TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病毒载体

目的：为使外源性 Ｔ Ｎ Ｆ, Ｉ Ｆ Ｎ 基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ Ｍ Ｈ ＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效 应,构建在 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子调控、 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ连接下协同表达 Ｔ Ｎ Ｆα和 Ｉ Ｆ Ｎβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果：从ｐ Ｇ Ｌ３ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｆ及ｐ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ中切下 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ和 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,先后插入ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓｋ （＋ ）, 构建成ｐ Ｂ Ｌ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ。回收 Ｔ Ｎ Ｆα Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｌｉｎｋ１ 中,构建成 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（＋ ）。回收 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入缺失 Ｅ１ 和 Ｅ３ 区及启动子的 Ａｄ ＢｇｌⅡ中, 构建成 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（－ ）。结论：此两种载体为“正反馈”式放大肿瘤免疫原性提供一条新途径。     

人支气管上皮细胞转化过程中MTS1/p16基因丢失的研究

目的观察人支气管上皮细胞系Ｍ转化过程中ＭＴＳ１／ｐ１６基因的缺失及Ｐ１６蛋白的表达情况。方法采用双色荧光原位杂交,免疫组织化学和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术。结果在早期ＭＰ１８细胞中没有发现ＭＴＳ１／ｐ１６基因的缺失,在较晚期的ＭＰ３６和ＭＰ９７细胞中ＭＴＳ１／ｐ１６基因均发生了缺失;免疫组织化学和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ的结果都表明,晚期Ｍ细胞ＭＰ１２０中Ｐ１６蛋白的表达水平比早期代数细胞ＭＰ２０明显下降。结论ＭＴＳ１／ｐ１６基因的功能失活在人支气管上皮细胞系Ｍ的转化过程中可能起重要作用。     

促凋亡基因Bax在膀胱癌表达的免疫组化检测

目的：研究促凋亡基因Ｂａｘ在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中的表达，探讨Ｂａｘ在ＴＣＣ发生、发展中的作用和预后复发中的意义。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及Ｓ－Ｐ免疫组化法检测。结果：５６例ＴＣＣ中有３４例Ｂａｘ蛋白表达阳性，阳性率６０．７％。２０例正常膀胱粘膜中有６例表达阳性，阳性率３０％。两组差异显著（Ｐ＜０．０５）。Ｂａｘ蛋白表达部位在细胞胞浆中。Ｂａｘ蛋白表达与病理分级、临床分期及肿瘤复发无显著相关性。结论：促凋亡基因Ｂａｘ在大部分ＴＣＣ中具有不同程度的表达与其发生有关，与ＴＣＣ分级、分期及复发无关。     

多重聚合酶链反应检测口腔鳞癌多肿瘤抑制基因初探

为探讨多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１，ＣＤＫＮ２）与口腔鳞癌的关系，应用自行设计合成的ＭＴＳ１基因特异引物建立的多重聚合酶链反应（ｍ－ＰＣＲ）技术，检测ＭＴＳ１基因在口腔鳞癌中的表达水平。结果：１４例鳞癌中２例有ＭＴＳ１基因变异，提示二者相关。     

hIL-10基因转导抑制大鼠心肌细胞诱生炎症细胞因子

目的：观察人白细胞介素１０ （ｈｕｍａｎ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １０ ,ｈ Ｉ Ｌ１０） 基因转导对脂多糖（ Ｌ Ｐ Ｓ） 诱导大鼠心肌细胞（ Ｃ Ｍ Ｃ） 的炎症细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ（ Ｉ Ｌ１０） Ｓ Ｎ 将人 Ｉ Ｌ１０ 基因导入大鼠 Ｃ Ｍ Ｃ,应用 Ｐ Ｃ Ｒ, Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ：①检测 Ｉ Ｌ１０ 基因的整合和表达;②观察 Ｉ Ｌ１０ 基因转导对 Ｌ Ｐ Ｓ诱导的 Ｃ Ｍ Ｃ 肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） 的ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达及白细胞介素１β（ Ｉ Ｌ１β） 和 Ｔ Ｎ Ｆα的蛋白质的产生的影响。结果：外源性 Ｉ Ｌ１０ 基因已整合到靶细胞染色体 Ｄ Ｎ Ａ 并有效地表达,并能抑制 Ｌ Ｐ Ｓ诱生 Ｃ Ｍ Ｃ 产生 Ｉ Ｌ１β, Ｔ Ｎ Ｆα。结论：逆转录病毒载体介导的人 Ｉ Ｌ１０ 基因转导能抑制 Ｃ Ｍ Ｃ 炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

两种不同来源的EBV LMP1基因在Balb／c3T3细胞中的表达

目的：研究来源于鼻咽癌细胞株ＳＵＮＥ１及ＥＢＶ标准株Ｂ９５－８细胞中两种ＥＢＶ ＬＭＰ１基因在真核细胞Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３中的表达,为进一步研究ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的核酸疫苗打基础。方法：将两种不同来源ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的真核表达质粒,经脂质体法转染Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞后,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、免疫组化及ＰＣＲ的方法检测不同转染细胞中ＥＢＶ ＬＭＰ１蛋白的表达及核酸片段。结果：ＰＣＲ结构表     

抑癌基因MTS1在胃癌及癌前组织中的表达

应用免疫组化ＬＳＡＢ法对５０例胃癌及１２例癌前组织进行抑癌基因ＭＴＳ１的检测。发现ＭＴＳ１基因在癌前组织中阳性表达率为６６．７％，在胃癌中的阳性表达率为２８．０％，Ｐ〈０．０５；分化良好型胃癌ＭＴＳ１基因阳性表达率为３８．５％，分化不良型胃癌其阳性表达率为１６．７％，Ｐ〈０．０５；在胃癌不同侵及沉度及有无淋巴结转移各组间ＭＴＳ１阳性表达无明显差别。提示ＭＴＳ１基因与胃癌的发生及组织学分化有一定关系     

P16/MTS_1基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的：探讨多肿瘤抑制基因缺失（Ｐ１６／ＭＴＳ１）与骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）发病的关系。方法：采用ＰＣＲ方法，对３０例ＭＤＳ的Ｐ１６／ＭＴＳ１基因的缺失情况进行分析，并与疾病发生的关系进行讨论。结果：３０例ＭＤＳ患者未见有Ｐ１６基因缺失。结论：本研究表明ＭＤＳ的发病与Ｐ１６基因的缺失无相关性。     

一氧化氮、内皮素与支气管哮喘气道高反应性的关系

为了解哮喘患者支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ） 中内皮素（ＥＴ） 、一氧化氮（ＮＯ） 在气道高反应性（ＢＨＲ） 形成过程中的意义,用ＦＥＶ１ ％ 值下降２０ ％ 所需的Ｍｃｈ 的浓度（ ＭｃｈＰＣ２０） 评估支气管哮喘患者气道高反应性,用放射免疫法和镀铜镉还原法分别测定ＢＡＬＦ 中ＥＴ 和ＮＯ 浓度并计算ＥＴ／ＮＯ 值。对１５ 例轻、中度过敏性支气管哮喘发作期患者,８ 例缓解期患者,７ 名健康自愿受试者进行了分析。结果发现：哮喘发作期患者ＢＡＬＦ 中ＮＯ,ＥＴ 和ＥＴ／ＮＯ 值升高,ＦＥＶ１ ％ ,ＭｃｈＰＣ２０ 降低,后者与ＮＯ 呈正相关,与ＥＴ 呈负相关,除ＥＴ／ＮＯ 值外,余与缓解期患者比较差异均有显著性;缓解期患者ＢＡＬＦ 中ＮＯ,ＥＴ 值均降低,但ＥＴ／ＮＯ 值明显升高,ＦＥＶ１ ％ ,ＭｃｈＰＣ２０ 轻度降低,与健康受试者比较差异均有显著性。提示ＮＯ,ＥＴ 分别具有改善或加重哮喘患者ＢＨＲ 的作用;缓解期患者轻度异常的ＢＨＲ 可能与ＢＡＬＦ 中ＥＴ／ＮＯ 值异常有关。     

胃癌中MTS1基因外显子2突变及缺失的研究

ＭＴＳ１是Ｋａｍｂ在１９９４年发现的一种新的抑癌基因。在很多类型肿瘤中经常出现ＭＴＳ１基因的纯合性缺失或突变。本文利用ＰＣＲ方法研究了ＭＴＳ１基因第２外显子在胃癌中的纯合性缺失情况，２４例标本中发现２例缺失。用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ并结合ＰＣＲ产物直接测序技术分析了２４例原发性胃癌标本中ＭＴＳ１基因第２外显子突变情况，只发现１例突变，此结果提示胃癌中ＭＴＳ１基因突变率较低。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

乳腺癌p16基因表达与增殖细胞核抗原指数的相关性

乳腺癌ｐ１６基因表达与增殖细胞核抗原指数的相关性郭山春廖松林丁华野孟振行皋岚湘柳剑英田玉旺邓永江吴霞多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１／ＣＤＫＮ２／Ｐ１６）在抑制肿瘤的形成中发挥重要作用，其缺失或突变与多种肿瘤的发生有密切关系，并预示其重要性并不亚于Ｒｂ和ｐ５...     

直肠癌组织中MTS1／p16基因产物表达的研究

目的：探讨人ＭＴＳ１／ｐ１６基因失活与直肠癌发生的关系，以及其作为肿瘤标记物在直肠癌诊断中的作用。方法：应用免疫组化方法观察ＭＴＳ１／ｐ１６基因产物在１０１例直肠癌组织的表达情况，并与非典型增生、癌旁移行粘膜及正常粘膜进行了比较。结果：癌组织ｐ１６阳性分级表达低于正常粘膜及移行粘膜（Ｐ＜０．０５），粘液腺癌低于管状腺癌（Ｐ＜０．０５）。在管状腺癌中，ｐ１６阳性率随分化程度下降而降低，高低分化癌之间差别有显著意义（Ｐ＜０．０１）。结论：ｐ１６蛋白的表达缺失与直肠癌的发生有关，且随着分化程度下降ｐ１６表达缺失增加     

进行性脊髓性肌萎缩症患者神经元存活基国及神经元凋亡抑制蛋白基因的缺失

目的：研究中国人群中进行性脊髓性肌萎缩症（ｓｐｉｎａｌ ｍｕｓｃｕｌａｒ ａｔｒｏｐｈｙ,ＳＭＡ）患者中神经元存活基因（ｓｕｒｖｉｖａｌ ｍｏｔｏｒ ｎｅｕｒｏｎ,ＳＭＮ）外显子７及神经元调亡抑制蛋白基因（ｎｅｕｒｏｎａｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｈｉｎｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅ,ＮＡＩＰ）外显子５缺失情况,进一步探讨这２个ＳＭＮ基因外显子７区域和５５例患儿ＮＡＩＰ基因外显子５的缺失进行检测。结果：ＳＭＮ基因外显子７区域纯合缺失率分别为：ＳＭＡＩ型９２％（２３／２５）;Ⅱ型９０％（２７／３０）。患儿双亲中有２例母亲的１例父亲也有纯合缺失。在５５例ＳＭＡ患儿中未检测到有ＮＡＩＰ基因外显子５的纯合缺失,仅发现２例杂合性缺失。结论：中国人ＳＭＡ患者中ＳＭN     

小儿急性白血病MTS1基因缺乏及点突变的研究

为探讨ＭＴＳ１基因突变与恶性血液病的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＤＮＡ印迹方法检测３５例急性白血病（ＡＬ）患儿ＭＴＳ１基因改变。结果显示：急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）缺乏（包括点突变）为２５．８％（８／１３）。Ｂ－ＡＬＬ纯合缺失为１６％（４／２５），Ｔ－ＡＬ为３３％（２／６）。点突变则两型各１例。结果证明：我国儿童ＡＬＬ ＭＴＳ１基因失活的存在，Ｔ－ＡＬ高于Ｂ－ＡＬＬ，点突变仅见于少数病例。该基     

p16/MTS1基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因缺失（ｍｒｌｔｉｐｌｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｇｅｎｅ １,ｐ１６／ＭＴＳ１）与骨髓增生异常综合征（ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＭＤＳ）发病的关系。方法 采用ＰＣＲ方法,对２９例ＭＤＳ的ｐ１６／ＭＴＳ１基因的缺失情况进行分析,讨论其与疾病发生的关系。结果 ２９例ＭＤＳ患者未见有ｐ１６基因缺失。结论 ｐ１６基因缺失和ＭＤＳ的发病关系不大。     

脊髓性肌萎缩运动神经元存活基因和神经元凋亡抑制 …

目的：研究国人脊髓性肌萎缩（ＳＭＡ）基因缺失特点。方法：应用ＰＣＲ扩增及限制性内切酶技术对１５例儿童型ＳＭＡ（Ⅰ型７例,Ⅱ型４例,Ⅲ型４例）和２例成人型ＳＭＡ进行运动神经元存活基因（ＳＭＮ）第７外显子和神经元凋亡掏蛋白基因（ＮＡＩＰ）第５外显子缺失分析。并对１例有阳性家族史的家系进行了羊水胎儿产前诊断。结果：１４例儿童型ＳＭＡ携有ＳＭＮ基因第７外显子缺失,占９３％;２例Ⅰ型ＳＭＡ携有ＮＡＩＰ基因第     

部分肿瘤抑制基因在新建骨肉瘤细胞系SOSP-9607中的表达及意义

目的：探讨骨肉瘤细胞系ＳＯＳＰ－９６０７的发生发展与部分肿瘤抑制基因及早期生长反应基因表达的关系。方法：采用原位杂交及免疫组织化学ＳＡＢＣ染色方法检测肿瘤抑制基因p５３,ｐ１６,Ｒｂ及早期生长反应基因ｅｇｒ－１在ＳＯＳＰ－９６０７细胞中的表达;用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测肿瘤抑制基因ＤＣＣ在ＳＯＳＰ－９６０７细胞中是否缺失。结果：ＳＯＳＰ－９６０７细胞中ｐ１６,Ｒｂ基因表达未见异常改变,未检测到突变型Ｐ     

LAMS对肝癌细胞株Bcl-2、BaX基因蛋白的影响

目的：研究ＬＡＭＳ对肝癌细胞株的Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白影响。方法：用ＭＴＴ法测定不同浓度ＬＡＭＳ对肝癌细胞株增殖的抑制作用；用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法测定不同抑制程度下凋亡细胞量和Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ基因蛋白的变化。结果：ＬＡＭＳ浓度与肝癌细胞增殖的抑制程度、凋亡细胞数、Ｂｃｌ－２基因蛋白表达减少及ＢａＸ基因蛋白表达增加呈正相关。结论：　ＬＡＭＳ可通过影响Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白的表达促使肝癌细胞凋亡。     

冷血心肌麻痹液温度与SRCa2+-ATPase活性及SRCa2+-ATPasemRNA表达

目的：评价冷血心肌麻痹液（ Ｃ Ｂ Ｃ）温度对心肌保护效果的影响． 方法：离体鼠心经 Ｃ Ｂ Ｃ不同温度（４,８,１２,１６ 和２０℃）停搏１２０ ｍ ｉｎ 及再灌注６０ ｍ ｉｎ, 测定心肌肌浆网（ Ｓ Ｒ） Ｃａ２＋  Ａ Ｔ Ｐａｓｅ 活性、钙摄取和 Ｓ Ｒ Ｃａ２＋  Ａ Ｔ Ｐａｓｅ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的改变． 结果：４,８,１２℃组 Ｓ Ｒ Ｃａ２＋  Ａ Ｔ Ｐａｓｅ 活性、钙摄取保护优于１６ 和２０℃组（ Ｐ＜ ０．０１）,４℃～１６℃组 Ｓ Ｒ Ｃａ２＋  Ａ Ｔ Ｐａｓｅ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达量为对照组１．１８～１．３２ 倍（ Ｐ＞ ０．０５）,２０℃组表达量为对照组的 １．６３ 倍（ Ｐ＜ ０．０５）． 结论：温度影响 Ｃ Ｂ Ｃ心肌保护效果, Ｓ Ｒ Ｃａ２＋  Ａ Ｔ Ｐａｓｅ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达上调可能与 Ｓ Ｒ泵功能受损的特异修复机制有关．