后根轴突再生重建感觉传入通路的实验研究

目的 将后根分别与脊神经节中枢突支(后根)和周围突支(脊神经)吻合,为通过后根再生重建感觉传入通路奠定组织学基础.方法 SD大鼠74只随机分为三组,左侧为正常对照侧,右侧为手术侧.A组将L4后根近断端L6后根远断端吻合;B组将L4脊神经出椎间孔2 mm处切断,近断端与L6后根远断端吻合;C组手术操作同B组,但不吻合作为假手术组.术后3个月以逆行神经示踪、脊髓后根入口(dorsal root entry zone,DREZ)降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)阳性轴突分布、脊神经节和脊髓后角神经元存活率、光镜和透射电镜评价轴突再生效果.结果 逆行神经示踪证实B组再生轴突轴浆运输功能恢复良好.A组和B组均可见轴突再生通过吻合口,神经纤维数量和髓鞘厚度与正常对照侧比较差异无统计学意义;但A组轴突再生停止于DREZ,脊髓后角CGRP阳性纤维分布密度低于B组和正常对照侧,差异有统计学意义.三组L6脊神经节神经元存活率与正常对照侧比较差异无统计学意义;A组和C组L4脊髓后角神经元存活率低于B组和正常对照侧,差异有统计学意义.结论 后根与脊神经吻合后不影响脊髓后角神经元存活,神经纤维再生、轴浆运输能通过DREZ进入脊髓,是一种理想的修复感觉传导通路的方式.

Abstract：

Objective To provide the morphological evidence for sensory pathway by the repair of dorsal root (DR) in which received transected and anastomosed with central processes (DR) and peripheral processes (spinal nerve) respectively. Methods 74 SD rats were divided into three groups randomly. Group A: the distal ending of L6 DR was sutured to the proximal ending of the L4 DR in right side. Group B: the postganglionic spinal nerve of L4 was cut at a point 2 mm to intervertebral foramen and its proximal stump was reconnected to the distal ending of L6 DR in right side. Group C: under the same operative manipulation on group B, but no anastomosis was performed to serve as the sham operation group. The left side was kept intact and served as a normal control in all groups. The repairing results of DR axonal regeneration were evaluated at 3 months after operation by retrograde tracing, the density of positive Calcitonin gene-related peptide (CGRP) axon in dorsal root entry zone (DREZ), survival rate of neurons in DR ganglia and posterior horn, light and transmission electron microscope. Results HRP retrograde tracing demonstrated axonal axoplasmic transport of regenerative nerve recovered well in group B. Regenerative fibers were found. There was no difference between group A or B and normal control with regard to the number of myelinated axons and the thickness of myelin. Regenerating axon stop at the DREZ in group A and the density of positive CGRP were lower than those in group B and normal control. Survival rate of neurons in L6 DR ganglia had no difference among all groups. However, in posterior horn, a significant increase in death was seen in group A and sham group. Conclusion The ability of axonal regeneration was effective and with no disservice to neurons in posterior horn following anastomosis of postganglionic spinal nerve and dorsal root, by which axoplasmic transport across the DREZ into the spinal cord.     

具有感觉传入通路的膀胱反射弧治疗脊髓损伤后弛缓性膀胱的实验研究

 目的 用SD大鼠构建具有感觉传入通路的膀胱反射弧,探讨其用于治疗脊髓损伤后弛缓性膀胱的有效性。方法 SD雄性大鼠24只,右侧为实验侧,先行L5前根近断端与S2前根远断端吻合,再将L5脊神经节周围突支近断端与S2后根远断端行端端吻合。左侧不做处理,为对照侧。术后3个月,破坏L6~S4节段脊髓造成弛缓性膀胱,于建模前后通过一般观察、神经电生理检测、神经示踪等方法观察反射弧构建情况。结果 21只大鼠存活至术后3个月,7只成功分离出吻合的脊神经。电刺激实验侧S2后根吻合口远端,均能检测到膀胱神经丛复合动作电位、膀胱平滑肌复合肌肉动作电位,截瘫前后动作电位差异无统计学意义;电刺激对照侧S2后根,在截瘫后未能检测到动作电位。实验侧膀胱神经丛复合动作电位和膀胱平滑肌复合肌肉动作电位平均波幅为截瘫前对照侧的71.9%和82.4%。神经示踪结果显示实验侧L5脊髓前、后角均可见青蓝色阳性反应颗粒。结论 构建具有感觉传入通路的膀胱反射弧,可使其运动、感觉神经通过轴突再生长入副交感神经纤维,并与脊髓前、后角重建轴突联系,轴浆运输功能得到重建,可用于弛缓性膀胱的治疗。     

周围神经端端或端侧吻合后降钙素基因相关肽和P物质免疫组织化学的对比研究

目的　探讨周围神经端端或端侧吻合后神经递质降钙素基因相关肽 (CGRP)和 P物质 (SP)水平的变化。　方法　选取雌性 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为 5组 ,每组 4只 ;实验组为 4组 ,正常对照组为 1组。实验组 :切断双侧腓总神经。将左侧腓总神经远侧断端吻合至胫神经侧方 ,右侧行腓总神经端端吻合 ,术后 1、2、4和 2 7周于各时间点分别在神经吻合口、腰段脊髓和背根神经节处取材 ,每次 4只进行 CGRP和 SP的免疫组织化学染色。对照组 :不行神经切断及吻合术 ,1周后检测同上。　结果　实验组术后 1周在腰段脊髓后角和背根神经节中 CGRP和 SP的表达均显著减少 ,术后 4、2 7周 ,CGRP和 SP在腰段脊髓后角的表达逐渐恢复至接近正常水平 ,但在背根神经节中的表达却无显著变化。端端、端侧吻合的两侧 CGRP和 SP变化的趋势一致 ,但在腰段脊髓后角的 4个时间点的样本中 ,端端吻合的表达显著高于端侧吻合。对坐骨神经进行乙酰胆碱酯酶 (Ach E)、SP、CGRP和 PGP9.5染色显示神经纤维均可通过端端与端侧神经吻合口。　结论　再生的神经纤维可以通过端侧吻合口 ,端侧吻合中感觉神经的恢复与端端吻合相似 ,但恢复的程度稍差于端端吻合。     

端侧神经吻合后再生状况的实验研究

目的研究端侧神经吻合后,神经再生的可能性和再生纤维的类型.方法将失神经后的兔耳大神经制成端侧吻合模型,12只动物被分成2、4、6、8和12周5个实验组和1个正常对照组,在受神经侧注入HRP逆行示踪,实验到期后对耳大神经纤维和相应的神经节进行HRP染色和CGRP的免疫组化染色,光镜下观察结果.结果逆行示踪显示,神经端侧吻合2～4周时,供神经侧C2、C3背根神经节内无HRP标记阳性的细胞,至第6周,背根神经节内开始出现HRP阳性细胞,8～12周阳性细胞的数量更多,尤其是胞体直径在50μm以上的阳性细胞数显著增加;2～4周时CGRP免疫组化的染色显示,背根神经节内的CGRP阳性标记细胞逐步增强,6周以后阳性标记的细胞数量增加,阳性细胞的胞体直径在12～40 μm范围内,属于中小直径的细胞胞体,同时观察到供神经纤维内的CGRP阳性纤维逐步增多,并跨越神经吻合口长入受神经体内,8～12周背根神经节内的CGRP阳性标记细胞的增加不显著,吻合口及受神经体内的神经纤维也增加不明显.结论端侧神经吻合后再生纤维可长入移植体,纤维再生的顺序是细小类的纤维首先再生.     

脊神经前根吻合重建脊髓损伤大鼠神经反射通路的形态学研究

目的:观察利用脊神经前根吻合重建脊髓损伤大鼠股四头肌神经反射通路的形态学情况。方法:取4周龄SD大鼠20只,体重120～150g;将左侧L1神经前根与支配股四头肌的优势脊神经(L3)前根通过尾神经桥接吻合,右侧不作任何处理。神经吻合术后6个月,手术分离神经吻合段。将能分离神经吻合段的大鼠在L2脊髓水平左半侧切断脊髓制备大鼠脊髓半切损伤模型,饲养4周后左侧股神经注射Trueblue(TB)染色剂进行逆行荧光染色,观察L1脊髓前角是否有TB标记的阳性细胞;同时解剖分离神经吻合段进行HE染色及电镜观察。结果:饲养过程中大鼠死亡4只。成功分离出10只大鼠的神经吻合段。吻合段神经肉眼观察光滑圆润,无萎缩;HE染色光镜下吻合段神经纤维排列整齐,走行一致,为典型的有髓神经纤维结构;电镜下吻合段神经纤维具有明显神经轴突特征。TB荧光逆行示踪左侧L1脊髓前角可见荧光标记阳性的神经元,而右侧无标记阳性细胞。结论:L1与L3脊神经前根吻合可成功建立L2脊髓半切损伤大鼠的股四头肌脊髓旁神经反射通路。     

雪旺细胞源性神经细胞黏附分子L1对脊髓轴突再生作用的研究

目的 研究神经细胞黏附分子L1抗体封闭后的雪旺细胞对脊髓损伤后轴突再生的影响。方法 将纯度高于98%的新生SD大鼠坐骨神经源性雪旺细胞，经神经细胞黏附分子L1抗体封闭后的雪旺细胞及生理盐水分别移植于成年SD大鼠T10节段左侧胸髓半横切损伤处（各组大鼠均为24只），8周后采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪，NF免疫组化染色及Western blot蛋白定量等方法，观察损伤脊髓的神经轴突再生情况。结果 L1抗体封闭组与应用未封闭雪旺细胞组相比，HRP阳性神经元数目明显减少，再生神经轴突量减少，Western blot显示前者NF量仅为后者的2/3左右。结论 雪旺细胞源性神经细胞黏附分子L1对损伤脊髓的轴突再生具有促进作用。     

人工膀胱反射弧重建治疗脊髓损伤后弛缓性膀胱

目的：探索利用截瘫平面以上正常的体反射重建膀胱反射弧,恢复脊髓损伤后弛缓性膀胱排尿功能的可行性。方法：将Beagle犬L6前根近端与S2前根远端在硬膜内显微吻合,经一段时间的轴突再生后,建立＂膝腱-脊髓中枢-膀胱＂人工反射弧,术后8个月,在破坏S1～S4脊髓节段前后分别进行神经电生理、膀胱肌电图及尿流动力学和辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪等检查：对1例L1压缩性骨折伴截瘫患者行右侧T11与S2前根经腓肠神经移植硬膜内吻合术。结果：2只犬在术后8个月时电刺激截瘫前和截瘫后左侧L6后根、神经吻合口近端均可在吻合口远端记录到运动诱发电位,其波形和波幅相似;尿流动力学检查,当刺激开始时逼尿肌压力和膀胱内压均迅速上升,而腹内压增加幅度较小,刺激中止后膀胱内压迅速下降;膀胱注射HRP后48h实验侧L6脊髓节段前角中发现HRP标记的大神经元细胞。临床1例患者术后55个月时随访,膀胱充盈后可产生自控性排尿,尿流动力学显示排尿完全是由膀胱逼尿肌的收缩引发。结论：利用截瘫平面以上正常的体反射建立人工反射弧通路是成功和有效的,可恢复脊髓损伤后弛缓性膀胱自控性排尿。     

利用腹壁反射建立人工膀胱反射弧的辣根过氧化物酶逆行示踪研究

目的研究利用腹壁反射可建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一新的神经传导通路，通过再生到盆神经的躯体运动神经纤维可实现膀胱的神经再支配，探讨通过刺激下腹壁，该人工膀胱反射弧产生控制性排尿的神经形态学基础。方法选用6只SD大鼠，右侧为实验侧，左侧为对照侧，右侧T13前根近端与右侧S2前根远端通过一段自体移植神经在硬膜囊内行显微缝合，保持T13后根完整，经一段时间轴突再生后，建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一新的人工膀胱反射弧。神经缝合术后8个月，应用辣根过氧化物酶(peroxidase horseradish，HRP)逆行追踪标记技术，用微量注射器在双侧膀胱壁上各注射30％HRP 5μl，动物存活60h后经升主动脉灌注杀死。切取T11～L1及L4～S4节段脊髓，冰冻切片后利用TMB法进行呈色反应，观察切片内HRP标记细胞形态及分布情况。结果大鼠膀胱平滑肌注射HRP后，实验侧T13脊髓前角及双侧L6～S4节段脊髓中间带外侧核区有HRP标记阳性细胞，而对照侧T13脊髓前角未发现HRP标记细胞。结论腰骶髓截瘫平面以上的躯体运动神经轴突可长人膀胱平滑肌内副交感冲经节细胞，并由此传递躯体反射冲动到膀胱平滑肌。利用“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一人工反射弧，对实现SCI患者膀胱控制性排尿功能，有一定临床意义。     

端侧缝合后神经再生方式的实验研究

目的 应用组织学与荧光逆行追踪法研究端侧缝合后的神经再生方式。方法 雌性SD大鼠，共24只，实验分3组，分别为正常对照组、端端缝合组和端侧缝合组。3个月后，每组取2只，切取缝合口上下0．5cm的神经采用HE染色法进行缝合口形态学检查。另外6只大鼠，作为供体神经的胫神经用0．2％Diamidino Yellow，用作受体神经的腓总神经用0．2％True Blue进行逆行追踪。7～10d后经灌注取出大鼠L4～L6的DRG与相应的脊髓腰膨大进行荧光显微镜检测。结果 组织形态学观察可见端侧缝合组缝合口近端有神经轴突经侧方长人缝合口远端。同时可以看到胫神经的束膜保持一定的连续性。神经逆行追踪法中双标细胞出现在端侧缝合组L4～L6DRG（L4，L5DRG为主）及相应的脊髓腰膨大的切片中；端端缝合组、正常对照组相应部位仅可见单标细胞。端侧缝合组DRG双标细胞以中、小细胞为主。脊髓内以大细胞为主。结论 神经端侧缝合后神经的再生方式是侧枝芽生。再生纤维中既有感觉成分又有运动成分。感觉再生以痛觉为主。     

大鼠脊神经前根切断后脊髓内Slit1表达的变化

目的 :探讨脊神经前根损伤后,大鼠脊髓组织中Slit1的表达变化,为进一步研究Slit1在神经再生中的作用提供依据。方法:应用2月龄SD大鼠共100只,体重250±20g,其中80只SD大鼠实施左侧L5及L6脊神经前根切断,分别在伤后1d、3d、7d、14d时处死(每个时间点20只),取L5~L6脊髓节段,标记左右;左侧半L5~L6脊髓节段为实验组;右侧半为自身对照组。假手术大鼠(20只)实施麻醉及暴露L5及L6脊神经手术,未行L5及L6脊神经前根切断术,取其L5~L6脊髓节段为空白对照组。采用免疫组化、Western blotting及RT-PCR法检测大鼠脊髓组织中Slit1的变化。结果:脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组中Slit1阳性细胞数分别为5.78±1.53、15.85±2.65、23.93±1.53、8.78±1.78;自身对照组中分别为2.31±1.63、2.57±1.89、3.20±2.16、3.02±2.15。各时间点实验组中Slit1阳性细胞数显著高于空白对照组(2.89±1.26)及自身对照组(P0.05)。Western blotting示脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组Slit1相对表达量分别为0.326±0.09、0.448±0.05、0.638±0.07、0.304±0.07;自身对照组分别为0.038±0.02、0.038±0.01、0.035±0.02、0.046±0.03。各时间点实验组Slit1相对表达量与空白对照组(0.038±0.03)及自身对照组比较,差异有显著性(P0.05)。RT-PCR示脊神经前根切断后1d、3d、7d、14d,实验组Slit1 m RNA相对量分别为0.380±0.03、0.425±0.04、0.768±0.05、0.605±0.04;自身对照组分别为0.210±0.04、0.265±0.03、0.292±0.02、0.261±0.02。各时间点实验组Slit1 m RNA相对量与空白对照组(0.231±0.03)及自身对照组比较,差异有显著性(P0.05)。结论 :脊神经前根切断后,同侧脊髓灰质前角内Slit1的表达显著增加。     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

Study of the correlations between the volumes of the hypophysis, the epiphysis and the subfornical organ to the somatic weight and the volume of the hypothalamus in rodents]

The correlations between volume of the hypophysis, of the epiphysis and of the subfornical organ to body weight and volume of the hypothalamus were studied on 193 rodents belonging to 41 species. Concerning the volume of the hypophyseal lobes the regression slopes of Rodentia occupy an intermediate position between those of Isectivora and Prosimians studied by BAUCHOT. The volume of the epiphysis increases more rapidly with the weight of the body than that of the hypophyseal lobes, the volume of the subfornical organ increases on the contrary more slowly.     

Characteristics of the receptors in the isolated capsule of the hip in the cat

Summary The properties of the afferent fibres from the capsule of the hip joint have been studied in the cat in situ, in relation to joint rotation, and in an isolated capsule preparation which was opened and stretched directly with an actuator.In situ two types of afferent fibres were found, those having a full range of sensitivity and others having only a limited range in response to the joint rotation. When studied in isolated tissue the afferent fibres of the capsule were uniform in threshold and sensitivities, and no full range receptors were found. We conclude that the full range receptors which enter the articular nerve of the hip are spindle afferents and not capsule receptors. On the basis of these and previous results in animals and man the role of joint receptors in kinaesthesia and position sense is discussed.

---

Résumé Les auteurs ont étudié les propriétés des nerfs afférents à la capsule de la hanche, chez le chat en imprimant à l'articulation des mouvements de rotation et sur des préparations de capsule isolée et ouverte en l'étirant directement grâce à un dispositif mécanique.In situ, on a trouvé deux types de nerfs afférents, les uns ayant en réponse à la rotation articulaire une étendue complète de sensibilité et les autres seulement une sensibilité limitée. Sur la capsule isolée les nerfs afférents sont indentiques en ce qui concerne le seuil et la sensibilité et on ne trouve aucun récepteur complet. On en conclut que les récepteurs de toute l'étendue de la sensibilité qui pénètrent les nerfs articulaires de la hanche sont des fibres en fuseau d'origine musculaire et non des récepteurs capsulaires. Sur ces bases et sur les résultats précédemment obtenus chez l'animal et chez l'homme, les auteurs discutent le rôle des récepteurs articulaires dans la cénesthésie et le sens des positions.