儿童激素性高眼压与外周血淋巴细胞糖皮质激素受体表达相关性研究

目的 检测激素性高眼压患儿外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）,GRα和 GRβ的表达,研究其与儿童激素性高眼压的相关性。 方法 收集20例激素性高眼压患儿(高眼压组),10例使用激素后眼压正常患儿（对照组）,10例健康儿童(健康组)的外周血,提取淋巴细胞RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)法检测淋巴细胞内GRα、GRβmRNA表达水平。结果 儿童外周血淋巴细胞有GRα、GRβmRNA表达, 以GRα为主。高眼压组的 GRαmRNA 半定量比值为(1.35±0.08) , 与对照组（1.25±0.04）及健康组(1.33±0.09)相比,差异无显著性意义(均 P＞0. 05)。高眼压组的GRβmRNA半定量比值为(1.24±0.04),与对照组(1.28±0.03)及健康组(1.20±0.07)相比,3组之间的表达差异无显著性意义(均 P >0. 05)。结论 未发现儿童外周血淋巴细胞糖皮质激素受体GRα和 GRβ的表达水平与激素性高眼压之间相关性。     

激素性高眼压患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体α、β的表达及意义

目的 检测糖皮质激素性高眼压患者外周血单个核细胞(PBMCs)内糖皮质激素受体(GR)亚型GRα和GRβ mRNA的表达,并探讨其与激素性青光眼的关系.方法 收集9例激素性高眼压患者(高眼压组),10例用激素后眼压正常患者(正常眼压组),10例健康志愿者(对照组)的外周血,提取单个核细胞RNA,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PBMCs内GRα、GRβ mRNA表达水平.结果 外周血单个核细胞有GRα、GRβ mRNA表达,以GRα为主.高眼压组的GRα mRNA半定量比值为(1.11±0.17),与对照组(1.07±0.09)和正常眼压组(1.06±0.11)相比,其表达增高,差异有显著性意义(均P<0.05).高眼压组、正常眼压组、对照组的GRβ mRNA半定量比值分别为(1.030±0.004)、(1.040±0.004)、(1.030±0.006),3组之间的表达差异无显著性意义(均P0.05).结论 外周血GRαmRNA的表达水平与糖皮质激素性青光眼的发病密切相关,外周血GRβ mRNA与激素性青光眼的关系可能不大,但GRβ的作用仍需从其他方面继续研究.     

特发性血小板减少性紫癜患者激素敏感性与糖皮质激素受体亚型的关系研究

目的探究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者对糖皮质激素敏感性与其外周血单个核细胞内激素受体亚型表达的关系。方法采用实时定量RT—PCR和免疫组化技术检测不同激素敏感性ITP患者（包括糖皮质激素抵抗和敏感病人）外周血单个核细胞内α和β亚型糖皮质激素受体（GRα和GRβ）mRNA和蛋白表达，并将检测结果与正常对照组进行比较。结果糖皮质激素抵抗组患者外周血单个核细胞GRβmRNA表达量和GRβ蛋白表达阳性的单个核细胞比率明显高于激素敏感组及正常对照组（P〈0．01），而GRα mRNA和蛋白表达水平，各组之间无显著差异。结论ITP患者糖皮质激素敏感性与其GRβ表达水平密切相关。     

淋巴瘤患者外周血白细胞和淋巴细胞GCR表达及与化疗效果关系的研究

目的：探讨糖皮质激素受体（GCR）在淋巴瘤中的表达规律及与化疗敏感性的关系。方法;采用3H－DEX测定淋巴瘤患者外周血淋巴细胞的白细胞膜GCR位点表达,同时观察淋巴细胞和白细胞GCR位点数与化疗敏感性的关系。结果：淋巴瘤患者外周血白细胞和淋巴细胞GCR表达总体无差异但淋巴细胞GCR高表达者较白细胞高者对化疗反应性好,化疗不影响GCR表达,结论：淋巴瘤患者外周血淋巴细胞的测定对预测糖皮质激素（GC）疗效较外周血白细胞更有价值。     

地塞米松对人卵巢癌细胞糖皮质激素受体的调节

目的：观察地塞米松调节人卵巢癌细胞系3AO细胞增殖分化的作用机制及3AO细胞中糖皮质激素受体（GR）的表达。方法：①采用氨基安替比林法测定糖皮质激素受体拮抗剂（RU486）作用3AO细胞后阻断糖皮质激素的效应；②采用放射配体结合分析法检测3AO细胞中GR的表达；③采用定量RT-PCR法检测地塞米松对3AO细胞中GR的调节作用。结果：①RU486可完全阻断地塞米松对3AO细胞活性的诱导作用；②3AO细胞中存在高亲和力、低容量糖皮质激素受体；③地塞米松使GR结合活性明显降低，且具有时间依赖性。结论：3AO细胞中存在GR，地塞米松调节3AO细胞增殖分化的作用由GR介导，地塞米松可向下调节3AO细胞GR的结合活性，且具有时间依赖性。     

激素性青光眼与糖皮质激素受体关系研究

目的 :研究家兔糖皮质激素受体 (GR)与激素性青光眼 (SIG)的关系。方法 :实验前测定家兔外周血白细胞糖皮质激素受体 (GR)、血浆皮质醇 ,实验中隔日给家兔结膜下注射地塞米松 0 .5mg ,共 15次 30天 ,每周测量家兔眼压、房水流畅系数C值一次 ,分析GR、血浆皮质醇与眼压、C值的改变值间的关系。结果 :GR与眼压、C值的改变值间具有相关性 (P <0 .0 2 5、P <0 .0 1) ,血浆皮质醇与眼压、C值的改变值间无相关性 (P >0 .0 5、P >0 .0 5 )。结论 :GR的水平与眼组织对糖皮质激素的敏感性有关     

淋巴瘤患者外周血白细胞和淋巴细胞GCR表达及与化疗效果关系的研究

目的 :探讨糖皮质激素受体 (GCR)在淋巴瘤中的表达规律及与化疗敏感性的关系。方法 :采用3H- DEX测定淋巴瘤患者外周血淋巴细胞和白细胞膜 GCR位点表达 ,同时观察淋巴细胞和白细胞 GCR位点数与化疗敏感性的关系。结果 :淋巴瘤患者外周血白细胞和淋巴细胞 GCR表达总体无差异 ,但淋巴细胞 GCR高表达者较白细胞高者对化疗反应性好 ,化疗不影响 GCR表达。结论 :淋巴瘤患者外周血淋巴细胞的测定对预测糖皮质激素 (GC)疗效较外周血白细胞更有价值     

大鼠肺泡巨噬细胞Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1表达变化及其调节糖皮质激素受体功能的研究

目的：在模拟大鼠肺泡巨噬细胞炎症合并糖皮质激素治疗的条件下，阐明Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1（BAG-1）的表达变化及其对糖皮质激素受体（GR）功能的调节作用。方法：Western blot检测脂多糖（LPS）和地塞米松（Dex）作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1表达变化；免疫共沉淀法检测核蛋白中BAG-1与GR相互结合作用；相对荧光素酶法检测GR转录激活活性。结果：LPS和Dex作用后，细胞总蛋白中BAG-1L表达增加，BAG-1S表达无变化；核蛋白中只能检测到BAG-1L，表达量在LPS作用24h内逐渐增加；细胞核内BAG-1L与GR在LPS和Dex作用后存在着相互结合，同时GR转录激活活性逐渐降低，其变化与核蛋白中BAG-1L表达变化呈负相关。结论：LPS和Dex作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1L表达增加，与GR结合后共同转核，并抑制GR活性。该机制可能是感染条件下糖皮质激素抵抗的重要因素。     

大鼠严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体变化的实验研究

目的 研究大鼠在严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体（GR）的表达变化及意义，探讨影响GR改变的分子机制。方法 通过免疫印迹分析GR在严重烫伤后早期不同时相点肝脏中的表达变化及烫伤血清、细胞因子以及高浓度地塞米松对体外培养肝细胞GR表达的影响；应用放免和ELISA方法测定烫伤大鼠血清皮质酮和细胞因子TNF－α、IL-β的浓度变化。结果 大鼠肝脏GR的表达在严重烫伤后早期显著下调，而血清皮质酮和血清炎性细胞因子在烫伤早期均显著升高，体外实验则证实烫伤血清和TNF－α、IL－1对培养肝细胞的GR的表达有明显抑制作用，高浓度地塞米松作用则不明显。结论 严重烫伤会引起大鼠肝脏GR表达显著下调，烫伤早期分泌增多的炎性细胞因子可能是引起GR下调的主要原因之一，而烫伤早期机体内部大量生成的糖皮质激素对GR的表达并无显著影响。     

脑肿瘤周围水肿脑组织及外周血淋巴细胞糖皮质激素受体测定

目的:探讨脑肿瘤患者外周血淋巴细胞及水肿脑组织内糖皮质激素受体(GR)含量及相互关系。方法:应用放射免疫法测定32例脑肿瘤患者外周血淋巴细胞及瘤周水肿脑组织内GR的含量。结果:①手术前后外周血淋巴细胞GR的含量无统计学意义(P>0.05);②外周血淋巴细胞与水肿脑组织内GR含量无相关性;③激素治疗对外周血淋巴细胞及水肿脑组织内GR含量无明显影响。结论:外周血淋巴细胞GR含量不能反映瘤周水肿脑组织内GR含量;激素治疗对瘤周水肿脑组织内GR含量无任何影响。     

内源性库欣综合征患者外周血糖皮质激素受体敏感性的检测

目的 检测内源性库欣综合征患者体内糖皮质激素受体（GR）的数量与结合力的改变,为库欣综合征患者术后糖皮质激素合理替代治疗剂量提供参考。方法 按入院顺序依次纳入在四川大学华西医院内分泌代谢科住院并诊断为内源性库欣综合征的患者,并选择年龄及性别与患者匹配的健康志愿者作为对照组。采用流式细胞术检测两组受试者单个核细胞（PBMC）GR的数量和结合力,比较两组受试者差异,并分析库欣综合征患者血尿皮质醇水平与其GR数量及结合力的相关性。结果 共纳入库欣综合征患者17例和健康志愿者17例。库欣综合征患者GR数量和结合力分别为11.9±3.1、6.6±2.6;正常对照组GR数量和结合力分别为20.6±3.3、9.9±3.2。库欣综合征患者GR数量和结合力低于正常组（ P<0.05）;库欣综合征患者血、尿皮质醇水平与其GR数量或结合力无相关关系。结论 库欣综合征患者GR敏感性明显降低,建议手术切除肿瘤后患者采用生理剂量1.6倍的糖皮质激素替代治疗,以克服患者的糖皮质激素抵抗,维持糖皮质激素的生理功能。     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体及血浆皮质醇变化的初步研究

应用放射配体结合测定法、放射免疫测定法测定１１０例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）与血浆皮质醇（Ｆ）的变化。其中急性重症肝炎２０例、慢性重症肝炎２０例，慢性迁延性肝炎２０例，慢性活动性肝炎５０例以及对照组４０例。结果表明：各类乙肝患者ＧＲ水平明显低于对照组，而血浆Ｆ高于对照组。同时测定２０例慢性活动性肝炎稳定期ＧＲ、Ｆ的变化，发现随病情的改善ＧＲ水平也升高，而血浆Ｆ无明显改变。     

糖皮质激素对兔炎症过程中中性粒细胞粘附的影响

为了探讨糖皮质激素在分子水平抑制炎症过程中中性粒细胞粘附的作用机理，分别测定了兔中性粒细胞ＣＤ１８的表达以及中性粒细胞与ＩＣＡＭ－１包被磁珠的粘附率，并对两者进行相关性分析。     

组蛋白脱乙酰酶2-核转录因子-κB/激活蛋白-1介导的重度哮喘对糖皮质激素不敏感的分子机制

 目的 探讨重度哮喘患者对糖皮质激素不敏感的分子机制,尤其从糖皮质激素/糖皮质激素受体（glucocorticoid/glucocorticoid receptor,GC/GR）及组蛋白脱乙酰酶2（histone deacetylase 2,HDAC2）及其下游的炎性转录因子途径进行研究。方法 临床招募健康对照者12例,轻中度哮喘患者12例,重度哮喘患者10例,收集其外周血,进行地塞米松（dexamethasone,Dex）抑制IL-8释放试验,检测重度哮喘患者外周血单个核细胞（peripheral blood molecule cells,PBMCs）是否存在激素敏感性下降。通过Western blot和细胞免疫荧光染色法检测PBMCs的GRα蛋白质水平及跨膜转运情况。HDAC2活性试剂盒检测PBMCs核蛋白的HDAC2活性,Western blot检测磷酸化NF-κB、激活蛋白1（activating protein-1,AP-1）的亚基磷酸化c-Jun及磷酸化c-Fos的水平。结果 重度哮喘患者PBMCs在TNFα诱导IL-8释放实验中表现出对Dex敏感性下降;GR总蛋白质水平虽然代偿性升高,但GRα水平下降且向核内转移减弱;HDAC2活性降低,炎性转录因子NF-κB、AP-1亚基被激活。结论 重度哮喘患者的PBMCs中存在激素不敏感,可能是通过HDAC2-NF-κB/Ap-1介导的炎症通路引起了GRα表达量下降和转运能力降低。     

糖皮质激素对兔脑、肺和肝组织糖皮质激素受体的调节

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松（Ｄｅｘ）对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比较无显著差异。提示糖皮质激素（ＧＣ）对兔不同靶器官ＧＲ的调节存在不同特点。     

面神经损伤后糖皮质激素受体α在面神经核及外周淋巴组织的表达

目的探讨面神经损伤后,糖皮质激素受体α（GRα）在面神经核团及外周淋巴组织的表达和变化规律。方法建立新西兰兔面神经损伤模型,分别于损伤后24 h4、8 h7、2 h、7 d1、4 d取出面神经核团和颈部淋巴结,采用免疫组化SP法,观察糖皮质激素受体的表达情况。结果糖皮质激素受体α在面神经核团及外周淋巴细胞中均有表达;糖皮质激素受体α表达增高在面神经核中出现在损伤48 h后,颈部淋巴结出现在损伤72 h后。结论糖皮质激素受体α表达在面神经核团及外周淋巴细胞胞核及胞质中,在面神经受到损伤后其表达量增高,而且神经损伤较单纯外伤可以引起较长时间的局部炎症反应。     

肝肾不足型重型斑秃患者血皮质醇及糖皮质激素受体mRNA的表达状况

目的探讨肝肾不足型重型斑秃患者血皮质醇、外周血单个核细胞(PBMC)中糖皮质激素受体mRNA(GRmRNA)表达状况与斑秃发病关系。方法采用化学发光法检测23例肝肾不足型重型斑秃患者血皮质醇表达水平,并用逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应分别检测该23例患者应用糖皮质激素(GC)治疗前后PBMC中GRmRNA表达水平,并与20例正常对照组相对比。结果重型斑秃组与正常对照组两组血清皮质醇水平差异无统计学意义(P>0.05),重型斑秃组治疗前、后GRmRNA表达水平均低于正常对照组(P<0.05),并且治疗后GRmRNA表达水平比治疗前更低(P<0.01)。结论重型斑秃患者存在GC-GR紊乱,GRmRNA表达水平降低可能参与了重型斑秃的发病机制。肝肾不足型重型斑秃患者PBMC中GR mRNA表达水平显著低于正常对照组,这可能是重型斑秃肝肾不足证型在受体及基因水平上的病理变化,也可能是重型斑秃肝肾不足证型的微观本质之一。     

严重烧伤早期小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体变化及安定-氯胺酮对其影响

目的观察严重创伤早期小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体(GR)蛋白表达的变化,并探讨安定-氯胺酮对其变化的影响,为安定-氯胺酮在创伤应激中的作用提供可靠实验依据.方法 95只成年健康昆明小鼠,随机分为正常对照组、烧伤组、安定-氯胺酮处理组、烧伤后安定-氯胺酮处理组,应用Western blot技术检测各组小鼠处理后早期24h内不同时期腹腔巨噬细胞GR的蛋白表达水平.结果小鼠严重烧伤后30min,腹腔巨噬细胞中GR的表达就已经开始降低,在6h达到最低,显著低于正常对照组,12h时逐渐回升,但在24h时仍低于正常.而安定-氯胺酮组GR的表达水平无显著差异,在严重烧伤后应用安定-氯胺酮能明显地抑制GR蛋白表达水平的降低,烧伤后安定-氯胺酮处理组各时相点与正常对照组相比无显著差异.结论严重烧伤可引起小鼠腹腔巨噬细胞GR表达水平的下降,而单纯应用安定-氯胺酮对小鼠腹腔巨噬细胞GR的表达水平无明显影响,在严重烧伤后应用安定-氯胺酮能显著抑制GR水平的下调,故安定-氯胺酮可能部分改善小鼠严重烧伤诱发的应激状态.