星状神经节阻滞对福尔马林致痛兔脊髓P物质含量的影响

目的：观察星状神经节阻滞（SGB）对福尔马林致痛兔脊髓P物质（SP）含量的影响，探讨其治疗疼痛的可能机制。方法：健康成年日本大耳白兔在无菌操作下暴露右侧星状神经节，置入并固定硬膜外导管，命名其一端开口位于星状神经节附近，另一端自颈背部穿出，置管1周后，选择恢复健康者19只随机分为三组：假手术组（A组）5例，SGB组（B组）和对照组（C组）各7例，A组直接麻醉后灌注固定取脊髓颈段6－8（C6－8）和胸段6－8（T6－8），B组和C组用福尔马林皮下注射法建立急性疼痛模型，致痛1h后B组经导管注入0．25％布比卡因0．51ml,C组用等量生理盐水，观察1h后，同A组一样灌注固定取脊髓，用免疫组织化学检测脊髓SP含量的变化。结果：SP免疫阳性反应物集中分布在脊髓背角I，II层，B组和C组脊髓颈段SP的光密度（OD）值与A组相比均降低（P＜0．05，P＜0．01），B组脊髓颈段SP的OD值较C组显著升高（P＜0．05），三组间脊髓胸段内SP的OD值无明显差别（P＞0．05），结论：上肢皮下注射福尔马林可引起兔脊髓颈段SP含量降低，星状神经节阻滞可部分志这种现象，使SP含量升高，SP含量升高可能是其治疗疼痛性疾病的脊髓机制之一。     

鞘内吗啡对切口疼痛模型大鼠脊髓背角P物质的影响

目的研究鞘内(IT)吗啡对切口疼痛模型大鼠脊髓背角P物质(SP)的影响.方法雄性SD大鼠16只,随机分为四组(每组4只)假手术组(组Ⅰ)、术前30min IT 0.9%氯化钠20μl组(对照组,组Ⅱ)、术后30min IT吗啡5μg组(组Ⅲ)和术前30min IT吗啡5μg组(组Ⅳ).按Brennan法制成切口疼痛模型,以累积疼痛评分确定疼痛行为.免疫组织化学方法观察脊髓背角SP免疫反应(SP-LI).结果组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的累积疼痛评分均明显低于组Ⅱ(P＜0.01).组Ⅱ大鼠术侧脊髓背角浅层SP-LI物质积分光密度明显高于组Ⅰ及对侧(对照组0.62±0.07,假手术组0.40±0.09,P＜0.01);与组Ⅱ比较,组Ⅳ的大鼠术侧脊髓背角浅层SP-LI物质积分光密度(0.37±0.06)明显降低(P＜0.01),但两用药组间比较无显著差别.结论在大鼠切口疼痛模型中,术前IT吗啡的抗伤害作用与其抑制SP在脊髓背角的释放有关.     

大鼠椎骨错缝模型下丘脑及背根神经节P物质含量的实验研究

目的:检测腰椎椎骨错缝对大鼠下丘脑及背根神经节中P物质含量的影响。方法:选取120只体质量为350~450 g的SPF级雄性SD大鼠随机分为旋转固定组(RF组)、单纯固定组(SF组)和假手术组(Sham组)。RF组和SF组大鼠腰椎L4-L6节段植入的椎体外部连接固定装置,RF组大鼠使L5棘突向右侧旋转,造成L5棘突与L4和L6棘突的不共线;SF组大鼠单纯植入椎体外部连接固定装置不进行旋转。Sham组大鼠不植入椎体外部连接固定装置,只切开后缝合。分别于手术后1、4、8和12周结束时,检测各组大鼠下丘脑及背根神经节中P物质含量。结果:手术1、4、8周后,RF组和SF组大鼠下丘脑中P物质含量均低于Sham组大鼠(P<0.05);手术1、4、8、12周后,RF组和SF组大鼠背根神经节中P物质含量均高于Sham组大鼠(P<0.05);固定12周后,RF组和SF组大鼠下丘脑中P物质与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:椎骨错缝可抑制下丘脑中P物质的镇痛作用,促进背根神经节中P物质的合成和传递,从而引起或加剧疼痛。     

炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化

目的 评价炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化.方法 健康成年雄性SD大鼠120只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为两组(n=60):对照组(C组)和炎性痛组(F组).F组大鼠左侧后肢趾部皮下注射3％福尔马林0.1 ml,C组注射等容量的生理盐水.于注射后1h、1、2、3和7d时采用yon Frey纤毛测定左侧后爪机械痛阈.于各时点随机取12只大鼠处死后取损伤侧L5背根神经节和L4,5脊髓背角,分别采用免疫荧光标记法和Western blot法检测Nogo-A蛋白的表达.结果 与C组比较,F组大鼠注射后1h、1、2、3和7d时机械痛阈降低,注射后1h、2、3和7d时背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05).结论 背根神经节及脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调可能在福尔马林致大鼠炎性痛形成过程中发挥重要作用.     

可乐定对脊髓P物质释放的影响

目的：研究可乐定对大鼠脊髓Ｐ物质释放的影响，旨在探讨可乐定镇痛作用的脊髓途径。方法：２０只ＳＤ大白鼠随机分为可乐定组和对照组，各１０只。可乐定组大鼠腹腔注射可乐定４０μｇ，对照组注射等量生理盐水。取脊髓腰段多聚醛固定的冰冻切片。Ｐ物质免疫组化显示用过氧化物酶－抗过氧化物酶法（ＰＡＰ法）。结果：可乐定用药组的大鼠脊髓后角中外区及背外侧我光密度ＯＤ值较对照组显著增高，Ｐ物质免疫反应产物显著增多，以Ⅰ－     

背根神经节压迫对大鼠痛行为及脊髓背角内降钙素基因相关肽的影响

目的 建立有效的背根神经节慢性压迫模型，探讨大鼠痛行为及脊髓背角内降钙素基因相关肽的变化。方法 采用铬制1-0肠线通过椎间孔压迫大鼠L4、L5背根神经节制备压迫模型，术后观察缩爪阈值变化，用放射免疫分析方法测定脊髓背角中降钙素基因相关肽的含量。结果 压迫组术后痛敏明显，术后1周时达高峰，以后逐渐恢复，但到术后4周时仍未完全达到正常水平；假手术组术后痛敏恢复较快，于术后7d恢复至正常水平。压迫组背角内降钙素基因相关肽含量在术后5d及4周时均明显增高，与同组对侧、假手术组及对照组相比差异有显著性。光镜观察，压迫组术后5d压迫侧背根神经节出现明显的神经内膜水肿及神经元胞质水肿，到术后4周这种改变虽然仍存在，但明显减轻。结论 稳定可靠的背根神经节慢性压迫模型，受压侧脊髓背角中降钙素基因相关肽含量持续升高，与慢性痛行为一致。     

人神经生长因子β基因转染对糖尿病神经病理性痛大鼠背根神经节P物质表达的影响

目的 评价皮下转染重组腺病毒介导的人神经生长因子β(Ad-hNGFβ)基因对糖尿病神经病理性痛大鼠背根神经节P物质表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠,体重180 ～ 220 g,采用腹腔注射链脲霉素(STZ) 75 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病模型.取10只大鼠作为对照组(C组),不制备糖尿病模型;取75只糖尿病模型制备成功的大鼠,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=25):糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、Ad-hNGFβ基因治疗组(Ad-NGF组)和LacZ重组复制缺陷性腺病毒基因治疗组(Ad-LacZ组).Ad-NGF组和Ad-LacZ组分别于STZ注射后21 d且痛阈测定结束后双侧腹股沟皮下脂肪接种1.12× 1010 PFU Ad-hNGFβ 10μl和1.12× 1010 PFU Ad-LacZ 10μl.分别于STZ注射前、注射后21、35和49d时测定机械痛阈和热痛阈.于注射后49d时痛阈测定结束后采用免疫组化法测定背根神经节P物质的表达.结果 与C组比较,DNP组、Ad-NGF组和Ad-LacZ组注射后各时点机械痛阈和热痛阈降低,DNP组和Ad-LacZ组背根神经节P物质表达下调(P＜0.05);与DNP组比较,Ad-NGF组注射后49d时热痛阈升高,背根神经节P物质表达上调(P＜0.01),Ad-LacZ组各时点机械痛阈、热痛阈和背根神经节P物质表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ad-hNGF基因转染可能通过上调背根神经节P物质的表达在一定程度上减轻糖尿病大鼠神经病理性痛.     

硬膜外腔植入髓核对大鼠脊髓背根神经节SP和CGRP表达的影响

目的 观察硬膜外腔植入异体髓核对大鼠L6-S1,脊髓背根神经节细胞SP和CGRP表达的影响,以期为椎间盘源性疼痛发病机制提供细胞生物学基础.方法 18只雄性SD大鼠(体重260-280g)随机分为三组:脂肪组、髓核组、假手术组,每组n=6.另外3只雄性SD大鼠用来提供异体脂肪和髓核.术后第30d取L4-L6脊髓背根神经节和脊髓背角,采用免疫组织化学染色方法 观察髓核对脊髓背角和背根神经节细胞肽类神经递质SP和CGRP表达的影响.结果 术后30d脂肪组大鼠与假手术组相比,脊髓背角和背根神经节细胞SP和CGRP表达没有显著性差异(P>0.05);髓核组与脂肪组和假手术组相比脊髓背角和背根神经节细胞SP和CGRP表达显著增加(P<0.05).结论 硬膜外腔植入异体髓核可引起脊髓背根神经节细胞SP和CGRP表达增加.     

脊髓电刺激对坐骨神经损伤大鼠背根神经节神经元和脊髓神经元的保护作用

目的 观察脊髓电刺激对大鼠坐骨神经切断后背根神经节(DRG)神经元和脊髓神经元的影响.方法 建立大鼠坐骨神经损伤模型,随机分为实验组(n=15)和对照组(n=15);实验组行脊髓电刺激,对照组行假治疗.观察不同时期两组大鼠DRG神经元和脊髓神经元计数和超微结构;测定再生神经纤维髓鞘厚度及传导速度(NCV).结果 术后1、4、8周,实验组DRG神经元计数为15.74±1.47、14.17±1.20、13.33±0.47;对照组为10.99±1.38、10.33±0.78、9.20±0.56两者差异有统计学意义(P＜0.05).实验组脊髓神经元计数为17.16±0.50、15.86±1.27、11.55±0.95;对照组为12.16±0.92、10.27±0.44、9.24±0.78,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脊髓电刺激对周围神经损伤后DRG神经元和脊髓神经元具有保护作用.     

姜黄素对糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓和背根神经节神经细胞凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓和背根神经节(DRG)神经细胞凋亡的影响.方法雄性SD大鼠108只,体重200～230 g,采用腹腔注射链唑霉素70 mg/kg的方法建立大鼠DNP模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=27),正常对照组(C组):不制备DNP模型;DNP组;溶剂对照组(SC组)和姜黄素组(Cur组):于腹腔注射链唑霉素后14 d分别腹腔注射玉米油或姜黄素100 mg/kg(25 mg/ml),1次/d,连续2周.于链唑霉素给药前2 d、给药后14 d、姜黄素给药后3、7、14 d时测定机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);于姜黄素给药后3、7、14 d时分别采用免疫组化法和Western blot法测定脊髓和DRG caspase-3和Bcl-2的表达水平,并测定神经细胞的凋亡率.结果 与C组比较,DNP组、SC组和Cur组MWT降低,TWL缩短,脊髓和DRG神经细胞凋亡率升高,caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调(P＜0.05);与DNP组比较,Cur组MWT升高,TWL延长,脊髓和DBG神经细胞凋亡率降低,caspase-3表达下调,Bcl-2表达上调(P＜0.05),SC组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 姜黄素可通过抑制脊髓和DRG神经细胞凋亡,从而减轻大鼠DNP,其机制与抑制caspase-3水平、增强Bcl-2水平有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of curcumin on the apoptosis in spinal cord and dorsal root ganglion neurons in a rat model of diabetic neuropathic pain (DNP) . Methods One hundred and eight male SD rats weighing 200-230 g were randomly divided into 4 groups ( n = 27 each): control group (group C), DNP group, solvent control group (group SC) and curcumin group (group Cur) . Diabetes was induced with intraperitoneal streptozocin 70 mg/kg. Successful induction of diabetes was defined as blood glucose ＞ 16.7 mmol/L. Curcumin and com oil 100 mg/kg (23 mg/ml) were given intraperitoneally once a day for 14 consecutive days starting from 14 days after administration of streptozocin in Cur and SC groups respectively. Mechanical paw withdrawal threshold (MWT) and thermal paw withdrawal latency (TWL) were measured 2 d before and 14 d after streptozocin injection and 3, 7 and 14 d after curcumin injection. The pain threshold measured at 14 d after administration of streptozocin decreased by more than 15% of the baseline in all the rats. The expression of caspase-3 and Bcl-2 in spinal cord and dorsal root ganglion was determined at 3, 7 and 14 d after curcumin injection by immuno-histochemistry and Western blot, and the neuronal apoptosis rate was determined by TUNEL. Results Compared with group C, MWT and Bcl-2 expression were significantly decreased, TWL was significantly shortened, the neurona lapoptosis rate and caspase-3 expression were significantly increased in DNP, SC and Cur groups ( P ＜ 0.05).Compared with group DNP, MWT and Bcl-2 expression were significantly increased, TWL was significantly prolonged, the neuronal apoptosis rate and caspase-3 expression were significantly decreased in Cur group ( P ＜0.05) . There was no significant difference in the parameters mentioned above between DNP and SC groups ( P ＞0.05). Conclusion Curcumin can attenuate DNP by inhibiting the apoptosis in spinal dorsal hom and dorsal root ganglion neurons in rats, and the inhibition of caspase-3 expression and increase in Bcl-2 expression are involved in the mechanism.     

大鼠急性颈脊髓损伤后P物质与肺水肿的关系

目的 :探讨大鼠急性颈脊髓损伤后P物质与肺水肿的关系。方法 :成年Wistar大鼠40只,体重240~250g,雌雄不限,随机分为实验组和对照组,每组20只,每组又分为造模后24h、3d、1周、2周共4个时间点,每个时间点5只大鼠。实验组采用改良Allen′s打击法制作大鼠C7急性脊髓损伤(SCI)模型,打击力度为10×2.5g.cm;对照组只暴露C7段脊髓。在造模后相应时间点处死大鼠,通过光学显微镜观察肺组织的病理学变化,并检测各时间点两组大鼠血清和肺泡灌洗液中P物质含量和蛋白浓度,计算肺通透指数(肺泡灌洗液蛋白浓度/血清蛋白浓度)。结果:实验组大鼠急性SCI后24h肺组织可见肺毛细血管充血,肺泡内分泌物增多、红细胞增加;伤后3d达到高峰;伤后1周肺泡内水肿、出血较3d时减轻;伤后2周明显好转;对照组肺泡透亮,无水肿和出血。实验组伤后24h血清和肺泡灌洗液中P物质升高,伤后3d达高峰,伤后1周开始下降,伤后2周明显下降;实验组伤后24h、3d、1周血清及伤后24h、3d肺泡灌洗液中P物质含量与对照组比较有显著性差异(P<0.05),伤后2周两组比较无显著性差异(P>0.05)。肺通透指数的变化与P物质的变化趋势相同。结论:大鼠急性颈SCI后肺泡灌洗液及血清中P物质含量变化与肺水肿程度变化同步,P物质可能参与了急性颈SCI后肺水肿的形成过程。     

不同传入神经损伤对大鼠神经病理性痛形成的影响及其与脊髓和背根神经节BDNF的关系

目的 探讨不同传入神经损伤对大鼠神经病理性痛形成的影响及其与脊髓和背根神经节(DRG)脑源性神经营养因子(BDNF)的关系.方法 雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、腓肠神经损伤组(SUR组)和腓肠肌-比目鱼肌(GS)神经损伤组(GS组).SUR组和GS组分别暴露腓肠神经和GS神经并剪断,S组仅暴露腓肠神经和GS神经而不剪断.于术前1 d和术后3、7 d时测定大鼠机械痛阈.于术后7 d痛阈测定结束后,取术侧L5的DRG和脊髓节段,测定脊髓背角的BDNF表达,计算BDNF阳性神经元和受损神经元(ATF-3阳性神经元)占总DRG神经元的百分比和ATF-3阳性神经元中BDNF阳性神经元的百分比.结果 与术前1 d时比较,GS组术后各时点机械痛阈降低(P＜0.01).与S组和SUR组比较,GS组机械痛阈降低,脊髓背角BDNF表达上调,BDNF阳性神经元占总DRG神经元的百分比升高(P＜0.01);S组和SUR组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).与SUR组比较,GS组ATF-3阳性神经元占总DRG神经元的百分比差异无统计学意义(P＞0.05),而ATF-3阳性神经元中BDNF阳性神经元的百分比升高(P＜0.05).结论 切断来自大鼠骨骼肌的传入神经可形成神经病理性痛,其原因与上调DRG和脊髓背角中BDNF的表达有关;而切断来自皮肤的传入神经则不会形成神经病理性痛.     

交感神经对慢性卡压的臂丛神经背根节中P物质mRNA表达的影响

目的 研究交感神经不同功能状态对周围神经慢性卡压伤产生疼痛是否有不同的影响.方法 雄性SD大鼠48只,制作臂丛下干慢性卡压模型,分成A1、B1、C1、A2、B2、C26组,每组8只.A1(对照组)、B1(封闭组)、C1(去交感组)3组造模术后满3个月取卡压侧C8T1背根节;A2(对照组)、B2(封闭组)、C2(去交感组)造模术后满3个月去除卡压,继续饲养1个月后取卡压侧C8T1背根节.以RT-PCR方法检测背根节中P物质mRNA含量.结果 A1、B1、C1三组C8T1背根节中P物质mRNA相对含量均值分别为(3.620±0.830)×10-2、(2.945±0.724)×10-2、(2.239±0.734)×10-2,经方差分析,差异有统计学意义(P＜0.05);A2、B2、C2三组C8T1背根节中P物质mRNA相对含量均值分别为:(3.163±1.026)×10-2、(2.355±0.680)×10-2、(1.487±0.802)×10-2,三者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 周围神经慢性卡压伤产生的疼痛程度受交感神经影响,交感神经功能越低,疼痛程度越轻;行交感阻滞或切除有助于周围神经卡压疾病去卡压后疼痛的缓解.

Abstract：

Objective To investigate the effect of different function of sympathetic nerve on the pain of peripheral nerve chronic compression. Methods Forty-eight male Sprague-Dawley rats were made into lower trunk chronic compression models and divided into 6 groups (A1,B1,C1,A2,B2,C2) with 8 rats per group. The C8T1 dorsal root ganglions of the compressed sides of group A1 (control group), B1 (sympathetic block group)and C1 (de-sympathetic group) were harvested 3 months after compression surgery. The compressed lower trunks of group A2 (control group), B2(sympathetic block group)and C2(de-sympathetic group)were decompressed 3 months after compression surgery and bred for another month and then the C8T1 dorsal root ganglions of the compressed sides were harvested. The levels of substance P mRNA in the C8T1 dorsal root ganglions were tested with RT-PCR technique. Results the mean relative levels of substance P mRNA of group A1, B1 and C1 were (3.620 ± 0.830) × 10-2, (2.945 ± 0.724) × 10-2, (2.239 ± 0.734) × 10-2, respectively, with a significant difference (P = 0.006) and those of group A2, B2 and C2 were (3.163 ± 1.026) × 10-2, (2.355 ± 0.680) × 10-2,(1.487 ± 0.802) × 10-2, the difference among which was statistically significant (P = 0.003). Conclusion The pain of peripheral nerve chronic compression is affected by sympathetic function. The more lower the sympathetic function is, the more light the pain is. Sympathetic blockage or resection helps to relieve the pain of peripheral nerve compression disease after being decompressed.     

背根神经节P2X3受体在大鼠切口痛形成中的作用

目的 评价背根神经节P2X3受体在大鼠切口痛形成中的作用.方法 健康雄性SD大鼠24只,体重200～220 g,随机分为3组(n=8):对照组(C组)、切口痛组(IP组)和P2X3受体拮抗剂组(A组).IP组和A组制备大鼠左后趾部切口痛模型.模型建立后30 min,A组左后爪底皮下注射P2X3受体特异性拮抗剂TNP-ATP 200 nmol,C组和IP组注射等容量生理盐水.采用累积疼痛评分法,评定注药后1 h内大鼠疼痛行为学变化.注药后2 h时处死大鼠,取背根神经节,测定P2 X3受体表达和细胞内Ca2+浓度.结果 与C组比较,IP组和A组累积疼痛评分和Ca2+浓度升高,P2X3受体表达上调(P＜0.05);与IP组比较,A组累积疼痛评分和Ca2+浓度降低,P2X3受体表达下调(P＜0.05).结论 背根神经节P2X3受体参与了大鼠切口痛的形成,其机制可能与升高细胞内Ca2+浓度有关.     

神经病理性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化

目的 评价神经病理性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化.方法 健康成年雄性SD大鼠72只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=24):对照组(C组)、假手术组(S组)和神经病理性痛组(NP组).C组不做任何处理,NP组采用结扎并剪断胫神经和腓总神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型,S组仅切皮暴露坐骨神经但不结扎和剪断神经.于结扎后1、7、14、21 d时采用yon Frey丝测定大鼠机械痛阈.于各时点随机取6只大鼠处死后取损伤侧L5背根神经节和L4,5脊髓,采用免疫荧光标记法测定Nogo-A蛋白的表达(n=3),采用Westernblot法测定Nogo-A蛋白的表达(n=3).结果 与C组和S组比较,NP组大鼠结扎后7、14、21 d时机械痛阈降低,结扎后7、14 d时背根神经节Nogo-A蛋白表达下调,结扎后14、21 d时脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05).结论 背根神经节及脊髓背角Nogo-A蛋白可能在外周神经损伤诱发大鼠神经病理性痛过程中发挥重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the changes in the expression of Nogo-A protein in the dorsal root ganglion (DRG) and spinal dorsal horn in a rat model of neuropathic pain (NP) .Methods Seventy-two male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 3 groups ( n = 24 each) : control group (group C) , sham operation group (group S) and NP group. NP was induced by ligation and severance of tibial and common fibular nerves according to the technique described by Isabelle et al. The mechanical withdrawal threshold (MWT) to von Frey filament stimulation was measured at 1, 7, 14 and 21 days after ligation. Six rats in each group were randomly selected at each time point and sacrificed (3 for determination of Nogo-A protein expression by immunofluorescence, 3 for determination of Nogo-A protein expression by Western blot) . The L5 DRG and L4,5 segment of spinal cord on the injured side were removed for determination of Nogo-A protein expression by immunofluorescence and Western blot. Results Compared with the groups C and S, MWT was significantly decreased at 7, 14 and 21 days after ligation, the expression of Nogo-A protein in the DRG was down-regulated at 7 and 14 days after ligation and the expression of Nogo-A protein in the spinal dorsal horn was up-regulated at 14 and 21 days after ligation ( P ＜0.05) .Conclusion The Nogo-A protein in the DRG and spinal dorsal horn may play an important role in peripheral nerve injury-induced NP in rats.