多参数流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用

目的:探讨多参数流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的诊断价值。方法:对临床疑似淋巴瘤患者的30份淋巴结行病理学常规及免疫组化检查,已确诊NHL患者的71份骨髓和血液标本行常规细胞形态及组化染色。对所有标本制备单个细胞悬液,进行多参数流式细胞术(FCM)免疫表型分析。结果:(1)淋巴结常规病理中5例误诊或无法分类的病例,经FCM检测诊断明确。通过流式细胞免疫表型分析与淋巴结病理诊断相结合,准确率由78.6%(22/28例)提高到96.4%(27/28例);(2)49例NHL患者骨髓形态学经FCM的免疫表型分析获得进一步确诊和分型。同时,流式细胞免疫表型分析使NHL骨髓浸润检测的阳性率提高了22.7%。结论:FCM能进一步明确NHL和NHL骨髓浸润的诊断与鉴别诊断,提高诊断的准确率。     

非霍奇金淋巴瘤临床分析

淋巴瘤是恶性肿瘤,是一种起源于造血组织的实体瘤.淋巴瘤可发生在身体的任何部位.国内以20～40岁居多,男多于女,并以非霍奇金淋巴瘤占多数.非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一种很不均一的恶性肿瘤,临床以无痛性、进行性淋巴结肿大为典型表现,伴发热、消瘦、盗汗等,中晚期常有肝、脾大,晚期有恶病质.现将我院2008～2009年间诊治的20例恶性淋巴瘤患者总结如下.     

流式细胞术在首诊非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的作用

目的 探讨流式细胞术(FCM)在诊断非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓浸润中的价值.方法 采用骨髓涂片和切片联合FCM检测NHL骨髓侵犯.骨髓涂片经瑞氏-吉姆萨液染色,分类计数瘤细胞.骨髓切片采用塑料包埋法制作组织切片,常规苏木精-姬姆萨-酸性品红(HGF)染色.流式细胞仪每份标本分析10 000个细胞.检测方案采用CD45/侧向散射角(SSC)设门,重点分析幼稚细胞群及成熟淋巴细胞群,经前向散射角(FSC)、SSC、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的单克隆抗体(McAb1-FITC)、藻红蛋白(PE)标记的单克隆抗体(McAb2-PE)、CD45-Percp五参数分析确定免疫表型.结果 17例骨髓首诊病例中,骨髓穿刺(BMA)确诊12例(70.6%),骨髓活检(BMB)确诊15例(88.2%),FCM确诊17例(100%),FCM确诊率最高,较BMA差异有统计学意义(P<0.05),较BMB差异无统计学意义(P>0.05).BMB检查发现NHL骨髓浸润方式间质型、结节型和弥漫型均易见,分别占23.5%,23.5%和52.9%.FCM检测结果为B细胞淋巴瘤13例(76.5%)、T细胞淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤4例(23.5%).结论 骨髓涂片和骨髓切片检查是诊断NHL-BMI的基本方法,可以做出定性诊断.FCM可进一步做出明确的病理诊断.对于骨髓检查首诊NHL-BMI的病例,3种技术的联合应用可以提高NHL-BMI的诊断正确性和阳性率.     

骨髓细胞形态学和流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤患者骨髓侵犯诊断中的价值比较

目的比较骨髓细胞形态学和流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓侵犯诊断中的价值。方法选取2015年6月至2018年11月兰州大学第一医院收治的初诊疑似NHL骨髓侵犯患者150例,分析患者骨髓标本的细胞形态学、流式细胞术及两种方法联合检测的结果和诊断效能。结果骨髓细胞形态学和流式细胞术联合检测NHL骨髓侵犯的阳性率为30. 67%(46/150),高于单独骨髓细胞形态学[22. 67%(34/150)]、流式细胞术[27. 33%(41/150)]检查。骨髓细胞形态学诊断NHL骨髓侵犯的灵敏度、特异度、约登指数、正确率、阳性预测值、阴性预测值和阳性似然比均低于流式细胞术,阴性似然比高于流式细胞术;联合检测的灵敏度、约登指数和阴性预测值均高于两种方法单独检测,特异度、阳性预测值、阳性似然比和阴性似然均低于两种方法单独检测。结论虽然细胞形态学的检出率较低,诊断价值有一定的局限性,但淋巴瘤细胞形态具有一定的特征,仔细观察淋巴瘤细胞的形态特征可做出提示性的诊断。骨髓细胞形态学和流式细胞术的联合检测优于单独检测,联合检测可提高NHL骨髓侵犯的诊断价值。     

流式细胞免疫表型分析结合细针穿刺细胞学在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用

1文献来源Demurtas A,Accinelli G,Pacchioni D,et al.Utility of flow cytometry immunophenotyping in fine-needle aspirate cytologic diagnosis of non-Hodgkin lymphoma：A series of 252 cases and review of the     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞亚群分析及临床意义

目的研究非霍奇金淋巴瘤患者血淋巴细胞亚群与临床分期的关系.方法采用流式细胞仪检测患者或正常成人血中淋巴细胞亚群比例、CD4/CD8比值.结果与正常成人比较,Ⅰ～Ⅲ期NHL患者血中总T、T辅助细胞、CD4/CD8及B细胞略降低,T抑制细胞略增高(P>0.05);而NK细胞明显增高(P<0.05).Ⅳ期NHL总T、T辅助细胞及CD4/CD8明显下降(P<0.05),NK细胞明显增高(P<0.05).与Ⅰ～Ⅲ期比较Ⅳ期患者的总T、T辅助细胞、CD4/CD8和NK细胞明显下降(P<0.05),B细胞明显增高(P<0.05).结论淋巴细胞亚群的分析有助于NHL病情的判断.     

子宫非霍奇金淋巴瘤的临床分析

目的：探讨子宫非霍奇金淋巴瘤的临床特点、诊断要点及处理和预后。方法：回顾性分析2000～2002年我院诊断及治疗的3例子宫非霍奇金淋巴瘤。其中2例肿瘤位于宫颈，1例位于子宫内膜。上述3例病人均行多疗程化疗或手术 化疗的综合治疗。结果：3例病人随访至2002年6月分别存活6～24月。结论：经合适的治疗。即使临床分期晚，该病仍能获得良好的预后。     

非霍奇金淋巴瘤患者HBV感染分析

目的：回顾性分析乙型肝炎病毒感染与非霍奇金淋巴瘤发病的关系。方法：对2003～2008年收治的54例非霍奇金淋巴瘤患者乙肝五项检测结果进行统计,并随机抽取同期住院的54例其他非霍奇金肿瘤患者（原发肝细胞肝癌除外）,54例健康体检者作为对照进行比较。结果：三组患者乙肝阳性率分别为27.5%、16.8%和9%,差异有统计学意义。结论：非霍奇金淋巴瘤患者的HBV感染率显著高于普通人群和一般肿瘤患者（原发性肝细胞癌除外）。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清白蛋白检测分析

目的　探讨血清白蛋白 (Alb)水平在非霍杰金淋巴瘤 (NHL)患者中的临床意义。方法　采用溴甲酚绿法检测NHL患者血清Alb水平。结果　NHL患者Ⅲ +Ⅳ期血清Alb水平比Ⅰ +Ⅱ期患者低 (P <0 .0 1) ,中高度恶性患者Alb水平与低度恶性者相当 (P >0 .0 5 ) ,有症状患者的Alb水平比无症状患者低 (P <0 .0 5 ) ,Alb水平低下者化疗后 2年和5年存活率比正常组低 (P <0 .0 1)。结论　血清Alb水平可作为NHL患者预后判断的指标之一。     

非霍奇金淋巴瘤1例报告

<正>淋巴细胞发生了恶变即称为淋巴瘤,按照世界卫生组织淋巴系统肿瘤病理分类标准,目前已知淋巴瘤有近70种病理类型,大体可分为霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤两大类。笔者现将非霍奇金淋巴瘤1例分析报告如下。1病历摘要患者,男,60岁,于6天前无意中发现左下腹有无痛性肿物,2012年12月17日来院检查。肝胆彩超示:肝胆胰脾未见明显异常。于左侧腹部可见迂曲管状低回声,壁薄,内呈纤细网格样回声,未见蠕动。CDFI:壁上可见血流信号。     

成人慢性免疫性血小板减少症患者T细胞亚群、NK细胞和树突状细胞亚群的水平研究

目的研究成人慢性免疫性血小板减少症(Immune Thrombocytopenia,ITP)患者免疫细胞、免疫因子表达水平以及二者之间的相关性。方法选取2013年11月～2017年3月期间我院血液科收治的240例ITP患者,根据ITP国际工作组提出的诊断标准分为重度ITP患者(重度ITP组)和非重度ITP患者(非重度ITP组),每组各120例。另外选择同期120例健康体检人员,作为健康组。分别检测上述三组Th1细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs)、Th17/Treg、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)、树突状细胞(Dendritic cells,DC)等细胞比例和白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)等免疫因子表达水平,分别分析与ITP病情之间以及二者之间的相关性。结果免疫细胞Th17、Treg、Th17/Treg和DC比例与患者病情呈显著相关性,而Th1、NK细胞比例与患者病情无显著相关性;免疫因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ与患者病情呈显著相关性,而Ig G与患者病情无显著相关性。免疫细胞与免疫因子在ITP中的相关性分析显示,Th1细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α呈显著正相关;Th17细胞比例与IL-2、IL-6、IFN-γ呈显著正相关;Treg细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ呈显著负相关;Th17/Treg细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IgG呈显著正相关;NK细胞比例与IL-6、TNF-α、IFN-γ呈显著正相关;DC比例与IL-2、IL-6、TNF-α呈显著正相关。结论细胞免疫失衡引起机体免疫因子水平异常,是导致ITP发生发展的促进因素。     

T淋巴细胞亚群和NK细胞对非霍奇金淋巴瘤患者疗效的预测价值

目的:探讨T淋巴细胞亚群和NK细胞对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者疗效的预测价值.方法:选取本院收治的NHL患者120例为NHL组,另选同期体检人群60例作为对照组.所有NHL患者均单用化疗.于化疗前及化疗后1个月,检测T细胞及NK细胞水平.结果:化疗前,NHL组CD3+、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值均明显低于对照组,CD8+、CD25+、CD4+ CD25+ Treg及NK细胞比例均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);化疗后,CD4+细胞比例、CD4+/CD8+比值较化疗前明显升高,CD4+ CD25+ Treg比例明显降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);不同临床分期及临床结局的NHL患者化疗前T细胞及NK细胞比例比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);临床分期越高、疗效越差,CD3+、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值越低,CD8+、CD25+、CD4+CD25+ Treg及NK细胞比例越高.结论:NHL患者外周血中T细胞及NK细胞与NHL存在密切关联,有望通过动态监测NHL患者外周血中T细胞及NK细胞水平来观察疾病发展及化疗的效果,指导临床治疗.     

鼻腔NK/T细胞淋巴瘤螺旋断层放射治疗疗效观察

目的：研究鼻腔NK/T细胞淋巴瘤螺旋断层放射治疗后的临床疗效及不良反应。方法对2008年8月-2013年4月我科收治的25例鼻腔NK/T细胞淋巴瘤患者进行螺旋断层放射治疗,该组中3例未行化疗,1例行同步放化疗,2例放疗后行序贯化疗,其余患者均行1~2周期诱导化疗后行放疗再行序贯化疗。所有患者的化疗方案均以CHOP-L方案(环磷酰胺＋多柔比星＋长春新碱＋泼尼松+左旋门冬酰胺酶)为主,化疗总周期数均为1~7次,中位化疗周期数为4次。放疗均采用螺旋断层放射治疗,剂量GTV DT 50~56 Gy(中位剂量50 Gy),单次剂量2~2.78 Gy,CTV剂量范围DT 36~50 Gy(中位剂量40 Gy),单次剂量1.6~2 Gy。结果25例放疗后达到完全缓解(complete remission,CR)14例,部分缓解(partial response,PR)4例,稳定(stable disease,SD)3例;2例失访,2例放疗后1个月内死亡。患者总有效率(CR + PR)为78.3%,2年总生存率为92%,平均生存期55.3个月(95%置信区间49.0~61.5个月)。放疗后大部分患者出现不同程度的口干及味觉改变症状,少部分出现视力或听力下降,未出现脑损伤症状。结论相对于常规调强放射治疗,鼻腔NK/T细胞淋巴瘤螺旋断层放射治疗的临床疗效更优,不良反应更少。     

不同临床分期弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞含量的差异及意义

目的了解不同临床分期弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞含量的差异并分析其临床意义。方法选择DLBCL患者共62例,按临床分期分为3组,组1（Ⅱ期）21例,组2（Ⅲ期）21例,组3（Ⅳ期）20例,选择同期我院健康体检者30例作为对照组。采集DLBCL组与正常对照组空腹外周血2 mL,流式细胞术检测T淋巴细胞各亚群包括CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞的绝对值计数,并计算出CD4＋/CD8＋值,对各组数值进行比较。同时对临床分期与DLBCL患者外周血T细胞亚群及NK细胞数的关系进行相关性分析。结果组1、2患者CD3＋细胞数较对照组（P=0.003、0.002）及组3患者明显降低（P=0.042、0.036）;组1、2、3患者CD4＋细胞数均低于对照组（P=0.017、0.011、0.019）;组3 CD8＋细胞数显著高于正常对照组（P=0.018）和组1、2（P=0.045）,CD4＋/CD8＋值显著低于正常对照组（P=0.009）和组1、2（P=0、0.014）;组3 NK细胞数显著低于对照组（P=0.043）,且可见临床分期越差NK细胞数越低。临床分期与CD3＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋值有相关性（P〈0.05）。结论临床分期与DLBCL外周血T淋巴细胞亚群数值有相关性,随着临床分期的增加,DLBCL患者免疫抑制与紊乱加重,肿瘤负荷越大,NK细胞功能也越差。     

三氧治疗对淋巴瘤患者T细胞亚群、NK细胞的影响

目的 探讨三氧联合化疗对淋巴瘤患者细胞免疫功能的影响。方法 55例淋巴瘤患者随机分为单纯化疗组（n=30）和化疗加三氧组（n=25），治疗前后应用流式细胞术测定患者的CD3，CD4，CD8，CD4／CD8和NK值，以30例正常人为对照组。结果 ①淋巴瘤患者CD3^＋，CD4^＋，CD56^＋（NK）细胞，CD4^＋／CD8^＋比值低于正常对照组，CD8^＋细胞高于正常对照组；②单纯化疗组各项免疫指标治疗前后无明显变化；③化疗加三氧组治疗后与本组治疗前和单纯化疗组治疗后比较，CD4^＋细胞，CD4^＋／CD8^＋比值明显升高（P〈0．05），CD8^＋细胞明显降低（P〈0．05），CD3^＋，CD56^＋（NK）细胞无明显变化（P〉0．05）。结论 T细胞亚群在淋巴瘤患者中受到抑制，三氧治疗能提高淋巴瘤患者的细胞免疫功能，该方法是一种低毒高效的生物反应调节剂。     

高温射频消融对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响

目的 研究非小细胞肺癌患者高温射频治疗后机体免疫功能的变化。方法 在CT引导下经皮肺穿刺，用可扩展锚状电极配合RF－2000射频治疗仪高温射频消融治疗非小细胞肺癌患者30例。采用单克隆抗体和流式细胞仪技术及双抗体夹心法，检测治疗前后外周血T细胞亚群（CD3^ 、CD4^ 、CD8^ ）、NK细胞的百分率及SIL－2R的变化；采用免疫粘附酵母菌花环法检测红细胞免疫功能（RBC－C3bRR、RBC-ICR)。同时选择25例体检正常献血者作对照。结果 治疗前非小细胞肺癌患者外周血中CD3^ 、CD4^ 细胞、NK细胞、RBC-C3bRR的百分率及CD4^ ／CD8^ 细胞的比值与对照组相比，差异有显著性意义，而CD8^ 细胞、RBC－ICR的百分率及SIL－2R水平与对照组相比，差异有显著性意义（P＜0．01）。治疗后CD3^ 、CD4^ 细胞、NK细胞、RBC－C3bRR的百分率及CD4^ /CD8^ 细胞的比值与治疗前相比，差异有显著性意义，而CD8^ 细胞、RBC－ICR的百分率及SIL－2R水平，治疗前后比较差异有显著性意义（P＜0．01）。结论 锚状电极高温射频消融具有免疫激活作用，可使机体的免疫功能得到一定程度的改善。     

鼻NK/T细胞淋巴瘤18例临床及病理分析

目的分析鼻NK/T细胞淋巴瘤患者的临床表现及组织病理学特征。方法回顾性分析18例经病理证实的鼻NK/T细胞淋巴瘤患者的临床表现及组织病理等资料,男15例,女3例,年龄28⁷8岁,中位年龄55岁。结果 18例患者主要症状为单侧鼻塞12例(66.7%),伴流脓涕7例(38.9%)。鼻内镜检查见肿瘤外观表现以表面糜烂、溃疡多见,并常伴表面坏死;CT显示肿瘤居于鼻腔前部外侧壁13例,鼻中隔4例,鼻小柱1例,其中1例出现鼻骨破坏;15例表现鼻腔、鼻窦软组织密度影或异常密度影,其中3例双侧鼻窦均出现软组织密度影;免疫组织化学显示瘤细胞表达CD3、CD56、CD43、TIAI及LCA阳性,CD20、CD79a、CK(-),8例Ki-67阳性指数大于50%。随访0.578岁,中位年龄55岁。结果 18例患者主要症状为单侧鼻塞12例(66.7%),伴流脓涕7例(38.9%)。鼻内镜检查见肿瘤外观表现以表面糜烂、溃疡多见,并常伴表面坏死;CT显示肿瘤居于鼻腔前部外侧壁13例,鼻中隔4例,鼻小柱1例,其中1例出现鼻骨破坏;15例表现鼻腔、鼻窦软组织密度影或异常密度影,其中3例双侧鼻窦均出现软组织密度影;免疫组织化学显示瘤细胞表达CD3、CD56、CD43、TIAI及LCA阳性,CD20、CD79a、CK(-),8例Ki-67阳性指数大于50%。随访0.5³.0年,失访5例,1年内死亡2例,2年内死亡1例,9例控制良好。结论鼻NK/T细胞淋巴瘤无特异性的临床表现,但其具有特殊的形态学、免疫表型及临床生物学行为,有助于对该病的诊断,正确的活检方式和免疫组织化学检查是减少鼻NK/T细胞淋巴瘤误诊的主要方法。     

胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能的研究

目的检测胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能状态,探讨其与胃癌新临床病理分期(TNM)及组织病理学类型的关系.方法流式细胞仪测定胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞数量,以胃溃疡患者及正常人作对照分析.结果胃癌患者外周血CD3 、CD4 、NK细胞数量及CD4 /CD8 比值较正常对照组和胃溃疡组均明显下降(P＜0.01),而CD8 细胞水平显著升高.T淋巴细胞亚群及NK细胞数量的改变与胃癌组织病理学类型无关,而与胃癌临床病理分期有关,分期越晚,CD3 细胞、CD4 细胞、CD4 /CD8 细胞比值及NK细胞数量越低,CD8 细胞水平越高;在Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间存在显著差异(P＜0.05或P＜0.01).结论胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低.积极的外科手术治疗以及免疫治疗有助于恢复其免疫功能.     

鼻腔NK／T细胞淋巴瘤特异分子标志及预后相关因素研究

目的 探讨鼻腔NK／T细胞淋巴瘤的特异性免疫标志及预后的相关因素。方法 以鼻腔NK／T细胞淋巴瘤30例石蜡组织标本为研究对象．同部位B细胞淋巴瘤20例为对照，采用S—P三步法行免疫组化染色；采用PCR法对12例鼻腔NK／T细胞淋巴瘤行TCRβ、γ基因重排分析，2例B细胞淋巴瘤为对照；对全纽病例回顾性分析、比较．探讨预后的相关因素。结果 30例鼻腔NK／T细胞淋巴瘤中，CD45RO阳性26例、CIM323例、CD3ε24例阳性定位于胞浆、CD5626例、CD309例、CD20、CD45RA、CD57、CD16及CD3表面全部阴性；细胞毒颗粒蛋白TIA—1、GranzymeB、Perforin的阳性表达分别为30例、28例、24例；对照组20例B细胞淋巴瘤均不表达。背景反应性中性粒细胞和组织细胞表达TIA—1，肿瘤细胞的异型性和CD30／GranzymeB的表达密切相关。12例NK／T细胞淋巴瘤TCRβ的基因检出率为58．3％（7例），TCRγ／链基因检出率为66．7％（8例）。结论 NK／T的常规诊断可在形态学的基础上，联合使用CD45RO，CD3e、CD56，GranzymeB免疫化染色确定：全组病例超过半数存在TCRβ、TCRγ基因重排，表明大部分为T细胞单克隆性增生；肿瘤细胞的异型性和CD30／GranzymeB的表达密切相关，其意义尚待深入探讨：影响预后的相关因素主要有临床分期、肿瘤侵犯、全身症状、病理分级及治疗方法等。