇浓度,物料比进行单因素考察,进行正交实验,优选瑞香狼毒的最佳提取工艺。结论:得到最佳提取工艺即20倍80%乙醇,加热回流1.5h,提取1次。     

中药狼毒的本草考证——为"瑞香狼毒"正名

对中药狼毒进行了本草考证,认为瑞香狼毒为历代本草记载的正品狼毒;狼毒大戟和月腺大戟应与瑞香狼毒区别列为大戟狼毒(或闾茹和草闾茹)较合适。     

粉防己碱抑制瘢痕形成机理的研究

目的：探讨粉防己碱对瘢痕形成的抑制作用及其机理。方法：采用瘢痕成纤维细胞体外培养和兔实验性瘢痕模型,观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。结果：体外实验粉防己碱组^3H－TdR掺入率和^3H－脯氨酸掺入率均较对照组明显降低,呈剂量依赖关系;动物实验粉防己碱能明显减少瘢痕组织中成纤维细胞的数量,降低胶原面密度,减轻瘢痕纤维化程度。结论：粉防己碱对瘢痕成纤维细胞过度增殖和胶原沉积具有抑制作用,可能是其抗瘢痕纤维化的主要机制之一。     

瑞香狼毒与黄花瑞香狼毒的生药鉴定

对瑞香狼毒Stellera chamaejasme及黄花瑞香狼毒Stellera chamaejasme f.chrysantha进行了生药性状、显微、薄层色谱方面的比较鉴别,以供扩大药源、控制质量参考.     

瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对小鼠白血病L1210细胞增殖、克隆形成和DNA合成的影响

目的;从整体水平探讨瑞香狼毒水提物（SCLA）的抗癌作用及机制。方法：以不同剂量SCLAig给药后,不同时间采集小鼠血清,处理体外培养的小鼠白血病L1210细胞,观察肿瘤细胞MTT还原,克隆形成能力和DNA合成的改变。结果;SCLA3,6,12g/kg给药1,2,4,8h后的药物血清处理肿瘤细胞后,其MTT还原及克隆形成率均显著降低;给药2h时的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。SCLA小鼠药物血清也显著抑制[^3H]TdR掺入L1210细胞DNA。结论：直接抑制癌细胞增殖及DNA合成是瑞香狼毒的重要抗癌机制。     

瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

瑞香狼毒药效组分抑制小鼠皮下移植瘤H22的实验研究

目的:考察两种体内给药途径瑞香狼毒药效组分对小鼠肝癌移植瘤H22抑制作用强度与量效关系及对荷瘤小鼠免疫器官的影响。方法:建立小鼠皮下肝癌移植瘤H22实验动物模型,采用灌胃与腹腔注射两种给药途径,瑞香狼毒药效组分Zp1102、Zp1103、Zp1105、Zp1111、Zp1113在小于1/3-1/5LD50的剂量范围内,观测各受试药对移植瘤H22的抑制作用及其量效情况,并测算实验小鼠胸腺与脾脏指数。结果:瑞香狼毒各药效组分对小鼠皮下移植瘤H22具有较强的抑制作用,并呈一定剂量依赖关系,其中Zp1102、Zp1103经灌胃给药2g/kg(折合成生药量)时能达到35%左右的抑瘤率;Zp1105灌胃给药效果较差(16g/kg时仅能达到35%左右的抑瘤率),而腹腔注射给药法250mg/kg时就可以达到38%的抑瘤率;Zp1111在250mg/kg剂量时对皮下移植瘤H22的抑瘤率达48.35%。多数药效组分对荷瘤小鼠的体质量与免疫器官系数较溶剂对照组有所下降,但其影响比阳性对照药要小。结论:瑞香狼毒药效组分对小鼠皮下移植瘤H22具有较强的抑制作用,且用药安全性较好,其中Zp1111抑瘤作用最强;腹腔注射给药在较低剂量即可...     

中药狼毒及其混淆品苘茹的本草考证

通过本草考证，作者认为狼毒的正品应为瑞香科的瑞香狼毒Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ Ｌ．的根。而目前在全国大部分地区作为狼毒使用的大戟科植物狼毒大戟Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｆｉｓｃｈｅｒｉａｎａ Ｓｔｅｕｄ。和月腺大戟Ｅ．ｅｂｒａｃｔｅｏｌａａ Ｈａｙａｔａ的根则是历代本草中所记载的Ｌｕ茹及草Ｌｕ如。     

瑞香狼毒中的一个新双香豆素——异西瑞香素B

目的：研究瑞香狼毒的化学成分。方法：采用硅胶柱层析的方法分离和纯化化合物，根据理化性质和波谱方法鉴定化合物结构。结果：从瑞香狼毒中分离得到两个双香豆素类化合物：7-羟基-5，6-二甲氧基-3-[（2-羰基-2H—1-苯骈吡喃-7）氧取代]-2H—1-苯骈吡喃-2-酮，命名为异西瑞香素B（1）和西瑞香素（2）。结论：化合物1为新化合物。