创伤弧菌脓毒症大鼠肝细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的动态变化研究

目的探讨大鼠创伤弧菌(VV)脓毒症时肝细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达量的动态变化情况。方法制作大鼠VV脓毒症模型(VV组),RT-PCR法测定染菌后各时间点大鼠肝细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达量。结果感染创伤弧菌后大鼠肝细胞Bcl-2 mRNA表达量明显下降(P﹤0.05);Bax mRNA其表达量明显增加(P﹤0.05),染菌后2 h明显增高,在染菌16 h的表达量仍明显高于正常水平(P﹤0.05)。结论创伤弧菌脓毒症可致肝组织中Bcl-2 mRNA表达量下降,Bax mRNA表达量增加,早期明显增高,并持续维持在高水平。     

酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症凝血因子的动态变化

目的探讨酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症凝血因子的变化及意义。方法制作酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症模型,观察脓毒症组大鼠在染菌后2、6、12、24 h各时间点脓毒症表现,并检测各时间点大鼠血浆FIG、AT:A、tPA、PAI-1水平。结果脓毒症组大鼠染菌后6 h开始出现较明显的毒血症状,并随时间的延长而加剧,24 h达高峰,濒临死亡。脓毒症组大鼠血浆FIG在染菌后呈进行性升高,6 h始明显高于正常对照N组及酒精肝对照A5组(P<0.01),12 h达高峰,24 h FIG有下降趋势,但与12 h组相比,两者差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠AT:A在染菌后呈进行性下降,6 h即显著低于A5及N组(P均<0.01)。tPA在染菌后2 h第1次达高峰(P<0.05),下降至正常水平后于24 h再次显著升高(P<0.01),PAI-1于2 h显著升高(P<0.01),而tPA/PAI值2 h显著降低,24 h显著高于对照组(P均<0.05)。结论酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症早期即可出现明显的凝血紊乱,动态检测FIG、AT:A、tPA、PAI-1水平可反映创伤弧菌脓毒症病情严重程度。     

酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症各脏器的超微结构观察

目的观察酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症重要脏器的超微结构变化,探讨研究创伤弧菌的致病性。方法采用酒精灌胃联合自由饮酒法制做大鼠酒精性肝病模型,取成模大鼠12只,分成2组,实验组6×108cfu/mL浓度创伤弧菌右下肢皮下注射感染肝病大鼠;对照组等量生理盐水右下肢皮下注射。48 h后颈动脉取血液及患肢病变组织进行细菌培养,留取肝脏、心脏、肺脏、肾脏、脾脏、右下肢肌肉、大脑等脏器组织0.1 cm×0.1 cm×0.1 cm置电镜固定液,超薄切片观察超微结构。结果实验组大鼠12 h后,皮温升高,右下肢明显肿胀、皮肤发紫,精神萎靡,活动减少,呼吸急促,均在48 h内濒临死亡,血液及患肢病变组织培养出创伤弧菌,电镜下见心肌、肺、肝、肾等组织的部分实质细胞内和间质中有创伤弧菌生长,肝脏、心脏、肺脏、肾脏、脾脏、右下肢肌肉、大脑存在不同程度超微结构改变,部分血管内皮细胞损伤及基膜断裂溶解,线粒体、内质网等细胞器损伤明显,其中以下肢骨骼肌、肺、肝脏的超微结构改变尤为明显,脾脏的改变相对较轻。结论创伤弧菌感染酒精性肝病大鼠后导致多个脏器的实质细胞及间质超微结构损伤,致使多器官功能障碍甚或衰竭,是导致机体快速死亡的重要原因。     

创伤弧菌脓毒症研究进展

创伤弧菌(vibrio vulnificus)为非霍乱弧菌，1970年Roland首先报道了由创伤弧菌感染引起小腿坏疽和内毒素性休克；在美国、丹麦、西班牙、以色列及我国台湾等一些沿海城市相继由创伤弧菌感染的临床报告；而国内1991年由姜红首先报道创伤弧菌败血症死亡1例；近来浙江省温州地区陆续有创伤弧菌败血症病例报告，大多因多器官功能障碍而死亡。可见创伤弧菌感染是一种少见而又致命性的重要疾病。     

肝病大鼠创伤弧菌脓毒症基质金属蛋白酶-9的动态变化

目的 探讨血清MMP-9水平与酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症进展的关系.方法 制作酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症模型,分脓毒症组及抗菌药物干预组.观察脓毒症组大鼠在染菌后2 h、6 h、12 h、24 h各时间点的脓毒症表现及光镜下肺组织病理改变,并以ELISA法测定脓毒症组及抗菌药物干预组大鼠染菌后各时间点血清MMP-9水平.计量资料采用(x±S)表示.采用SPSS 10.0进行统计,各组血清MMP-9值作t检验,多组间差异采用单囚素方差分析处理.P＜0.05为差异有统计学意义.结果 脓毒症组大鼠染菌后6 h开始出现较明显的毒血症状,并随时间的延长加剧,24 h达高峰,濒临死亡.光镜下肺组织损伤以炎症细胞浸润及肺泡壁水肿充血为主,6 h较轻,12 h损伤加重,到24 h可见大量的炎细胞浸润,淋巴滤泡形成,伴肺泡腔出血.脓毒症组血清MMP-9水平染菌后6 h明显升高(P＜0.01),12 h达高峰,24 h已明显下降(P＜0.01,与12 h组比).抗菌药物干预组大鼠血清MMP-9变化曲线与脓毒症组一敛,但与脓毒症组相应时间点比较,仅6 h时MMP-9水平明显减低(P＜0.01).结论 MMP-9可能不是酒精性创伤弧菌脓毒症后期病情恶化的主要参与因素,血清MMP-9水平不能准确地反应酒精性肝病创伤弧菌脓毒症病情轻重及全身器官损伤的程度.     

创伤弧菌原发性脓毒症的临床研究

近年来 ,创伤弧菌 (ＶｉｂｒｉｏＶｕｌｎｉｆｉｃｕｓＶＶ)原发性败血症已引起美国、日本等沿海国家的重视。为增强对本病的认识 ,提高诊治成功率 ,现对我们 1995～ 2 0 0 1年收治的 17例病例加以分析总结 ,并对ＶＶ的致病力进行了初步的动物试验 ,现报告如下。一、临床资料1.一般资料及症状 :男 12例 ,女5例 ,年龄 39～ 6 7岁 ,均为沿海区县人 ,平素均喜食海鲜产品 ;发病月份为5～ 9月份 ;基础疾病 :12例患有慢性乙型病毒性肝炎、酒精性肝病 (2例伴腹水 ) ,1例患有新型隐球菌性脑膜炎 ,1例患白细胞减少症 ,1例有糖尿病史 ,2例无明确基础疾…     

创伤弧菌脓毒症大鼠脑组织转位蛋白的表达及抗菌药物的干预

目的 探讨创伤弧菌脓毒症大鼠脑组织转位蛋白(TSPO)基因和蛋白表达及促/抗炎因子的蛋白表达,并观察抗菌药物头孢哌酮钠联合左氧氟沙星的干预效应.方法 SD大鼠100只,随机(随机数字法)分为健康对照组(A组,n=10)、创伤弧菌脓毒症组(B组,n=40)和抗菌药物干预组(C组,n=40),抗菌药物对照组(D组,n=10).大鼠左后肢皮下注射创伤弧菌(6×108 cfu/ml,0.1 ml/100 g)制作脓毒症大鼠模型,腹腔注射头孢派酮钠180 mg/kg和左氧氟沙星18 mg/kg进行干预,以RT-PCR、Western blotting、免疫组化、ELISA等方法观察大鼠染菌后6、12、24、48 h脑组织TSPO表达、促/抗炎因子水平及电镜的特点.结果 与A组比较,B组大鼠脑组织TSPO表达水平6h即明显增高(P＜0.05),24 h达峰值.C组大鼠12、24、48 h脑组织TSPO表达水平均明显低于相同时间点B组大鼠(P＜0.05).B组大鼠脑组织各时间点TNF-α、IL-6、IL-10水平均比A组明显升高(P＜0.05),其中TNF-α在6h达峰值,IL-6 12 h达峰值,IL-10则48 h达峰值.与B组相同时间点比较,C组大鼠6、12、24 h时点脑组织TNF-α水平明显下降(P＜0.05),12、24、48 h时间点脑组织IL-6水平亦明显下调(P＜0.05),而IL-10水平在各时间点均较B组明显升高(P＜0.05).免疫组化法观察B组大鼠脑组织TSPO蛋白棕黄色颗粒密集较多,C组棕黄色颗粒较B组减少;电镜下B组大鼠脑组织神经元细胞核溶解消失,细胞及细胞器肿胀明显,C组大鼠脑组织神经元细胞核部分溶解,形态尚存,细胞及细胞器水肿减轻.结论 创伤弧菌脓毒症大鼠脑组织TSPO的表达随着脑组织炎症、病理进展逐渐增高,能敏感反映脑损伤的变化.使用头孢哌酮钠和左氧氟沙星能有效减轻脑组织炎症损伤,降低TSPO的水平.     

创伤弧菌脓毒症患者的预后影响因素分析

目的:探讨创伤弧菌脓毒症患者的预后影响因素。方法:回顾性分析温州医科大学附属第一医院2008年1月至2019年12月67例创伤弧菌脓毒症患者的病例资料,采用单因素分析比较死亡组和治愈组在一般资料、临床表现、入院实验室指标、抗菌药物和外科手术的差异。然后将单因素分析差异有统计学意义的指标纳入多因素分析,最终得出影响患者预...     

创伤弧菌脓毒症患者的抢救与护理

创伤弧菌为嗜盐性海生G杆菌属，创伤弧菌脓毒症起病急、病情进展快、病死率高，我院1998年5月至2002年8月收住了创伤弧菌脓毒症患者12例，现报告如下。     

创伤弧菌脓毒症一例并文献复习

目的 探讨创伤弧菌脓毒症的临床特点、诊断及治疗.方法 对1例创伤弧菌脓毒症的临床资料进行分析,并结合文献进行总结.结果 创伤弧菌脓毒症临床上多表现为急性发热、寒战、休克和特征性下肢血性大疱样皮损、皮肤及肌肉坏死等,进展极为迅速,多数病例于48 h内死于多脏器功能衰竭.结论 此症预后差,病死率高,早期、联合、足量使用敏感抗菌素是治疗关键.     

Atypical manifestation of Vibrio vulnificus septicaemia

Vibrio vulnificus is a Gram‐negative marine bacterium that may cause local wound infection, gastroenteritis, or septicaemia. Fatal septicaemia usually presents with fever, shock, and large haemorrhagic bullae on the legs. This report is about a man who had severe V. vulnificus septicaemia but presented with atypical features of leg pain and diffuse purpuric skin lesions. V. vulnificus septicaemia should be suspected if the following are present: septic shock, leg pains associated with diffuse purpuric skin lesions, recent consumption of raw seafood, and a past medical history of liver cirrhosis.     

乌司他丁联合抗菌药对创伤弧菌脓毒症大鼠心肌的保护作用

目的观察创伤弧菌脓毒症大鼠的心肌酶变化及心肌超微结构的病理改变,探讨乌叫他厂联合抗菌药物对创伤弧菌脓毒症大鼠心肌损伤的干预作用。方法对60只成年雌性大鼠采用腹腔内注射创伤弧菌悬液建立脓毒症模型,将其分为四组,每组15只,分别为胀毒症对照组（C组）、氧氟沙星治疗组（K组）、乌司他丁治疗组（u组）、乌司他丁联合氧氟沙早治疗组（L组）。C组大鼠出现休克症状后观察各组大鼠心肌组织透射电镜下超微结构改变。H时留取血液标本,采用酶联免疫吸附剂测定法行心肌酶学检测。结果L组_人冬氰酸转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、羟丁酸脱氢酶（HBDH）值均明显低于其他三组（P均〈0．01）。K组、U组仅CK值显著低于C组（P均〈0．01）,而其AST、LDH、HBDH水平与C组比较均无统计学意义（P均〉0．05）;U组与K组AST、CK、LDH、HBDH的水平差异无统计学意义（P均〉0．05）。C组大鼠心肌细胞的超微结构病变最重,K组心肌纤维的超微结构改变较少,U组心肌纤维的超微结构改变较K组多,而L组心肌纤维的结构基本正常。结论乌司他丁伍用抗菌药治疗对创伤弧菌脓毒症大鼠急性心脏损伤具有明显的保护作用。     

浙江省舟山市售贝类中创伤弧菌的定量检测及毒力基因分析

目的 了解2010-2012年浙江省舟山市售贝类中创伤弧菌(Vibrio vulnificus,VV)的污染状况与季节性变化规律,及其毒力相关基因分型。 方法 采用3%氯化钠碱性蛋白胨水增菌,纤维二糖一多粘茵素E(cc)琼脂分离贝类海产品中的创伤弧菌,可疑菌落的鉴定采用API20E,采用最近似值法(most probable number,MPN)进行创伤弧菌的定量检测,应用PCR技术进行生物Ⅰ型、Ⅱ型和血清E型鉴定,及vcg、16S rRNA毒力基因分型。 结果 179份样品检出64株创伤弧菌,检出阳性率为35.75%。不同季节检出率差异有统计学意义(2=35.23,P0.05),夏季检出率最高为68%。39株VV菌株为溶血素A基因(hemolysin gene A, vvhA)核酸阳性,1株BT2型,1株血清E型,其余37株均为BT1型。vcgC/E和16S rRNA A/B毒力基因分型结果显示:CB型 31株,CAB型4株,EA型 3株,EAB型 1株。 结论 舟山市售贝类中创伤弧菌的污染状况严重,尤其是夏秋季,毒力基因型呈多样性,以CB型为主。应对贝类的食品安全进行风险评估,预防食源性疾病的暴发。     

腹泻样本中创伤弧菌的检测分析

目的 了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。 方法 对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37 ℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40 ℃培养18~24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。 结果 在144份腹泻患者粪便样本中检测分离到2株创伤弧菌,阳性率为1.39%(2/144);均为生物Ⅰ型,其基因型为vcgC/16S rRNA B型。药敏结果显示分离的创伤弧菌对氨基糖苷类抗生素耐药如阿米卡星、庆大霉素。 结论 在监测的腹泻样本中分离到具有较强致病能力的创伤弧菌,且氨基糖苷类抗生素耐药,应加强对海水产品和腹泻样本中创伤弧菌的检测及耐药分析,预防创伤弧菌的感染暴发。     

创伤弧菌脓毒症大鼠肝组织因子和组织因子途径抑制物的基因表达及抗生素的影响

目的 研究创伤弧菌(VV)脓毒症大鼠肝组织的组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)基因表达及抗生素头孢哌酮钠联用乳酸左旋氧氟沙星对其的影响.方法 110只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为正常对照组(NC组,10只)、创伤弧菌脓毒症组(VV组,分5个哑组,每亚组10只)、创伤弧菌脓毒症药物干预组(AA组,分5个亚组,每亚组10只).构建创伤弧菌脓毒症模型及药物干预模型.RT-PCR检测大鼠肝组织TF mRNA和TFPI mRNA的基因表达水平.应用SPSS 12.0进行t检验、方差分析等处理.结果 与NC组相比,VV组染菌后2 h,6 h,9 h,12 h,16 h TF mRNA表达均明显升高(P<0.05),其中染菌6 h表达最高;从组染菌后9 h,12 h的TF mRNA仍明显高于NC组(P<0.05),后逐渐减少.VV组与AA组的肝组织TFPI mRNA与NC组相比,均无明显改变(P>0.05).与相同时间点的VV组相比,AA组16 h TF mRNA明显降低(P相似文献   

Sensitively and quickly detecting Vibrio vulnificus by real time recombinase polymerase amplification targeted to vvhA gene

Vibrio vulnificus (V. vulnificus) is a Gram-negative bacterium living in warm and salty water. This marine bacterium could produce hemolysin (VVH), which often causes serious gastroenteritis or septicemia when people contact to seawater or seafood containing V. vulnificus. Timely diagnosis is regard as essential to disease surveillance. In this paper, we aimed at developing a quick and sensitive method for the detection of Vibrio vulnificus using real time recombinase polymerase amplification (real time RPA). Specific primers and an exo probe were designed on the basis of the vvhA gene sequence available in GenBank. Target DNA could be amplified and labeled with specific fluorophore within 20 min at 38 °C. The method exhibited a high specificity, only detecting Vibrio vulnificus and not showing cross-reaction with other bacteria. The sensitivity of this method was 2 pg per reaction (20 μL) for DNA, or 200 copies per reaction (20 μL) for standard plasmid. The detection limit (LOD) stated as the target level that would be detected 95% of the time and estimated was 1.58 × 10² copies by fit of the probit to the results of 8 replicates in different concentration. For quantitative analysis of the real time RPA, the second order polynomial regression was adopted in our study. The results showed the correlation coefficients were raised above 0.98, which suggested this model might be a better choice for the quantitative analysis of real time RPA compared to the routine linear regression model. For artificially contaminated plasma samples, Vibrio vulnificus could be detected within 16 min by real time RPA at concentration as low as 1.2 × 10² CFU/mL or 2.4 CFU per reaction (20 μL). Thus, the real time RPA method established in this study shows great potential for detecting Vibrio vulnificus in the research laboratory and disease diagnosis.