瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

藤茶蛇葡萄素对人卵巢癌细胞和人恶性黑色素瘤细胞增殖的抑制作用

目的:探讨藤茶蛇葡萄素(APS)的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法观察APS对人卵巢癌细胞SK-OV-3和人恶性黑色素瘤A375细胞抑制作用。结果:APS能明显抑制体外培养的SK-OV-3、A375细胞的生长。MTT结果显示,APS对SK-OV-3细胞的IC50为24.24μg/ml;对A375细胞的IC50为18.29μg/ml。结论:APS对体外SK-OV-3、A375细胞的生长均有明显的抑制作用。     

沙枣对人肝癌Bel-7404细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察沙枣提取物对人肝癌Bel-7404细胞增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法:以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocalteu法测定沙枣提取物各分离组分的总酚含量。通过MTT法,观察各组分对Bel-7404细胞增殖抑制作用。选取对Bel-7404增殖抑制活性最强的20%乙醇洗脱组分,设50、100、150μg/ml剂量组,采用Ainexin V-FITC/PI双染法,流式细胞仪检测其诱导细胞凋亡,并采用Hoechst 33258荧光染色法观察细胞形态变化。结果:沙枣提取物各分离组分对Bel-7404增殖抑制作用各不相同,其中20%乙醇洗脱组分的50、100、150μg/ml剂量组的凋亡率分别为29.8%、58.7%和76.2%;凋亡细胞的细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光。结论:沙枣提取物可抑制Bel-7404细胞增殖,诱导其凋亡,并与总酚含量呈现一定的量效关系。     

余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌BEL-7404细胞株凋亡的影响

目的:探讨余甘子叶化学成分没食子酸对人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的影响.方法:采用MTT法测定余甘子叶化学成分没食子酸在体外对BEL-7404细胞增殖的影响;普通光学显微镜、倒置相差显微镜和荧光显微镜观察余甘子叶化学成分没食子酸作用BEL-7404细胞后的形态学变化;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测余甘子叶化学成分没食子酸诱导BEL-7404细胞早期细胞凋亡的情况;Tunel法检测BEL-7404细胞的晚期凋亡情况及其凋亡率.结果:MTT法和显微镜观察显示余甘子叶化学成分没食子酸能不同程度抑制BEL-7404细胞的增殖,可致细胞形态学改变,出现典型的凋亡特征;AnnexinV/PI双标记法检测显示早期凋亡细胞随作用时间的延长而增加,Tunel法检测晚期凋亡细胞,其凋亡率亦随作用时间的延长而增大.结论:余甘子叶化学成分没食子酸能抑制BEL-7404细胞的增殖并诱导其产生凋亡,其对BEL-7404细胞的凋亡影响呈时间依赖性.     

月腺大戟及狼毒大戟体外抗肿瘤药理活性对比研究

目的:通过对比研究月腺大戟和狼毒大戟体外抗肿瘤药理活性,为狼毒质量标准制订提供准确的实验依据。方法:乙醇超声提取月腺大戟和狼毒大戟,取其浸膏配制成合适浓度为受试物,选取人肝癌细胞株BEL-7402,通过观察给药后肿瘤细胞外观改变、MTT法定量检测其IC50及细胞计数检测药物作用对肿瘤细胞生长曲线的影响,综合评价月腺大戟和狼毒大戟体外抗肿瘤药理活性。结果:月腺大戟作用于BEL-7402细胞48 h后,对BEL-7402细胞的IC50为90.0μg/mL;狼毒大戟对BEL-7402细胞有显著的增殖抑制作用,作用呈明显量效关系,在作用48 h后,对BEL-7402细胞的IC50为24.8μg/mL;月腺大戟和狼毒大戟同一浓度75μg/mL对BEL-7402细胞杀伤率分别为34.4%和50%,观测时间96 h计算其倍增时间(TD值)分别为18.0 h(空白对照为16.7 h)及26.6 h(空白对照为16.3 h)。结论:月腺大戟和狼毒大戟对BEL-7402细胞体外抗肿瘤活性相差甚远,月腺大戟对BEL-7402细胞无明显体外细胞毒作用,狼毒大戟对BEL-7402细胞生长有明显抑制作用,作用呈明显剂量依赖性,是一类很有...     

竹节香附素A联合顺铂对人肝癌细胞QGY-7703的协同抑制

目的:研究竹节香附素A联合顺铂对人肝癌QGY-7703细胞的协同抑制作用,为抗癌新药的研发应用奠定基础。方法:采用体外SRB法和MTT法研究竹节香附素A及竹节香附素A联合顺铂对人肝癌QGY-7703细胞的增殖抑制作用。结果:MTT法测定竹节香附素A给药24h,IC50为18.9μg/ml;竹节香附素A给药48h,IC50为4.8μg/ml。SRB法测定竹节香附素A给药24h,IC50为19.6μg/ml;竹节香附素A给药48h,IC50为5.4μg/ml。竹节香附素A联合顺铂协同给药药物浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml,药物浓度比例为1:1,给药24h,IC50为2.09μg/ml,联合用药系数CI为0.2414⁰.3991。结论:竹节香附素A有显著的抗肿瘤活性;竹节香附素A联合顺铂对人肝癌QGY-7703细胞有显著的协同抑制效果。     

白背叶提取物A对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究

目的 观察白背叶提取物A对肿瘤细胞增殖的抑制作用.方法 采用四唑盐比色实验(MTT法),以半数抑制浓度(IC_50)为评价抗肿瘤活性强度的指标,分别对4种常见的人恶性肿瘤细胞进行抗肿瘤活性的筛选.结果 白背叶提取物A在浓度为5 μg/ml时对人胃癌细胞SGC-7901,人肺癌细胞A549有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),其IC_50分别为27.14 μg/ml,33.08 μg/ml;在浓度为20 μg/ml 时对人结肠癌细胞LoVo有抑制作用(P<0.05),其IC_(50)为36.82 μg/ml;在浓度为40 μg/ml 时对人肝癌细胞Bel-7404有抑制作用(P<0.05),其IC_50为37.70μg/ml.结论 白背叶提取物A对以上4种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用.     

壮药鸡血藤提取物毒性作用及体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察鸡血藤提取物(MHD)的毒性及体外抗肿瘤作用。方法:采用常规小鼠急性毒性试验方法、MTT法观察鸡血藤提取物对人胃癌细胞株7901,人肝癌细胞株7404,人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的抑制作用。结果:MHD在大于20μg/ml浓度时对Hela细胞抑制率30%,有一定的抑制作用,其结果具有统计学意义。结论:MHD可能具有一定抑制Hela肿瘤细胞增殖及其诱发的移植性肿瘤作用。     

白木通醇提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究白木通乙醇提取物的体外抗肿瘤活性。方法:采用乙醇回流提取制备白木通醇提取物,以MTT法检测白木通醇提取物对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1的生长抑制情况。结果:白木通醇提取物体外对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1有抑制增殖作用。结论:白木通醇提取物具有一定的体外抗肿瘤活性。     

白头翁皂苷D体外抗肝癌作用及其机制研究

目的探讨白头翁皂苷D体外抗肝癌作用及其相关机制。方法采用MTT法考察白头翁皂苷D对人肝癌细胞BEL-7402增殖的影响,同时观察BEL-7402细胞形态的变化,采用集落形成实验考察白头翁皂苷D对BEL-7402细胞集落形成的影响;Hoechest 33342染色观察BEL-7402细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BEL-7402细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化;采用Western blotting法检测BEL-7402细胞Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT结果显示白头翁皂苷D对BEL-7402细胞增殖有抑制作用;集落形成实验结果显示白头翁皂苷D能明显抑制BEL-7402细胞集落的形成,白头翁皂苷D(25.00μg/m L)能显著诱导BEL-7402细胞凋亡;白头翁皂苷D(18.75、25.00μg/m L)能显著降低BEL-7402细胞线粒体膜电位;白头翁皂苷D(12.50、18.75、25.00μg/m L)可显著上调BEL-7402细胞中Caspase-3的表达;白头翁皂苷D(25.00μg/m L)可显著下调Bcl-2的表达。结论白头翁皂苷D有良好的体外抗肝癌作用,其机制与调节线粒体途径凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3的表达有关。     

吴茱萸次碱对三种肿瘤细胞体外增殖抑制作用的研究

目的:探讨吴茱萸次碱的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法检测了不同浓度的吴茱萸次碱在不同的时间点对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源Hep G2肝癌细胞的抑制情况。结果:吴茱萸次碱在浓度为64、32、16、8、4μg/ml时,对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源Hep G2肝癌细胞均具有明显的抑制作用,随着药物浓度增加,抑制率逐渐增大,与阴性对照组比较作用极其显著。吴茱萸次碱作用细胞24h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为34.10、24.81和28.07μg/ml,对H22的IC50值最小(24.81μg/ml),生长抑制作用最好;作用48h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为19.35、20.62和27.81μg/ml,对S180的IC50值最小(19.35μg/ml),抑制作用相对最好;作用72h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为15.35、17.74和14.52μg/ml,对Hep G2的IC50值最小(14.52μg/ml),抑制作用最好。结论 :吴茱萸次碱对三种肿瘤细胞增殖均有明显的抑制作用。     

银杏外种皮中银杏酸的体外抗肿瘤活性研究

目的:探讨银杏酸对肿瘤细胞和正常细胞生长的影响.方法:从银杏外种皮中制备纯度90%的银杏酸同系混合物.采用MTT法,检测银杏酸对各细胞株生长的抑制作用.结果:银杏酸浓度为5.0μg/ml时,对肿瘤细胞生长都有明显的抑制作用,其中对肺癌LTEP-a-2细胞抑制率达到59.1%,而对正常细胞无影响;高浓度银杏酸对正常细胞和肿瘤细胞生长的抑制作用趋于一致.结论:银杏酸对体外培养的肿瘤细胞有较强抑制作用,浓度低于5.0μg/ml时对正常细胞生长无影响.     

二去水卫矛醇对人卵巢癌细胞的体外抑制作用

[目的]研究二去水卫矛醇(1,2:5,6-dianhydroga-lactitol,DAG)对人卵巢癌细胞A2780和SKOV3增殖的抑制作用。[方法]采用噻唑蓝(MTT)比色法和CCK-8(cell counting kit-8)法检测不同浓度DAG对人卵巢癌细胞A2780和SKOV3的体外抑制作用,观察DAG的半数抑制浓度。[结果]MTT法检测结果显示,DAG对人卵巢癌细胞A2780、SKOV3作用72 h后半数抑制浓度(72 h-IC50)分别为19.97μg/ml、22.57μg/ml;而CCK-8法检测结果显示,DAG对人卵巢癌细胞A2780、SKOV3作用72 h后72 h-IC50分别为15.15μg/ml、16.15μg/ml。显微镜下可见DAG 72 h作用后细胞圆缩、胞质浓缩、胞浆内颗粒集中边缘化甚至细胞溶解等损伤现象。[结论]DAG在体外对人卵巢癌细胞A2780和SKOV3均有抑制生长作用。     

藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的实验研究

目的 探讨藤茶总黄酮的体外抗肿瘤作用.方法 采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用.结果 藤茶总黄酮能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长,MTT法IC50为20.71μg·ml-1;细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成法,当药物浓度在9.90μg·ml-1以上时抑制率为100%,当药物浓度为6.60μg·ml-1时抑制率为69.80%,当药物浓度为4.40μg·ml-1时抑制率为30.23%.结论 藤茶总黄酮对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用.     

竹节香附素A的体外抗肿瘤活性研究

目的:研究两头尖中主要有效成分竹节香附素A的体外抗肿瘤活性,为两头尖抗肿瘤有效成分竹节香附素A的创新药物研究提供科学依据。方法:采用体外MTT法,研究竹节香附素A对人体LAX肺癌、QGY-7703肝癌、Bre-04乳腺癌、Col-6肠癌及L929小鼠成纤维细胞株的增殖抑制作用;考察竹节香附素A对QGY-7703和L929细胞增殖抑制的量-效和时-效关系。采用流式细胞仪研究竹节香附素A对QGY-7703肿瘤细胞的诱导凋亡作用。结果:竹节香附素A对QGY-7703和L929细胞具有显著的抑制增殖作用,且其增殖抑制作用与药物给药浓度、给药时间呈现明显的量效和时效关系。竹节香附素A作用48小时后,对肝癌QGY-7703、肺癌LAX、乳腺癌Bre-04、肠癌Col-6和小鼠成纤维L929五种肿瘤细胞均具有抑制增殖作用,IC50分别为:5.09μg/ml,11.48μg/ml,9.32μg/ml,11.22μg/ml,12.71μg/ml,顺铂的IC50为:5.27μg/ml,6.04μg/ml,6.23μg/ml,6.78μg/ml和9.75μg/ml,其中竹节香附素A对QGY-7703细胞增殖抑制作用最强,作用强度略高于顺铂。竹节香附素A可以显著诱导QGY-7703细胞凋亡,给药剂量的增加,凋亡细胞比例增大。竹节香附素A低剂量(1μg/ml)给药,QGY-7703细胞的凋亡率为19.78%高于顺铂(2μg/ml)给药的细胞凋亡率12.68%,竹节香附素A给药(50μg/ml)24h细胞凋亡率达到67.29%。结论:首次系统研究了竹节香附素A的体外抗肿瘤活性,竹节香附素A体外对QGY-7703具有显著的抑制作用,进而发挥诱导QGY-7703凋亡的生物活性。     

大蒜多糖对人体肝癌BEL-7402的体外抑制作用

目的 探讨大蒜多糖(Garlic Polysaccharide,GP)对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用.方法 以10,30,100,300 μg/ml 的 GP 作用于体外培养的BEL-7402 细胞,并作用不同时间,通过 MTT 法检测 GP 对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 MTT 实验显示 GP可抑制 BEL-7402 细胞的生长,呈时间及浓度依赖性,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,流式细胞仪可检测到 BEL-7402 细胞凋亡率明显增加.结论 GP 能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人肝癌 BEL-7402 细胞的生长.     

蛇葡萄素钠体外协同卡铂抗小鼠肺癌Lewis细胞的作用

目的:研究蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞的体外抗肿瘤作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT比色法测定蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪检测蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用诱导细胞凋亡作用。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠单用在12.5、25、50、100μg/ml浓度范围内对小鼠肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用;6.25~50μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂3.12~25μg/ml联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应;流式细胞仪结果表明,蛇葡萄素钠25、50、100μg/ml与卡铂25μg/ml联合应用时,凋亡率显著增高。结论:蛇葡萄素钠单用在一定的浓度范围内对Lewis细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用,蛇葡萄素钠与卡铂合用可以增强卡铂的活性,有协同抑制作用,蛇葡萄素钠可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

蝎毒抗癌多肽对人白血病细胞生长的影响

目的:观察蝎毒抗癌多肽(APBMV)对体外培养的人早幼粒白血病细胞株HL-60生长的影响。方法:细胞毒性实验(MTT法)和生长抑制实验。结果:APBMV可使HL-60代谢MTT的能力显著低于对照组,其IC_(50)值为10.74μg/ml;在适当浓度,APBMV可显著抑制HL-60细胞的生长(P<0.01),剂量效应与时间效应关系明显,24h、48h和96h的IC_(50)值分别为19.41μg/ml、9.90μg/ml、11.41μg/ml,且24h与48h间、48h与96h间效应相比,均有显著相关关系(r=0.9660,P<0.05;r=0.9940,P<0.01);APBMV对HL-60细胞的生长抑制作用以48h为著,96h时效应不增强。结论:APBMV是东亚钳蝎蝎毒中有效低毒的抗肿瘤成分,可显著抑制白血病细胞的生长。     

夜香树3种甾体皂苷对人肝癌细胞株BEL-7404增殖抑制作用机制研究

目的: 探讨夜香树3种甾体皂苷(SSCN)对肝癌细胞株BEL-7404增殖抑制作用及其机制。 方法: 夜香树叶用有机溶剂提取并鉴定3种SSCN,体外培养BEL-7404细胞,采用细胞集落形成法体外测定SSCN对人肝癌细胞株BEL-7404增殖的影响;流式细胞技术检测细胞周期与凋亡率变化;单细胞凝胶电泳(SCGE)分析细胞DNA损伤;用质粒PBR322解旋反应观察SSCN对肿瘤BEL-7404细胞拓扑异构酶Ⅱ的影响。 结果: 3种SSCN对肝癌细胞BEL7404有明显的抑制作用, 并呈剂量-时间依赖性,流式细胞仪分析结果显示,G₀/G₁和G₂/M期细胞数增多,S期减少,呈现细胞阻滞现象,并伴有大量的细胞凋亡。SSCN可以引起DNA损伤,对TopoⅡ活性有抑制作用,可抑制Topo Ⅱ介导的质粒DNA超螺旋的解旋。 结论: SSCN对BEL-7404细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能是:①阻滞细胞于G₂/M期,最终导致细胞死亡。②损伤DNA,造成DNA双链断裂。③抑制Topo Ⅱ的催化活性,使DNA超螺旋增加。     

芫菁内斑蝥素和结合斑蝥素抗肿瘤活性的比较研究

目的 比较提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素的体外抗肿瘤活性.方法 将提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素作用于人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404;采用WST-1比色法进行体外细胞抑制实验,测定斑蝥素和结合斑蝥素对上述三种肿瘤细胞的生长抑制率.结果 斑蝥素对HT-29结肠癌细胞的抑制作用不稳定,对PLC/PRF/5和BEL-7404肝癌细胞的抑制作用随用药浓度的增加而增强,但在高浓度作用下仍表现出较低抑制率.结合斑蝥素对HT-29、PLC/PRF/5、BEL-7404三株肿瘤细胞均表现出明显的抑制效果,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度分别为:28.51,86.77,21.27 μmol/L.结论 芫菁体内结合斑蝥素对人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404的抑制作用远好于斑螯素,提示结合斑螯素的抗癌效果极可能好于斑蝥素.