苯并芘与肽聚糖体外协同对人皮脂腺细胞炎症因子表达的影响

目的：检测苯并芘（Bap）和革兰氏阳性菌细菌壁肽聚糖（PGN)体外对SZ95人皮脂腺细胞炎症因子表达的影响。方法：体外培养SZ95永生化人皮脂腺细胞,分为空白对照组、Bap组、PGN组和（Bap+PGN）组, PGN浓度为20μg/mL,Bap浓度 为10-5mol/L。 RT-PCR和ELISA检测SZ95永生化人皮脂腺细胞分泌白介素(IL-1α、IL-1β）、TNF-α mRNA和蛋白表达水平。结果：（Bap+PGN）组IL-1α,IL-1β和TNF-αmRNA及蛋白表达水平高于空白对照组、Bap组和PGN组,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：苯并芘协同增强PGN诱导的皮脂腺细胞炎症因子IL-1α,IL-1β,TNF-α的表达,这可解释为什么环境污染可加重或诱导痤疮 的发生。     

白藜芦醇对苯并芘诱导的人皮脂腺细胞炎症因子及相关基因表达的影响

目的 研究白藜芦醇对苯并芘诱导的SZ95人皮脂腺细胞炎症因子及相关基因表达的影响.方法 SZ95人皮脂腺细胞分为对照组、1×10-5 mol/L白藜芦醇组、1×10-5 mol/L苯并芘组及白藜芦醇+苯并芘组.实时荧光定量PCR检测各组SZ95人皮脂腺细胞中白细胞介素1α(IL-1α)、IL-6、芳香烃受体(AhR)、...     

异维A酸对肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞相关炎症基因表达的影响

目的 观察异维A酸体外对肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞中与痤疮发病可能相关的炎症基因表达的影响,探讨异维A酸治疗痤疮的分子机制。方法 将培养的SZ95细胞分成3组,对照组不做处理,另外两组用20 mg/L肽聚糖单独（肽聚糖组）或联合10-5 mol/L异维A酸（共刺激组）共同处理。作用3 h后,实时荧光定量PCR检测上述各组SZ95细胞中白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）以及Toll样受体2（TLR2）和其下游基因MyD88 mRNA表达水平;作用24 h后酶联免疫吸附试验检测各组细胞培养上清液中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、 TNF-α蛋白表达水平;作用48 h后Western印迹检测TLR2和MyD88蛋白表达水平。采用SPSS 23软件, 3组间指标的比较采用单因素方差分析,并采用Bonferroni校正进行两两比较。结果 对照组、肽聚糖组和共刺激组IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α mRNA和蛋白表达水平差异均有统计学意义（均P < 0.01）;其中,肽聚糖组上述指标均高于对照组及共刺激组,差异均有统计学意义（均P < 0.016 7）。上述3组间MyD88 mRNA表达差异也均有统计学意义（分别为6.707 ± 0.950、10.270 ± 0.477、7.892 ± 0.900,F = 10.17,P < 0.01）,肽聚糖组高于对照组及共刺激组,差异均有统计学意义（t值分别为4.740、3.298,均P < 0.016 7）。肽聚糖组TLR2 mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,但与共刺激组比较差异无统计学意义。结论 异维A酸抑制肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞中与痤疮发病可能相关的炎症因子的表达,其机制可能是通过抑制天然免疫应答中MyD88的表达而非TLR2本身,这可能是异维A酸治疗痤疮的机制之一。     

青蒿琥酯对痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞促炎症因子表达的影响

目的：研究青蒿琥酯（Art）对痤疮丙酸杆菌（P.acnes）诱导的人皮脂腺细胞(SZ95)促炎症因子表达的影响。方法：CCK8法检测不同浓度Art对人皮脂腺细胞活力的影响,筛选出适宜浓度的Art;RT-PCR、ELISA法检测肿瘤坏死因子（TNF)-α和白细胞介素（IL）-1β的表达。结果：Art在25～100μmol/L剂量范围内以剂量依赖关系抑制了痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α、IL-1β mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。结论：Art可抑制痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α和IL-1β。     

Clascoterone对SZ95人皮脂腺细胞增殖、脂质合成和炎症因子表达的影响

目的:明确clascoterone对雄激素作用下人皮脂腺细胞增殖、脂质合成和炎症因子表达的影响,探索其抗痤疮机制.方法:体外培养SZ95人皮脂腺细胞,分为双氢睾酮(DHT)组、clascoterone组,clascoterone+DHT组,CCK8法检测细胞增殖,尼罗红染色检测细胞内中性脂质,蛋白免疫印迹检测脂质合成相...     

人皮脂腺的分离和皮脂腺细胞的培养——一种体外培养模型

作者应用分离酶(dispase)分离出完整的皮脂腺,并应用3T3细胞饲养层培养技术,成功地培养了来源于皮脂腺的细胞。为进一步研究皮脂腺的形成和功能提供了一个理想的体外培养模型。方法和结果:①皮脂腺的分离:从健康志愿者的胸部或背部取皮肤标本,切成3×5mm小块,放入分离酶(2.4U/ml)4℃20小时后,用细镊分开表皮和真皮。表皮上具有保持完好且连有皮脂腺的毛囊。把表皮放入DNA酶37℃15分钟后,使用显微外科器械在解剖显微镜下从表皮上分离出完整     

芳香烃受体在人表皮、毛囊和皮脂腺上的表达及其意义

目的 观察芳香烃受体(AhR)在人表皮、毛囊及皮脂腺细胞上的表达及在二(噁)英作用下的激活情况.方法 采用免疫荧光和免疫组化法观察AhR蛋白在人面部表皮、毛囊、皮脂腺及体外培养的HaCaT细胞和SZ95人皮脂腺细胞上的表达情况;Western印记法观察2,3,7,8-四氯二苯-p-二(噁)英(TCDD)作用HaCaT细胞和SZ95细胞3d后AhR蛋白表达的变化情况.结果 AhR蛋白在人面部皮肤表皮、毛囊、皮脂腺细胞上表达,并且AhR蛋白在表皮棘层和颗粒层的表达强于基底细胞层,在皮脂腺小叶的外周和中央表达强于皮脂腺小叶中间,在毛囊外毛根鞘和近毛小皮细胞上的表达强于内毛根鞘细胞.AhR蛋白在HaCaT细胞和SZ95细胞的细胞核和胞质中高表达.在TCDD作用下,HaCaT细胞和SZ95细胞内AhR蛋白表达明显下降,显示AhR在TCDD作用下被激活.结论 AhR在人表皮、毛囊、皮脂腺、HaCaT细胞及SZ95细胞上高表达,并在TCDD作用下激活,显示二(噁)英有可能通过AhR信号途径引起了人表皮、毛囊和皮脂腺的异常分化.     

人皮脂腺细胞与雄激素关系的研究进展

雄激素是最重要的促皮脂腺活性激素。在雄激素作用下 ,人皮脂腺细胞大量分泌脂质是发生痤疮的前提条件。人皮脂腺细胞不仅是雄激素作用的靶位点 ,同时也具有合成活性雄激素的能力 ,是维持皮肤中雄激素稳态的主要场所。综述了人皮脂腺细胞和雄激素相互作用关系的研究进展。     

人皮脂腺细胞与雄激素关系的研究进展

雄激素是最重要的促皮脂腺活性激素。在雄激素作用下，人皮脂腺细胞大量分泌脂质是发生痤疮的前提条件。人皮脂腺细胞不仅是雄激素作用的靶位点，同时也具有合成活性雄激素的能力，是维持皮肤中雄激素稳态的主要场所。综述了人皮脂腺细胞和雄激素相互作用关系的研究进展。     

四氯二苯并二恶英对SZ95人皮脂腺细胞细胞色素P4501A1表达的影响及其意义

【摘要】 目的 探讨环境污染物2,3,7,8-四氯二苯并二恶英（TCDD）影响人皮脂腺细胞的细胞色素P4501A1（CYP1A1）分子信号途径及氯痤疮的发生机制。方法 实时荧光PCR研究10 nmol/ L TCDD作用SZ95人皮脂腺细胞2 h后CYP1A1 mRNA表达的变化;细胞免疫组化和斑点印迹法研究10 nmol/L TCDD作用SZ95人皮脂腺细胞3 d后蛋白表达变化情况。结果 实时荧光 PCR研究显示,CYP1A1 mRNA在SZ95人皮脂腺细胞呈低量表达,在10 nmol/L TCDD作用下,CYP1A1 mRNA表达增强了5.622倍,差异有统计学意义（P < 0.05）。细胞免疫组化显示,CYP1A1蛋白在SZ95人皮脂腺细胞核及胞质中低量表达,在10 nmol/L TCDD作用下表达明显增强。斑点印迹法证实,10 nmol/L TCDD作用于SZ95人皮脂腺细胞3 d后CYP1A1蛋白相对定量值（4.233 ± 0.252）显著高于未加药的阴性对照组（0.123 ± 0.208）,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论CYP1A1 mRNA和蛋白在SZ95人皮脂腺细胞上呈低量表达,但在TCDD作用下表达被激活,体外证明CYP1A1是TCDD影响人皮脂腺细胞异常分化的AhR下游靶位基因之一。 【关键词】 细胞色素P4501A1; 四氯二苯并二恶英; 皮脂腺; 细胞     

色素上皮衍生因子及受体在皮脂腺SZ95细胞的表达

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)及受体在皮脂腺细胞系SZ95细胞的表达。方法采用RT-PCR法检测SZ95细胞中PEDF及受体的mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测PEDF及受体蛋白的表达,同时免疫荧光法定位其在SZ95细胞中的表达情况。使用不同浓度双氢睾酮(DHT)作为刺激因子作用于SZ95细胞,实时定量PCR (qPCR)和免疫印迹法检测PEDF mRNA和蛋白水平变化。结果 RT-PCR发现PEDF及受体在SZ95细胞中均有表达,蛋白免疫印迹发现PEDF及受体蛋白质相对分子质量分别为50KD和55KD。PEDF主要表达在细胞浆内,PEDF受体主要表达在胞膜上。10μmol/L和100μmol/L DHT作用48h后,SZ95细胞PEDF mRNA和蛋白水平明显降低。结论在mRNA及蛋白质水平,SZ95细胞均表达PEDF及受体,雄激素可降低SZ95细胞PEDF表达。     

芳香烃受体在人表皮、毛囊和皮脂腺上的表达及其意义北大核心CSCD

目的 观察芳香烃受体（AhR）在人表皮、毛囊及皮脂腺细胞上的表达及在二噁英作用下的激活情况。方法 采用免疫荧光和免疫组化法观察AhR蛋白在人面部表皮、毛囊、皮脂腺及体外培养的HaCaT细胞和SZ95人皮脂腺细胞上的表达情况;Western印记法观察2,3,7,8-四氯二苯-p-二噁英（TCDD）作用HaCaT细胞和SZ95细胞3 d后AhR蛋白表达的变化情况。结果 AhR蛋白在人面部皮肤表皮、毛囊、皮脂腺细胞上表达,并且AhR蛋白在表皮棘层和颗粒层的表达强于基底细胞层,在皮脂腺小叶的外周和中央表达强于皮脂腺小叶中间,在毛囊外毛根鞘和近毛小皮细胞上的表达强于内毛根鞘细胞。AhR蛋白在HaCaT细胞和SZ95细胞的细胞核和胞质中高表达。在TCDD作用下,HaCaT细胞和SZ95细胞内AhR蛋白表达明显下降,显示AhR在TCDD作用下被激活。结论 AhR在人表皮、毛囊、皮脂腺、HaCaT细胞及SZ95细胞上高表达,并在TCDD作用下激活,显示二噁英有可能通过AhR信号途径引起了人表皮、毛囊和皮脂腺的异常分化。     

体外培养的人子宫内膜细胞中GnRH及其受体的表达

目的探讨促性腺激素释放激素（GnRH）及其受体（GnRH-R）在体外培养的人子宫内膜异位症（EMS）和对照组在位子宫内膜细胞中的表达情况。方法用酶消化分离法培养EMS和对照组在位子宫内膜细胞；用免疫细胞化学法检测培养细胞GnRH和GnRH-R表达。结果17例标本15例培养成功，成功率88．2％；GnRH和GnRH-R在EMS和对照组在位子宫内膜培养细胞胞浆内均表达阳性，但经过3-4次传代后，GnRH不再表达，而GnRH-R持续表达。结论在位子宫内膜细胞的消化分离培养是一种简便易行的方法；GnRH-R在培养细胞中持续表达提示其可以用于研究GnRH类似物（GnRH-a）对子宫内膜的直接作用。     

A型肉毒素下调UVB诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达

目的探讨A型肉毒素是否通过MAPK信号通路下调UVB诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达。方法培养HaCaT细胞,分为4组:对照组(未做任何处理);UVB组(80 mJ/cm~2);UVB+A型肉毒素组(80 mJ/cm~2+5 IU/mL);A型肉毒素组(5 IU/mL)。采用酶联免疫吸附试验检测HaCaT细胞培养液中的IL-6及IL-8细胞炎症因子的表达情况。通过蛋白免疫印迹法测定细胞内MAPK相关通路蛋白的表达水平。结果与UVB组相比,UVB+A型肉毒素组IL-6及IL-8细胞炎性因子释放减少。与对照组相比,UVB组p-ERK、p-JNK表达水平增加。UVB+A型肉毒素组与UVB组比较,p-ERK、p-JNK表达水平下降,而p-AKT~(Ser473)及p-P38无明显改变。结论 A型肉毒素可能通过p-ERK、p-JNK信号通路下调UVB诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞刺激因子及其受体BAFF-R的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）中B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体BAFF—R（属于肿瘤坏死因子家族的B细胞活化因子受体）的表达情况。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）以及免疫印迹法（westem blot）分别检测28例SLE活动期患者及24例SLE稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—RmRNA及蛋白的表达水平，并以21例健康志愿者作对照；同时将两者mRNA及蛋白的表达水平与SLE疾病活动程度进行相关分析。结果 SLE活动期、稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—R mRNA及蛋白的表达水平均明显高于正常人（P〈0．01），活动期患者的表达高于稳定期患者（P〈0．01）；BLyS mRNA及蛋白的表达与狼疮活动指数（SLEDAI）呈显著正相关（P〈0．01），BAFF—R mRNA及蛋白的表达与SLEDAI无明显相关性（P〉0．05）。结论 BLyS及其受体BAFF—R可能参与了SLE的发病机制。     

寻常疣患者外周血Th17细胞相关因子的表达及意义

目的探讨Th17细胞相关因子在寻常疣患者外周血中的表达情况及意义。方法采用ELISA法检测30例寻常疣患者外周血血清中IL-17,IL-23和TGF-β1的表达水平,并以30例健康人群作为对照。结果寻常疣患者血清中IL-17及IL-23水平[分别为(206.77±48.96)pg/mL,(248.53±51.45)pg/mL]均高于正常对照组[分别为(165.49±51.84)pg/mL,(109.22±52.81)pg/mL],差异均有统计学意义(P均<0.05);寻常疣患者外周血清中TGF-β1表达水平(148.34±36.91)ng/L与正常对照组(143.64±24.36)ng/L差异无统计学意义(P>0.05)。寻常疣患者的病程、疣体数量与血清中IL-17,IL-23和TGF-β1水平均无相关性(P均>0.05)。结论 Th17细胞相关因子IL-17,IL-23及TGF-β1在寻常疣患者体内存在变化,可能与寻常疣的发病有关。     

UVB与钙离子对体外培养人角质形成细胞表达天疱疮抗原的影响

目的 研究中波紫外线(UVB)照射以及不同钙离子浓度对角质形成细胞表达天疱疮抗原的影响.方法 通过改变培养基中的钙离子浓度以及采用不同剂量UVB照射体外培养的人角质形成细胞,在不同时间段以寻常型天疱疮(PV)或落叶型天疱疮(PF)血清作为一抗进行免疫荧光检测,观察寻常型天疱疮抗原(PVA)和落叶型天疱疮抗原(PFA)的表达情况;提取细胞或皮肤表皮组织蛋白质,用PV和PF血清进行免疫印迹检测.结果 无论是否增加钙离子浓度,体外培养人角质形成细胞间隙均可以检测到PV血清特异性着色.只有增加培养基中钙离子浓度后,形成的复层化角质形成细胞间隙才可以检测到PF血清特异性荧光着色.不同剂量UVB照射后的角质形成细胞均不产生PF血清的特异性着色.PF血清与160000条带反应,PV血清可与130000和160000两条带反应.结论 体外培养的单层或复层角质形成细胞均可以表达PVA,提高培养基中钙离子浓度可以诱导培养人角质形成细胞复层化并表达PFA,而UVB照射不能促使人角质形成细胞在体外培养条件下表达PFA.     

细胞间粘附分子-Ⅰ的表达与炎症相关

细胞间粘附分子-Ⅰ(ICAM-Ⅰ)是近来确定的在白细胞上CD_(18)复合物的结合配体,是一种糖蛋白,分子量界于90～120kD。在体外ICAM-Ⅰ可由白细胞介素-Ⅰ、γ-干扰素、肿瘤坏死因子等炎症介质在成纤维细胞和内皮细胞上诱生,在体内常伴随淋巴细胞浸润成为炎症损害而存在。ICAM-Ⅰ除了可在血管内皮细胞、胸腺细胞和其他上皮细胞以及成纤维细胞等非造血细胞上表达外,也可在许多造     

Ezrin在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其意义

皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,SCC)是起源于表皮或附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤,是最常见的非黑素瘤皮肤癌。近年来其发病率和转移率有持续上升的趋势,引起临床较多关注。本研究用免疫组化方法检测埃兹蛋白(Ezrin)在SCC中的表达,并分析其与SCC的分化程度以及癌细胞转移的关系。