胶原诱导性关节炎小鼠Th17细胞的检测及意义

目的：研究Th17细胞及其相关细胞因子白细胞介素-17（IL-17）在胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）小鼠体内的变化。方法：利用Ⅱ型胶原蛋白建立小鼠CIA模型。应用流式细胞术（FCM）分析小鼠脾脏及引流淋巴结中Th17细胞的比例,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中IL-17的含量。结果：CIA小鼠脾脏及引流淋巴结中Th17细胞的比例分别为（3．19±0．70）％、（3．54±0．97）％,显著高于正常对照组的（0．95±0．34）％、（1．31±0．47）％,P〈0．01。C1A小鼠血清中IL—17的含量也明显高于正常对照组（P〈0．05）。结论：Th17细胞及其分泌的细胞因子IL—17在CIA小鼠体内明显升高,并与疾病的发生密切相关。     

蜂毒肽对胶原诱导关节炎大鼠模型Th17/Treg平衡及炎症的影响

目的探讨蜂毒肽干预胶原诱导关节炎大鼠模型后对Th17/Treg平衡调控及关节炎症的影响。方法将30组SD大鼠随机分为正常对照组6只,其余24只SD大鼠于第1天尾根部注射牛II胶原,第10天再次注射II胶原建立胶原诱导关节炎模型,第14天淘汰6只未建模成功的大鼠,筛选出18只建模成功的大鼠按随机数字表法分为模型组、蜂毒肽组、甲氨蝶呤组,每组6只。第14天蜂毒肽组腹腔注射蜂毒肽(0. 5 mg/kg,隔日1次),甲氨蝶呤注射组注射甲氨蝶呤(每只1 mg,每周1次,共3次),模型组、正常组腹腔注射等量灭菌注射用水,第32天麻醉处死后,收集血清,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-10、IL-17 A浓度,分离大鼠脾脏,提取淋巴细胞,MTS检测单个核细胞活性,流式细胞术检测Th17、Treg细胞的比例,HE染色观察踝关节病理变化。结果蜂毒肽、甲氨喋呤降低血清中TNF-α、IL-17 A浓度(P0. 01,P0. 05),升高IL-10浓度(P0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤抑制淋巴细胞活性(P0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤能下调Th17细胞比例(P0. 05),上调Treg细胞比例(P0. 01,P0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤组减少滑膜增生,抑制炎性细胞浸润,延缓骨和关节软骨破坏。结论蜂毒肽能调节胶原诱导关节大鼠模型Th17/Treg平衡,抑制关节的炎症。     

Th17/Treg细胞平衡与类风湿关节炎的研究新进展

类风湿关节炎(RA)是一种常见慢性进行性多关节受累的免疫系统疾病,发病机制尚不明确。随着对该疾病研究的不断深入,已发现辅助性T细胞(Th)17细胞和调节性T细胞(Treg)在自身免疫调节中发挥重要作用。目前研究认为,RA是抗原呈递细胞和CD4+T细胞相互作用的结果。近年来,Th17细胞、Treg细胞及Th17细胞/Treg的细胞平衡在RA发病中受到越来越多的关注,并发现后两者才是RA发病机制的核心。     

宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg失衡的研究

目的 探讨宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th 17/Treg失衡的意义.方法 分别选取同期53例宫颈癌、25例CIN和25例子宫全切患者作为研究对象,采用流式细胞仪检测外周血和宫颈组织中Th17细胞、Treg细胞表达.结果 宫颈癌组、CIN组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th 17/Treg均显著高于对照组（P＜0.05）.外周血Th17细胞表达与FIGO分期呈正相关（P＜0.05）,Treg细胞表达与分化程度呈负相关（P＜0.05）.组织中Th 17/Treg与FIGO分期呈负相关（P＜0.05）.结论 宫颈癌患者外周血和组织中Th17细胞和Treg细胞表达均显著升高,Th17/Treg失衡在宫颈癌发生发展过程中起重要促进作用.     

双氢青蒿素通过调节Th17/Treg平衡改善银屑病小鼠皮损机制研究

目的验证双氢青蒿素(DHA)是否能改善咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠皮损, 并探讨其可能的机制。方法24只雌性BALB/c小鼠随机分为4组:空白对照组(Control组)、模型组(Model组)、25 mg/kg DHA治疗组(DHA-L组)、50 mg/kg DHA治疗组(DHA-H组),每组6只。每天观测小鼠皮肤变化并进行PASI评分。连续给药6 d,取小鼠皮肤进行HE染色和Ki67免疫组织化学染色;流式细胞仪检测小鼠脾Th17细胞和调节性T细胞(Treg);ELISA检测小鼠血清白细胞介素17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果IMQ成功诱导银屑病小鼠模型,DHA治疗后小鼠皮损改善,组织病理学改善,DHA-L和DHA-H组PASI评分及Ki67阳性细胞数量均低于Model组(P < 0.05);Model组脾Th17细胞比例较Control组升高(P < 0.05),DHA-L组和DHA-H组均较Model组降低(P < 0.05);DHA-L组和DHA-H组脾Treg细胞比例较Model组升高(P < 0.05);Model组血清IL-17A和TNF-α水平均较Control组升高(P < 0.05),与Model组相比,血清IL-17A水平在DHA-L和DHA-H组均降低(P < 0.05),而血清TNF-α水平仅DHA-H组降低(P < 0.05)。结论DHA可以改善IMQ诱导的银屑病小鼠皮损,其机制可能和调节Th17/Treg细胞平衡有关。     

胃癌患者Th17/Treg细胞失衡的研究

目的 检测Th17和Treg细胞在胃癌患者外周血中的分布,探讨Th17/Treg细胞免疫平衡与胃癌发生发展的关系。方法 选取2010年7月—2011年9月河北医科大学第四医院住院的胃癌患者45例作为病例组,另选取同期本院健康体检者20例作为对照组。取受试者外周血5 ml,分离单个核细胞,采用流式细胞分析技术检测CD+4CD+25Foxp3+和CD+4IL-17+细胞的表达,以产生IL-17的CD+4T为Th17细胞,以CD+4CD+25Foxp3+细胞为Treg细胞,检测Th17和Treg细胞的数量和比例。结果 流式细胞术检测结果显示,病例组外周血Th17细胞比例、Treg细胞比例、Th17/Treg均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组中,外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例呈正相关（r=0.64,P=0.003）;病例组中,外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例无直线相关性（r=0.12,P=0.490）。多元线性回归分析结果显示,Th17细胞比例升高与TNM分期（P=0.002）、淋巴结转移（P=0.017）有关;Treg细胞比例升高与TNM分期（P=0.034）、分化程度（P=0.015）有关;Th17/Treg升高与淋巴结转移有关（P=0.036）。结论 胃癌患者Th17、Treg细胞比例及Th17/Treg明显增高,并与患者TNM分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度有关,提示胃癌患者存在Th17/Treg细胞免疫平衡失调,这种失调可能促进了胃癌的进展。     

姜黄素对类风湿关节炎患者Th17/Treg细胞平衡的调节作用

目的：探讨姜黄素在类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4⁺T细胞培养中对Th17/Treg细胞平衡的调节作用。方法：从30个未经治疗的RA患者和30个健康受试者的血液中采集CD4⁺T细胞,用Th17分化因子刺激,用1μg/mL的姜黄素孵化。72 h后,收集细胞并用流式细胞术检测Th17和Treg细胞百分比,用ELISA技术检测IL-17和TGF-β1水平。结果：与对照组(0μg/mL姜黄素处理组)比较,在RA患者CD4⁺T细胞中,1μg/mL姜黄素可以降低Th17细胞百分比(P<0.05),减少IL-17的产生(P<0.05),但能升高Treg细胞百分比(P<0.01),并增加TGF-β1产生(P<0.01)。然而,在健康受试者的CD4⁺T细胞培养中没有观察到这种现象。结论：姜黄素可以调节RA患者CD4⁺T细胞中Th17/Treg细胞的平衡,但对健康受试者没有影响。     

急性脑梗死患者外周血Th17、Treg及Th17/Treg的变化及临床意义研究

目的 观察急性脑梗死(ACI)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达及其比值(Th17/Treg)的变化,并探讨临床意义。 方法 72例ACI患者,48例同期健康体检者为正常对照组,采用流式细胞术检测各组外周血中Th17及Treg占CD4+ T细胞比例。ACI患者按照美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)分为轻型组、中型组和重型组3种不同神经功能缺损程度,根据Pullicino公式分为小梗死灶组、中梗死灶组、大梗死灶组3种不同梗死灶类型。同时分析Th17、Treg比例及Th17/Treg比值分别与NIHSS评分、梗死灶体积的相关性。 结果 ACI组患者Th17比例(7.26%±1.92%)、Th17/Treg比值(2.38±1.80)均显著高于与对照组(2.86%±0.65%,P＜0.05;0.35±0.07,P＜0.05),Treg比例(4.29%±1.82%)显著低于对照组(8.03%±1.10%,P＜0.05)。ACI患者Th17比例和Th17/Treg比值及Treg比例在不同神经功能缺损程度和不同梗死灶类型中差异均有统计学意义(均P<0.05)。Th17/Treg比值分别与NIHSS评分、梗死灶体积呈正相关(r=0.865,0.672,P＜0.05)。 结论 ACI患者外周血Th17、Treg比例和Th17/Treg比值与急性脑梗死的严重程度密切相关,同时监测Th17/Treg比值的变化对评估患者的疾病进展具有一定临床参考意义。      

甲氨蝶呤与Th17/Treg细胞平衡对类风湿关节炎的作用机制研究

类风湿关节炎(RA)是一种慢性进行性的自身免疫性疾病,探讨其发病机制是RA研究中的重要部分。免疫功能紊乱、遗传、环境因素等均与RA的发病相关。免疫功能紊乱是RA发病的主要原因,而辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)的平衡、失衡及相关细胞因子均在RA的发病及病情进展中具有重要作用。甲氨蝶呤作为治疗RA的一线药物,其治疗机制也与Th17/Treg细胞的平衡及失衡有关,通过纠正Th17/Treg细胞失衡,从而改善RA的炎症反应,可为RA的进一步治疗提供理论思路。     

卵巢癌患者外周血Th1/Th2及Treg/Th17细胞平衡关系

目的 探讨卵巢癌患者外周血中CD4+T细胞亚群:辅助T细胞(Th,包括Th1、Th2、Th17)及调节性T淋巴细胞(Treg)表达、平衡关系的变化,以及在卵巢癌发病机制中的作用.方法 流式细胞术检测30例卵巢癌疾病组及20例健康对照组外周血中Thl、Th2、Thl7、Treg表达占CD4+T细胞的百分率,并计算Th1/Th2、Th17/Treg的比值.结果 卵巢癌患者外周血中Th2、Th17及Treg亚群占CD4+T细胞的百分率明显高于健康对照组(P<0.05),而Th1百分率低于健康对照组(P<0.05),各亚群变化与临床分期相关,但与组织类型及细胞分化无关(P>0.05).卵巢癌组Th1/Th2比值降低,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),卵巢癌患者存在Th2方向极化;卵巢癌组Treg/Th17比值升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌患者外周血中存在CD4+细胞亚群表达异常,存在Th1/Th2、Treg/Th17比值失衡,为卵巢癌临床免疫治疗提供理论支持.     

Gas6对类风湿关节炎小鼠Th17/Treg细胞平衡和炎症反应的调控作用

目的探讨生长停滞特异性蛋白6（Gas6）对类风湿关节炎小鼠的保护作用及与辅助性T细胞（Th）17/调节性T细胞（Treg）的关系。方法将24只雄性DBA/1J小鼠按照随机数字表法分为对照组、胶原诱导的关节炎（CIA）组、CIA+生理盐水组和CIA+Gas6组,每组6只。在小鼠尾根部皮下注射弗氏完全佐剂与牛II型胶原蛋白混合乳剂0.1ml,21d后再次以弗氏不完全佐剂与牛II型胶原蛋白混合乳剂0.1ml构建CIA小鼠模型。模型建立后第42天记录小鼠关节炎指数（AI）评分;采集下腔静脉血1ml,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞因子IL-17和IL-10的表达;无菌切取脾脏,采用流式细胞术检测CD4+IL-17+细胞和CD4+Foxp3+细胞的比例;切取右踝关节,HE染色观察关节损伤情况。结果与对照组小鼠相比,CIA小鼠AI评分增高,踝关节存在明显的炎症细胞浸润和软骨破坏,血IL-17和IL-10水平均显著增加（均P＜0.05）;CIA小鼠脾脏CD4+IL-17+细胞比例升高,而CD4+Foxp3+细胞的比例下降（均P＜0.05）。与CIA组小鼠相比,CIA+Gas6组小鼠AI评分下降,踝关节炎症细胞浸润明显,软骨破坏减轻,血IL-17水平下降而IL-10水平升高（均P＜0.05）;同时CD4+Foxp3+细胞比例明显增加,而CD4+IL-17+细胞比例下降（均P＜0.05）。结论Gas6能够减轻CIA小鼠的关节损伤,机制可能与其抗炎和对Th17/Treg细胞平衡的调控作用有关。     

Th1/Th2、Th17/Treg细胞的平衡与临床

T细胞是一个非常复杂的高度异质性群体,其中Th细胞是根据功能分类的一个T细胞群。Th细胞包括多种功能亚群[1],许多研究证实这些亚群不是分化定型细胞,具有一定的可塑性(plastici-ty)[2-3],它们通过分泌的细胞因子相互影响、相互制约、形成网络维持动态平衡,一旦失衡就可能发生     

薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎小鼠Th17细胞分化作用研究

目的研究薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠体内Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17(IL-17A)的作用。方法健康SPF级DBA/1 7~8周雄性小鼠20只,测定造模对照组(经生理盐水治疗后CIA小鼠)、薏苡仁酯组(经薏苡仁酯注射液治疗后CIA小鼠)小鼠脾脏Th17细胞及血清中IL-17变化。应用流式细胞术(FCM)分析小鼠脾脏中Th17细胞的比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中IL-17A含量。结果经薏苡仁酯注射液治疗后,薏苡仁酯组CIA小鼠脾脏中Th17细胞比例较造模对照组显著降低(1.82%比4.99%,P0.05),小鼠血清中IL-17A的含量也明显低于造模对照组[(3.54±0.61)pg/m L比(8.31±0.25)pg/m L,P0.05]。结论薏苡仁酯对CIA小鼠Th17细胞具有分化作用。     

活体供肾移植后外周血Treg、Th17及Th17/Treg比值的变化研究

目的 检测活体肾移植受者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)的比例,探寻肾移植术后外周血Treg细胞、Th17细胞及Th17/Treg比值的动态变化规律.方法 采用前瞻性研究方法,用流式细胞术分别检测活体肾移植受者术前和术后1、2、3周及术后1、2、3、4、5、6个月的外周血Treg细胞、Th17细胞比例.结果 Treg细胞比例在术后第2周明显下降(P＜0.05),术后2个月降至最低,较术前相比下降68.6％ (P ＜0.05),术后6个月恢复至术前水平.Th17细胞比例在术后1周至3周明显升高(P＜0.05),术后1个月恢复至术前水平.移植后第1周Th 17/Treg细胞比值明显升高(P＜0.05),持续至术后3个月,术后6个月恢复至术前水平.术后使用环孢素的受者Treg细胞比例在术后2个月最低,下降67.1％ (P ＜0.05);术后使用他克莫司的受者Treg细胞比例在术后3周最低,下降80.8％(P ＜0.05),均在术后3个月开始缓慢上升.CD3+T细胞比例在术后1周降低(P＜0.05),术后3周恢复至术前水平.结论 活体肾移植术后免疫细胞处于动态变化.术后2周到5个月Treg细胞比例均明显降低,其中以术后2个月最低.Th17/Treg细胞比值在术后1周到3个月均明显升高.他克莫司和环孢素对肾移植术后Treg细胞都有抑制作用.     

中医药干预类风湿性关节炎Th17/Treg平衡的研究进展

类风湿性关节炎（RA）是一种以侵蚀性关节炎症为主要临床表现的自身免疫性疾病,其病因和发病机制尚未完全阐明。研究表明Th17/Treg轴失衡是RA发病的重要机制,纠正Th17/Treg轴失衡对治疗RA具有重要意义。中医药对RA的防治具有独特优势,近年来,一系列实验及临床研究表明中药能够有效纠正Th17/Treg失衡状态,从而抑制RA自身免疫炎症反应。本文总结与分析了近5年来关于中药单体、有效成分和中药复方对RA中Th17/Treg轴的干预研究,有利于更加全面地认识中医药干预RA中Th17/Treg平衡的作用机制,为进一步治疗RA提供参考。