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首先制备胃癌组织可溶性抗原提取液,经耐热试验,外源性凝集素结合试验,高碘酸氧化试验,甲醇—氯仿抽提试验等理化处理后,检测MG5,MG7,MG9,MGb1,MGe1,MGd1,6株单抗相应抗原的活性变化,进行初步定性分折。结果表明:MG单抗相应抗原均能被外源性凝集素ConA所识别,并可耐热(80℃30min,100℃20 mim),但高碘酸氧化后抗原活性则丢失。MG7,NGdl相应抗原可被甲醇-氯仿抽提,MG5,NG9,MGb1,MGe1相应抗原则不能被其抽提,故认为MG单抗相应抗原是一组碳水化合物抗原,其抗原决定族存在于糖链上,为抗原的进一步纯化和鉴定打下了基础。  相似文献   

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作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定。首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。并制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再用MG5-Sepharose4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免疫印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上,免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。  相似文献   

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作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定,首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再甩MG5-Sepharose 4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免癌印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上.免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。  相似文献   

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取经病理证实的胃癌、结肠癌、胰腺癌组织共12例,正常胃,结肠粘膜4例,各取2g,制备可溶性抗原提取液,分别用ELISA方法检测MG5,MG9,MGd1MGel,MHb1相应抗原的含量,结果显示,MG单抗相应抗原在胃癌结肠癌组织中的分布均高于正常组织,但胰腺癌组织中则均为阴性。其中胃癌组织中的含量高于结肠癌组织,同一肿瘤组织中MG5,MG9,MGd1相应抗原的含量不同,但正常胃肠组织中也含有少量的MG单抗相应抗原,这一结果对探讨MG-Ags的表达机理及意义具有一定帮助。  相似文献   

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应用胃癌单抗ID1-2对833例窥镜活检组织进行了免疫学荧光检查,胃癌阳性检出率为81.6%;胃溃疡为32.7%;肠化生性萎缩性胃炎为40.0%;食管和结肠腺癌分别为60.0%和62.5%,与单纯性萎缩性胃炎和浅表性胃炎的阳性检出率相比有非常显著的差异(P<0.01)。表明ID1-2单抗可用于检测活检粘膜组织中的癌细胞以及具有癌细胞相关抗原的癌前病变组织,如果与内窥镜及常规病理学检查联合应用,将可  相似文献   

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应用单抗分析结晶天花粉蛋白的抗原决定簇   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文报道用制备的22株单克隆抗体为探针,采用ELISA双抗体相加试验以分析结晶天花粉蛋白上抗原决定簇的结果。经集群分析法处理,可将22株单抗集群为不同的六组。由此提示,结晶天花粉蛋白上有六个不同的、可被单抗识别的抗原决定簇。此数目与我们对结晶天花粉蛋白上B细胞识别的抗原决定簇进行计算预测所得到的结果相吻合。这对于从分子水平进一步探讨结晶天花粉蛋白结构与功能之间的关系奠定了基础。  相似文献   

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胃癌MG抗原IRMA临床应用价值的初步探讨   总被引:3,自引:0,他引:3  
自1975年建立杂交瘤技术以来,已研制出多种抗肿瘤的单克隆抗体,并广泛应用于临床的检测,显示出一定的诊断价值。我们于1994年起,应用胃癌MG抗原免疫放射(IRMA)试剂盒检测了多种肿瘤病人血清中的浓度,对其的诊断价值进行了探讨。 对象和方法 一、对象: (一)正常对照组:30例(男性16例,女性14例),平均年龄24.5±7.5岁。 (二)病人组:(1)胃癌:25例(男性15例,女性10例),平均年龄42.5±18.5岁。 (2)消化道溃疡:26例(男性14例,女性12例),平均年龄27.5±11.3岁。 (3)慢性胃炎,28例(包括浅表性胃炎7例和萎缩  相似文献   

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刘琰  袁政 《免疫学杂志》1990,6(4):243-246
本文对本室制备抗结肠癌单克隆抗体CL-4的对应癌相关抗原进行了初步分析,证明该抗原的性质为糖脂和糖蛋白;其抗原决定簇为一种含涎酸的碳水化合物结构,可能是结肠癌细胞膜上的神经节苷酯和癌细胞内的粘液性大分子糖蛋白,其分子量分别为115-205KD和256KD。并研究了CL-4和CA19-9两种单抗所作用的对应抗原决定簇是否相同。根据添加指数为28%,此值稍大于25%,表明这两种单抗所识别抗原决定簇不完全相同。该抗原可能是一种新的含涎酸的结肠癌标志物。  相似文献   

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应用简易的测定单抗衍生物抗原结合活性的竞争ELISA方法。不同浓度的抗铁蛋白单克隆抗体A-hF-c及其衍生物与一定浓度的A-hF-C-HRP偶联物一起竞争固相铁蛋白抗原,以50%偶联物被竞争抑制时的抗体浓度作为活性相互比较的依据,所得到的结果能够较真实地反映单抗衍生物活性保留的百分比。  相似文献   

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应用随机多肽文库测定BAC5单抗相关的抗原表位   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的 鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位。方法 应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物淘洗,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方法选择和鉴定阳性噬菌体克隆,对阳性和阴性噬菌体的外源性DNA片段进行序列分析,推导和比较由这些噬菌体所展示的多肽的氨基酸序列,结果 通过3轮生物淘洗能被抗体捕获的噬菌体克隆为77%(35/45),用竞争试验从所捕获的克隆中测得8个阳性克隆,来自这8个克隆的噬菌体展示3种外源多肽,即-H-Q-S-H-Y-P-V-V-S-L-(4/8),-Q-N-Q-A-W-F-S-Q-P-P-V-R-M-(3/8)和-T-Q-A-Y-K-G-F-P-V-L-P-S-(1/8),与来自阴性克隆的多肽序列-N-H-Q-S-T-F-W-Q-K-W-T-A-(6/6)比较,前3个序列在靠近肽的N端都具有相同的脯氨酸(P)和缬氨酸(V)结构(-P-V-)。结论 BAC5单抗能识别近N端含有脯氨酸和缬氨酸结构的多肽。这些多肽可能模拟存在于鼻咽癌细胞表面,与BAC5单抗相关的抗原表位的构象。  相似文献   

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本文用肝癌手术标本,制备细胞悬液,免疫BALB/c小鼠,融合产生杂交瘤,用ABC染色法筛选单克隆抗体,获得特异性较好的杂交瘤-HAb_(18),抗体亚类为小鼠IgG1,抗原经亲和层析获得,分子量为60KD,过碘酸-Schiffs染色阴性,脂蛋白电泳阴性,PI:8.2。肝癌免疫组化染色阳性率为75%。  相似文献   

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