三氧化二砷联合干扰素抑制人表皮癌细胞株A431的生长

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合干扰素（INF）在不同浓度、不同作用时间对人表皮癌细胞细胞株A431增殖的抑制作用,筛选两药应用的最佳作用时间和剂量。方法通过对A431细胞常规传代培养,采用MTT比色分析法检测不同浓度As2O3、INF及二者联合对人A431细胞增殖抑制的影响;采用流式细胞分析术,检测人A431细胞的细胞周期变化和凋亡的情况。结果与阴性对照组比较,As2O3在1～10μmol/L浓度范围内对A431细胞有明显的增殖抑制作用,在24～72h对人A431细胞的抑制作用随着浓度的增加而增强,且以10μmol/L浓度组作用72h的抑制率最高（P〈0.01）。与阴性对照组比较,INF在一定浓度和时间范围内对A431细胞作用也有相似结果。As2O3能诱导细胞凋亡,随着时间的延长和浓度的增加凋亡细胞数目增加。结论 As2O3和INF均对人A431细胞有明显的抑制作用,且呈现剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系,As2O3和INF均能使S期延滞,并提高S期细胞比例,两药联合有协同效应。As2O3诱导A431细胞凋亡的作用显著,但INF能强化As2O3诱导A431细胞凋亡的作用。     

色素上皮衍生因子在A431细胞的表达及对其增殖的影响

目的明确色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor, PEDF）在A431细胞的表达情况以及对其增殖影响。方法采用RT-PCR和Western—blot分别检测A431细胞PEDFmRNA和蛋白的表达：MTT方法检测PEDF对A431细胞增殖的影响。结果A431细胞在mRNA和蛋白水平均可检测到PEDF的表达。此外,100gg/ml的PEDF可以抑制A431细胞的增殖。结论PEDF抑制A431细胞增殖,有望用于皮肤鳞癌的治疗。     

肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默对Survivin表达的影响

目的 研究肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默(即基因不表达或表达量极低)对Survivin表达的影响.方法 应用siRNA技术对肝细胞癌细胞株HepG2细胞中甲胎蛋白基因的表达进行下调,应用ELISA法(即酶联免疫吸附测定法)对转染前后上清液甲胎蛋白的浓度进行测定,应用MTT比色法对转染前后细胞存活和生长情况进行检测,应用流式细胞术对细胞凋亡率进行分析,应用逆转录PCR技术对转染前后细胞Survivin mRNA水平进行检测.结果 与转染前相比,转染后研究组的上清液中甲胎蛋白的浓度均发生逐渐降低,且转染48 h后,观察组的下降更为明显.观察组的吸光度明显逐渐下降,肝癌细胞生长活性减弱了45.23％;HepG2细胞的凋亡率增至36.8％,较转染前升高了24.4％,HepG2细胞中Survivin mRNA表达下降了74.32％.对于上述情况,空白组和对照组均未见明显的变化.结论 肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默可抑制Survivin mRNA表达,从而降低肝癌细胞的生长活性以及增加细胞的凋亡率.     

三氧化二砷对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响

目的观察不同浓度的三氧化二砷对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μmol.L-1)的三氧化二砷作用于三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48、72 h后的细胞增殖率,Western blot检测不同浓度的三氧化二砷作用于MDA-MB-231细胞24 h的PCNA水平。结果不同浓度的三氧化二砷作用于三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48、72 h后,随着时间的推移和浓度的升高,细胞增殖抑制率增加,有浓度和时间依赖性,以1.0μmol.L-1三氧化二砷作用最明显,Western blot检测显示,与对照组比较,随着浓度的升高,PCNA蛋白降低,其中以1.0μmol.L-1三氧化二砷作用后最明显。结论三氧化二砷能促进MDA-MB-231细胞的凋亡,其机制可能与下调PCNA表达的促凋亡途径有关。     

Survivin在肺癌细胞定位表达与临床病理特征的关系

目的：探讨survivin在肺癌细胞定化表达与临床病理特衙的关系，方法：以免疫组化方法测定2004年1月～2007年5月手术获得的50例肺癌标本survivin细胞定位情况，用SPSS软件X^2检验分析survivin细胞定位与患者年龄、性别、癌组织学类型、分化程度、TNM分期、淋巴结转移的关系。结果：50例肺癌标本中snrvivin总阳性率为62．0％（31／50），其中单纯胞质阳性占51．61％（16／31），单纯胞核阳性占25．8％（8／31），胞质和胞核共同阳性者占22．58％（7／31）；survivin在肺癌细胞定位表达与淋巴结转移比较差异有显著性（P〈0．005）；而与患者年龄、性别、癌组织学类型、分化程度、TNM分期比较差异无显著性（P＞0．005）。结论：survivin在肺癌细胞定位表达与肺癌淋巴结转移有关。     

三氧化二砷对胃癌细胞SGC7901/ADR GST-π和TopoⅡ表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素(ADM)耐药性的逆转作用和对GSTπ和TopoⅡ表达的影响。方法用MTT法检测As2O3的非细胞毒性浓度和SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内药物浓度及用免疫组织化学法检测细胞GSTπ和TopoⅡ的表达。结果与结论0.4~0.8μmol.L-1As2O3对耐药细胞SGC7901/ADR无明显毒性(P<0.01),As2O3可下调GSTπ表达,提高SGC7901/ADR细胞内ADM浓度,部分逆转SGC7901/ADR细胞对ADM的耐药性。     

沙樱桃黄酮对人A-704细胞毒性及增殖的影响

目的探讨沙樱桃黄酮对人A-704(肾癌)细胞毒性作用及其对细胞增殖的影响,为沙樱桃的应用和开发提供实验依据。方法体外培养人A-704细胞沙樱桃黄酮,用台盼蓝法检测对细胞毒性作用;用克隆形成法测定对细胞分裂增殖的影响;用X射线能量色散谱仪分析对细胞内微量元素含量的影响。结果①台盼蓝法测定结果显示,给药后培养6h,沙樱桃黄酮(0.1,0.5,5mg.L-1)组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组活细胞数比对照组分别减少了33.8%、35.8%、60.8%和40.3%,到18h减少了57.3%、80.1%、99%和59.6%,差异有显著性(P<0.01)。沙樱桃黄酮组间比较,差异有显著性(P<0.01)。②克隆形成法测定结果表明,沙樱桃黄酮(0.1,0.5,5mg.L-1)组和5-FU组克隆数比对照组减少了40.4%、47.6%、83.6%和43.4%,差异有显著性(P<0.01)。③X射线能量色散谱仪分析结果表明,细胞内Ca2+离子水平随给药浓度的增加而升高,K+和P3+离子浓度则降低,与对照组比,差异有显著性(P<0.01)。结论沙樱桃黄酮对人A-704细胞具有明显的毒性作用,其作用与抑制细胞分裂,改变细胞膜结构,使细胞内游离Ca2+增加活化细胞内核酸内切酶,引起细胞DNA损伤有关。     

三氧化二砷诱导子宫内膜癌Hec-1B细胞凋亡及对Survivin基因表达的影响

<正>本研究的目的是了解三氧化二砷(As2O3)在体外能否诱导子宫内膜癌细胞株Hec-1B凋亡及其机制,从而为开辟子宫内膜癌新的化疗药物提供理论基础。     

三氧化二砷对人胃癌细胞凋亡的作用及对肺耐药蛋白表达的影响

目的 研究亚砷酸(As2O3)对人胃癌细胞株MGC803的凋亡诱导作用及对肺耐药蛋白基因(LRP)表达的影响.方法 选用人胃癌MGC803细胞系,运用体外细胞培养法,流式细胞术检测As2O3对人胃癌细胞的诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应方法检测LRP的表达情况.结果 不同浓度的As2O3均可诱导凋亡.1.0、2.0 μmol·L-1的As2O3,可下调LRP的表达.结论 As2O3具有诱导胃癌细胞凋亡的作用,适当的浓度可下调LRP的表达.     

三氧化二砷抑制肝癌细胞增殖的体内实验研究

目的：探讨As2O3对小鼠H22肝癌细胞增殖的抑制作用。方法：建立小鼠H22肝癌实体型移植瘤模型，腹腔应用As2O3治疗后，通过PCNA及CyclinD1免疫组化检测指标反映细胞增殖改变。结果：As2O3能够下调PCNA及CyclinD1蛋白的表达。结论：As2O3对小鼠肝癌细胞的增殖具有明显的抑制作用，具有治疗肝癌潜在价值。     

亚砷酸对人骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究亚砷酸（ATO）对人骨髓间充质干细胞（MSC）增殖及凋亡的影响。方法：通过正常志愿者髂后上棘穿刺获得MSC,体外培养传代,取第3代细胞鉴定后进行实验。纯化的MSC与1、5、10μmol/L的ATO共孵育,分别在24、48、72h时采用HE染色观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡情况。结果：ATO可引起MSC形态明显改变;抑制MSC增殖,不同浓度（1、5、10μmol/L）ATO对MSC作用72h时的细胞增殖抑制率分别为（66.3±2.2）%、（81.1±1.7）%、（90.0±2.2）%;FCM检测表明ATO可诱导MSC凋亡,10μmol/L的ATO处理72h时引起（68.37±2.93）%的凋亡率。这3种作用均随ATO浓度及作用时间的增加而增强。结论：ATO可在体外抑制MSC增殖,并促进其凋亡。     

三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞作用的研究

目的以人脐静脉内皮细胞作为血管新生内皮细胞的模拟物,通过研究As2O3对人脐静脉内皮细胞的影响,探讨As2O3的抗血管新生作用机制。方法分离和培养人脐静脉内皮细胞,以不同浓度和时间的As2O3和VEGF作用于脐静脉内皮细胞,应用流式细胞技术测定As2O3和VEGF对脐静脉内皮细胞增殖、细胞凋亡和癌基因bcl-2表达的影响。结果As2O3以时间和剂量依赖的方式抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制癌基因bcl-2表达,而VEGF可拮抗As2O3的部分作用。结论As2O3可以通过直接作用于内皮细胞而抑制血管新生。     

三氧化二砷诱导宫颈癌细胞凋亡的研究

目的:研究三氧化二砷能否诱导宫颈癌细胞凋亡。方法:AnnexinV/PI双染,流式法检测早期凋亡;倒置显微镜观察、HE染色检测凋亡过程的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡晚期出现的DNALadder。结论:适合浓度的三氧化二砷可以诱导宫颈癌细胞发生明显凋亡。     

三氧化二砷白蛋白纳米微球的制备及体外释药特性

目的:制备三氧化二砷白蛋白纳米微球(As_2O_3-BSA-NS)并鉴定其体外释放特性。方法:通过交联固化的方法制备三氧化二砷蛋白徽球。以粒子(粒径<1μm)分布百分数、载药量和包封率为指标设立总的优化指数(DF)。选择因素有油相/水相比、高速分散速度、BSA浓度和搅拌固化时间,按正交设计优化制备工艺。用体外释药方法研究其释放特性。结果:4个因素中,高速分散速度对总优化指数影响最大(P<0.01),其次是BSA浓度和油相/水相比(P<0.05),搅拌固化时间对指数几乎没有影响(P>0.05)。体外释药实验证实三氧化二砷蛋白微球释药速度明显慢于单纯的三氧化二砷。结论:使用优化的交联固化的方法可以制备出符合要求的三氧化二砷蛋白微球,其具有明显的缓释功能。     

Survivin与肝癌细胞增殖和凋亡相关性及其临床病理意义

目的 分析Survivin表达与肝癌细胞增殖和凋亡间的相互关系,探讨其临床病理学意义.方法 应用免疫组化(SP)法检测44例肝细胞癌(HCC)组织、25例癌旁相应组织、9例正常肝组织中Survivin、Ki-67蛋白的表达情况,用TUNEL法检测其凋亡细胞,并计算增殖指数(PI)和凋亡指数(AI).结果 HCC组织中Survivin蛋白阳性表达率为68.18%,癌旁组织、正常肝组织中均无表达,3组比较差异有统计学意义(P<0.01).Survivin表达与脉管内瘤栓(P<0.05)、组织学分级(P<0.05)显著相关,与其他临床病理特征无相关性.HCC标本中Survivin阳性表达病例平均PI值为(35±16)%,阴性表达者平均PI值为(16±10)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).HCC标本中Survivin阳性表达病例平均AI值为(3.2±1.5)%,阴性表达者平均AI值(5.2±2.2)%,2组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 Survivin在HCC中高表达,与HCC患者预后相关.Survivin通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的方式共同影响肝癌的生物学特性.     

三氧化二砷对成纤维细胞的生长抑制及细胞周期的影响

目的探讨三氧化二砷(AS2O3)对成纤维细胞的增殖及细胞周期的影响。方法用含AS2O3浓度分别为0、2、4μmol/L的培养液分别作用于成纤维细胞,24 h和48 h后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布。结果 AS2O3可显著抑制成纤维细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P<0.01);AS2O3可使细胞周期G0/G1期比例增加(P<0.01),G2/M期减少(P<0.01)。结论 AS2O3具有抑制成纤维细胞的增殖及阻止细胞周期进展的作用。