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分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用常规方法建立了4株稳定分泌抗重组人IL-6(rHuIL-6)单克隆抗体(McAb)小鼠杂交瘤细胞系1H3、2A10、3A3和4B1。其中,1H3为IgG2b(K),2A10为IgG1(K),3A3和4B1为IgG2a(K)。4株McAb特异性强,与细胞因子IL-1β、IL-3、IL-8、TNF-α、GM-SCF、ICAM-1,以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ELISA测定小鼠腹水McA 相似文献
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重组人GMCSF为可刺激骨髓细胞、粒细胞和巨噬细胞等多种细胞增殖,增强造血功能的细胞因子,目前,已广泛用于恶性肿瘤及各种原发性、继发性粒细胞缺乏症[1]的辅助治疗。为解决该细胞因子的纯化及检测,我们研制了抗该细胞因子的mAb杂交瘤细胞株,并进行了初步鉴定。1 材料和方法1-1 动物免疫 用重组人GMCSF按常规免疫8周龄雌性Balb/c小鼠3次,20μg/只·次,融合前3d,再经尾静脉追加免疫1次。1-2 mAb的制备 细胞融合、筛选及克隆化,参照文献[2,3]进行。1-3 mAb的特性鉴定… 相似文献
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抗创伤弧菌单克隆抗体细胞系的建立及其特性鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
创伤弧菌感染是海水养殖及野生海水鱼的重要疾病之一,可通过伤口和食物链感染人类,引起较严重的疾病,出现发热、寒战等症状,严重者可发生败血症,其死亡率高达 50% [1]。目前,尚缺乏对此种菌的快速检测及预防措施。我们采用杂交瘤技术,制备了抗创伤弧菌的单克隆抗体(mAb),以期为该菌的快速诊断及预防提供试剂。1材料和方法1.1材料创伤弧菌标准菌种由青岛海洋大学生命学院提供。 Balb/c小鼠(8 wk龄、雌性)由本校动物中心提供。小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0由本室保存。1.2方法1.2. 1mAb的制备将创… 相似文献
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抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST1 McAb杂交瘤细胞系的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 耐热性肠毒素ST1单克隆抗体制备及在感染性腹泻诊断中的应用。方法 应用基因工程菌株分泌的肠毒素制备ST1包涵体,免疫Balb/c小鼠,成功制备了3株特异性抗ST1的单克隆抗体细胞株,用其中1株McAb建立了检测ST1的双单克隆抗体夹心ELISA法。结果 检测52株从临床腹泻病人粪便中分离的大肠杆菌,检出ST1阳性率为26.92%,与ST1检测的经典方法乳鼠灌胃法符合率为96.15%。结论 该方法是一种简捷、灵敏和特异的检测方法,具有实际应用价值。 相似文献
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HM-KMC1人-鼠种间骨髓瘤细胞系是用SP^2/0-Ag14与正常人末稍血淋巴细胞融合。选择细胞形态好,生长快,含人染色1~3条的杂交瘤,经8氮什鸟嘌呤(8AG)耐药培养,形成对8AG有一定抵抗的耐药株。该株不分泌Ig,HAT试验为敏感株,分别和多种来源的人淋巴细胞进行6次融合均获成功,融合率高,经多年工作,完成了建系的有关实验研究。 相似文献
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抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
α毒素是A型产气荚膜梭菌所致严重创伤性气性坏疽的主要致死因素,至今尚无有效的防治方法,使用抗生素和多价抗毒素效果不明显t‘J。为此,我们采用细胞融合技术,制备了抗a毒素的单克隆抗体(InAb),为治疗气性坏疽患者的a毒素中毒提供可能性。互材料和方法1.l抗原和细胞a毒素抗原系重组菌株BLZI(DE3)(PXlryAI)的表达产物,按照表达系统十ET-28b(+)的操作手册进行提取。SpZ/0骨ff$细胞,由本室保存。且.2实验动物6周一百周龄*alb/C小鼠,由卫生部长春生物制品研究所提供。互.3抗a霉素mAb的制备动物免疫、细胞融合… 相似文献
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自杂交瘤技术问世以来,已在生物学、医学、兽医学等领域内推广应用,并利用杂交瘤技术成功地研究和揭示了许多疑难问题。在杂交瘤的筛选中,常用的有ELISA、间接荧光抗体及放射免疫等法,本文采用Dot-ELISA法进行猪伪狂犬病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的筛选试验,经反复试验证明,它是一种杂交瘤细胞系筛选试验有用的方法。 相似文献
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抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立秦玉倩吴悦周月梅(上海生物制品研究所免疫研究室,上海200052)Veterlein等[1]报道用抗尿激酶(UK)单克隆抗体(McAb)亲和层析柱,能从UK粗制品、甚至新鲜尿液中提取高纯度的UK,从而大大降低制备... 相似文献
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分泌抗MCG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立周昌奎蓝兰张云峰**(福建省计划生育科学技术研究所,福州350011*福建省立医院生物治疗中心**福建省福港生物工程研究中心)谢弘王放(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)以苯甲酸-丙酮一步法,从... 相似文献
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研究了以产生抗人小细胞肺癌相关抗原和CD3双特异性抗体(Bispecificantibody)的方法及双特异性抗体的性质,两个具有不同表型(HAT敏感/Neo拮抗和HAT拮抗/Neo敏感)杂交瘤细胞系,经常规方法进行融合,最后选出7个分泌双特异性抗体的杂交-杂交瘤细胞系以其中一个克隆系细胞进行了测示研究,结果表明,该克隆系细胞培养上清能有效增细LAK细胞对靶瘤细胞的杀伤活性,表明其具有临床应用前景 相似文献
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本文采用绿脓杆菌国际标准产毒株PA-103株,纯化绿脓杆菌外毒素A,免疫BALB/c小鼠。免疫鼠血清效价经ELISA法检测达1:80万。取脾脏混悬细胞10^8与10^7Sp2/0细胞,用50%oPEG(MW4,000)融合。取有克隆生长孔上清液用ELISA法筛选分泌抗体阳性孔。 相似文献
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