冰冻解冻去甘油红细胞制备中去白膜预处理的必要性研究

目的了解非去除白膜层和去除白膜层方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞中红细胞回收率和白细胞残留量,探寻简单并符合国家标准质控指标的制备方法。方法取33份红细胞悬液,分成2组,A组为非去除白膜层预处理共11份,B组为去除白膜层预处理共22份,-50℃速冻后置入-65℃冰箱保存,10-20d后取出解冻,均采用ACP215自动去甘油制成冰冻解冻去甘油红细胞。检测未处理红细胞悬液、解冻后去甘油前和去甘油红细胞成品中的红细胞回收率及白细胞残留量。结果A组成品红细胞回收率明显高于B组[分别为(84.27±3.21)%和(80.64±4.70)%],白细胞残留量略>B组,但仍在国标允许范围之内(0.75±0.14%)。结论ACP215制备冰冻解冻去甘油红细胞可采用非去除白膜层的预处理方法,制品质量符合国家标准,而且操作自动简便。     

2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的效果比较

目的观察2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的结果,比较洗涤溶液组合中是否加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液对洗涤结果的影响。方法取44份全血,应用ACP215血液处理仪制备成冰冻红细胞,分A组:9%NaCl溶液、羟乙基淀粉20氯化钠注射液、0.9%NaCl溶液;B组:9%NaCl溶液、0.9%NaCl溶液2种洗涤溶液进行解冻去甘油。对2组红细胞回收率、残留白细胞、残留血小板、甘油含量、游离血红蛋白含量、体外溶血等指标进行检测分析。结果 A组解冻红细胞的红细胞回收率(86.0±3.4)%、残留白细胞(0.57±0.18)%、残留血小板0、甘油含量(3.4±0.8)g/L、游离血红蛋白含量(0.55±0.14)g/L、体外溶血试验(12±5)%均符合国家标准,B组红细胞回收率(87.0±2.3)%、残留白细胞(0.51±0.24)%、残留血小板0、甘油含量(3.5±0.7)g/L、游离血红蛋白含量(0.47±0.10)g/L、体外溶血试验(10±4)%也符合国家标准,2组解冻红细胞制品也均符合AABB标准和欧洲标准中对于红细胞回收率的要求,2组结果差异无统计学意义,P>0.05。结论羟乙基淀粉20氯化钠注射液对使用ACP215血液处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞的洗涤效果无影响,但洗涤液中不加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液,其制品质量符合国家标准、AABB标准和欧洲标准,更加经济、省时。     

冰冻解冻去甘油红细胞制备工艺的改良

深低温冰冻保存可大幅度延长红细胞的体外存活时间和存活率[1].上世纪80年代初,美国FDA批准冰冻保存红细胞的有效期为10年[2].随着无偿献血工作的开展,为了使稀有血型血液得到长期保存和开展自身储血,国内也逐渐兴起了此项技术的应用.但由于冰冻解冻去甘油红细胞制备工艺复杂,影响质量的因素较多.     

甘油化震荡频率对冰冻解冻去甘油红细胞质量的影响

目的对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法进行探索并对其质量进行评价。方法随机抽取本站40 U相似文献   

冰冻红细胞去甘油技术研究新进展

为提高冰冻红细胞的质量和缩短冰冻红细胞去甘油流程的时间,冰冻红细胞去甘油的方法不断改进,由沉降法、离心法发展到膜分离法。沉降法快速简便,但是大分子沉降剂可诱发过敏性反应;离心法相对安全,但会对细胞造成渗透性损伤及机械性损伤。膜分离法从透析法发展到微流膜法,虽然能够解决上述问题,但装置的设计上尚未解决血液中泡沫堵塞等问题。本文就冰冻红细胞去甘油技术的研究进展进行综述。     

高碘酸钠法检测冰冻解冻去甘油红细胞中甘油残留量方法的探讨

目的 用高碘酸钠法检测冰冻解冻去甘油红细胞中甘油残留量,对检测方法和监测流程进行探讨、评价.方法 由于国内应用较多的甘油含量化学检测法,在血站的实际检测中存在技术方法上的不足,本文借鉴<中华人民共和国药典>甘油测定法对其进行了改进;针对血站日常监测冰冻解冻去甘油血液制品按照国家标准规定留样后面临的矛盾,本文进行了探索并改进了检测方法,与原标准比较;对此建立的检测方法和流程进行了测试评价.结果 用此法检测甘油含量的相关度较高(r=0.999 9);检测回收率平均为98.7%;检测CV≤3.2%;可采用10 mL取样量替代15 mL取样量.结论 本文建立的实验方法和监测流程更符合血站实际工作需要,可以达到操作简单、准确监控冰冻解冻去甘油红细胞中甘油残留量的目的.     

原料全血30℃保存24 h后制备的悬浮红细胞和血浆质量变化情况的初步研究

目的将全血分别在冷藏(4±2)℃与室温(30±1)℃条件下保存24 h,比较2种温度条件下由全血分离所得的悬浮红细胞及血浆在保存期内的质量变化。方法本次研究纳入20名健康无偿献血者,每人献400 mL全血,将其分成2份,每份200 mL。对照组在冷藏条件下保存;实验组在室温条件下保存,于24 h后将2组全血离心,分离血浆入转移袋,加入50 mL MAP红细胞保存液,制备得到悬浮红细胞。2组悬浮红细胞均放置在冷藏条件下保存,于保存d 1、7、14、21、35分别无菌取样检测Hb、Hct、MCV、溶血率、pH、K~+、葡萄糖、ATP、2,3-DPG、红细胞渗透脆性值等指标;2组血浆分别于全血采集1 h后及全血保存24 h后进行无菌取样,检测Ⅷ因子含量。结果分离所得血浆在全血采集1 h后与保存24 h后Ⅷ因子含量无明显变化。在35 d保存期内,悬浮红细胞的Hb、Hct和MCV值无显著性差异;d 35,研究发现实验组红细胞渗透脆性高于对照组(4.9±0.2 vs 4.7±0.2;P<0.05);2组溶血率、K+值随保存时间延长而增加,分别于d 7、14、21、35;d 1、7、14、21组间有显著性差异(0.29±0.14 vs 0.11±0.09、0.39±0.22 vs 0.18±0.08、0.80±0.22 vs 0.24±0.07、0.93±0.22 vs 0.38±0.11;10.5±1.2 vs 5.4±0.7、21.7±2.0 vs 18.6±2.6、24.8±1.6 vs 22.7±2.7、29.2±2.5 vs 27.1±2.8;P均<0. 05);2组ATP、2,3-DPG、葡萄糖、pH值随保存时间延长而下降,分别于d 14、21、35;d 1、7、14;d 1、7、14、21、35;d 1、7、21组间有显著性差异(4.2±0.2 vs 4.7±0.2、3.6±0.2 vs 4.5±0.2、3.1±0.3 vs 3.9±0.2;1.96±0.44 vs 10.67±0.87、1.33±0.34 vs 3.27±0.88、0.82±0.29 vs 1.49±0.45;23.2±1.1 vs 29.4±1.5、22.0±1.3 vs 27.4±1.1、21.5±0.8 vs 25.1±1.1、18.7±1.5 vs 22.8±1.2、16.1±1.8 vs 19.1±1.7;6.8±0.1 vs 7.0±0.1、6.7±0.1 vs 6.8±0.1、6.4±0.1 vs 6.5±0;P均<0.05)。结论与冷藏(4±2)℃保存条件下相比,全血在室温(30±1)℃保存24 h后进行离心制备,35 d保存期内的溶血率增加,2,3-DPG值下降;而分离所得血浆在全血采集1 h后与保存24 h后Ⅷ因子含量无明显变化。本研究为相关标准或规程的制定提供参考依据或以此来指导临床用血。     

冰冻红细胞解冻后残留甘油含量测定方法初探

目的　建立快速测定冰冻红细胞中残留甘油含量的方法。方法根据GPO PAP法测定甘油三脂的部分原理 ,将甘油用甘油激酶及三磷酸腺苷 (ATP)磷酸化 ,再以磷酸甘油氧化酶 ,氧化三磷酸甘油 ,生成H2 O2 ,并以4 氨基安替比林 (4 AAP)与 4 氯酚显色 ,显色程度与甘油含量成正比。结果含甘油 2 0 0 /L与 1 2 0 0 /L的样本批内CV值分别为 4 .4 9%、3.5 3% ,日间CV值为 4 .6 % ;甘油含 75 0～ 2 0 0 0 /L样本的回收率为 96 %～ 1 0 3% ;甘油浓度在 2 5 0～ 2 0 0 0 /L有较好的线性关系 ,r =0 .9999,Y =0 .0 0 0 5 6 2X +0 .0 0 0 7。结论甘油磷酸氧化酶法测定冰冻红细胞中残留甘油含量 ,具有方法简单、快速、特异、灵敏之特点 ,结果客观、准确、稳定     

甘油对冰冻解冻红细胞质量的影响探讨

目的比较两种方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量差异。方法随机取2~6℃保存6d内的RH阴性去白细胞悬浮红细胞60袋,应用ACP215全自动血细胞处理仪制备甘油化红细胞,-80℃冰箱保存1~24个月,其中30袋去甘油冰冻保存,30袋不去甘油冰冻保存,然后取出于37~40℃水浴快速融化后,选择ACP215全自动血细胞处理仪去甘油程序进行去甘油洗涤处理,检测冰冻解冻去甘油红细胞的质量指标,并与国家标准进行比较。结果两种方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞其血红蛋白水平、游离血红蛋白浓度、甘油残余量和细菌培养试验均满足《全血及成分血质量要求(GB18469-2012)》。结论两种方法均可制备符合国家标准的冰冻解冻去甘油红细胞。但从临床抢救角度看,采用冰冻前去甘油的方法,可以为临床抢救争取约30min的时间。     

甘油浓度对红细胞冻干保存效果的影响

目的探讨甘油浓度浓度对红细胞冷冻干燥保存的回收率、溶血率及残余水含量的关系。方法以甘油浓度分别为3%、6%、9%、12%、15%、18%、21%(w/v)的冻干保护剂处理红细胞,冻干,用显微镜观察细胞形态、血细胞计数仪检测细胞数、分光光度计测定游离血红蛋白量,分析细胞复水后红细胞计数、溶血情况。用热重法测定冻干红细胞水分含量,分析不同保护剂组红细胞的水分含量变化情况。结果复水后红细胞形态正常,甘油浓度为9%、12%、15%时,红细胞回收率分别为(77.08±9.41)%、(84.37±3.42)%、(80.21±9.20)%,红细胞溶血率分别为(19.82±2.23)%、(17.66±1.17)%、(15.86±2.23)%,相应的冻干红细胞残余水分含量为(19.43±1.36)%、(22.89±1.57)%、(26.17±1.09)%。结论保护剂中甘油浓度影响红细胞冻干保存的效果;甘油浓度为(9-15)%时对冻干保存的红细胞损伤较小;冻干红细胞残余水分含量随保护剂中甘油浓度的增高而增高。     

ACP215处理机制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工制备的对比研究

目的观察ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工洗涤制备的效果,并对其检测结果进行初步分析。方法采用48袋Rh（D）阴性全血,先甘油化冰冻保存,后解冻将其随机等分成2组,实验组采用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。按照相关标准分别对实验组和对照组的红细胞回收率、游离血红蛋白含量、甘油含量、残留白细胞、体外溶血试验进行检测分析。结果实验组的红细胞回收率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）,实验组的甘油含量、残留白细胞均低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。但是两种方法制备产品中游离血红蛋白含量、体外溶血试验的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞操作简单易行,安全可靠,省时、省力,且产品质量均符合国家标准,有实际应用价值,值得推广。     

论冰冻红细胞的质量检测

我站制备的冰冻红细胞测定结果为：细菌和霉菌培养均无菌生长；红细胞回收率82.96％；甘油残留量测定分别为：4．07g／L、4.24g／L、3.0lg／L、3．18g／L；游离血红蛋白测定和体外溶血率等各项指标均达到国家标准。     

甘油激酶偶联法测定解冻红细胞的甘油含量

受血者Rh(D)血型常规检测后,冰冻红细胞需求量明显增多.甘油用于红细胞冷冻保存,可通过红细胞膜,使溶液的冰点降低,增加未冻水量,具有冷冻保护作用.同时甘油对红细胞又有溶血作用,故解冻红细胞必须除去甘油,使红细胞内甘油含量少于1%才能在输注后获得适当的存活率[1、2].因此,准确测定解冻红细胞悬液上清液的甘油含量非常必要.笔者参考文献[3],建立了测定甘油含量的甘油激酶-甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶酶偶联法,报道如下.     

改良法在制备冰冻红细胞技术上的应用研究

目的 改良制备冰冻红细胞的甘油化过程,并对洗涤后的产品进行质量检测及分析评价。方法 随机抽取本站4℃保存7d内红细胞悬液(1U)标本20份,随机分为两组,实验组在甘油化过程中,用等渗于生理盐水的0.25mol/L的甘氨酸溶液,将57%的复方甘油试剂稀释至40%的甘油溶液,将甘油浓度降低,其他过程不变,对照组在甘油化过程中加入57%复方甘油试剂,将两组制备成冰冻红细胞,置于–80℃冰箱内保存,保存1个月后取出解冻去甘油化,比较两组冰冻解冻去甘油红细胞的质量指标,并进行分析评价。结果 两组的游离血红蛋白,甘油残余量等指标均符合《全血及成分血质量要求(GB18469—2012)》,且实验组的游离血红蛋白(0.60±0.05)、甘油残余量(0.56±0.23)、红细胞内的甘油总量(0.82±0.05)、溶血率(0.33±0.10)与对照组相比显著下降,有统计学差异(P <0.05),实验组的三磷酸腺苷A T P (5.34±0.35)、2, 3-D P G(538.40±59.96)与对照组相比显著升高,有统计学差异(P <0.05),实验组的红细胞回收率(86.9±2.18)与对...     

RHD阴性解冻去甘油红细胞输注阈值的回顾性调查

目的了解临床RHD阴性解冻去甘油红细胞输注阈值,并对内、外、妇科输血的必要性进行分析。方法收集2005-01-2009-12-31期间临床内、外、妇科输注RHD阴性解冻去甘油红细胞患者前1 d的Hb值和《临床输血技术规范》的附件三(手术及创伤输血指南)和附件四(内科输血指南)中红细胞输注要求Hb为标准输注阈值做比较性分析,观察其输血的合理性、科学性。结果内、外、妇科输注解冻去甘油红细胞前阈值Hb平均分别为61 g/L7、3 g/L、85 g/L,三科平均输注解冻去甘油红细胞的阈值为73.3 g/L,内科RHD阴性解冻去甘油红细胞的输注阈值>100 g/L的仅占6.5%、外科占10.8%、妇科占37.5%。结论三者相比内科输血较为合理,妇科输血中非必要输血最多,其次是外科。     

冰冻解冻去甘油红细胞制备过程质量控制方法简

目的 探讨冰冻解冻去甘油红细胞制备过程的质量控制方法.方法 将40袋血液随机分为实验组和对照组,分别监测相关变量对产品质量的影响.结果 两种方法白细胞残留量、甘油残留量和容量合格率均为100％,血红蛋白含量和游离血红蛋白含量的差异有统计学意义（x2和P值分别为5.625,0.044和10.157,0.030）.结论 血红蛋白含量和游离血红蛋白含量合格率与甘油化及去甘油化过程中的诸多因素有关.     

应用MAP在4℃条件下保存冰冻解冻去甘油红细胞的质量变化

冰冻解冻去甘油红细胞是采用特定方法将冰冻红细胞溶解后,清除几乎所有甘油,并将红细胞悬浮于一定的氯化钠注射液中的红细胞成分[1],该血液品种为临床常用的血液成分之一,用于稀有血型患者输血、新生儿RH溶血病换血以及自体输血长期保存等。临床使用时必须提前预约,在有库存的情况下最快也需要2~3h制备。去甘油的红细胞用生理盐水悬浮保存,必须在24h内输注[1],故临     

M115与ACP215制备冰冻解冻去甘油红细胞的比较研究

红细胞冰冻是保存稀有血型红细胞的一项技术,也用于自体红细胞储存及保持血型平衡[1～4].冷冻保护剂多为甘油,可长期保存[5],输注前要解冻并去甘油,洗涤方法有手工和机器两种.本研究采用M115型、ACP215型细胞洗涤机来制备冰冻解冻去甘油红细胞,并对产品各种质控指标进行分析.     

延长解冻去甘油红细胞4℃保存期的质量观察

随着临床医疗技术水平的不断提高,稀有血型血液的临床供应量逐步增加。由于目前解冻红细胞保存期仅为24h,在临床需求变更而当天无其他相同稀有血型患者使用时,血液将难以发挥其应有作用,直接造成血液的损失;目前解冻红细胞的制备时间为2h,还无法满足Rh（-）患者急诊用血的时间要求。针对以上情况,笔者尝试在目前血站操作规程及成分血质量标准的基础上,研究红细胞经解冻后用生理盐水悬浮在4℃环境下,     

MAP洗涤红细胞再冰冻的实验研究

目的对红细胞洗涤后冰冻保存的安全性探讨。方法选择20袋(2u/袋)悬浮红细胞,每袋分成2份(1u/份)为实验组和对照组,实验组制备成M AP洗涤红细胞后再冰冻保存;对照组直接制备成冰冻红细胞,一周后实验组和对照组用同等方法进行去甘油解冻,并计算红细胞的回收率及其相关质控指标。结果实验组和对照组冰冻红细胞回收率,甘油残余量,上清液游离血红蛋白含量及体外溶血率比较无显著性差异(P>0.05),两组成品无菌试验均阴性。结论M AP洗涤红细胞制备成冰冻红细胞,各项质量指标符合国家标准,能应用于临床,因而有效解决临床备用洗涤红细胞剩余而造成的血液浪费。