人血清心脏肌钙蛋白I定量和定性测定比较

目的 比较心脏肌钙蛋白I(cTnI)定量和定性测定方法,评价其临床检测意义。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和固相层析免疫法(敏感阈值0.2ng/ml)对517份人血清标本分别进行cTnI定量和定性测定。结果定性分析cTnI阴性组、弱阳性组、阳性组和强阳性组其定量测定cTnI平均浓度分别为0.1 95、0.658、3.580和53.730ng/ml。两法总符合率为94.39(488/517),相对特异性91.35％(169/185),相对敏感性96.08％(319,/332)。固相层析免疫法18次重复测定四组已知浓度标本总符合率均100％;ELISA法测定结果变异系数在10％左右,所测范围可由1×10-2mg/ml至1×102ng/ml,测定范围线性关系良好。结论 固相层析免疫法和ELISA法测定cTnI,两法结果较为符合,均有较好的准确度。前者稳定性较好,且操作更为简便快速,但对病情和疗效的观察有一定的限制。ELISA法检测结果明确,测定范围广,有助于病情和疗效观察,但精确度稍差。认为两法用于cTnI临床检测各有其长处,须把好试剂质量关和注重科学性。     

时间分辨荧光免疫分析法和酶联免疫吸附实验法测定乙型肝炎病毒大蛋白的方法学比较

目的对时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测乙型肝炎患者血清中病毒大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,HBV-LP)进行方法学比较。方法收集30例正常体检血清标本作为阴性对照和150例慢性乙型肝炎患者血清标本,利用ELISA法检测HBV-LP,将其中70例阳性标本作为阳性样本,70例阴性标本作为阴性样本,再分别采用TRFIA法检测HBV-LP,对二者的灵敏度、特异度、一致性、检测线性范围、精密度、相关性及两种试剂盒的稳定性进行比较。其中TRFIA与ELISA结果不一致的12例标本采用PCR法进行验证。结果TRFIA检测HBV-LP的最小测定值为0.1 ng/ml,ELISA检测HBV-LP的最小测定值为2.5 ng/ml,二者的特异度均为100%。TRFIA和ELISA检测HBV-LP的Kappa值为0.83。12例ELISA和TRFIA检测不一致的标本,经PCR验证后有10例HBV DNA103拷贝数。TRFIA试剂检测的线性范围在0.625~10 252 ng/ml之间,ELISA试剂盒检测的线性范围在5~1 281.6 ng/ml。TRFIA法检测高、中、低3个浓度水平的批内CV平均为6.10%,ELISA法的批内CV平均为8.98%。TRFIA批间CV平均为6.91%,ELISA的批间CV平均为10.45%。TRFIA试剂盒的结合下降率为6.61%,ELISA试剂盒的结合下降率为23.59%。结论 TRFIA与ELISA具有高度的一致性,但是两者相比,前者有更高的灵敏度和精密度,且TRFIA试剂盒的稳定性更好。     

cTnI定量检测对不稳定性心绞痛患者冠脉病变程度和预后的判断价值

目的探讨不稳定性心绞痛(UAP)患者cTnI定量检测同冠脉病变数量、程度和预后之间的关系.方法不稳定性心绞痛患者68例,采用美国DPC公司全自动化学发光免疫检测系统及试剂进行血清cTnI定量检测、CK-MB质量试验.并行冠脉造影术.随访观察30天后心脏事件的发生.结果 68例UAP患者中,A组26例(占38.2%),cTnI≥0.4 ng/ml.B组42例(占61.8%),cTnI＜0.4 ng/ml.同步测定CK-MB质量,二组间差异无显著性.A组中C型病变、三支病变、左主干受累和高度狭窄20例(占76.9%),明显高于B组9例(占21.4%,P＜0.05).A组Braunwald分级ⅢA或ⅢB者23例(占88.5%),B组仅3例(占7.1%),明显高于B组(P＜0.001).A组30天内发生心脏事件14例(占53.8%),明显高于B组4例(占9.5%,P＜0.01).结论化学发光免疫分析法cTnI定量检测同冠状动脉病变数量及严重程度、临床Braunwald分级有密切关系.并对判断不稳定性心绞痛患者预后有一定的预测价值.     

血清肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶同工酶对急性心肌梗死诊断价值的对比研究

目的对比研究血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)对急心肌梗死(AMI)的诊断价值.方法采用化学发光法定量检测17例AMI、14例不稳定性心绞痛(UA)、9例陈旧性心肌梗死(OMI)患者血清中的cTnI及CK-MB.结果17例AMI患者cTnI浓度均大于1.5ng/ml,11例UA及9例OMI患者cTnI浓度小于1..5ng/ml,3例UA患者大于1.5mg/ml.13例AMI、5例UA和1例OMI患者CK-MB浓度大于5.0 ng/ml,其余患者CK-MB浓度均小于5.0 ng/ml.cTnI诊断AMI的敏感性为100%,特异性为86..96%,阳性预测价值为85%,阴性预测价值为100%,正确率为92.5%;CK-MB诊断AMI的敏感性为76.47%,特异性为73.91%,阳性预测价值为68.42%,阴性预测价值为80.95%,正确率为75%.结论cTnI对急性心肌梗死的诊断价值优于CK-MB.     

快速全血心肌肌钙蛋白Ⅰ检测床边诊断急性心肌梗死

AMI组80例发病后12h内入院。入院后即刻、4、8、24、48、168h采静脉血用固相层析免疫分析技术定性检测心肌肌钙蛋白(cTnI)。结果:入院后即刻cTnI阳性率95％,其余各时点阳性率均100％。心衰组30例,非心脏病组30例各时点cTnI均阴性。cTnI     

cTnI自身抗体对两种cTnI检测方法检测结果的影响

目的:比较心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗体结合位点不同的两种免疫分析仪检测cTnI的差异,观察cTnI自身抗体对急性心肌梗死(AMI)患者cTnI检测结果的影响。方法:采用AQT90快速免疫分析仪的时间分辨荧光免疫法(2个捕获cTnI抗体位点之一处于cTnI分子稳定区中间片断之外,不受cTnI自身抗体干扰,总的来说受cT-nI自身抗体干扰较少)和Centaur CP全自动免疫系统的化学发光法(2个捕获cTnI抗体位点都处于cTnI分子稳定区中间片断,受cTnI自身抗体干扰较多),分别对36例AMI患者血浆中cTnI的含量进行检测,并以酶联免疫吸附法(ELISA)对这些患者血浆cTnI自身抗体进行检测。结果:36例AMI患者AQT分析仪cTnI测定值(2.492±5.91μg/L)高于CP分析仪的(1.934±6.06μg/L),但不显著(P>0.05)。按两种分析仪测定值的差异分AQT>CP组(20例),和AQTCP组的cTnI自身抗体浓度(2465.0±1706.4)pg/ml,AQT的cTnI测值为(4.64±7.97)μg/L,高于CP测值(3.70±8.48),但P>0.05;而AQTCP组,P<0.001,AQT仪,CP仪的cTnI测值分别为(0.59±0.44)μg/L,(0.68±0.54)μg/L,二者非常接近,无显著差异(P>0.05)。结论:结果说明cTnI自身抗体浓度对于cTnI测定值有显著影响,于自身抗体浓度高时,AQT法受自身抗体浓度影响小,其cTnI测定值高于CP仪的cTnI测定值;于自身抗体浓度不高时,两种仪器测定的cTnI值非常接近,无显著差异。     

急性心肌梗塞时血清心脏肌钙蛋白Ⅰ的测定及临床意义

测定急性心肌梗塞(AMI)病人血清心脏肌钙蛋白I(cTnI)和心肌酶学水平,以探讨其诊断AMI价值.方法:cTnI和心肌酶学分别以固相免疫法析法和酸法测定.结果:50例AMI病人cTnI阳性率98.00%较高血压病[EH]患者(0/21)和正常人(0/43)显著升高(P约<0.0001).31例AMI cTnI高阳性者心肌酶学敏感性83.87%与cTnI近似(P=0.103),而在18例AMI cTnI低阳性者中仅22.22%,较cTnI差异显著(P<0.0001).15例AMI cTnI高阳性者于发病后2天cTnI和心肌酶阳性率较高,7～10天cTnI仍有较高的阳性率(86.67%),但后者显著下降(20.00%)并于10天后恢复正常.cTnI阳性率10d后始明显下降(36.36%),少数持续3周.结论:cTnI诊断AMI具高度特异性和敏感性,对AMI微小心肌损伤和中、晚期诊断cTnI测定优于心肌酶学.     

巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价

目的建立快速、简便诊断巨片形吸虫病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取巨片形吸虫总RNA,通过RT-PCR获得FgCL1-YN基因片段,并克隆入pET28a(+)表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白(r FgCL1-YN);将r FgCL1-YN和羊抗鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜的适宜位置作为检测带和质控带,以胶体金标记抗人IgG4抗体的鼠单抗作为检测试剂,制备检测特异性IgG4型抗体的免疫层析试条。用该试条检测巨片形吸虫病患者(30份)、日本血吸虫病患者(15份)以及健康人(32份)血清,评价其诊断价值,同时用ELISA法进行平行检测作为对照。结果试条检测法的敏感性为100%(30/30),特异性为97.9%(46/47),总体符合率为98.7%(76/77)。ELISA法检测的敏感性、特异性和总体符合率分别100%(30/30)、100%(47/47)和100%(77/77)。试条法与ELISA法的敏感性、特异性和总体符合率,经四格表确切概率法检验,P值分别为1、0.5和0.5,全部大于0.05。显示,试条法与ELISA法检测巨片形吸虫病患者血清的结果高度一致。另外,试条法的检测时间为10min,血清用量低于10μL,且具较高的敏感度。结论以r FgCL1-YN建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测巨片形吸虫病具有较高的诊断价值。     

化学发光免疫分析检测丙肝病毒抗体在血液筛查中的应用评价

目的:评价化学发光免疫分析(CLIA)测定丙肝病毒(HCV)抗体的方法学性能在血液筛查中的应用。方法:以辣根过氧化物酶(HRP)为酶标记物,以鲁米诺为发光底物,采用双抗原夹心法检测血样中的抗-HCV。建立抗-HCV化学发光酶免疫分析方法,与常规使用的抗-HCV酶联免疫分析方法(ELISA)同时检测20例发光值(RLU)大于14 000的抗-HCV血清阳性标本,再用荧光定量RT-PCR检测;每天用卫生部临床检验中心指定生产的HCV的质控血清对CLIA进行检测,建立自己实验室的该项目临界值浓度,连续6个月对HCV质控血清检测,计算S/CO值,统计分析精密度、CV;用EQA的质控物检测HCV抗体,进行标本符合率计算。结果:CLIA方法的灵敏度为0.02ng/mL,阳性符合率为100%,ELISA的阳性符合率为75.2%,荧光定量RT-PCR检测的阳性符合率为100%。结论:HCV抗体CLIA检测抗-HCV试验方法的敏感性、准确性、稳定性较好,能满足临床输血早期筛查,以排除假阳性,杜绝漏检的风险。     

固相酶免疫分析用于血清FT3检测探讨

目的研究血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)测定的固相酶免疫分析方法.方法用聚苯乙烯固相载体、亲和纯化的兔抗T3抗体和T3-β-半乳糖苷酶标记物建立固相管竞争法、固相板竞争法和固相板顺序饱和法.通过对酶标物进行化学修饰、减少标准品或待测样品的上样量、扩大反应体系和采用顺序饱和法,避免或减少甲状腺激素结合蛋白(TBP)的干扰.结果 3种方法的可测范围均为0.48～45.00 ng/L ,其正常值分别为(4.34±1.03),(4.14±0.97),(4.03±0.82)ng/L .正常人与甲状腺功能亢进症患者能明显分开.3种方法的灵敏度分别为0.150,0.130,0.045 ng/L,平均批内变异系数分别为6.2%,6.4%,5.2%,平均批间变异系数分别为13.1%,12.4%,11.0%.结论固相酶免疫分析法基本解决了TBP的干扰,其测定结果的灵敏度和精密度均达到放射免疫分析法(RIA)的水平.     

sFasL检测对结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断价值的探讨

目的探讨sFasL对恶性胸腔积液与结核性胸腔积液鉴别诊断价值。方法应用ELISA法分别检测32例恶性胸腔积液和43例结核性胸腔积液中sFasL的含量,对结果进行统计学处理。结果结核性胸腔积液组sFasL(13.56±5.38 ng/ml)显著高于恶性胸腔积液组(5.72±2.59 ng/ml),二者具显著性差异(P＜0.001)。以10 ng/ml为临界值,胸腔积液中sFasL>10 ng/ml诊断为结核性胸腔积液的敏感性为81.4%(35/43),特异性为81.3%(26/32),临床诊断符合率为81.4%(61/75)。结论sFasL对结核性、恶性胸腔积液的鉴别诊断有临床实用价值。     

快速诊断滴虫性阴道炎免疫层析试纸条的初步研制

目的 用胶体金标记抗阴道毛滴虫重组AP33单克隆抗体制备金标AP33 mAb,研制开发出一种能快速、简便、有效检测阴道毛滴虫感染的免疫层析（GICA）试纸条。方法 采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗阴道毛滴虫重组AP33单克隆抗体,选择最佳反应模式组装试纸条。用该试纸条检测滴虫性阴道炎患者及非滴虫性阴道炎患者白带中的靶抗原,鉴定方法的敏感性和特异性。结果 用制备的免疫层析试纸条检测重组AP33抗原的最低量为20 ng/ml,其中以单克隆抗体4A2为包被抗体、单克隆抗体4F8为金标抗体的试纸条检测效果最佳。以湿片法为标准,用该试纸条检测60例滴虫性阴道炎患者白带,敏感性为90.0%（54/60）;检测60例非滴虫性阴道炎患者白带,特异性为95.0%（57/60）。两法的总符合率为92.5%。结论 GICA检测阴道毛滴虫特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

联合检测hs-CRP、cTnI和心肌酶谱在诊断儿科感染性疾病的应用

目的:探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肌钙蛋白I(cTnI)和心肌酶谱联合检测在儿科感染性疾病鉴别诊断中的意义。方法:应用全自动化学发光免疫分析仪和全自动生化分析仪对3组研究对象血清hs-CRP、cTnI、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)分别进行测定,并做统计学处理。结果:hs-CRP在细菌感染组中(18.27±3.90)mg/L显著高于病毒组(5.56±0.60)mg/L和健康对照组(4.02±0.60)mg/L(P0.05);cTnI在细菌组中(0.030±0.010)ng/ml显著低于病毒感染组(0.126±0.040)ng/ml(P0.05),但高于健康对照组(0.022±0.010)ng/ml(P0.05);CK、CK-MB、LDH和α-HBDH在细菌感染组中显著低于病毒感染组(P0.05),但高于健康对照组(P0.05)。结论:多项生化标志物联合检测综合判断,可弥补单项检测的不足,有利于感染性疾病患儿鉴别诊断,避免误诊而延误治疗。     

胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗原的研究

目的 研究胶体金免疫层析试纸条检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法通过鼠疫F1抗原单克隆抗体(F1MAb)捕捉F1抗原的胶体金免疫层析(GICA)试纸条,检测308只强毒鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)感染鼠脏器标本和225份对照鼠(达乌尔黄鼠217只,小白鼠5只,豚鼠3只)标本,同时用鼠疫反向间接血球凝集试验(RIHA)微量法和细菌培养做平行检测.结果 225只对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA和RIHA在1×108 cfu/ml水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应.GICA、RIHA对鼠疫菌检测灵敏性为2.5×105、2.0×105cfu/ml;检测F1抗原灵敏性为1、10 μg/L.GICA与细菌学检验符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较,差异无统计学意义(x2=0.36,P＞0.05);与RIHA符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较差异有统计学意义(x2=9.09,P＜0.05).308只实验鼠样本细菌培养阳性284只,284份细菌培养阳性标本中,GICA有280份检测阳性,阳性率为98.59%,高于RIHA[阳性率为96.13%(522/533)],两组比较差异有统计学意义(x2=5.14;P＜0.05).GICA的敏感度为98.59%(280/284),特异度为97.19%(242/249),阳性预测值为97.56%(280/287),阴性预测值为98.37%(242/246),Youden指数为0.9578.结论 GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,是鼠疫早期快速诊断中有应用价值的检测技术.     

Dot-IGSS检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测96份确诊为脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的循环抗原(CAg),阳性率分别为94.79%和92.71%.检测51例非囊虫病者和62例其他脑部疾病患者的CSF,两种方法均为阴性.诊断指数分别为194.79%和192.71%,检测CAg的最小量Dot-IGSS为244ng/ml,Dot-ELISA为488ng/ml.试验表明两法诊断脑囊虫病均具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行,有希望用于脑囊虫病的临床诊断.     

肌钙蛋白I与柯萨奇病毒特异抗体对病毒性心肌炎的临床价值

分别用固相免疫层析法和ELISA方法动态测定病毒性心肌炎组(VM,n=102)、病毒感染组(VI,n=41)和对照组(n=46)的血清肌钙蛋白I(cTnI)和柯萨奇病毒特异性抗体(CBV-IgM、IgG).结果①VM组cTnI阳性率70.58%,其中急性期阳性率达到87.93%,明显高于普通心肌酶CK、CK-MB和LDH的15.69%(P<0.01),而VI组与对照组无1例出现cTnI或心肌酶阳性.②VM组CBV-IgM阳性率(67.65%)明显高于VI组(17.07%),P<0.05.③在VM组中,IgM阳性者的cTnI阳性率(73.91%)明显高于IgG阳性者的cTnI阳性率(43.75%),P<0.01;cTnI阳性者中IgM阳性率(83.33%)也明显高于IgG阳性率(41.67%),P<0.01;而VM组中cTnI阴性者IgM阳性率(30.00%)明显低于IgG阳性率(60.00%),P<0.05.说明cTnI对VM的心肌损伤具有良好的敏感性、特异性和准确性,明显优于普通心肌酶,对VM急性期心肌损伤的敏感性更高.测定CBV-IgM、IgG有助于VM常见病因和病期的诊断.cTnI和CBV-Ig联合测定可使VM的诊断变得简单和成熟.     

ELISA双抗原夹心法检测内脏利什曼病抗体的研究

目的观察rK39抗原酶联免疫吸附试验双抗原夹心法(ELISA夹心法)检测内脏利什曼病抗体用于内脏利什曼病诊断与宿主动物感染调查的可行性。方法采用ELISA夹心法与rK39免疫层析试条法(ICT)同步检测内脏利什曼病抗体。结果 5种家畜血清229份,7种鼠类标本238份,ELISA夹心法和rK39 ICT法抗体检测均阴性;接种利什曼原虫灰仓鼠、草原兔尾鼠标本33份,13份阳性,阳性率39.4%;塔里木兔标本119份,阳性7份,阳性率5.9%;非疫区儿童血清29份,全部阴性;疫区无内脏利什曼病症状人血清250份,4份两种方法均阳性,阳性率均为1.6%;住院内脏利什曼病病人血清67份,两种方法的阳性率分别为68.7%和67.2%。共检测人和其他动物标本965份,两种方法的阳性符合率98.6%,阴性符合率99.9%。ICT相同显色等级的阳性标本,ELISA跨10个滴度。结论 ELISA夹心法可检测多种动物内脏利什曼病抗体,抗体滴度具有定量意义。该方法适用于内脏利什曼病诊断、疗效观察和流行病学调查。     

肌钙蛋白I和肌红蛋白与不稳定性心绞痛患者的预后

研究旨在观察不稳定性心绞痛 (UA)患者入院后血清肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)和肌红蛋白 (Mb)变化 ,探讨其对心脏事件的近期、远期预报价值。1.资料和方法 :60例UA患者分别在入院、入院后 12、2 4、48h、10d各采血 1次。用免疫发光法 (IMMULITE系统 )测定cTnI、Mb和CK MB浓度 ,分析其与心脏事件的关系。分近期 (3 0d)、远期 (6～ 12个月 )随访 ,记录心脏事件发生情况 ,包括入院 2 4h后发生急性心肌梗死、心原性猝死、顽固性心绞痛。2 .结果 :在近期cTnI≥ 0 4ng/ml组与cTnI <0 4ng/ml组心脏事件发生率分别为 48 2 %和 9 1% ,P <0 0 5。…     

量化检测日本血吸虫循环抗原的初步研究

目的探索量化检测日本血吸虫循环抗原的方法。方法用AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA(S-ELISA)检测SEA-TCA抗原,并根据测得的OD490值和相应抗原浓度计算回归方程式,再用该法和fSjc26GST-PcAb双抗体夹心ELISA方法检测急慢性日本血吸虫病人的血清循环抗原。并初步应用于检测流行区和传播阻断地区的人群血清循环抗原。结果AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA测得SEA-TCA浓度(y)与OD490值(x)呈明显的正相关(r=0.981,y=128.08x-46.95);血清循环抗原的平均含量,急性血吸虫病人(206.27±36.62 ng/ml)显著高于慢性血吸虫病人(122.88±75.13 ng/ml)。两组双抗体S-ELISA检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率均为100%(34/34),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率则分别为87.50%(70/80)和78.57%(63/80),特异性分别为90.74%(98/108)和92.59%(100/108)。用以上两法对流行区和传播阻断地区的人群血清进行循环抗原检测,其阳性率分别为34.52%(87/252)和9.72%(49/504),具有显著性差异。结论两组双抗体S-ELISA用于检测日本血吸虫循环抗原均有较好的效果,其中AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA能量化检测日本血吸虫循环抗原。     

固相酶免疫分析用于血清FT_3检测探讨

目的　研究血清游离三碘甲状腺原氨酸 (FT3)测定的固相酶免疫分析方法。方法　用聚苯乙烯固相载体、亲和纯化的兔抗 T3抗体和 T3-β-半乳糖苷酶标记物建立固相管竞争法、固相板竞争法和固相板顺序饱和法。通过对酶标物进行化学修饰、减少标准品或待测样品的上样量、扩大反应体系和采用顺序饱和法 ,避免或减少甲状腺激素结合蛋白 (TBP)的干扰。结果　 3种方法的可测范围均为 0 .4 8～ 4 5 .0 0 ng/ L ,其正常值分别为 (4.34± 1.0 3) ,(4.14± 0 .97) ,(4.0 3± 0 .82 ) ng/ L。正常人与甲状腺功能亢进症患者能明显分开。 3种方法的灵敏度分别为 0 .15 0 ,0 .130 ,0 .0 4 5 ng/ L ,平均批内变异系数分别为 6 .2 % ,6 .4 % ,5 .2 % ,平均批间变异系数分别为13.1% ,12 .4 % ,11.0 %。结论　固相酶免疫分析法基本解决了 TBP的干扰 ,其测定结果的灵敏度和精密度均达到放射免疫分析法 (RIA)的水平