临床孤立综合征患者外周血T细胞受体β链可变区多态性研究

目的分析临床孤立综合征患者外周血T细胞受体β链可变区(TCRVβ)多态性,初步预测特异性TCRVβ片段,研究其对临床孤立综合征的诊断价值。方法选择2012年9月至2014年3月诊断并接受治疗的临床孤立综合征患者30例(CIS组),以同期行健康体检的30例受试者为正常对照组。流式细胞术检测常规免疫学指标和TCRVβ亚家族表达变化,CELL Quest Pro 5.1等相关软件分析24个TCRVβ亚家族成员表达水平,并计算扩增者比例、扩增个数和扩增分数。结果 TCRVβ24个亚家族中,CIS组CD4~+TCRVβ2、4、5.2、5.3、7.1、8、14、17、20、21.3片段,以及CD8~+TCRVβ4、14片段表达水平高于正常对照组,而CD4~+TCRVβ11和CD8~+TCRVβ9、11片段表达水平低于正常对照组(P0.05或P0.01)。CIS组CD4~+TCRVβ(P=0.002)和CD8~+TCRVβ14(P=0.010)扩增者比例均高于正常对照组,其余亚家族扩增者比例差异则无统计学意义(均P0.05)。CIS组TCRVβ扩增者比例与正常对照组差异无统计学意义(P 0.05),但扩增个数(P=0.001)、扩增分数(P=0.006)均高于正常对照组。受试者工作特征(ROC)曲线显示,CD4~+TCRVβ4诊断临床孤立综合征的曲线下面积(AUC)为0.719(95%CI:0.592～0.851,P=0.003),灵敏度83.33%、特异度56.67%;CD4~+TCRVβ14诊断的AUC为0.713 (95%CI:0.581～0.845,P=0.005),灵敏度70%、特异度56.23%;CD8~+TCRVβ4诊断的AUC为0.727(95%CI:0.600～0.854,P=0.002),灵敏度93.33%、特异度50%;以上3个片段对临床孤立综合征均具有中等诊断价值。结论虽然临床孤立综合征患者外周血CD4~+TCRVβ4、CD4~+TCRVβ14和CD8~+TCRVβ4片段表达水平升高,但其诊断价值有限。     

多发性硬化患者外周血T淋巴细胞受体β链可变区多态性研究

目的探讨多发性硬化(MS)不同阶段外周血T淋巴细胞受体β链可变区(TCRVβ)多态性的特点。方法收集首都医科大学宣武医院神经内科临床孤立综合征(CIS)患者30例、复发-缓解型多发性硬化(RRMS)患者40例、继发-进展型多发性硬化(SPMS)患者10例、健康对照者30名,经TCRVβ单克隆抗体标记后采用流式细胞仪分析各组外周血TCRVβ扩增程度以及TCRVβ24个亚家族扩增患者百分比、扩增片段所占百分比的差异。结果 CIS、RRMS及SPMS组TCRVβ存在扩增患者比例、扩增个数和扩增分数均高于对照组(P0.01),而CIS、RRMS及SPMS组间比较无统计学差异(P0.05)。CIS、RRMS及SPMS组CD4+TCRVβ2扩增频率均高于对照组(P0.008),CIS组、RRMS及SPMS组CD8+TCRVβ11表达水平均低于对照组(P0.05),SPMS组CD4+TCRVβ21.3表达水平低于CIS组(P0.05)。ROC曲线分析提示CD8+TCRVβ11的扩增片段所占百分比对MS诊断具有一定价值,对MS分型无诊断价值;CD4+TCRVβ21.3的扩增片段所占百分比对SPMS诊断具有一定价值。结论可通过检测部分TCRVβ片段对MS及SPMS的早期诊断提供相关依据。     

T细胞受体β链可变区基因在芳香族抗癫痫药物皮肤不良反应机制中的研究进展

芳香族抗癫痫药物(aromatic antiepileptic drugs,AAEDs)是临床抗癫痫治疗中常用的一类药物,较其他抗癫痫药物更易诱发皮肤不良反应(cutaneous adverse drug reactions,cADRs),严重者可致患者死亡。目前,AAEDs-cADRs的机制尚未阐明,可能的影响因素包括遗传、免疫、病毒、药物代谢等。其中,涉及免疫机制相关的研究结果显示,T细胞介导的免疫应答在AAEDs-cADRs中起重要作用,T细胞受体(T cell receptor,TCR)β链可变区(beta chain variable region,BV)基因会出现限制性取用。本文就TCR及TCR BV基因在AAEDs-cADRs机制中的研究进展进行综述。     

重症肌无力患者循环T细胞受体β链3号互补决定区的研究

目的研究重症肌无力(MG)患者循环T细胞受体(TCR)β链基因亚家族的优先表达,以及β链3号互补决定区(CDR3)基因片断的长度谱型特征,以探讨MG患者体内是否存在病理性T细胞的单克隆或寡克隆增殖。方法收集64例初诊MG患者和16名健康献血者外周静脉血,通过反转录多聚酶链反应(RT PCR)扩增样本中不同亚家族含CDR3的大片段,分析TCRVβ6、8、12、15亚家族的表达,用长度谱型技术研究CDR3谱型特征。结果64例MG患者中, 41例优先表达TCRVβ6、8、12、15中1~2种亚家族,且部分为单克隆或寡克隆性T细胞增殖,另一部分为多克隆增殖;而16名健康对照外周血表达TCRVβ6、8、12、15中3 ~4种亚家族,且全部为多克隆分布。结论TCRVβ6、8、12、15亚家族在MG患者中呈优势表达、优先表达或倾斜性分布,并出现T细胞的克隆性扩增(单克隆或寡克隆),提示这些亚家族参与MG的致病。     

滤泡辅助性T细胞与特发性视神经炎和视神经脊髓炎谱系疾病关系的研究

目的探讨滤泡辅助性T细胞(T follicular helper,Tfh)在特发性视神经炎(ON)和视神经炎谱系疾病(NMOSD)的体液免疫过程中的作用及其临床意义。方法选择2015-03—2017-04期间在作者科室住院的急性特发性ON患者41例(ON组)、NMOSD急性期患者55例(NMOSD组),患者均予甲基泼尼松龙冲击及序贯治疗,并行脑和脊髓MRI检查。于甲基泼尼松龙治疗前后进行扩展的神经功能障碍评分(EDSS)和视觉功能评分(VOS)检查;采用流式细胞术测定两组患者甲基泼尼松龙治疗前外周血和部分脑脊液Tfh标志物:包括辅助性T细胞(CD4)、趋化因子受体5(CXCR5)双阳性(CD4+CXCR5+)T细胞以及CD4、CXCR5、程序性死亡因子-1(PD-1)三阳性(CD4+CXCR5+PD-1+)T细胞占CD4+细胞的百分比(以下简称"比例");以ELISA法检测甲基泼尼松龙治疗前AQP-4抗体水平。以26名健康人为对照,检测其外周血CD4+CXCR5+、CD4+CXCR5+PD-1+T细胞比例。比较ON组和NMOSD组患者CD4+-CXCR5+及CD4+-CXCR5+-PD-1+T细胞比例、AQP4抗体水平及甲基泼尼松龙治疗前后EDSS和VOS功能评分变化,比较两患者组与健康对照组CD4+-CXCR5+和CD4+-CXCR5+-PD-1+T细胞比例,并分析患者血和脑脊液Tfh细胞比例的相关性,患者Tfh细胞比例与病程、年复发率、EDSS及VOS评分相关性,患者AQP4抗体水平与Tfh比例、病程和EDSS评分的相关性。结果ON组和NMOSD组外周血CD4+CXCR5+T细胞比例[分别为(16.69±4.78)%、(16.88±5.22%)]及CD4+CXCR5+PD-1+T细胞比例[分别为(10.61±3.44)%、(10.78±3.63)%]均显著高于健康对照组[分别为(12.60±4.57)%、(6.86±2.87)%,均P0.01],两患者组间外周血和脑脊液Tfh细胞比例差异均无统计学意义(均P0.05)。NMOSD组病程显著长于ON组[分别(27.23±37.78)、(12.06±32.02)个月,F=4.305,P0.05],治疗前后EDSS评分均高于ON组(分别为治疗前3.94±1.03、3.06±1.15,F=15.11,P0.01;治疗后3.43±1.47、2.50±1.58,F=8.836,P0.01)。两组甲基泼尼松龙治疗后VOS评分(分别为5.17±4.42、6.13±3.68)和EDSS评分(分别为2.50±1.58、3.43±1.47)均显著低于治疗前评分(VOS分别为6.63±4.25、7.44±3.66;EDSS分别为3.06±1.15、3.94±1.03,均P0.01)。相关分析显示,ON组及NMOSD组外周血及脑脊液中CD4+CXCR5+与CD4+CXCR5+PD-1+T细胞两种不同细胞比例均呈正相关(ON组分别r=0.822、P=0.000,r=0.714、P=0.047;NMOSD组分别r=0.826、P=0.000,r=0.917、P=0.001)),NMOSD组脑脊液CD4+CXCR5+T细胞比例与外周血中该细胞比例呈显著正相关(r=0.717、P=0.030),而ON组两者无相关性(r=0.321、P=0.482)。NMOSD患者血清AQP4抗体水平与病程和EDSS评分均呈正相关(r=0.418、P=0.000,r=0.351、P=0.001)。两组患者外周血和脑脊液CD4+CXCR5+PD-1+T细胞比例与EDSS评分、VOS评分及年均复发次数均无相关性(均P0.05)。结论Tfh可能参与了ON和/NMOSD的体液免疫过程,NMOSD患者血清AQP4抗体与病情相关。     

白细胞介素-6-滤泡辅助性T细胞介导视神经脊髓炎谱系病的研究进展

视神经脊髓炎谱系病(NMOSD)是一类视神经、脊髓和大脑同时或相继受累、以体液免疫为主要介导的中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病.白细胞介素-6(IL-6)-滤泡辅助性T(Tfh)细胞与NMOSD的发生、发展密切相关.抗IL-6受 体的重组人源化单克隆抗体作为治疗NMOSD的新型药物疗效较好.文中对IL-6-Tfh细胞介导NM...     

甲泼尼龙冲击治疗对视神经脊髓炎谱系病患者外周血滤泡辅助性T细胞百分率的影响

目的探究视神经脊髓炎谱系病(NMOSD)患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)百分率在甲泼尼龙冲击治疗前、后的变化。方法收集AQP-4抗体阳性的急性期NMOSD患者(NMOSD组)23例,采用流式细胞术检测甲泼尼龙冲击前、后外周血CXCR5~+ICOS~+的CD4~+T细胞(Tfh细胞),记录NMOSD组的EDSS评分,分析NMOSD组患者Tfh细胞百分率与患者AQP-4抗体滴度及EDSS评分的相关性。结果 NMOSD组患者甲泼尼龙冲击治疗前外周血Tfh细胞百分率[(1.77±0.74)%]显著高于甲泼尼龙冲击治疗后[(1.26±0.45)%](t=2.284,P=0.032)。首次发病NMOSD患者甲泼尼龙冲击治疗前Tfh细胞百分率与EDSS评分呈正相关(r=0.625,P=0.040),甲泼尼龙冲击治疗前、后Tfh细胞百分率与AQP-4抗体滴度无相关性(r=--0.02,P=0.928)。结论经甲泼尼龙冲击治疗后,NMOSD患者急性期外周血Tfh细胞百分率降低,首次发病NMOSD患者Tfh细胞百分率水平与EDSS评分有关。Tfh细胞百分率水平可能与NMOSD的复发有关。     

重症肌无力患者外周血调节性T细胞及B细胞激活因子受体的分析

目的 研究重症肌无力(MG)患者外周血多群调节性T细胞的水平及其B细胞表达B细胞激活因子受体(B cell-activating factor receptor,BAFF-R)的情况.方法 应用四色流式细胞仪检测61例MG患者与23名健康对照外周血调节性T细胞(CD4+ CD25 high Foxp3+、CD8+ CD28-、CD8+ CD122+)以及CD19+ BAFF-R+细胞的百分率.结果 MG组与健康对照组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+ T细胞的百分率分别为32.12%±16.12%与65.15%±14.72%,MG组该群调节性T细胞的水平明显低于健康对照组(P＜0.01);两组CD8+ CD28-及CD8+ CD122+ T细胞的水平差异无统计学意义.此外,MG组外周血CD19+ BAFF-R+细胞的水平(10.57%±5.59%)显著高于健康对照组(5.38%±3.87%,P＜0.01).大剂量激素或大剂量激素加丙种球蛋白治疗后短期内可使MG组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+调节性T细胞的百分率增加(P＜0.05).结论 MG患者Foxp3+的CD4+ CD25 high调节性T细胞的减少提示MG患者存在免疫和耐受的失衡,显示了T细胞的自身免疫性.在B细胞方面,MG患者外周血CD19+ B细胞上BAFF-R表达增高,提示其体内B细胞已处于易激活状态.     

偏头痛患者5-羟色胺2A受体启动子区T102C基因多态性的研究

目的 探讨5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)基因T102C多态性与哈尔滨地区汉族人偏头痛的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测204例偏头痛患者及186例健康对照者5-HT2AR基因启动子区域T102C多态性.结果 偏头痛患者中T/T,T/C,C/C分布为29.9%,53.9%和16.2%,正常对照中T/T,T/C,C/C分布为35.0%,48.9%和16.1%,两组间无显著性差异(P>0.05).偏头痛患者的等位基因频率为102T 56.9%,102C 43.1%,正常对照组为102T 59.4%,102C 40.6%,两组间无显著性差异(P>0.05).结论 5-HT2AR基因启动子区域T102C基因多态性与哈尔滨地区汉族人偏头痛的发生无相关性.

Abstract：

Objective To investigate the association between 5-HT2A receptor (5-HT2AR) promoter T102C gene polymorphism and migraine in Han nationality, Harbin. Methods Polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP)analysis were applied to determine the genotypes at the promoter 102 of 5-HT2AR gene in 204 migraine patients and 186 controls. The genotype distribution and allele frequencies among different groups were compared. Results The genotype T/T,T/C,C/C distribution of the 5-HT2AR were 29.9% ,53.9% and 16.2% in migraine patients,and were 35.0% ,48.9% and 16.1% in controls (P > 0.05). The allele frequencies of 5-HT2AR in migraine patients were 56.9% for 102T,43.1% for 102C,and 59.4% for 102T,40.6% for 102C in controls (P > 0.05 ).Conclusion The polymorphism of 5-HT2AR promoter T102C gene was not significantly associated with migraine among Han nationality,in Harbin, China.     

CD19+CD24~(high) CD38~(high)调节性B细胞及相关细胞因子在视神经脊髓炎谱系疾病患者外周血中的变化及意义

目的检测NMOSD患者外周血中CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg及其细胞因子IL-10、TGF-β水平,探讨CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg、IL-10、TGF-β在NMOSD急性期的变化及可能作用;检测NMOSD患者外周血GFAP水平,结合EDSS评分,探讨GFAP与疾病严重程度的相关性。方法选取2016年12月-2018年1月就诊于河北医科大学第二医院神经内科NMOSD急性期患者27例为实验组,性别、年龄相匹配的20例健康人为对照组。入组的NMOSD患者进行EDSS评分、流式细胞术检测外周血CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg数量,PCR法检测外周血IL-10、TGF-β、GFAP的mRNA水平,并与健康人比较。结果 NMOSD组CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg水平较对照组下降,差异有统计学意义,CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg与EDSS之间无线性关系。NMOSD组IL-10、TGF-β的mRNA水平较对照组下降,差异有统计学意义。NMOSD组GFAP水平较对照组升高,差异有统计学意义。GFAP与EDSS之间无线性关系。结论 CD19~+CD24~(high)CD38~(high)Breg在NMOSD急性期发病中数量和功能上均受损,血清GFAP水平增高,但不能反应复发患者疾病残疾程度。     

视神经脊髓炎谱系病和多发性硬化患者甲状腺激素水平及甲状腺抗体的相关研究

目的探讨视神经脊髓炎谱系病(NMOSD)和多发性硬化(MS)患者甲状腺激素水平及甲状腺自身抗体的差异。方法检测37例NMOSD患者(NMOSD组)及27例MS患者(MS组)三碘甲腺原氨酸(T_3)、甲状腺素(T_4)、游离T_3(FT_3)、游离T_4(FT_4)、促甲状腺激素(TSH)水平以及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的阳性率,并选择52名健康体检者作为正常对照组。比较三组间甲状腺激素水平及甲状腺自身抗体的差异。结果 NMOSD组T_3、FT_3水平均显著低于MS组和正常对照组(均P0.05)。MS组和正常对照组间T_3、FT_3水平差异无统计学意义(均P0.05)。三组间T_4、FT_4、TSH水平差异无统计学意义(均P0.05)。NMOSD组TPOAb、TGAb阳性率均显著高于正常对照组(均P0.05)。与MS组比较,NMOSD组TGAb阳性率显著升高(P0.05),两组间TPOAb阳性率的差异无统计学意义(P0.05)。MS组与正常对照组比较,TPOAb、TGAb阳性率差异无统计学意义(均P0.05)。结论 NMOSD患者的甲状腺激素水平较MS患者更低,合并甲状腺抗体阳性率更高。     

重症肌无力患者外周血CD_4~+CD_(25)~(high)T细胞及其动态观察

目的研究重症肌无力(myastheniagravis,MG)患者外周血CD4+CDh25ighT细胞的水平,以及各种治疗方法对其的影响。方法应用四色流式细胞仪检测55例MG患者(治疗前)与33名健康对照外周血CD4+CDh25ighT细胞百分率,对其中26例MG患者进行了治疗前后的动态检测。结果MG患者与健康对照外周血CD4+CD2h5ighT细胞百分率分别为6·22%±3·37%与5·16%±1·87%,两者差异无统计学意义(P=0·061),而21例非手术治疗患者其外周血CD4+CD2h5ighT细胞百分率的变化与病情评分的变化呈负相关(r=-0·563,P=0·008)。结论这种非手术治疗前后短期内的CD4+CD2h5ighT细胞的变化情况可能与病情相关,但胸腺切除前阶段观察的情况有所不同。     

抑郁症患者外周血辅助性T细胞与抗抑郁药疗效的相关性研究

目的 探讨抑郁症患者辅助 T 淋巴细胞（Th）1 与 Th2 亚型的变化及其与抗抑郁药治疗效果 的相关性。方法 纳入 2020 年 10 月至 2021 年 12 月在首都医科大学附属北京安定医院就诊的 37 例抑 郁症患者作为抑郁症组,选取年龄、性别等相匹配的 39 名健康者作为健康对照组。采用 17 项汉密尔顿 抑郁量表（HAMD-17）评估患者的疾病严重程度,并计算治疗前后 HAMD-17 的减分率,减分率≥ 50% 为 治疗应答,＜ 50% 为治疗无应答。通过流式细胞术检测所有受试者外周血 Th1 和 Th2 细胞比例,比较治 疗前抑郁症组和健康对照组 Th 细胞比例差异。对抑郁症患者进行为期 8～12 周的抗抑郁治疗,比较治 疗前后治疗应答组和治疗无应答组患者的 Th 细胞比例差异。采用 Spearman 相关分析患者 Th 细胞亚群 比例与 HAMD-17 评分的相关性。结果 抑郁症组治疗前 Th1 细胞比例为（43.61±24.27）%,高于健康对 照组的（26.13±18.56）%,差异有统计学意义（t=-3.538,P＜ 0.01）。抗抑郁治疗后,抑郁症组患者 HAMD- 17 总分为（10.73±7.02）分,低于治疗前的（20.68±4.24）分,差异有统计学意义（t=8.566,P＜ 0.01）。共 31 例患者于治疗后完成 Th 细胞的检测,将患者分为治疗无应答组（13 例）和治疗应答组（18 例）,重复测 量方差分析显示,组别和时间的交互作用对 Th1 细胞比例的影响差异有统计学意义（F=7.306,P=0.011）; 治疗无应答组治疗前的 Th1 细胞比例高于治疗应答组［（7.19±1.62）% 比（5.31±2.38）%］,且治疗后低 于治疗前［（4.29±2.10）% 比（7.19±1.62）%］,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）。相关性分析显示,抑 郁症患者治疗前后 HAMD-17 减分率与治疗前 Th1 细胞比例呈负相关（r=-0.429,P=0.008）,与治疗前后 Th2/Th1 细胞比值呈负相关（r=-0.357,P=0.048）,与治疗前后 Th1 细胞比例呈正相关（r=0.591,P＜ 0.001）。 结论 抑郁症患者外周血 Th1 细胞比例检测有助于抗抑郁药治疗效果的早期预测。     

单、双相抑郁患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体表达研究

目的探讨单、双相抑郁障碍患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA的表达水平及其在亚细胞的分布的差异性。方法纳入符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版修订版(DSM-IV-TR)诊断标准的单相抑郁障碍(简称单相抑郁)患者35例、双相抑郁障碍(简称双相抑郁)患者23例和正常对照30名,检测受试者外周血单个核细胞(peripheral blood monouclearcell,PBMC)中GRαmRNA表达水平,共聚焦显微镜下观察GRα在PBMC中的亚细胞分布,测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和血清皮质醇的浓度。结果与对照组比较,单、双相抑郁患者组GRαmRNA表达均下降(P0.05),且与HAMD总分均呈负相关(r=-0.62,P0.05;r=-0.79,P0.05)。随着病情的加重,单、双相抑郁的轻中度、重度亚组的GRαmRNA表达递减(P0.05)。单、双相抑郁患者组PBMC上GRα表达均显著减少,且主要分布在细胞浆内,提示存在核分布异常;随着抑郁程度的加重,核内分布呈下降趋势(P0.05);但单、双相抑郁患者组间无明显差异(P0.05)。单、双相抑郁组血浆ACTH和血清皮质醇浓度与GRαmRNA的表达均无关(P0.05)。结论提示GR在单、双相抑郁障碍的发病机制中均可能起重要作用,且GRαmRNA可能仅是抑郁状态指标,无法鉴别单、双相抑郁障碍。     

一项B细胞监测下减量利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎谱系病的前瞻性研究

目的观察B细胞监测下减量利妥昔单抗方案治疗视神经脊髓炎谱系病(NMOSD)患者的疗效及安全性。方法收集2016年12月-2019年6月苏州大学附属第一医院神经内科规律随访的35例NMOSD患者临床资料,分为B细胞监测下减量利妥昔单抗组、硫唑嘌呤组及环磷酰胺组,比较治疗前后扩展残疾状态量表评分差值、未复发的可能性、药物不良反应等指标。结果 (1) RTX组比AZA组治疗前后EDSS评分下降水平明显,具有统计学意义(P 0.05);(2) RTX组和CTX组的复发风险明显低于AZA组,差异有统计学意义(Log-rankχ2=9.147,P=0.01);(3) RTX组总不良事件发生比例较CTX组少,RTX组激素停药率高于AZA组和CTX组(P 0.05),差异具有统计学意义;(4) RTX组平均用药间隔时间7.00(6.0,10.0) m。结论 B细胞监测下减量利妥昔单抗方案治疗NMOSD总体安全、有效,可延长用药间隔,减少患者的用药费用支出。     

脑血管病纤维蛋白原Bβ-148(C→T)基因多态性分析

目的:对77例脑血管病人纤维蛋白原Bβ-148(C→T)基因多态性进行分析。方法:用聚合酶联反应 (PCR),限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法。结果:77例脑血管病人纤维蛋白原Bβ-148(C→T)基因频率C=0． 364,T=0．636,与健康人基因频率C=0．712,T=0．285比较,两组间均有显著性差异,P<0．05。结论:纤维蛋白原Bβ- 148(C→T)突变基因T与脑血管病有关。     

NMOSD患者外周血滤泡辅助性T细胞及其亚群的表达研究

目的通过研究视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者外周血中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的表达,探讨Tfh细胞与NMOSD发病的关系。方法采用流式细胞术分别检测53例NMOSD急性发作期患者(NMOSD组)和20名健康对照(对照组)的外周血中不同表型的Tfh细胞占CD4+T细胞的比例及其三个亚群Tfh1、Tfh2、Tfh17占CD4+CXCR5+T细胞的比例。结果 NMOSD组CD4+CXCR5+Tfh细胞、CD4+CXCR5+PD-1+Tfh细胞占CD4+T细胞的比例均高于健康对照组[分别(22.80±6.78)%vs.(18.94±3.84)%,t=3.042,P=0.003;(9.54±3.29)%vs.(4.21±1.31)%,t=9.914,P=0.000]。在CD4+CXCR5+T细胞中,NMOSD患者组Tfh17细胞所占比例高于对照组[(30.70±4.56)%vs.(27.33±2.89)%,t=3.071,P=0.003],Tfh1细胞比例低于对照组[(26.41±4.42)%vs.(30.26±3.66)%,t=-3.474,P=0.001],Tfh2细胞比例与对照组差异无统计学意义(P=0.127);(Tfh2细胞比例+Tfh17细胞比例)/Tfh1细胞比例的比值高于对照组(2.41±0.65vs.1.88±0.39,t=4.264,P=0.000)。结论 NMOSD急性发作期患者外周血中Tfh细胞比例增高,同时存在着Tfh细胞的三个亚群的比例失调,尤其是Tfh17细胞比例显著增高,推测Tfh细胞与NMOSD的发病存在一定关系。     

调节性T细胞在血管性痴呆患者外周血中表达的初步研究

目的探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)在血管性痴呆患者外周血中的表达情况。方法选择血管性痴呆患者48例,健康对照组40例,采取外周血标本,流式细胞学检测Treg占CD4+T细胞的比例,实时定量PCR检测外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的水平,体外增殖抑制试验检测Treg的抑制功能,ELISA检测Treg抑制炎症因子的产生。结果与健康对照组相比,血管性痴呆患者CD4+CD25+Foxp3+Treg比例下降,Foxp3表达降低,并且Treg的抑制功能减低。结论 Treg在血管性痴呆患者外周血中表达降低,且功能减弱,提示Treg可能参与了血管性痴呆的发生发展。     

脑梗死患者纤维蛋白原β-148C/T基因多态性的研究

目的　探讨脑梗死 (CI)患者纤维蛋白原 (Fg)Bβ基因启动区多态性位点 β 14 8C/T的基因多态性频率分布及其与Fg功能和水平的关系。方法　用聚合酶反应 限制性片段长度多态性 (RFLP)分析方法 ,对CI组 (15 1例 )和健康对照组 (113人 )进行研究 ,应用Fg功能自动化检测系统检测血浆Fg分子功能参数 ,用比浊法测Fg水平。结果　CI组与对照组T等位基因的频率分别为 0 .32 1和 0 .2 4 8,两组比较有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;CI组和对照组Fg分子功能 (FMPV/ODmax)分别是 (4 .4 73± 0 .5 0 9)和 (3.716± 0 .4 35 ) ,两组比较有极显著差异 (P <0 .0 1) ,Fg水平 (S)分别为 (3.90± 0 .37)和 (2 .87± 0 .5 1) ,两组比较有极显著差异 (P <0 .0 1)。Fgβ 14 8C/T基因多态性与Fg水平 (r=0 .5 2 ,P <0 .0 0 1)和Fg分子功能 (r=0 .4 5 ,P <0 .0 0 2 )间存在正相关。结论　Fgβ 14 8C/T基因多态性与血浆Fg分子功能和Fg水平具有相关性 ,Fg分子功能增强和Fg水平升高是CI的危险因素 ,Fgβ 14 8C/T基因多态性与CI易患性相关联。     

实验性过敏性脑脊髓炎中枢神经系统浸润细胞凋亡研究(论著摘要)

1材料和方法（1）实验动物：二级雌性Hartley豚鼠24只，6周龄，体重180～230g。取16只诱发EAE后随机分为4组，分别为发病初期组、高峰期组、恢复期1组和恢复期2组；观察时间为发病24h内、发病5天（d）、发病10d和发病15d。对照组8只，观察时间同实验组相对应，每个时间点2只。（2）EAE的诱发；动物用牛脊髓髓鞘碱性蛋白加等量完全福氏佐剂进行免疫，每只注射100μg。对照组用等量完全福氏佐剂加生理盐水免疫。（3）取标本方法：动物经体积分数为州的多聚甲醛灌注后取脑和脊髓。（4）切片方法：标本石蜡包埋，切片厚度5pm，每采样点连续切…