2，2’，4，4＇-四溴联苯醚对原代新生大鼠海马细胞

目的探讨2，2’，4，4’-四溴联苯醚（2。2’，4，4’-tetrabromodiphenyl ethers，PBDE-47）对原代新生大鼠海马细胞氧化应激、DNA损伤和凋亡的影响。方法原代培养的新生大鼠海马细胞暴露于10、20、40μg／ml PBDE-47，每组3个平行样，24h后，检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率，细胞内丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力、活性氧（ROS）水平以及DNA损伤和细胞凋亡隋况。结果与对照组比较，20和40μg／ml组LDH漏出率升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。各染毒组MDA含量均高于对照组，GSH-Px活力均低于对照组，且20和40μg／ml组与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；10、20、40μg／ml组GSH含量和SOD活力均低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），但各染毒组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；20和40μg／ml组细胞内ROS水平高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。10、20、40μg／ml组尾部DNA百分率和Oliver尾矩均高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；20和40μg／ml组细胞凋亡率均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），且呈上升趋势。相关分析表明，海马细胞DNA损伤、凋亡百分率与ROS水平呈正相关（r值分别为0．982，0．998，P〈0．05），细胞凋亡百分率与DNA损伤呈正相关性（r=0.967，P〈0．05）。结论PBDE-47可致原代新生大鼠海马细胞氧化应激和诱导细胞DNA损伤和凋亡，呈现一定的神经毒性。     

富勒烯对中国仓鼠肺成纤维细胞的氧化损伤作用

目的探讨富勒烯（C60）对中国仓鼠肺成纤维（CHL）细胞的氧化损伤作用。方法用不同浓度的C60（0、1．25、2．5、5、10、20和40μg／mL）染毒24h,四甲基偶氮唑盐实验检测C60对CHL细胞的增殖抑制作用,并检测细胞内LDH释放率及SOD、CAT活性和GSH、MDA、ROS含量。结果C60染毒组细胞生存率下降,10、20、40μg／mLC60染毒组细胞存活率与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。CHL细胞中LDH释放量上升,且各染毒组与对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．01）。各染毒组随染毒浓度增加SOD、CAT活性降低,与对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．01）。GSH含量降低,但仅C6040μg／mL染毒组,与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。MDA含量增加,10、20、40μg／mL剂量组,与对照组比较差异均具有统计学意义（P〈0．01）。ROS含量有不同程度的升高,与对照组相比差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论C60可引起中国仓鼠肺成纤维细胞损伤,可能是通过氧化应激介导。     

用彗星试验检测苯并(a)芘致小鼠体细胞DNA的损伤

[目的]建立彗星试验检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠体细胞DNA损伤的方法。[方法]雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和高、中、低剂量3个染毒组，每组4只。3个染毒组和溶剂对照组分别腹腔注射二甲基亚砜（0．01ml／g体重）和苯并（a）芘（250、125、62．50mg／g体重）。染毒3h后，处死小鼠，取出肝、肾和小肠组织制备单细胞悬液用于彗星试验。IMI彗星分析软件分析彗星尾距（oliver tail moment，TM）评价细胞DNA损伤的程度。[结果]高剂量组小鼠肝、肾和小肠细胞的彗星尾距值均增加，中、高剂量组小肠细胞的彗星尾距值均是溶剂对照组的5．22倍（P〈0．05）；中、高剂量组小鼠肾细胞的尾距值分别是溶剂对照组的8．27和7．16倍（P〈0．05）。高剂量组肝细胞的彗星尾距值是溶剂对照组的3．99倍。低剂量组仅小肠细胞的彗星尾距均值（1．285μm）增加（P〈0．05）。[结论]彗星试验可检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠肝、肾和小肠细胞的DNA损伤。     

镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性和细胞间隙连接通讯的影响

目的探讨镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞（CHL）毒性和细胞间隙连接通讯（GJIC）的影响。方法以CHL细胞为靶细胞，采用噻唑蓝（MTT）颜色反应法，检测2份镍冶炼烟尘对CHL细胞的毒性作用。采用划痕标记染料示踪技术（scrape-loading and dye transfer，SLOT）检测镍冶炼烟尘对CHL细胞GJIC的影响。结果2份受试物各剂量组在作用6、12h时，CHL细胞增殖情况与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），作用36h时，所有剂量组细胞存活率均降低，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），并呈现剂量-反应和时间-反应的关系。2份受试物作用CHL细胞36h时IC50分别为21．36、23．07μg／ml。镍冶炼烟尘在25．00、50．00、100．00μg/／ml时，荧光黄（LY）由伤沿列传向邻近细胞的列数减少，与溶剂对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），细胞间隙连接通讯能力降低。结论镍冶炼烟尘对体外培养的CHL细胞可产生毒性作用。抑制细胞生长。一定浓度的镍冶炼烟尘能够抑制CHL细胞的GJIC。     

甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究

目的 研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联（DNA-protein crosslinks．DPC）和致DNA的断裂作用。方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后．采用KCl-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应。结果KCl-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛（5μM,25μM）不能引起DNA-蛋白质的交联（P〉0．05）,较高浓度（125μM．625μM）可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用（125μM,p〈0．05;625μM．P〈0．01）。而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度（5μM,25μM）时可以引起DNA链的断裂（P〈0．01）．在较高浓度（125μM,625μM）时可以引起交联作用（P〈0．01）。结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用．而在〈25μM时以DNA断裂为主。     

热休克蛋白70的表达在二氢二醇环氧苯并(a)芘致DNA损伤中的作用

目的研究热休克蛋白70（HSP70）的表达在二氢二醇环氧苯并（a）芘（BPDE）致DNA损伤中的作用。方法培养人肺腺癌A549细胞，作如下处理：BPDE染毒组：以不同剂量BPDE（0、2、4、8pmol／L）染毒2h；预热＋BPDE染毒组：细胞预热（42℃ 2h，37℃恢复1h）后，再按BPDE染毒组同样处理，各组均设溶剂对照。采用单细胞凝胶电泳技术和Western blot法分别检测DNA的损伤情况与HSP70的表达。结果（1）DNA损伤情况：BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒剂量增加而加强，明显高于溶剂对照，差异有统计学意义（P〈0．01），组间相互比较，差异亦有统计学意义（P〈0．01），且DNA损伤程度与BPDE染毒剂量呈正相关（r=0．96，P〈0．05）；预热＋BPDE染毒组DNA损伤程度随BPDE染毒浓度递增，与预热溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．01），但在4、8μmol／L的BPDE组间，DNA损伤程度的差异无统计学意义（P〉0．05），与BPDE染毒组比较，各剂量下DNA损伤程度均明显增加。（2）HSP70表达情况：BPDE染毒组在2、4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达逐渐升高，与溶剂对照相比，差异有统计学意义（P〈0．05），但在8μmol／L剂量时，表达下调，与溶剂对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；预热＋BPDE染毒组HSP70的表达均比预热溶剂对照明增加，在4μmol／L的BPDE作用时HSP70表达水平最高，与2、8μmol／L剂量组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。与BPDE染毒组相比，各剂量下HSP70的表达水平均明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HSP70对BPDE所致A549细胞DNA损伤的保护作用并不明显。     

应用胞质分裂阻滞微核细胞组学法评价三溴乙酸的遗传毒性

[目的]应用胞质分裂阻滞微核细胞组学方法[cytokinesis-block micronucleus cytome（CBMN-cyt）assay]评价三溴乙酸的遗传毒性。[方法]以小鼠淋巴瘤（L5178Y）细胞为受试细胞,分为2组。一组暴露于终浓度分别为0（阴性对照）、7．81、15．62、31．25、62．50、125．00、175．00、250．00μg／mL的三溴乙酸溶液24h,采用噻唑蓝比色法（MTF法）检测细胞毒性,并计算半数致死浓度（medianlethaldose,LC50）;另一组暴露于终浓度分别为0（阴性对照）、31．25、62．50、125．00、175．00μg／mL的三溴乙酸溶液24h,并设阳性对照（终浓度为0．10μg／mL丝裂霉素C）,采用CBMN-cyt试验检测遗传毒性。[结果]与阴性对照组相比,31．25、62．50,125．00,175．00,250．00μg／mL三澳乙酸染毒组L5178Y细胞的存活率均较低,差异有统计学意义（P〈0．05）;且随着三溴乙酸染毒浓度的升高,L5178Y细胞的存活率呈明显的下降趋势（尸〈0．01）。三溴乙酸对该细胞的LC50为135．7μg／mL。与阴性对照比较,125．00、175．00μg／mL三溴乙酸染毒L5178Y细胞的微核率均升高,各浓度三溴乙酸染毒L5178Y细胞的核质桥率也均升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;而各浓度三溴乙酸染毒L5178Y细胞的核芽率和核分裂指数（nucleusdividedindex,NDI）无显著改变。Pearson相关分析显示,随着三溴乙酸染毒剂量的升高,L5178Y细胞的微核率、核质桥率、核芽率均呈明显的上升趋势（P〈0．01）。[结论]三溴乙酸的遗传毒性,可能与染色体损伤、DNA错误修复、染色体重组或端粒末端融合损伤有关。     

长春新碱诱发的人淋巴细胞遗传损伤的体外试验方法评价

目的 用3个遗传终点来评价人外周血淋巴细胞暴露于不同剂量长春新碱（VCR）后的遗传损伤。方法 外周血来自男女2名助血员，用终浓度为0．00（溶剂对照）、0．01、0．02、0．04、0．08μg／ml的VCR染毒24h，再用微核试验、彗星试验和hprt基因突变试验检测淋巴细胞的遗传损伤。微核试验以微核率、微核细胞率、核芽、核质桥、核分裂指数和凋亡细胞作为染色体损伤指标；彗星试验以平均尾长和平均尾相作为DNA损伤的指标；hprt基因突变试验以基因突变率作为评价指标。结果 3种试验均呈阳性。hprt基因突变率和凋亡细胞数从0．02μg／ml剂量开始与对照的差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），其余指标从最低剂量组开始就明显高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05），并存在剂量一效应关系。结论 VCR在体外可通过不同机制诱发人淋巴细胞的遗传损伤。     

脂多糖对增生性瘢痕患者正常皮肤成纤维细胞增殖及I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达的影响

目的探讨脂多糖（hpopolysaccharide,LPS）对皮肤成纤维细胞增殖和I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达的影响．以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤按黄勇等方法行成纤维细胞培养后,分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为O．005、0．010、O．050、0．100、0．500和1．000μg／ml大肠杆菌LPS（E．coli055：B5）培养,对照组为DMEM培养。分别通过MTT比色法及细胞计数法观察各组1—9d吸光度（A）值和细胞数量的变化;并对刺激后细胞进行传代,用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达,并以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞作对照。结果与对照组比较,0．005～0．500μg/ml组A值增加,于5～9d差异有统计学意义（P〈0．05）;1．000μg／ml组A值降低,于3～9d差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较,0．005～O．500μg／ml组细胞数量显著增加,于1～6d差异有统计学意义（P〈O．05）;1．000μg／ml组细胞数量显著降低,于2～9d差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较,0．005～O．500μg／ml组促进细胞胶原合成,且O．100μg/ml组作用达高峰（P〈O．05）,1．000μg／mlLPS抑制细胞胶原合成（p〈O．05）。LPS刺激浓度在0．005～0．100μg/ml时,促进正常皮肤成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA表达,抑制胶原酶mRNA表达,且呈一定的剂量依赖性;当LPS刺激浓度为O．500μg／m1,上述作用下降;而当LPS刺激浓度到达1．000μg／ml时,抑制正常皮肤成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA表达,促进胶原酶mRNA表达。LPS刺激浓度在0．100μg／ml时．成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达与同一个体增生性瘢痕组织成纤维细胞近似。结论LPS对正常人皮肤成纤维细胞增殖及I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达的直接调节可能是其参与增生性瘢痕形成的重要机制。     

丙烯腈对中国仓鼠肺细胞细胞活力和间隙连接通讯功能的影响

目的：探讨丙烯腈（ACN）对中国仓鼠肺细胞（CHL）细胞活力及细胞间隙连接通讯（GJIC）功能的影响。方法：镜下观察细胞形态学改变,采用MTT法测定细胞生长半数抑制浓度（IC50）,应用荧光染料示踪技术观测ACN对CHL细胞GJIC的影响。结果ACN染毒12和24h,细胞生长IC50分别为435．73和251．09μg/ml。低剂量组（12．5和25．0μg/ml）细胞形态与对照组相比无明显改变,较高剂量组（50．0－200．0μg/ml）细胞轻度受损（0－Ⅰ级）,高剂量组（800．0μg/ml）细胞明显受损（Ⅲ级）。ACN原形在无明显细胞毒辣性剂量（10．0－50．0μg/ml）时即可抑制GJIC,并呈持续抑制作用,存在剂量－效应和时间－0效应关系。ACN经代谢活化后,可加重对细胞GJIC的抑制作用和细胞受损程度,但在染毒12h后停止接触,该作用在一定程度上可逆转,牛磺酸作为一种重要的抗氧化剂,预处理细胞（牛磺酸剂为10和20mmol/L)可明显抑制ACN对细胞GJIC的下调作用。结论ACN在较高剂时对CHL人有毒性作用,但在无明显细胞损伤剂量时即明显抑制细胞GJIC功能,该抑作用停止接触ACN或有抗氧化剂存在可逆转,提示氧化应激在ACN所致细胞GJIC功能下调中具有重要作用。     

2009年深圳市外来劳务工血清乙肝标志物与HBV-DNA的检测分析

目的了解深圳市外来劳务工乙肝病毒的感染情况,探讨劳务工血清乙肝标志物与乙肝DNA之间的关系。方法利用ELISA法对235份深圳市外来劳务工的血清标本进行乙肝五项检测,并应用实时荧光定量PCR法检测乙肝患者的HBV-DNA水平。结果在235例感染乙肝病毒的外来劳务工中,30岁以下劳务工患者占总的乙肝病毒感染人数的74.89%。大三阳（1,3,5阳性）和小三阳（1,4,5阳性）患者占劳务工乙肝患者总数的77.45%,其乙肝DNA的检出率分别为97.8%和68.8%,HBsAg（＋）和HBcAb（＋）患者的HBV-DNA的阳性率为76.5%。结论乙肝五项不足以真实反映乙肝患者的病毒复制水平,对于年青外来劳务工乙肝五项异常者必须进行DNA测定以正确判断患者的传染性,从而为乙肝的防控和治疗提供依据。     

对苯二酚与杂交中DNA的相互作用

目的 探讨在pH为7．42磷酸盐缓冲溶液中对苯二酚与DNA的相互作用。方法用循环伏安法、荧光光谱法、紫外光谱法、DNA分子杂交技术和量子化学方法进行检测。结果在DNA杂交过程中，对苯二酚与其作用后的荧光光谱。紫外光谱的吸收峰峰形以及强度改变较大，循环伏安法氧化峰正向移动，量化计算结果表明，对苯二酚位于磷酸基团和碱基近侧。结论在DNA杂交过程中对苯二酚与其以Ⅱ-Ⅱ化学键和静电结合为主。     

用DNA杂交技术对儿童中HCMV感染的流行病学研究

本研究用随机六聚寡核苷酸引物法，以同位素和地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记了ＨＣＭＶＡＤ１６９ＤＮＡＨｉｎｄⅢＹ片段（３．８Ｋｂ），以此为探针，采用ＤＮＡ－ＤＮＡ斑点杂交的方法，检测了３２１例城乡１～６岁学龄前儿童ＨＣＭＶ感染情况。结果表明，这些儿童中ＨＣＭＶ阳性率为４５．８％；城市儿童为４６．１％，农村４５．５％。城市１～２岁组儿童的感染率高于３～６岁（Ｘ２＝７．２１，Ｐ＜０．０１）。而农村各年龄组无差别。对儿童ＨＣＭＶ检出情况作Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析表明，影响儿童感染ＨＣＭＶ的主要因素为幼儿园环境、儿童年龄、喂养方式等。说明幼儿园是学龄前儿童获得ＨＣＭＶ感染的重要场所，而儿童的年龄，个人卫生习惯及喂养方式也是影响儿童感染ＨＣＭＶ的重要因素，表明人获得ＨＣＭＶ感染主要在幼年期。     

磷脂酰肌醇-3激酶在石英诱导的DNA双链断裂修复中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)在石英致人胚肺成纤维细胞(HELF)DNA双链断裂修复中的作用.方法 用200μg/ml的石英刺激HELF和用显性失活突变体抑制P13K功能的HELF(DN-Δp85)不同时间.免疫印迹法检测磷酸化H2AX(γH2AX)的水平以及DNA依赖性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)的组成成分Ku70、Ku8和DNA-PKcs的蛋白水平,并用Image-Pro plus 6.0软件对条带光强度进行半定量分析.中性彗星试验检测DNA双链断裂损伤,用彗尾DNA百分含量值观察DNA双链断裂损伤程度变化,并计算DNA修复能力.结果 γH2AX的水平在石英刺激3 h明显增高,12 h达峰值,24 h下降.与HELF相比,石英诱导的DN-Δp85细胞γH2AX水平增高受到抑制.石英刺激HELF和DN-ΔP85细胞12 h组Ku70、Ku80和DNA-PKcs的蛋白水平(0.58±0.09、0.95±0.21、0.55±0.06,0.37±0.14、0.55±0.17、0.52±0.07)均高于相应的无石英刺激组(0.26±0.10、0.69±0.26、0.43±0.11,0.11±0.07、0.27±0.14、0.39±0.07),差异有统计学意义(P<0.05).与石英刺激HELF 12 h组比较,石英刺激DN-ΔP85 12 h组的Ku70、Ku80蛋白水平增高受到抑制,差异均有统计学意义(P<0.05).石英刺激的HELF12 h组和DN-Δp85 12h组的彗尾DNA百分含量分别为9.78±1.15和11.79±4.90,明显高于同细胞系的无石英刺激组(2.40±0.69,3.31±1.35),差异有统计学意义(P<0.05);与石英刺激HELF 12 h组相比,石英刺激HELF细胞24 h组彗尾DNA百分含量明显降低(4.19±0.47),差异有统计学意义(P<0.05).石英刺激DN-Δp85 24 h组的彗尾DNA百分含量为(7.58±4.32),明显高于无石英刺激DN-Δp85组和石英刺激HELF 24 h组,差异有统计学意义(P<0.05).HELF的DNA修复能力为75.74%,DN-Δp85的DNA修复能力为49.64%.结论 石英可诱导DNA双链断裂损伤,PI3K与DNA损伤修复有关,通过调节Ku70和Ku80的水平,可促进石英诱导的DNA双链断裂损伤的修复.     

外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA实时定量PCR检测与体征及血细胞计数的相关性

目的 定量检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA含量，研究其与体征及皿细胞计数之间的相关性，并比较不同检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异。方法 以实时定量PCR（RQ-PCR）定量检测40份健康人静脉血标本，确定临床阳性检测限。31例发热患者共72份血标本同时进行常规细菌培养及大肠埃希菌DNA定量检测，比较两种检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异，两个取血时间点间大肠埃希菌DNA含量的变化，并计算大肠埃希菌DNA含量与体温、心率、白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间的相关性。结果 RQ-PCR定量检测大肠埃希菌DNA阳性率为52．78％（38／72），显著高于细菌培养阳性率2．78％（2／72）（P=0．000）。同一患者两个时间点血标本检测结果显示，静脉血中大肠埃希菌DNA在2～6小时内的升降变化达10～20倍。血中大肠埃希菌DNA含量与体温和心率之间均显著相关（P=0．000），相关程度中度密切（，值分别为0．565和0．546），与白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间无显著相关关系。结论 RQ-PCR检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌阳性率远高于血培养。血中大肠埃希菌DNA拷贝数变化速度较快。血细胞计数不能很好反映血中大肠埃希菌的含量，而体温心率的影响因素较多，因此RQ-PCR能更及时准确反映大肠埃希菌血症的严重程度，有助于对肠屏障损伤导致肠道细菌移位的动态程度或后果进行评估。     

精子染色质完整性检测与辅助生殖技术

随着男科学研究的深入,精子评估已由传统的精液常规分析向细胞、分子水平深入发展.精子染色质完整性是反映男性生育力的新指标,其影响到辅助生殖技术(ART)中的受精率、胚胎质量和妊娠率等,与ART结局密切相关.检测精子染色质完整性,采取适当措施获得染色质无损伤或损伤较小的精子,对改善ART结局十分必要.精子染色质结构分析是目...     

哺乳动物体细胞核移植后核重编程研究进展

通过体细胞核移植技术获得重构胚胎,在卵母细胞内多种重编程因子的作用下,供体细胞核抹去分化状态,恢复全能性,这就是核重新编程的过程.在这个过程中供体核必须被正确激活与胚胎发育密切相关的基因,同时抑制与分化有关的基因.到目前为止,通过这项技术已获得多种哺乳动物的克隆后代,但克隆成功率低且存活个体大多表型异常.核重编程的不准确性可能是克隆后代存在高死亡率和发育异常的主要原因之一.综述了重编程中DNA甲基化、组蛋白乙酰化、X染色体失活以及基因印迹等的近期研究.     

成都地区血浆凝固酶阴性葡萄球菌耐药性及分子流行病学分析

目的探讨成都地区血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)耐药性及分子流行病学特征。方法采集成都市15所医院和6所疾病预防控制中心分离的不重复的2038株CoNS,按NCCLS推荐的方法和判断标准进行药敏试验。同时将CoNS作质粒和PFGE分型。结果(1)CoNS以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌为主,3种葡萄球菌占CoNS的82.2%,不同来源菌株的构成不完全一致。(2)CoNS对一种及一种以上抗菌药物有耐药性,耐药率为80.4%,对复方新诺明(SMZ)、青霉素G、氨苄青霉素、红霉素、TMP-SMZ和四环素等抗菌药物有较高的耐药性,对万古霉素、氟哌酸、丁胺卡那霉素较敏感。共检出25种耐药谱型,主要耐药谱型为氨苄青霉素+红霉素+青霉素G+SMZ、氨苄青霉素+庆大霉素+链霉素+四环素、氨苄青霉素+青霉素G+四环素、链霉素+红霉素+青霉素G+SMZ+TMP-SMZ、红霉素+新生霉素+青霉素G+SMZ+TMP-SMZ和青霉素G+SMZ+TMP-SMZ。不同来源CoNS的主要耐药谱型不完全一致,主要生化型别CoNS耐药性表现出一定的相似性。(3)CoNS质粒检出率为72.9%,共分为12个质粒谱型(Ⅰ-Ⅻ),以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主,3个型别占1485株携带质粒的CoNS的80.1%。(4)CoNS共有29种PFGE谱型和112个亚型,A、B、C、D、E等5型占总数的89.1%,在不同来源的CoNS中均为优势基因型。不同来源的CoNS中A型具有较相似的构成比且均为最主要的基因型,其它几种优势基因型的构成缺乏相似性。结论本地区CoNS耐药率相当高,多重耐药的现象普遍存在于不同类型的人群中。不同来源CoNS尤其是来自医务人员和患儿的CoNS有很高的同源性,存在着互相传播的潜在可能。     

Vitamin C in Cultured Human (HeLa) Cells: Lack of Effect on DNA Protection and Repair

Aims: Dietary antioxidants, including vitamin C, may be in part responsible for the cancer-preventive effects of fruits and vegetables. Human intervention trials with clinical endpoints have failed to confirm their protective effects, and mechanistic studies have given inconsistent results. Our aim was to investigate antioxidant/ pro-oxidant effects of vitamin C at the cellular level. Experimental approach: We have used the comet assay to investigate effects of vitamin C on DNA damage, antioxidant status, and DNA repair, in HeLa (human tumor) cells, and HPLC to measure uptake of vitamin C into cells. Results: Even at concentrations in the medium as high as 200 μM, vitamin C did not increase the background level of strand breaks or of oxidized purines in nuclear DNA. Vitamin C is taken up by HeLa cells and accumulates to mM levels. Preincubation of cells with vitamin C did not render them resistant to strand breakage induced by H₂O₂ or to purine oxidation by photosensitizer plus light. Vitamin C had no effect on the rate of repair of strand breaks or oxidized bases by HeLa cells. However, vitamin C at a concentration of less than 1 μM, or extract from cells preincubated for 6 h with vitamin C, was able to induce damage (strand breaks) in lysed, histone-depleted nuclei (nucleoids). Conclusion: In these cultured human cells, vitamin C displays neither antioxidant nor pro-oxidant properties; nor does it affect DNA strand break or base excision repair.     

实时荧光PCR法检测正常人脑膜炎奈瑟菌

目的建立一种简易快速的实时荧光PCR方法（Q—PCR）并用于检测正常人群中脑膜炎奈瑟菌。方法采集成都市正常人群的咽拭子1008份，分别采用培养分离法和Q—PCR法检测Nm。绪果Q—PCR法方法的灵敏度、特异性分别为100％和100％，阴性预测值（NPV）为100．00％，阳性预测值13．09％，检出限为250du／ml体系，Q—PCR方法检出时间为3h，培养法阳性结果需时4d。Q—PCR技术检测1008份正常人群的咽拭子中NmDNA的阳性率为8．33％，培养法为1．09％。结论Q—PCR技术的灵敏度高于培养法，Q—PCR法具有灵敏、特异、经济、快速的特点，可用于疾病的快速诊断，特别适合正常人群的带菌率调查。