应用型特异性引物巢式PCR分析温州地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义

目的了解温州地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布及其与临床的相关性。方法选取温州地区HBVDNA阳性的慢性HBV感染者202例,其中慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者52例,慢性乙型肝炎103例,肝硬化27例,肝细胞癌20例,应用型特异性引物巢式PCR检测HBV的基因型。结果202例HBVDNA阳性血清标本中,B型37例（18．3％）,C型123例（60．9％）,B／C混合型41例（20．3％）,D型1例（0．5％）,未发现A、E、F和G型;与B基因型、B／C混合型相比,C基因型在慢性乙型肝炎和肝细胞癌中明显升高,分别为56．1％和14．6％（P〈0．05）;C基因型感染者血清丙氨酸氨基转移酶水平（226±268）U／L高于B基因型的（114±183）U／L和B／C混合型的（130±222）U／L,差异有统计学意义（P〈0．05）;C基因型感染者HBeAg阳性率和HBVDNA含量明显高于B基因型和BC混合型感染者相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论温州地区存在HBV的B、C、D和B／C混合基因型,C型为本地区的优势基因型．并且C型HBV感染易引起较重肝脏损伤。     

西安市慢性乙型肝炎病毒基因型检测及其临床意义

目的：明确西安市慢性乙肝患者血清中HBV基因型的分布状况及其临床意义。方法对262例慢性HBV患者的血清采用巢式PCR法进行病毒基因型检测,并分析HBV基因型的临床意义。结果262例慢性HBV患者的基因分型,C型186例（70.2%）、B型58例（22.1%）、B/C混合型18例（7.7%）,基因型分布在性别上差异无统计学意义,在慢性乙肝、肝硬化、肝癌中分布差异无统计学意义,HBeAg阳性率与HBeAg阴性率差异无统计学意义。结论西安市HBV的基因型以C型为主,其次为B型及B、C混合型;各基因型患者的临床特点相似;HBeAg阳性率与HBeAg阴性率相比较,各基因型间差异有统计学意义（P〈0.05）。     

嘉兴地区乙肝病毒基因分型与病理及耐药的关系

目的：了解嘉兴地区慢性乙型肝炎（CHB）患者乙型肝炎病毒（HBV）基因型分布的特点,探讨基因型与病理及核苷类药物耐药之间的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应方法检测85例CHB患者的HBV基因型,同时检测血清HBV DNA、乙肝三系、核苷类药物耐药,并进行肝组织病理检查。结果85例CHB患者B基因型32例（37.65％）、C基因型53例（62.35％）,C基因型患者的HBV DNA水平、HBeAg阳性率均明显高于B基因型,差异均有统计学意义（t=2.78,χ2=8.03,P均＜0.05）。肝组织炎症坏死及肝纤维化的进展程度,C基因型较B基因型明显加重,差异均有统计学意义（χ2分别=8.82、10.67,P均＜0.05）,C基因型较B基因型发生拉米夫定、替比夫定耐药更多,差异均有统计学意义（χ2分别=4.03、4.03, P均＜0.05）。结论嘉兴地区CHB患者HBV基因型以C型为主,C型HBV复制能力强,拉米夫定、替比夫定耐药更多,更易导致严重肝脏病变。HBV基因分型对判断肝脏病变的严重程度和指导临床抗病毒治疗具有重要意义。     

西安市乙肝患者HBV基因型分布及临床相关性指标的研究

目的 研究了解西安市乙型肝炎病毒(HBV)的基因型分布及其与临床相关性指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)关系和临床意义。方法 采用巢式PCR对389例西安市HBV感染患者的血清标本进行HBV DNA扩增,后用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RLFP)鉴定HBV基因型。并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝五项,速率法检测ALT和AST。结果 西安市389例HBV感染患者基因型分布为HBV B基因型58例占14.9%(58/389),HBV C基因型326例占83.8%(326/389),HBV B/C混合型5例占1.2%(5/389)。其中HBV B、C基因型与患者在性别和乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性率、HBV DNA载量水平及ALT和AST比较差异均无统计学意义(P0.05);B、C基因型患者在HBV携带者和慢性乙肝中分布比较差异无统计学意义(P0.05),但在肝硬化和肝癌中比较差异有统计学意义(P0.05)。HBV C基因型较B基因型更易发展成为肝硬化甚至肝癌。结论 西安市HBV感染者存在HBV B、HBV C、HBV B/C混合型3种基因型,以HBV C为主要基因型,B型次之,B/C混合型最少;肝硬化的发生与C型存在着一定关系,提示HBV C基因型更容易发展成为肝硬化。     

铜陵地区乙型肝炎病毒基因型分布及其与临床的相关性研究

目的了解铜陵地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布,分析该地区不同基因型别与肝功能损害、病毒复制水平及血清标志物的关系,探讨不同基因型的临床意义。方法采用聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法(RDB)对铜陵地区228例HBV阳性感染者的血清分别进行HBV基因型分型、HBV载量以及乙型肝炎血清标志物和肝功能等的检测,并结合其指标进行相关性分析。结果在228例患者的血清样本中,226例样本成功分型,其中B型54.4%(124/228)、C型37.3%(85/228)、B/C混合型7.5%(17/228),2例未检出,占0.09%。不同HBV基因型患者间年龄、e抗原(HBeAg)、e抗体(抗HBe)、肝功能的差异无统计学意义(P0.05)。C型HBV载量明显高于B型及B/C混合型(P0.01)。结论铜陵地区HBV基因型的分布以B型为主,其次为C型和少量B/C混合型;C型感染者HBV载量显著高于B型,C型感染者肝脏损害较B型重,提示HBV基因型可能影响患者体内HBV复制并可能引起不同临床类型的慢性肝病。     

148例肝硬化患者乙型肝炎病毒基因型分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因型与肝炎后肝硬化的相关性。方法用PCR荧光基因型分型方法对甘肃地区HBV感染者中148例肝硬化(LC)患者的血清标本进行分型。结果基因型在LC患者中的分布:B基因型39.86%(59/148),C基因型57.43%(85/148),两者差异有统计学意义(χ2=4.69,P=0.036);C基因型患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平明显高于B基因型患者(t=1.99,P<0.05);C基因型患者血清HBeAg阳性率明显高于B基因型患者(χ2=13.33,P=0.000)。结论甘肃地区LC患者主要有B、C两种基因型,以C基因型为优势基因型,C基因型与肝病的严重性有关。     

昆明地区HBV DNA基因型的分布特征

目的研究云南省昆明地区乙型肝炎病毒(HBV)的基因分型特征。方法采用荧光定量PCR及基因型特异性引物PCR方法,对云南省昆明地区360例HBV感染血清进行HBV DNA定量及基因分型检测,以ELISA法检测血清乙肝标志物。结果 360例HBV感染血清中有346例(96.11%)可以直接分型,其中196例(56.65%)为C型,91例(26.30%)为B型,37例(10.69%)为C/B混合型,21例(6.07%)为D型,A型仅1例(0.29%);比较显示,C型基因分布率显著高于其他基因型(P0.01);C基因及C、B混合基因型患者HBV-DNA定量显著高于B基因及其他基因型患者(P0.01或P0.05);另除B型基因在"大三阳"模式中比例显著较低(P0.05),HBV基因型在其他各血清模式组间的分布差异无统计学意义(P0.05);14例标本未能直接分型(3.89%),其HBV-DNA定量平均水平为4.136×10~3 IU/mL显著低于其他检样(P0.05)。结论昆明地区HBV基因型的分布较为丰富,存在C型、B型、C/B混合型及D型和A型,其中以C型和B型为本区域的主要HBV基因型;当C/B混合型和C型的HBV感染时,往往伴随HBV较高水平复制,且HBV感染B基因型与HBeAg的检出呈负相关;本区域内D基因型分布率介于内地低海拔区域和拉萨高原地带之间。这些可能是本区域内HBV基因型分布的流行病学特征。未能直接分型检样的HBV-DNA定量均较低,可能说明HBV基因分型应该在一定的HBV-DNA定量水平基础上进行。     

某地区慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型与临床的相关性研究

目的 了解该地区慢性乙型肝炎(CHB)患者基因型分布的特点,探讨基因型与临床之间的相关性.方法 采用荧光PCR方法检测256例CHB患者的HBV基因型,同时检测血清HBV DNA、HBV-M、肝功能等,并对其与性别、年龄、肝功能及病毒复制水平的关系进行分析.结果 256例CHB患者B基因型84例(32.81%),C基因型148例,B+C混合型24例.C基因型为优势基因型(χ2=17.66,P＜0.01);B基因型患者血清HBeAg阳性率76.19%,显著低于C基因型血清HBeAg阳性率86.49%(χ2=3.981,P＜0.05);C基因型患者的ALT、AST及TBIL均高于B型,但差异无统计学意义(P＞0.05).男、女性别中均以C基因型占优势,分别为67.56%和32.43%,差异有统计学意义 (χ2=6.10,P＜0.05;χ2=16.00,P＜0.01);C基因型平均年龄(32.38±13.90)岁,明显高于B基因型平均年龄(28.95±10.84)岁,差异有统计学意义(t=5.15,P＜0.01).结论 该地区CHB患者HBV基因型以C型为主,C型血清HBeAg阳性率高于B型.     

拉米夫定耐药感染者HBV基因与YMDD变异的相关性探讨

目的探讨拉米夫定耐药感染者HBV基因型与YMDD变异的相关性。方法采用PCR扩增后测序的方法,对162例拉米夫定耐药感染者进HBV基因型的分析。实时荧光定量PCR法检测HBVYMDD变异及HBVDNA载量。率的比较采用Y2检验法,两组均数间的比较采用t检验法。结果162例拉米夫定耐药感染者中,B基因型102例（63．0％）,C基因型60例（37．0％）。YMDD变异111例（68．5％）,其中YIDD变异30例（18．5％）,YVDD变异32例（19．7％）,YIDD／YVDD混合型变异49例（30．3％）。统计结果显示,不同性别之间HBV基因型分布没有显著性差别（P〉0．05）。B型患者的年龄（29．7岁±10．2岁）显著低于C型患者的年龄（35．3岁±11．3岁）,差异有统计学意义（P〈0．05）。YMDD变异的发生率在B、C基因型之间差异无统计学意义（P〉0．05）。C基因型患者血清的HBVDNA含量（6．08±0．71）显著高于B基因型组（5．73±0．90）（P〈0．05）,而血清ALT水平没有显著性差别（P〉O．05）。结论拉米夫定耐药感染者YMDD变异与基因型无关。但C基因型患者平均年龄、病毒载量显著高于B基因型,可能是导致CHB患者对拉米夫定耐药的重要因素。     

200例乙型肝炎患者HBV基因型分布及临床意义

目的探讨200例武汉地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者病毒基因型的分布及其与肝病严重程度的相关性。方法采用半巢式PCR对200例来自武汉地区的乙肝病毒感染者血浆HBV进行扩增后,Sanger测序法进行基因分型。结果200例HBV血浆样本的基因型分布为B型142例（71．0％）,C型55例（27．5％）,D型1例（O．5％）和B／C混合型1例（O．5％）,B／F／G混合型1例（O．5％）。在基因型B和基因型C中,无症状携带HBV患者、轻中度慢性乙肝患者、重度肝炎及肝硬化患者、肝癌患者的构成比分别为：37．32％,44．37％,14．08％,4．23％和23．64％,36．36％,21．82％,18．18％,两种基因型在肝病严重程度中的构成比差异有统计学意义（P〈O．05）。结论分离的200例HBV样本基因型以B,C为优势基因型,且基因型与HBV感染者发生肝病的严重程度有显著相关性。     

阿德福韦酯联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎病毒耐药分析

目的 通过研究乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布特点及耐药位点的分布,了解拉米夫定联合阿德福韦酯治疗慢性HBV耐药情况的发生,以探讨其临床意义.方法 选取在我院门诊和住院部就诊的曾经单用过拉米夫定或阿德福韦酯治疗失败的患者,再次使用拉米夫定联合阿德福韦酯治疗2年以上的慢性乙型肝炎患者73例,应用实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法检测HBV DNA分型情况,用连接酶检测反应(LDR)方法检测位点变异情况.结果 73例中14例未能检测出基因型,基因型检出率80.8％(59/73);其余59例标本检测到了基因型,其中B型11例(18.6％)、C型43例(72.9％)、非B非C型5例(8.5％).治疗1年的59例标本中有9例患者检测到了耐药位点,耐药发生率为15.3％,其中B基因型中检出2例(18.2％),C基因型中检出7例(16.3％),非B非C型基因型中未检出;各基因型中变异位点的检出率差异无统计学意义(x2=1.286,P＞0.05).治疗2年的59例患者中有24例患者检测到了耐药位点,耐药发生率40.7％,其中B基因型中检出4例(36.4％),C基因型中检出18例(41.9％),非B非C型基因型中检出2例(3.3％);各基因型中变异位点的检出率差异亦无统计学意义(x2=6.578,P＞0.05).治疗2年后在24例耐药患者中发生相关阿德福韦酯耐药率33.3％(8/24),发生相关拉米夫定耐药率58.3％(14/24),发生联合耐药率8.3％(2/24).结论 兰州地区HBV基因型主要以C基因型分布为主,其次是B型,还有其他基因型存在;不同基因型耐药发生概率相近,突变概率与基因型无关.对单用拉米夫定或阿德福韦酯治疗失败后的患者再次使用两者联合治疗,亦有较高的耐药风险.     

慢性乙型肝炎基因分型与阿德福韦酯疗效相关性研究

目的 调查本地区乙型肝炎病毒(HBV)基因分型的分布情况,观察乙型肝炎基因分型对阿德福韦酯抗病毒疗效的影响.方法 对285例慢性乙型肝炎(其中HBV基因型B型219例,C型66例)用阿德福韦酯治疗的慢性乙型肝炎的患者进行分析,观察治疗12周、24周、48周及96周丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV DNA定量、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)乙型肝炎病毒e抗体定量.结果 阿德福韦酯治疗12周时B组以及C组HBV DNA转阴率为30.6%及36.4%,HBV DNA下降均值为(1.36±0.98)eopies/ml及(1.31±1.40)copies/ml(P>0.05);治疗24周两组HBV DNA转阴率分别为33.8%及42.4%,HBV DNA下降均值为(2.19±1.18)copies/ml及(2.22±1.10)copies/ml(P>0.05).治疗48周两组HBV DNA转阴率分别为38.8%及45.5%,HBV DNA下降均值为(2.98±1.24)copies/ml及(2.97±0.92)copies/ml(P>0.05).治疗96周两组HBV DNA转阴率分别为44.8%及48.5%,HBV DNA下降均值为(3.41±1.68)copies/ml及(3.50±1.72)copies/ml(P>0.05).治疗12周后B、C两组HBeAg转阴HBeAb出现分别为10.6%vs 8.6%及11.6%vs 9.3%,24周后B、C两组HBeAg转阴/HBeAb出现分别为14.6%vs 11.3%及16.3%vs 11.6%,48周后B、C两组HBeAg转阴/HBeAb出现分别为27.8%vs 21.2%及25.6%vs 20.9%,96周后B、C两组HBeAg转阴/HBeAb出现分剐为36.4%vs 25.2%及39.5%vs 25.6%,两组差异均无统计学意义(P>0.05).两组ALT复常率12周为59.8%vs 47.0%(P<0.05),24周为60.3%vs 63.6%,48周为76.3%vs 77.3%,96周为80.0%vs 80.3%,两组差异均无统计学意义(P>0.05).结论 阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎B型及C型,病毒应答、生化应答及血清学应答相当,阿德福韦酯时HBV基因B型及C型疗效无明显影响.本地区HBV基因型以B型为主,C型次之,未发现A、D型.     

江苏省南通地区乙型肝炎病毒基因分型与临床相关性

目的了解江苏省南通地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法选择南通地区HBV-DNA阳性的乙型肝炎病毒感染者300例,其中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)189例,重型肝炎(CSH)26例,肝硬化(LC)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果300份血清标本中B型89例(29.7%),C型196例(65.3%),BC混合型15例(5.0%);C基因型在LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组和CHB组(P<0.05)。结论南通地区HBV基因型可能以B、C型为主,C型为优势基因型并与肝硬化、肝癌的发生相关。     

慢性乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒基因型与细胞免疫功能的关系

目的探讨慢性乙型肝炎（cHB）患者的乙型肝炎病毒（HBV）基因型与细胞免疫功能的关系及其临床意义。方法对108例CHB患者用聚合酶链反应（PCR）微板核酸杂交-酶联免疫吸附测定（ELISA）技术进行HBV基因分型,用流式细胞仪检测T细胞亚群、非特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、辅助性T细胞（Th）1、Th2、自然杀伤（NK）细胞,对其中55例人白细胞抗原（HLA）-A2阳性CHB患者检测HBV特异性CTL。结果108例CHB患者中,B基因型59例（54．6％）,C基因型48例（44．4％）,B、C混合型1例（0．9％）,HLA—A2阳性55例（51．4％）中,C基因型感染者27例,B基因型感染者28例;乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性率高于B基因型感染者（75．0％VS49．2％）（P〈0．01）,C基因型的HBVDNA水平高于B基因型感染者（6．12±0．81）log10copies／mlvs（5．02±0．61）log10 copies／ml（P〈0．01）,HBV特异性CTL低于B基因型感染者（0．21±0．06）％vs（0．39士o．12）％（P〈0．01）。非特异性CTL高于B基因型感染者（19．84±6．17）％vs（16．81±3．56）％（P〈0．01）,丙氨酸转氨酶（ATL）高于B基因型感染者（505．12±312．91）U／Lvs（222．11±205．16）U／L（P〈0．01）,血清总胆红素（TBIL）高于B基因型感染者（45．71±41．12）μmol／Lvs（28．18±15．12）μmol／L（P〈0．05）。结论与CHBB基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBVDNA水平高于B基因型感染者,HBeAg阳性率也高于B基因型感染者,因此C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,可能也与C基因型感染者的非特异性CTL比B基因型感染者高有关。     

不同临床类型慢性乙肝患者乙肝病毒基因型检测

目的探讨本院慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型分布特征及与临床类型的关系。方法利用线性探针分析法进行乙肝病毒基因分型。结果52例慢性乙肝患者检出乙肝病毒基因型B型24例（46．2％）,C型26例（50％）,A、B混合型2例（3．8％）,B、C两型均以男性多见,两型间性别比例差异无统计学意义（X2=0．65,P〉0．05）;在慢性肝炎轻度、中度、重度、肝硬化及肝癌中,B和C基因型的分布差异无统计学意义（P〉0．05）;A、B混合型2例分别为慢性乙型肝炎轻度和慢性乙型肝炎中度。C型HBeAg阳性率高于B型,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA载量两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本组慢性乙肝患者的乙肝病毒基因型以B、C为主要亚型,且C型稍多,C型HBeAg阳性率高于B型。     

湘潭地区乙型肝炎病毒基因型与YMDD基因区序列突变及BCP区突变关系探讨

【目的】对湘潭地区HBV感染者的基因型、YMDD基因区序列突变及BCP区突变情况及关系进行探讨。【方法】对952例不同类型的HBV感染者的样本同时进行基因型、YMDD基因区序列突变及BCP区突变检测和分析。【结果】湘潭地区HBV各种基因型分布比例为：B型占73．32％,C型占12．08％,B、C型混合感染14．60％。YMDD基因区序列突变结果显示：YMDD野生型,占88．66％,其余为YMDD突变型。BCP区突变结果显示：1762A／1764G（野生型）占70．59％,1762T／1764A（突变型）占19．75％,其余为混合型。基因型、相关性分析显示：HBVB型和C型YMDD基因区序列突变率无显著性差异（P〉0．05）,序列突变类别存在显著性差异（P〈0．05）,HBVC型YVDD突变率要高于B型。C型BCP区突变率要高于B型（P〈0．01）。HBV YMDD野生型和突变型的BCP区突变率存在显著性差异（P〈0．01）,HBV YMDD突变型标本BCP区突变率与YMDD野生型相比无差异,但YVDDBCP区突变率要高于其他类别。【结论】①湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有南方地区的特点。②拉米夫定治疗前通过HBV基因型检测来预测抗病毒应答可能并无实际意义。③HBV基因分型、YMDD基因区序列突变、BCP区突变检测的应用,将有助于临床上对乙肝患者的预后和转归进行正确评价。     

上海市金山地区乙型肝炎病毒基因型分布及其与临床的关系

目的了解上海金山地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者基因型分布及其与临床的关系。方法401例HBVDNA阳性患者采用聚合酶链反应（PCR）-酶联免疫吸附试验（ELISA）进行HBVDNA定量、微流基因芯片法进行基因分型、ELISA检测e抗原（HBeAg）及肝功能检查后进行综合分析。结果B型198例（49．38％）,C型169例（42．14％）,B／C混合型20例（4．99％）,未分型14例（3．49％）,未发现其他基因型。B型在慢性乙型重度肝炎（CSHB）患者中的比例显著低于无症状携带者（ASC）和慢性乙型轻、中度肝炎（CMHB）（P〈0．01）,而C型在CSHB患者中的比例显著高于ASC和CMHB（P〈0．01）。ASC中B型患者的HBVDNA水平最低。C型患者的丙氨酸氨基转移酶（ALT）和γ-谷氨酰基转移酶（GGT）水平均高于B型。结论上海金山地区HBV感染者基因型以B型为主,C型次之,少量B／C混合型,C型与重肝病关系比B型密切。