二磷酸盐对骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达影响的研究

目的分析趋化因子CXCL1及受体CXCR2在小鼠骨癌痛模型中的作用,并探讨二磷酸盐对小鼠骨癌痛模型的干预机制。方法 60只小鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组。股骨远端骨髓腔注射NCTC2742细胞复制小鼠股骨痛模型,治疗组给予二磷酸盐治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水。Real-time PCR分析各组中趋化因子CXCL1和CXCR2mRNA的表达,Western blot检测CXCL1、CXCR2蛋白及肿瘤坏死因子TNF-α以及细胞凋亡蛋白Bax/Bcl2以及Caspase-3的表达。结果模型组小鼠的机械缩爪阈值较对照组有显著的增高(P<0.05,P<0.01),而药物治疗组对模型组小鼠的升高的阈值有显著的改善作用(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达明显增强(P<0.01),二磷酸盐可以显著抑制CXCL1及CXCR2的表达(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠肿瘤坏死因子TNF-α、促细胞凋亡蛋白Bax及Caspase-3的表达明显增高,凋亡蛋白Bcl2的表达明显降低(P<0.01),而二磷酸盐可以显著改善上述指标表达(P<0.01)。结论二磷酸盐通过下调骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达、促进细胞凋亡发挥治疗骨癌痛模型小鼠的作用。     

趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在肝癌侵袭 转移中的作用及机制

目的 探讨趋化因子受体 CXCR4 及其配体 CXCL12（CXCL12/CXCR4）在原发性肝癌侵袭转移中的作用 及机制。方法 分别采用 Western blot、免疫组化和 Real-time PCR 等方法检测 60 例肝癌及对应癌旁组织标本中 CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平。常规培养 4 种肝癌细胞（Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B）和正常肝细胞 （7702）,Real-time PCR 检测上述细胞中 CXCL12、CXCR4 mRNA 的表达,筛选合适的实验细胞。将 CXCR4 干扰质 粒（sh-CXCR4）和对应空载体（sh-control）分别转染至 MHCC97h 构建稳转细胞系。Transwell 侵袭实验、细胞划痕实 验、MTT 实验分别检测 2 组细胞的侵袭、迁移和增殖能力。取稳定表达的 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞, 接种至 6 只裸鼠皮下,观察瘤体生长情况。Western blot 检测 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞及对应裸鼠移 植瘤中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,同时对转染 CXCR 过表达质粒的 MHCC97h 中 VEGF-C 的表达水平 进行检测。结果 （1）Western blot、免疫组化和 Real-time PCR 的结果均证实肝癌组织中 CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平均高于癌旁组织。（2）Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B 细胞中 CXCL12/CXCR4 mRNA 表达水平均高 于 7702 细胞,选取 MHCC97h 为实验细胞。转染 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的侵袭、迁移和增殖能力均明显低于 sh-control 组,同时接种含 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的裸鼠移植瘤的生长速度也明显小于 sh-control 组。（3）体外 和体内实验均证实 sh-CXCR4 组的 VEGF-C 表达水平均低于 sh-control 组,而过表达 CXCR4 后,VEGF-C 的蛋白表 达明显上调。结论 CXCL12/CXCR4 在原发性癌组织和肝癌细胞中呈现高表达,CXCL12/CXCR4 可能通过调控 VEGF-C 蛋白表达从而抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移。     

动脉粥样硬化小鼠主动脉组织中CXCL16和MMP-1表达

目的探讨动脉粥样硬化小鼠主动脉组织中CXC型趋化因子配体16(CXCL16)和MMP-1的表达。方法选取8周龄的SPF级ApoE基因敲除(ApoE^-/-)雄性小鼠10只,给予高脂饲料喂养构建动脉粥样硬化模型(实验组),另选取8周龄的SPF级雄性小鼠10只给予普通饲料喂养作为对照组。两组小鼠均在喂养8周后处死,将心脏-主动脉整条分离。采用Western blot法检测两组小鼠主动脉组织中CXCL16和MMP-1蛋白表达。采用RT-PCR法检测主动脉组织中CXCL16和MMP-1 mRNA表达。结果实验组小鼠主动脉组织CXCL16和MMP-1蛋白表达量高于对照组(P<0.05)。实验组小鼠主动脉组织CXCL16和MMP-1 mRNA表达量高于对照组(P<0.05)。结论动脉粥样硬化小鼠主动脉组织中高表达炎症因子CXCL16和MMP-1。     

CXCL12/CXCR4在佐剂性关节炎大鼠脾脏中的表达及芍药苷-6'-O-苯磺酸酯的作用

目的观察CXCL12及其受体CXCR4在佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠脾脏中的表达,以及芍药苷-6'-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导AA模型,随机分为正常对照组、模型组、CP-25(50 mg·kg~(-1))组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX,0.5 mg·kg~(-1))组。造模后d 14~28给药。HE染色观察脾脏的病理情况;免疫组化法和ELISA法检测脾脏中CXCL12的表达;免疫组化法和Western blot法检测脾脏CXCR4的表达。结果与正常对照组相比,AA大鼠脾脏动脉周围淋巴鞘的细胞密度增加,淋巴小结增多,脾脏中CXCL12和CXCR4表达增加;CP-25可以明显减少AA大鼠脾脏动脉周围淋巴鞘的细胞密度,改善淋巴小结增生,下调脾脏中CXCL12和CXCR4表达,且CXCL12和CXCR4表达与脾脏病理呈正相关。结论 AA大鼠脾脏CXCL12和CXCR4的高表达与脾脏病理改变有关,CP-25减少AA大鼠脾脏中CXCL12和CXCR4的表达可能是其发挥抗炎免疫调节作用的机制之一。     

去甲斑蝥素对CXCR4表达及MCF-7细胞迁移的影响

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的机制。方法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞株,采用MTT法检测NCTD对MCF-7细胞增殖抑制浓度;建立体外细胞趋化转移模型分析200,400,600μmol/LNCTD抑制MCF-7细胞迁移的能力;realtime PCR、Western blot分析不同浓度药物处理后的MCF-7细胞中CXCR4及CXCL12表达。结果NCTD可抑制MCF-7细胞增殖,具有明显的量效关系,24h的IC50为582μmol/L;在体外条件下,NCTD可以抑制CXCL12所趋化的细胞迁移;同时可以抑制MCF-7细胞中的CXCR4表达。结论NCTD通过下调CXCR4的表达抑制乳腺癌细胞MCF-7的迁移。     

子宫颈癌组织中 CXCL12-CXCR4生物轴及 MMP2-TIMP2的表达及意义

目的：探讨人子宫颈癌（宫颈癌）组织 CXCL12-CXCR4生物轴及 MMP2-TIMP2的表达,进一步研究宫颈癌发病的过程和转移机制。方法运用免疫组化法检测23例人宫颈癌患者（试验组）和因多发性子宫肌瘤行全子宫切除的患者25例（对照组）宫颈组织标本中 CXCL12-CXCR4和 MMP2-TIMP2的表达,研究其与子宫颈癌发病的相关性。结果与对照组相比宫颈癌组织中 CXCL12及 CXCR4阳性表达较多（ P <0.05）;与对照组相比,宫颈癌组织中 CXCL12及 CXCR4呈现高表达,二者与对照组比较,差异有统计学意义（ P <0.05）。与对照组相比宫颈癌组织中MMP-2及 TIMP-2阳性表达较多（ P <0.05）,与对照组相比,宫颈癌组织中 MMP-2及 TIMP-2呈现高表达（ P <0.05）。CXCL12与 MMP2呈正相关（ r =0.452,P <0.05）;CXCL12与 TIMP2呈正相关（ r =0.533,P <0.05）。结论宫颈癌发病和转移可能与 CXCL12-CXCR4生物轴及 MMP2-TIMP2密切相关,CXCL12是在其中起着重要作用。     

新型吡唑并[4,3-d]嘧啶衍生物的合成和抗炎活性

目的为了研发新型抗炎药,设计合成了一种新的吡唑并[4,3-d]嘧啶衍生物,并揭示了新化合物可能的抗炎机制。方法在显微镜下观察细胞的形态变化;通过Griess法测定新型化合物对脂多糖刺激的RAW264.7细胞中NO产生的影响;通过qRT-PCR评估TNF-α、IL-6和IL-1β的基因相对转录水平;通过qRT-PCR和Western blot测量环氧化酶-2表达,以及对NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路进行检测。小鼠体内实验通过HE染色观察肺组织变化。结果该新型化合物借助NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路可有效抑制RAW264.7细胞中NO的产生以及COX-2、TNF-α、IL-6和IL-1β的表达。同时,它还可以改善细胞的形态和缓解小鼠急性肺损伤。结论新型吡唑并[4,3-d]嘧啶衍生物通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路来产生抗炎活性。     

FTY-720通过TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路对小鼠肺纤维化模型的影响

目的探讨FTY-720对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将40只无特定病原体级健康雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、博来霉素组、生理盐水+FTY-720对照组、博来霉素+FTY-720组,每组各5只,在7天、14天处死小鼠,共8组。应用HE染色和Masson染色观察肺组织炎症及肺纤维化情况;通过瑞士-吉姆萨染色计数支气管肺泡灌洗液细胞;BCA法测定BALF蛋白含量;ELISA方法检测BALF上清液中炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平;免疫组织化学法检测肺组织中COL1A1的表达水平;Western blot方法检测TGF-β1、p-P38 MAPK和NF-κB表达水平的变化。结果FTY-720显著降低BLM诱导增加的小鼠肺组织细胞外胶原沉积;减少小鼠肺组织BALF中IL-1β和TNF-α表达水平,和蛋白质含量、细胞数;FTY-720抑制TGF-β1活性与P38 MAPK的磷酸化,进而抑制NF-κB的表达与活化。结论FTY-720通过抑制TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路,进而抑制博来霉素诱导小鼠的肺纤维化。     

Expression of Chemokine CXCL12/CXCR4 in Non-Small Cell Lung Cancer

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征间的关系.方法:采用免疫组织化学SP三步法检测95例NSCLC患者肿瘤组织及27例肺部良性肿瘤患者(对照组)的石蜡标本中CXCL12、CXCR4的表达情况,并比较其在不同临床病理参数患者间表达的差异.结果:对照组中,CXCL12和CXCR4的高表达率分别为0和7.4％(2/27),NSCLC患者的高表达率分别为54.7％(52/95)和42.1％(40/95),差异均有统计学意义(P＜0.01).在NSCLC中,淋巴结转移组的CXCL12和CXCR4的高表达率(67.2％、51.7％)均高于非转移组(35.1％、27.0％),差异均有统计学意义(P＜0.05).CXCL12、CXCR4的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高,且Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P＜0.01).NSCLC患者CXCL12与CXCR4之间无明显相关性.不同年龄、性别、肿瘤大小、组织学分型及分化程度NSCLC患者之间CXCL12、CXCR4的高表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CXCL12、CXCR4的表达水平可作为判断NSCLC预后的参考指标.     

西红花酸对白细胞介素1β诱导人膝关节原代软骨细胞炎症因子表达的影响

目的研究西红花酸对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的人膝关节原代软骨细胞分解代谢及炎症应答的影响。方法西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L-1处理人膝关节原代软骨细胞12 h,MTT检测细胞存活率。西红花酸0.5,1,5,10和20μmol·L-1处理人膝关节原代软骨细胞12 h后,再加IL-1β10μg·L-1处理24 h;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基质金属蛋白酶3(MMP-3)、MMP-13及Ⅱ型胶原(CollⅡ)mRNA水平;ELISA检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;试剂盒检测一氧化氮(NO)含量;Western印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)P85、磷酸化PI3K P85(p-PI3K P85)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、P65 NF-κB和p-P65 NF-κB蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,西红花酸对人膝关节原代软骨细胞存活率无影响。qRT-PCR和ELISA检测结果显示,与IL-1β处理组相比,西红花酸处理可抑制IL-1β诱导的MMP-3和MMP-13 mRNA和...     

抑抗汤对胚泡着床障碍小鼠子宫白血病抑制因子表达的影响

目的 观察抑抗汤对小鼠胚泡着床障碍的影响.方法 将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和对照组.中药组按照抑抗汤灌胃剂量进一步分为低、中、高剂量组,分别每日以0.4、0.6、0.8 ml抑抗汤灌胃;对照组每日0.8ml生理盐水灌胃.模型组和中药组于第4天晨皮下注射0.8 g/L米非司酮溶液0.1ml.第5天观察各组小鼠妊娠率和平均胚泡着床数,ELISA法检测小鼠宫腔冲洗液白血病抑制因子(LIF)蛋白浓度,实时荧光定量PCR检测子宫内膜LIF表达水平.结果 模型组妊娠率和平均胚泡着床数较正常组明显下降(P＜0.01).中药组妊娠率和平均着床胚泡数均较模型组呈剂量依赖性增加(P＜0.05).中药组LIF蛋白和mRNA水平较模型组升高.结论 抑抗汤可能通过促进LIF表达促进胚泡着床.     

牛磺酸对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及其作用机制的研究

目的观察牛磺酸对小鼠酒精性肝损伤的保护作用,并对其保护机制进行初步探讨。方法采用慢性乙醇灌胃法诱导小鼠酒精性肝损伤模型。将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、牛磺酸给药组和牛磺酸单独处理组,每组小鼠10只。运用H&E染色及Masson染色观察各组小鼠肝组织形态改变情况及纤维化情况,检测各组小鼠肝组织中丙二醛(MDA)的水平,Western blot检测各组小鼠肝脏中炎症小体(NLRP3)及相关炎性因子IL-1β蛋白表达情况。利用Hep G2细胞构造肝细胞酒精性损伤模型,分为4组,对照组、模型组、牛磺酸给药组和牛磺酸单独处理组,利用DCFH-DA染色检测肝细胞活性氧(ROS)水平,利用Western blot检测各组细胞中NLRP3及IL-1β蛋白表达情况。结果与模型组相比,牛磺酸给药组小鼠肝脏组织炎症及纤维化情况明显减轻,肝组织中MDA的含量明显减少(P<0.05),肝组织中NLRP3及IL-1β蛋白表达明显降低(P <0.01)。体外实验结果显示,牛磺酸给药组细胞中ROS水平较模型组明显降低(P <0.05);Western blot结果显示,牛磺酸给药组NLRP3及IL-1β蛋白表达较模型组相比表达明显降低(P <0.01)。结论牛磺酸在一定程度上抑制小鼠酒精性肝损伤的发生及发展,其保护机制主要可能与其抑制ROS的生成及抑制NLRP3和IL-1β炎症因子的表达相关。     

蛇床子素通过抑制髓核致炎大鼠脊髓背角CXCL1/CXCR2的表达发挥抗炎镇痛作用

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对大鼠髓核源性神经根痛的抗炎镇痛作用。方法雄性SD大鼠60只随机分为3组:髓核致炎组(NP组,n=36)、Sham组(n=12)、Blank组(n=12),检测术前和术后3、7、14、21、28 d的50%MWT;q-PCR检测术后各时间点脊髓背角CXCL1、CXCR2和TNF-α的mRNA水平,Western blot检测术后各时间点脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平。另外雄性SD大鼠64只髓核致炎后随机均分为4组:生理盐水组(NP+NS),DMSO组(NP+DMSO),Ost组(NP+Ost),CXCL1中和抗体组(NP+AF-515),于术后d 3经硬膜外注射相应药物50μL。给药前后多个时点均检测50%MWT。于术后d 7取L5脊髓背角,通过Western blot检测各组脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平。结果NP组术后各时间点的50%MWT较Sham组均降低(P<0.05)。NP组术后各时间点脊髓背角CX-CL1、CXCR2和TNF-α的mRNA水平均较Sham组升高(P<0.05),且NP组术后各时间点脊髓背角CXCL1/CXCR2的蛋白水平较Sham组升高(P<0.05)。NP+Ost组给药后50%MWT比给药前升高(P<0.05),NP+AF515组在给药后3 h 50%MWT升高,持续到给药后12 h(P<0.05)。NP+Ost组术后7d脊髓背角CXCL1/CXCR2蛋白表达降低(P<0.05)。结论脊髓背角CXCL1/CXCR2可能参与了大鼠髓核源性神经根痛的发生发展,蛇床子素通过抑制脊髓背角CXCL1/CXCR2的表达而缓解髓核致炎大鼠神经根性疼痛。     

小肠结肠炎综合征小鼠肠黏膜中NLRP3表达与炎症分子关系的研究

目的 探讨食物蛋白诱导的小肠结肠炎综合征（FPIES）小鼠肠黏膜细胞中炎症小体NOD样受体热蛋白结 构域相关蛋白3（NLRP3）表达水平,明确NLRP3异常与炎症分子及细胞焦亡的关联性。方法 利用卵清蛋白灌胃建 立食物蛋白诱导FPIES小鼠模型;实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和Western blot方法检测肠黏膜细胞NLRP3、 炎症分子及细胞焦亡通路分子的表达水平;采用药物干预黏膜细胞,分别抑制和激活NLRP3,Western blot方法检测 肠黏膜细胞炎症分子及细胞焦亡通路分子表达的改变情况。结果 FPIES小鼠肠黏膜细胞中NLRP3、炎症分子及细 胞焦亡通路分子表达水平显著上调（P＜0.05）;激活NLRP3表达,可以诱导炎症分子及细胞焦亡通路分子表达显著 上调,抑制NLRP3表达,可以显著上调炎症分子转化生长因子（TGF）-β和肿瘤坏死因子（TNF）-α表达（P＜0.05）。结论 FPIES小鼠肠黏膜细胞NLRP3表达与炎症反应及细胞焦亡密切相关,是调控FPIES肠道病理表型的上游靶标分子。     

[10]-姜酚对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

目的：研究[10]-姜酚对缺氧/复氧诱导原代乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：提取原代乳大鼠心肌细胞,分为空白对照组、模型组、[10]-姜酚不同剂量组（1、3、10 μmol?L-1）。细胞缺氧4 h,复氧2h制备缺氧/复氧损伤模型;CCK-8法测定心肌细胞存活率;测定细胞上清液中生化指标,如乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）;测定上清液中炎症因子,如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）含量;Western blot 测定心肌细胞RhoA、ROCK1、p-NF-κB蛋白表达。结果：与模型组相比,[10]-姜酚增加乳鼠心肌细胞存活率,显著降低细胞上清液中LDH、CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-1β含量。[10]-姜酚能降低心肌细胞中RhoA、ROCK1、p-NF-κB蛋白表达。结论：[10]-姜酚对乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与其抑制RhoA/ROCK1/NF-κB信号通路、减轻炎症反应相关。     

趋化因子CXCL12/CXCR4在非小细胞肺癌中的表达

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征间的关系。方法:采用免疫组织化学SP三步法检测95例NSCLC患者肿瘤组织及27例肺部良性肿瘤患者(对照组)的石蜡标本中CXCL12、CXCR4的表达情况,并比较其在不同临床病理参数患者间表达的差异。结果:对照组中,CXCL12和CXCR4的高表达率分别为0和7.4%(2/27),NSCLC患者的高表达率分别为54.7%(52/95)和42.1%(40/95),差异均有统计学意义(P<0.01)。在NSCLC中,淋巴结转移组的CXCL12和CXCR4的高表达率(67.2%、51.7%)均高于非转移组(35.1%、27.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。CXCL12、CXCR4的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高,且Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.01)。NSCLC患者CXCL12与CXCR4之间无明显相关性。不同年龄、性别、肿瘤大小、组织学分型及分化程度NSCLC患者之间CXCL12、CXCR4的高表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCL12、CXCR4的表达水平可作为判断NSCLC预后的参考指标。     

冰岛刺参岩藻聚糖硫酸酯对胰岛素抵抗小鼠炎症改善作用的研究

目的 研究冰岛刺参岩藻聚糖硫酸酯（fucoidan from the sea cucumber Cucumaria frondosa, Cf-FUC）对胰岛素抵抗小鼠炎症反应的改善作用。方法 以高脂高糖饲料饲喂法建立胰岛素抵抗小鼠模型。雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、Cf-FUC组。正常对照组饲喂标准饲料,其它组饲喂高脂饲料。阳性对照组、Cf-FUC组分别在饲料中添加罗格列酮（rosiglitazone, RSG, 1 mg?kg?1?d?1）、Cf-FUC (80 mg?kg?1?d?1）。各组小鼠自由摄食摄水19周。实验结束后,检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、MIP-1、IL-1β、IL-6和IL-10表达水平,荧光定量PCR方法检测小鼠脂肪组织炎症细胞因子基因mRNA表达水平,Western方法检测JNK1、IKKβ磷酸化蛋白水平及细胞核和细胞质中NFκB蛋白表达量。结果Cf-FUC可显著降低胰岛素抵抗小鼠血清TNF-α、MIP-1、IL-1β和IL-6浓度,增加IL-10浓度;抑制小鼠脂肪组织TNF-α、MIP-1、IL-1β和IL-6基因mRNA表达,促进IL-10基因mRNA表达;抑制JNK1和IKKβ的磷酸化,增加细胞质中NFκB蛋白表达量,减少细胞核中NFκB蛋白表达量。结论Cf-FUC能通过抑制JNK和IKKβ/NFκB信号通路抑制促炎症因子分泌,增加抑炎症因子分泌,改善胰岛素抵抗小鼠的炎症反应。     

卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系

目的探讨卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系,为卵巢肿瘤的治疗提供新的研究思路和药物作用靶点。方法采用流式细胞术与RT-PCR方法检测卵巢肿瘤干细胞系CAOV-3中CXCR4的表达,通过体外微孔隔离室（Transwell）检测CXCR4对CAOV-3细胞侵袭转移能力的影响。结果 CXCR4在CAOV-3中细胞呈阳性表达,CXCL12可促进CAOV-3细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制CXCL12对CAOV-3迁移的促进作用。结论 CXCL12-CXCR4相互作用可促进卵巢肿瘤干细胞侵袭转移,在卵巢肿瘤的生长和侵袭转移过程中起着重要作用。     

橙皮苷对高脂高糖诱导胰岛 β 细胞损伤的保护作用

目的探讨橙皮苷(hesperidin,HSD)对于高脂高糖诱导小鼠胰岛β细胞损伤的保护作用及机制。方法HSD预处理后,高脂高糖处理MIN6细胞。CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法检测MIN6细胞增殖与凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2的表达;RT-PCR检测炎症因子TNF-α、IL-1β的表达;ELISA检测小鼠胰岛的胰岛素分泌功能。结果高脂高糖培养抑制MIN6细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低Bcl-2/Bax比值,增加炎症因子TNF-α、IL-1β的表达并且抑制了小鼠胰岛的胰岛素分泌;当HSD预处理后,MIN6细胞活力增加,Bcl-2/Bax比值增加,炎症因子TNF-α、IL-1β的表达有不同程度的降低,小鼠胰岛的胰岛素分泌增加。结论HSD减少了高脂高糖诱导的小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡和炎症因子分泌,改善小鼠胰岛素分泌。     

人参皂苷Rb1促进小鼠口腔溃疡愈合的作用机制研究

目的:考察人参皂苷Rb1对小鼠口腔溃疡愈合的促进作用，探讨其通过抑制炎症和提高细胞增殖来促进溃疡愈合的机制。方法:建立小鼠口腔溃疡动物模型；利用分离得到的原代小鼠口腔黏膜成纤维细胞和体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,建立脂多糖(LPS)诱导的炎症细胞模型。分别考察人参皂苷Rb1对小鼠口腔溃疡愈合的促进作用，使用ELISA法、Western bloting、RT-qPCR法等，检测小鼠血清和体外培养细胞中，与细胞增殖和炎症相关因子的含量，以及胶原蛋白的含量。结果:人参皂苷Rb1促进小鼠口腔溃疡愈合率最高达到85.7%,远超阴性对照(28.6%),优于阳性对照的西瓜霜(71.4%)。在小鼠血清中，人参皂苷Rb1降低了炎症因子IL-17的含量，提高了TGF-β1的含量。在体外培养的口腔黏膜成纤维细胞中，人参皂苷Rb1显著提高了TGF-β1、CTFG、IL-10、Col1a1和Col3a1的基因转录，同时提高了细胞增殖，降低了促炎因子(CXCL2、CXCL10和IL-6)的基因转录。其中对TLR2和TLR4转录的显著促进作用，说明人参皂苷Rb1促进了细胞对炎症刺激的应答。在小鼠巨噬细胞R...