新冠感染者康复期血浆中高效价新冠病毒IgG抗体检测的ELISA试剂盒筛选

目的 通过对ELISA-IgG试剂盒检测不同时期采集的单份康复期血浆及病毒中和实验检测不同效价的混合血浆的结果进行比较与分析，确定能用于高效价新冠病毒IgG抗体筛查的试剂盒。方法 用A、B两种不同厂家ELISA-IgG试剂盒同时检测2020年2月～2022年1月采集的269份康复期血浆，分析两者结果的相关性及符合率，初步确定试剂盒；按照初步选定的试剂盒的系列稀释标准品效价，分档位制备5档混合血浆小样G4～G128,同时用厂家A和厂家B的ELISA试剂盒以及原始株、Omicron变异株BA.1和BA.2株的假病毒中和实验检测，分析结果的相关性，结合强阳性样品的孔外稀释倍数，确定可用于筛选高效价新冠病毒IgG抗体的试剂盒。结果 以内控参考品B₂为标准品，厂家A检测敏感度为1∶32,厂家B检测敏感度为1∶8,厂家A的检测敏感度是厂家B的4倍；两个试剂盒检测269份血浆结果的相关性Pearson r为0.944 1,P<0.000 1;初步选定敏感度较低的厂家B为备选试剂盒。混浆小样结果分析显示，厂家A结果与厂家B结果的相关性Pearson r为0.988,厂家A的...     

严重急性呼吸综合征康复者志愿特殊献浆前健康检查分析

目的　探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)康复者特殊献浆健康检查标准。方法　对志愿献浆的SARS康复者进行诊断确认、健康鉴定、常规献血前检查、血浆SARS冠状病毒荧光PCR检测及抗体ELISA检测。结果　 4 5名志愿者中有 19名因健康状况或近期献血、或SARS抗体筛查阴性或其他原因未单采血浆 ,其余 2 6名分别每人单采血浆 2 0 0ml(1例为月经结束第 2天 ,1例ALT异常 ,2例Hb偏低 ,1例胸片轻度异常 ,4例肺功能轻度异常和 1例中度限制性通气功能障碍 ) ,30名志愿者血样SARS冠状病毒抗体检测 (稀释 8倍以上 )仍呈阳性反应 ;SARS病毒荧光PCR检测均为阴性。结论　对特殊志愿献浆的SARS康复者 ,部分健康检查标准可酌情放宽 ,是否存在SARS冠状病毒抗体是采浆与否的重要参考指标 ,该抗体可能因具有中和病毒的作用而用于SARS的临床治疗     

无偿献血者接种新冠疫苗后特异性抗体及中和抗体变化研究

目的 分析无偿献血者人群接种新冠疫苗后所产生抗体滴度变化情况，为健康人群的献血策略、后续疫苗研发及新冠防治提供依据。方法 1)收集无偿献血者(共55人，其中接种灭活疫苗22人，接种重组蛋白疫苗33人)接种完全程的新冠疫苗后2周、4周、8周、12周、16周、20周血清，进行SARS-CoV-2总抗体(IgG+IgM+IgA)检测(胶体金法)及中和抗体检测(上转免疫发光法);2)将所得数据按照采集时间、年龄、性别分组，用Graphpad 8.0统计学软件进行t检验及方差分析研究各组之间的差异性，明确总抗体和中和抗体变化趋势。结果 接种新冠灭活疫苗或新冠重组疫苗的无偿献血者所产生的中和抗体及总抗体(IgG+IgM+IgA)具有相同的变化趋势，中和抗体及总抗体(IgG+IgM+IgA)分别在接种后第2、第4周达到峰值，后均逐渐下降，但接种重组蛋白疫苗所产生的抗体相较灭活疫苗具有更高的滴度，且下降速度缓慢、具有更持久的保护力。此外，不同性别和不同年龄之间产生的中和抗体及总抗体(IgG+IgM+IgA)均不具有统计学差异。结论 接种疫苗后第2周，中和抗体达到高峰，第4周总抗体滴度达到高峰，且基本不...     

不同ELISA试剂与1种假病毒中和试验检测COVID-19康复者恢复期血浆抗体结果分析

目的 了解不同的严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) ELISA抗体试剂应用于核酸检测确诊新型冠状病毒肺炎(COVID-19)康复者恢复期血浆抗体检测的结果差异性.方法 应用3种SARS-CoV-2 ELISA抗体试剂(代以ELISA试剂1、2、3)和1种假病毒中和试验(ppNAT),于2020年9...     

193份SARS患者血清IgG抗体检测和结果分析

[目的]探讨SARS患者体内抗SARS冠状病毒抗体产生和变化的规律。[方法]用间接ELISA方法进行抗SARS CoV IgG抗体检测。[结果]采用北京华大吉比爱生物技术有限公司研制的抗SARS冠状病毒抗体检测试剂盒对61例临床和实验室确诊住院患者193份血清进行了IgG抗体检测，结果散点图表明大部分病人在病程的第15d左右可检出IgG抗体，最早第7d可检出抗体；其高峰出现在第2d左右。系列血清检测结果表明抗体产生模式呈现多样化趁势。[结论]SARS病人可产生抗SARS冠状病毒IgG抗体，并以多种模式有规律变化。     

IL-2、IFN-γ和GM-CSF基因佐剂对pcDNA3/MDC-VP1 DNA疫苗免疫作用的影响

目的:观察IL-2、IFN-γ和GM-CSF重组质粒对pcDNA3/MDC-VP1 DNA疫苗免疫的免疫增强效果。方法:将50只4～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成pcDNA3组、pcDNA3/MDC-VP1组、pcDNA3/MDC-VP1+pcDNA3/hIL-2组、pcDNA3/MDC-VP1+pcDNA3/m IFN-γ组、pcDNA3/MDC-VP1+pcDNA3/mGM-CSF组,每组10只。均每3周接种1次,共3次。每次接种的第20d内眦静脉采血,用微量中和试验(固定病毒-稀释血清法)检测血清中和抗体效价。第3次免疫后3周,每组取3只小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液,检测淋巴细胞增殖活性与特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果:各组血清中和抗体滴度随免疫次数增加而提高(P0.05);第3次免疫后pcDNA3/MDC-VP1+pcDNA3/mGM-CSF组的血清中和抗体滴度、脾脏淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性均高于其他组(P0.05)。结论:三种细胞因子基因佐剂均能增强pcDNA3/MDC-VP1的免疫效果,GM-CSF基因佐剂的免疫效果优于IL-2和IFN-γ。     

2013-2015年广东省深圳市福田区3~18岁健康人群水痘-带状疱疹病毒抗体水平调查

目的 了解深圳市福田区3～18岁在校学生水痘抗体水平,探讨能否在1～12岁儿童中补充接种一剂次水痘疫苗。 方法 2013-2015年每年采集辖区幼儿园、小学、中学在校学生血清,用VZV-IgG 抗体试剂盒(ELISA)检测水痘抗体。 结果 共检测3044名学生,水痘抗体阳性率为62.81%,抗体几何平均浓度(GMC)为(668.45187.29)mIU/ml。6～岁组学生抗体阳性率(42.25%)和GMC(155.1766.25 mIU/ml)最低;接种疫苗后6~8年的学生抗体阳性率(47.20%)和GMC(227.6185.61 mIU/ml)最低;接种疫苗比不接种疫苗抗体阳性率和抗体水平均高,且差异有统计学意义(2=48.240,P=0.000;t=10.830, P=0.020);2006-2014年福田区水痘发病率为10.74/10万～53.51/10万,72.45%的病例为3～18岁在校学生。2010-2014年福田区共发生53起水痘暴发疫情,89.36%发生在小学1～4年级。 结论 接种一剂次疫苗后水痘抗体阳性率和抗体水平呈现先下降后上升趋势,6～岁组和在接种疫苗6年后的学生抗体阳性率和抗体水平最低,建议在做第二剂次水痘疫苗安全性研究的情况下将目前1～12岁儿童水痘疫苗改为两剂次接种。     

静注免疫球蛋白制品中水痘-带状疱疹病毒抗体效价的检测结果分析

目的检测静注免疫球蛋白(IVIG)制品中水痘-带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus,VZV)抗体的效价,为临床应用提供参考依据。方法以水痘-带状疱疹病毒人免疫球蛋白国际标准品为参考,采用以纯化的糖蛋白为抗原包被的ELISA定量检测试剂盒对20批IVIG制品进行VZV抗体效价的检测。结果 20批IVIG制品的VZV抗体效价为(3.4～4.1)IU/mL,比活为(68～82)IU/g IgG。结论 IVIG制品中VZV抗体效价可达200 IU/瓶(蛋白浓度5%,50 mL/瓶)。在我国还没有特异性水痘-带状疱疹人免疫球蛋白制品的情况下,可以考虑用作水痘或带状疱疹患者的替代治疗产品。     

两种试剂检测抗—HCV不同结果的分析

为了保证临床输血安全，检测丙型肝炎抗体是十分必要的。根据《献血者健康检查标准》对于初、复检血液要用两个不同厂家的试剂检测。我站用两种不同厂家的ELISA试剂盒检测抗－HCV，发现出现不同结果的现象，现报告如下：１材料和方法１．１对象：２０００年３～１２月街头无偿献血者５３７４例，年龄１８～５０周岁，血标本离心后检测。１．２方法：采用ELISA方法。１．３试剂：两种检测HCV抗体ELISA试剂盒均为国产试剂，称为１号试剂和２号试剂，均有国家生产批准文号，中国生物检定所批批检报告书并贴有防伪标签。１．４质控血清…     

一种检测人破伤风免疫血浆特异性抗体的快速准确方法

目的筛选出快速准确、经济实用的定量检测破伤风免疫血浆中特异性抗体效价的检测方法。方法分别用MTNT法、Rubin双扩法、ELISA法检测10个样品的抗体效价,分析比较3种方法的优缺点,筛选出实用的方法。结果1~10号样品MTNT法抗体检测效价分别为16.45、8.00、6.45、3.05、8.05、20.90、8.10、12.00、5.05、3.15I U/ml;2、5、7号样品符合国家的最低效价要求,作为工作参比品;ELISA法结果比MTNT法结果平均高8.7%,具有可比性;ELISA试剂盒精密性平均为4.69%,质量较为稳定。结论ELISA法的结果与MTNT法呈正相关关系,优于Rubin双扩法,适用于筛选高效价的人破伤风免疫血浆。     

四川地区健康供血浆者SARS-CoV抗体血清学反应初探

目的探索四川地区健康供血浆者SARS-CoV抗体血清学反应情况及其是否对SARS-CoV具有中和作用。方法采用SFDA批准的SARS CoVIgG ELISA试剂盒筛查四川地区7127名健康供血浆者的7248份合格血浆,采用蚀斑中和试验测定单份阳性血浆。结果7248份合格血浆中SARS CoVIgG抗体阳性率平均为5.61%;7127名健康供血浆者中抗体阳性率为3.93%,其中S/CO值>5的阳性率为0.22%。ELISA检测强阳性的单份血浆的最高蚀斑中和抗体效价为166。结论四川地区健康供血浆者中的确存在对SARS-CoV抗体的血清学反应,原因有待于进一步的研究。     

快速筛选健康供血浆者中高效价CMV抗体初探

目的　通过调查和分析健康供血浆者中巨细胞病毒 (CMV)抗体效价情况 ,为筛选高效价CMV抗体血浆制备特异性CMV免疫球蛋白提供依据。方法　随机抽取来自 5个浆站的健康人血浆样品 ,采用ELISA方法进行定性和定量筛查。结果　健康人血浆中CMV抗体阳性率高达 96 .8% ,个别浆站高达 1 0 0 % ,其中CMVIgG效价高于 1 0U/ml的比例达到 2 6 %以上。结论　从健康人血浆中收集高效价CMVIgG血浆用于制备特异性CMV免疫球蛋白是可行的     

双重平行检测批量样品对两个实验室RFFIT检测效能的评价

快速荧光灶抑制试验(RFFIT)是世界卫生组织(World Health Organisation,WHO)推荐的狂犬病病毒中和抗体检测标准方法之一,国内进行RFFIT检测的不同实验室之间互评可促进该方法推广时的标准化。病毒病预防控制所和中国药品生物制品检定所对200例人血清进行了双重平行RFFIT检测。结果显示双方检测中和抗体效价几何均值(genomic means titration,GMT)为1.89、1.84I U/mL,差别无统计学意义(t=-0.94,P>0.05);血清中和抗体阳性率为95.00%、93.00%,差别无统计学意义(χ2=0.71,P>0.05);双方结果定性一致率为89.00%,发生结果定性不一致的22例(11.00%)血清双方检测结果均<1I U/mL;67例双方检测结果均<1I U/mL的血清样品中有22例(32.84%)发生结果定性不一致。     

抗类鼻疽伯克霍尔德菌多抗血清的制备及评价

目的制备抗类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudoamllei,其抗原简写为BP)多抗血清,评价不同处理方式对抗原免疫原性的影响.方法 采用超声破碎、甲醛灭活、热灭活3种方式处理细菌抗原接种新西兰兔和BALB/C小鼠,检测不同抗原免疫动物抗血清的ELISA效价及凝集试验效价.结果 (1)ELISA方案最佳条件:二抗稀释度为1/8 000,抗原包被浓度为4 μg/mL或8 μg/mL;凝集反应最佳条件:细菌浓度为6×109 CFU/mL、凝集温度为37 ℃、观察时刻为4 h.(2)超声破碎抗原(U-BP)免疫新西兰兔和小鼠的抗血清ELISA效价高达1/64 000,最高血清凝集效价分别为1/32和1/64,甲醛灭活抗原(F-BP)抗血清ELISA效价高达1/16 000,凝集效价为1/128和1/64;热灭活抗原(H-BP)抗血清ELISA效价达1/8 000,凝集效价为1/16和1/64.(3)F-BP和H-BP具有较强的免疫原性,U-BP在小鼠中的免疫原性较弱(P<0.05).结论 建立了抗类鼻疽伯克霍尔德杆菌多克隆抗体的检测方法,制备了高效价的抗类鼻疽伯克霍尔德杆菌多抗血清;甲醛灭活和热灭活细菌具有较好的免疫原性,为下一步类鼻疽伯克霍尔德杆菌的致病机制研究和疫苗研发打下了基础.     

胱抑素C抗体的质量评价及应用分析

目的将日本进口的胱抑素C（Cys C）抗体与某公司制备的兔抗Cys C抗体、羊抗Cys C抗体进行质量检测,初步应用试验评估这3种抗体能否用于定量检测血清Cys C （胶体金免疫比浊法）试剂盒的研发。方法分别用紫外分光光度法、二喹啉甲酸（BCA ）法检测3种Cys C抗体浓度;以聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测效价;然后将这3种Cys C抗体分别标记胶体金颗粒,以胶体金免疫比浊法测定血清Cys C ,比较其初步应用性。结果日本进口Cys C抗体浓度高达15．0～16．0 mg/mL ,某公司自制兔抗Cys C抗体、羊抗Cys C抗体浓度范围在3．0～4．0 mg/mL之间;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示3种抗体纯度相近,结果为85％。其抗体效价大于或等于1∶104;胶体金免疫比浊法测定Cys C的临床比对结果证实公司自制抗体与日本进口Cys C抗体有较好的可比性。结论某公司的兔抗Cys C、羊抗Cys C抗体与日本进口Cys C抗体虽浓度不同,但均具有高纯度和高效价的特点,可用于定量检测血清Cys C（胶体金免疫比浊法）试剂盒的研发。     

BAS-TRFIA法检测抗环瓜氨酸肽抗体方法学的建立

目的利用生物素-链霉亲和素放大系统建立一种可快速、灵敏地定量检测患者血清中抗环瓜氨酸肽(anticyclic citrullinated peptide,CCP)抗体的时间分辨荧光免疫分析法(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)。方法将链霉亲和素同铕标记二乙烯三胺五乙酸酐结合制备铕标记链霉亲和素衍生物;生物素同兔抗人IgG抗体结合制备生物素化IgG抗体,后者在免疫检测系统中可联结铕标记亲和素和抗CCP抗体从而形成复合物。最后通过测量Eu3+-链霉亲和素在615nm的荧光值计算血清抗CCP抗体水平。结果该方法具有更宽的线性范围,其线性范围为0.58-9463U/ml,而应用ELISA试剂盒检测线性范围只有18.48-591.4U/ml。此外,该方法的抗CCP抗体检测限可达0.5U/mL。回收率为96.45-104.63%。用BAS-TRFIA和ELISA法测得的值具有很好的相关性(R2=0.892 7)。结论本研究数据表明我们的建立的BAS-TRFIA法在测定抗CCP抗体上较传统ELISA试剂盒有很大改进,为RA的诊断和治疗提供了一个更为理想的免疫方法学选择。     

5种新型冠状病毒核酸检测试剂应用于DXcellenceTM全自动核酸检测分析系统的性能评估

目的 探讨5种新型冠状病毒核酸检测试剂与DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统的适配性，为临床实验室选择新型冠状病毒核酸检测方法和仪器提供参考依据。方法 参考《病原体核酸即时检测质量管理要求专家共识》对定性项目的性能验证要求，在DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统上，搭配艾科诺公司(简称Accunome)的核酸提取纯化试剂盒，评价5种新型冠状病毒核酸检测试剂(杭州金迪安、武汉明德、江苏硕世、北京金豪和上海思路迪，简写为JDA、MD、SS、JH、SLD)的性能。结果 5种新型冠状病毒核酸检测试剂均可配合Accunome公司的核酸提取纯化试剂盒，在DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统上实现样本进、结果出的检测。5种试剂检测时间为：单个样本54～94 min, 12个样本65～105 min。JDA、MD、JH试剂对新型冠状病毒开放阅读框1ab基因(ORF1ab基因)329～450 copies/mL的检出率均为100%,在核衣壳蛋白基因(N基因)260 copies/mL的检出率均为100%;SS...     

基因工程乙型病毒性肝炎疫苗基础免疫5~11年后抗体阴性儿童加强免疫效果分析

目的 评价浙江省儿童基因工程乙型病毒性肝炎(乙肝)疫苗基础免疫后5~11年抗体阴性者不同乙肝疫苗、不同针次加强免疫效果。 方法 2009年9月在浙江省台州市、丽水市、衢州市选择1周岁内完成全程接种乙肝疫苗的5岁以上儿童4407例,采集静脉血,使用化学发光法检测血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)、乙肝病毒核心抗体(抗-HBc),选择免前三项指标全阴者2164例,按0、1、6完成3针乙肝疫苗接种。第1、3针乙肝疫苗接种后间隔1个月采血,免后检测抗-HBs。 结果 通过对接种第1、3剂次乙肝疫苗后1个月检测抗-HBs,其抗体阳转率大于95%以上,不同疫苗接种3剂次与接种1剂次免疫效果差异有统计学意义。 结论 乙肝疫苗免疫策略实施以来,疫苗免疫效果良好,但抗-HBs阳性率存在随时间推移逐步下降的趋势,建议对5岁以上免疫儿童实施加强免疫会有较好的效果。     

非SARS患者中儿童与成人抗SARS抗体检测与比较

为了调查非SARS患者中儿童与成人体内抗SARS血清抗体的阳性率 ,随意选取我院门诊及住院的 14岁以下儿童患者 197例 ,健康儿童 15 6例 ,同时选取我院 18岁以上门诊及住院的病人 4 5 3例 ,无偿献血者 5 0 2例 ,采用两种抗SARS冠状病毒特异性抗体检测试剂盒及ELISA方法测定血清中抗SARS抗体。检测结果发现 ,健康儿童与患病儿童人群中抗SARSIgG抗体的阳性率均为 2 %左右 ( 4 /197和 3/15 6 ) ,而健康成人和成人患者中抗SARSIgG抗体的阳性率均为 0 .2 %左右 ( 1/45 3和 1/5 0 2 ) ,两者相比差异具有显著性意义 ( χ2 =11.6 1,P <0 .0 0 1)。而IgM抗体均为阴性。结论 :儿童体内抗SARSIgG抗体的阳性率显著高于成人     

新型冠状病毒奥密克戎变异株感染的临床特点分析

目的 分析新型冠状病毒奥密克戎变异株本土感染患者的临床特征。方法 收集2022年3月至2022年4月本院住院治疗的52例新型冠状病毒感染患者的临床资料,回顾性分析患者流行病学特征、发病症状、血液检验、影像学特点、治疗方法等。结果 52例患者入院时无症状感染者38例,轻型11例,普通型3例。男34例,女18例;年龄(47.37±14.66)岁。临床症状表现以发热、咳嗽咳痰及全身酸痛为主,按照患者入院首次鼻咽拭子核酸检测N基因及ORF1ab基因的周期阈值(Ct值)分为Ct值≤20组及Ct值组>20,各26例。Ct值>20组比Ct值≤20组血清新冠抗体水平、中性粒细胞计数、总蛋白、血钾升高,疫苗接种剂次增加,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,血清新型冠状病毒抗体水平高(OR=1.004,95%CI:1.00±1.01)、中性粒细胞计数高(OR=1.701,95%CI:1.09±2.66),入院首次鼻咽拭子新型冠状病毒检测Ct值>20的患者增加,差异有统计学意义。血清新型冠状病毒抗体水平及中性粒细胞计数预测患者鼻咽拭子新型冠状病毒检测Ct值...