当归芍药散加味黄芪对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的治疗作用

目的:探讨当归芍药散加味黄芪对肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)大鼠的治疗效果.方法:尾静脉注射阿霉素建立NS大鼠模型.建模成功大鼠分为模型组、福辛普利组、当归芍药散组、黄芪组、当归芍药散加味黄芪组,每组10只,另取10只大鼠作为正常组,连续给药4周.BCA法测定24 h尿蛋白;实验动物体组成测定...     

基于电解质研究当归芍药散对肾病综合征大鼠作用

目的:研究当归芍药散对肾病综合征大鼠电解质紊乱的纠正作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,福辛普利组,当归芍药散高、中、低剂量组,采用尾静脉注射阿霉素法复制肾病综合征大鼠模型,用代谢笼收集大鼠24 h尿液,采用全自动生化分析仪检测大鼠血清与尿液的Na+、K+、Cl-浓度。结果:与模型组相比,当归芍药散各剂量组大鼠血清电解质Na+、K+、Cl-浓度上升,尿液中Na+、K+、Cl-浓度下降。结论:当归芍药散可纠正肾病综合征大鼠电解质紊乱。     

阿霉素肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶表达改变及其对蛋白尿的影响

目的观察阿霉素肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶(HPA)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板源性生长因子(PDGF)的表达变化。方法清洁级健康雄性SD大鼠随机分为对照组(NC组)和阿霉素肾病组(AN组),分别观察0、7、14、21、28天的24h尿蛋白定量,0、14、21、28天血清白蛋白、尿素、肌酐、甘油三酯和胆固醇水平以及肾小球HPA、HSPG、bFGF、PDGF表达的改变。结果 AN组造模后14、21及28天24h尿蛋白定量较同时间点NC组及同组前一时间点明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);同时AN组在造模后各观察时间点HPA与PDGF表达显著增多,且随观察时间延长增加,与NC组相比差异有统计学意义(P<0.05);AN组在造模后各观察时间点HSPG表达较NC组显著减少,且随观察时间延长降低,差异有统计学意义(P<0.05);bFGF在NC组及AN组各观察时间点表达均未见明显变化(P>0.05);HPA表达与HSPG表达呈负相关(r=-0.757,P<0.05),与PDGF表达及蛋白尿呈正相关(r=0.899,P<0.05;r=0.868,P<0.05)。结论 HPA表达增加导致HSPG水解增多,同时释放出PDGF等因子,肾小球基膜的物理屏障和电荷屏障受损,促进蛋白尿的发生发展。     

异丙酚对大鼠中枢神经核团一氧化氮合酶表达的影响

目的 通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)的表达,探讨异丙酚的可能中枢作用位点.方法 采用NADPH-d酶组织化学法检测大鼠脑片的NOS阳性神经元在神经核团的分布.结果 异丙酚作用的大鼠伏核、外侧隔核、下丘脑室旁核、膝状体腹下核、背外侧膝状核、视上核、视交叉上核、视前腹侧核、弧束核、杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核、海马回嗅觉小岛及乳头状核等核团NOS阳性神经元的表达明显减少,与对照组比较均非常显著差异(P＜0.01).结论 异丙酚在大鼠中枢神经系统的作用部位与神经核团有关.     

安氟醚对大鼠耳蜗一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察安氟醚对大鼠耳蜗一氧化氮合酶(NOS)表达的影响,探讨其对耳蜗影响的可能机制。方法:30只Wistar大鼠随机分为3组(n=10),对照组(C组)持续吸入纯氧;低浓度安氟醚组(E1组)持续吸入1.5%安氟醚+纯氧;高浓度安氟醚(E2组)持续吸入3.0%安氟醚+纯氧,30min后处死大鼠,免疫组织化学方法检测耳蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节诱生型NOS(iNOS)、内皮型NOS(eNOS)和神经元型NOS(nNOS)的表达水平。结果:与C组比较,E1组耳蜗螺旋器、螺旋神经节iNOS、eNOS和nNOS以及血管纹eNOS表达均下调,E2组耳蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节iNOS、eNOS和nNOS表达下调(P<0.05或0.01);E2组耳蜗螺旋神经节eNOS和nNOS表达组较E下调明显(P<0.05)。结论:安氟醚可浓度依赖性地下调大鼠耳蜗NOS表达,从而影响耳蜗功能。     

当归补血汤对大鼠脑缺血再灌注后海马区一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用以及对海马区一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)表达的影响。方法采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,阻断血流2 h后再灌注。应用免疫组织化学染色法检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马区NOS免疫反应阳性细胞的表达情况,观察当归补血汤对其结果的影响。结果模型组大鼠海马各亚区及齿状回NOS阳性细胞分布稀疏,数目较假手术组和当归补血汤组显著减少,差异有统计意义(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注后海马区NOS免疫反应阳性细胞的表达降低,当归补血汤能增强脑缺血再灌注后海马区NOS阳性细胞的表达,对大鼠脑缺血再灌注后的神经组织具有一定的保护作用。     

应激对大鼠血清一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

心理应激是指机体通过认知、评价而察觉到应激源的威胁时所产生的心理生理机能改变的过程.NO是细胞-细胞间信息传递的重要调节因子,作为第二信使和神经递质而起着各种不同的功能.在应激状态下,周围神经NO含量及NOS活性的影响已有文献报道[1,2],但由于建立的模型条件不同,导致结果不一致.为此,我们建立社会心理应激模型,探讨心理应激状态下NO所起的作用.     

应激对大鼠血清一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

心理应激是指机体通过认知、评价而察觉到应激源的威胁时所产生的心理生理机能改变的过程。ＮＯ是细胞—细胞间信息传递的重要调节因子 ,作为第二信使和神经递质而起着各种不同的功能。在应激状态下 ,周围神经ＮＯ含量及ＮＯＳ活性的影响已有文献报道[1,2 ],但由于建立的模型条件不同 ,导致结果不一致。为此 ,我们建立社会心理应激模型 ,探讨心理应激状态下ＮＯ所起的作用。对象和方法一、社会应激动物模型建立成年雄性ＳＤ大鼠 (由第四军医大学动物中心提供 ) 2 0只 ,随机分为对照组 8只、实验组 1 0只 ,体重 2 0 0～ 2 50 ｇ。社会应激动…     

一氧化氮合酶在肝肺综合征大鼠肺组织中的表达

目的研究一氧化氮合酶(NOS)蛋白及其mRNA在肝肺综合征(HPS)大鼠肺组织中的表达。方法雄性SD大鼠随机分4组:肝前型门静脉高压症组(PHPH组)、肝内型门静脉高压症组(IHPH组)、门腔端侧分流组(PCS组)和手术对照组(SO组)。各组均行动脉血气分析,测肺组织中NO2ˉ/NO3ˉ含量,免疫组化和原位杂交并结合图像分析检测肺泡毛细血管内皮细胞、肺泡小动脉内皮细胞中原生型NOS(ecNOS)和诱生型NOS(iNOS)蛋白和mRNA的表达强度。结果①动脉血气分析:动脉氧分压,IHPH组大鼠(73.85±6.51)mmHg,较PHPH组(97.39±1.33)mmHg、PCS组(95.23±2.22)mmHg和SO组(99.05±0.75)mmHg显著下降。②肺组织中NO2ˉ/NO3ˉ含量(μmol/g蛋白):IHPH组大鼠(19.78±5.33)显著高于PHPH组(13.21±3.99)、PCS组(13.89±3.16)和SO组大鼠(8.71±1.68)。③ecNOSmRNA表达:IHPH组大鼠(4.96±0.82),较PHPH组(1.81±0.39)、PCS组(1.88±0.53)和SO组大鼠(1.19±0.32)显著增高;④ecNOS蛋白表达:IHPH组大鼠(4.11±0.28),较PHPH组(1.63±0.18)、PCS组(1.83±0.16)和SO组大鼠(0.98±0.20)显著增高。结论HPS大鼠肺泡毛细血管内皮细胞ecNOSmRNA及蛋白表达显著增强、肺组织中NO含量显著增高,在HPS发病中可能起重要作用。     

一氧化氮合酶在肝肺综合征大鼠肺组织中的表达

目的 研究一氧化氮合酶(NOS)蛋白及其mRNA在肝肺综合征(HPS)大鼠肺组织中的表达.方法 雄性SD大鼠随机分4组:肝前型门静脉高压症组(PHPH组)、肝内型门静脉高压症组(IHPH组)、门腔端侧分流组(PCS组)和手术对照组(SO组).各组均行动脉血气分析,测肺组织中NO2ˉ/NO3ˉ含量,免疫组化和原位杂交并结合图像分析检测肺泡毛细血管内皮细胞、肺泡小动脉内皮细胞中原生型NOS(ecNOS)和诱生型NOS(iNOS)蛋白和mRNA的表达强度.结果 ①动脉血气分析: 动脉氧分压,IHPH组大鼠 (73.85±6.51)mmHg,较PHPH组(97.39±1.33)mmHg、PCS组(95.23±2.22)mmHg和SO组(99.05±0.75)mmHg显著下降.②肺组织中NO2ˉ/NO3ˉ含量(μmol/g蛋白):IHPH组大鼠(19.78±5.33)显著高于PHPH组 (13.21±3.99)、 PCS组(13.89±3.16)和SO组大鼠(8.71±1.68).③ecNOS mRNA表达:IHPH组大鼠(4.96±0.82),较PHPH组(1.81±0.39)、PCS组(1.88±0.53)和SO组大鼠(1.19±0.32)显著增高;④ecNOS蛋白表达:IHPH组大鼠(4.11±0.28),较PHPH组(1.63±0.18)、PCS组(1.83±0.16)和SO组大鼠(0.98±0.20)显著增高.结论 HPS大鼠肺泡毛细血管内皮细胞ecNOS mRNA及蛋白表达显著增强、肺组织中NO含量显著增高,在HPS发病中可能起重要作用.     

异丙酚对大鼠肝一氧化氮合酶的影响

目的　了解异丙酚对大鼠肝脏一氧化氮合酶的影响。方法　 40只SD大鼠 ,随机分为异丙酚组、对照组 ,分别腹腔注射等容积异丙酚 (10ml/kg ,即 10 0mg/kg)和生理盐水 (10ml/kg)。异丙酚组待鼠翻正反射消失后 ,微泵输注异丙酚 ,2 0min后处死 ;对照组鼠腹腔注射 2 0min后处死。检测肝脏组织匀浆中NO水平、NOS酶活性及内皮型NOS(eNOS)在肝脏内的表达与分布 (免疫组化法 )。结果　异丙酚组肝脏组织匀浆中NO水平、NOS酶活性均明显高于对照组 (P <0 0 1)。免疫组化结果显示 :异丙酚组肝脏血管内皮细胞eNOS染色表达强阳性 ,半定量比较有显著差异 (P <0 0 1)。结论　异丙酚可以刺激肝脏中NOS活性 ,升高肝脏内源性NO水平     

当归芍药散及其拆方对肝硬化腹水大鼠电解质的影响

目的观察当归芍药散及其拆方对肝硬化腹水大鼠电解质紊乱的纠正作用。方法将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,甘利欣组,当归芍药散低、中、高剂量组,拆方活血药组和利水药组。采用苯巴比妥联合四氯化碳腹腔注射复制肝硬化腹水大鼠模型,用代谢笼收集大鼠24h尿液,采用冰点法测定大鼠尿渗透压,采用全自动生化分析仪检测大鼠血清及尿K+、Na+、Cl-浓度。结果与模型组比较,当归芍药散各剂量组大鼠尿渗透压显著降低(P<0.05),血清K+、Na+、Cl-水平显著升高(P<0.05),尿K+、Na+水平显著降低(P<0.05);当归芍药散各剂量组与甘利欣组、活血药组、利水药组血清和尿电解质水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论当归芍药散可纠正肝硬化腹水大鼠电解质紊乱,无明显剂量依赖性,全方和拆方的效应无明显差异。     

当归芍药散对肾病综合征幼鼠足细胞肌动蛋白骨架的保护作用

目的:探讨当归芍药散对肾病综合征幼鼠足细胞肌动蛋白骨架的保护作用。方法:选取4周龄幼鼠40只,按随机数字表法分为空白组、模型组、坎地沙坦组及中药组,每组10只。模型组、坎地沙坦组及中药组通过阿霉素尾静脉注射建立肾病综合征模型,造模成功后中药组予以当归芍药散水煎浓缩剂灌胃,坎地沙坦组予以坎地沙坦酯片混悬液灌胃,空白组与模型组予以0.9%氯化钠溶液灌胃。灌胃4周后比较四组一般状态、体重、24 h尿蛋白、血清白蛋白水平,电镜观测肾小球足细胞损伤情况,比较四组RANK、RANKL、α-actinin-4、Synaptopodin mRNA表达情况。结果:干预后,模型组一般状态差、眼睑可见水肿。中药组与坎地沙坦组一般状态均略优于模型组。干预后,模型组、中药组及坎地沙坦组体重与血清白蛋白水平低于空白组,而24 h尿蛋白高于空白组(P0.05)。中药组与坎地沙坦组体重与血清白蛋白均高于模型组,而24 h尿蛋白均低于模型组(P0.05)。干预后,模型组、中药组及坎地沙坦组RANK、RANKL mRNA相对表达量均高于空白组,而α-actinin-4、Synaptopodin mRNA相对表达量均低于空白组(P0.05)。中药组及坎地沙坦组RANK、RANKL mRNA相对表达量均低于模型组,而α-actinin-4、Synaptopodin mRNA相对表达量均高于模型组(P0.05)。模型组电镜下可见足突融合,足细胞结构破坏。中药组及坎地沙坦组足突融合程度较轻,可见少量完好足细胞。结论:当归芍药散对肾病综合征幼鼠具有一定的治疗作用,这种作用可能是通过改善其肾脏RANK、RANKL、α-actinin-4、Synaptopodin mRNA表达来实现的。     

环氧化酶抑制剂对门高压大鼠一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨一氧化氮合酶和前列环素在门静脉高压症高动力循环中的作用.方法 选取96只SD大鼠,随机分为三组:肝内型门脉高压组(n=31)、肝前型门脉高压组(n=33)和手术对照组(n=32).短期和长期应用环氧化酶抑制剂吲哚美辛后,分别测定三组大鼠门静脉压力以及血浆前列环素和一氧化氮浓度变化,并通过分光光度法和逆转录-聚合酶链反应法分别检测各组大鼠组织中一氧化氮合酶活性和mRNA表达.结果 与短期相比,长期应用环氧化酶抑制剂后,门静脉压力和一氧化氮浓度显著升高(P＜0.05),与持续下降的血浆前列环素浓度相反;同时内脏和血管组织诱导型一氧化氮合酶基因表达和活性均伴有显著增加(P＜0.05),但组成型一氧化氮合酶基因表达和活性无显著变化(P＞0.05).结论 诱导型一氧化氮合酶引起的一氧化氮过度合成和释放可能是导致门静脉高压症高动力循环的重要相关因素,一氧化氮和前列环素之间可能存在相互作用,而前列环素可能并不参与门静脉高压症高动力循环的维持和发展.     

L-NAME对肝硬化大鼠胃肠道中一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的 研究一氧化氮合酶亚型（NOS1,NOS2,NOS3）在肝硬化大鼠胃肠道中的表达,并探讨NOS抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯（L-NAME）对其表达的影响。方法 制作大鼠四氯化碳中毒肝硬化模型,肝硬化模型大鼠随枘发为NO合酶（NOS）抑制剂治疗组和未治疗组,模型治疗组用L-NAME0.5mg.kg^-1.d^-1,胃内注入,每日1次,治疗10d,免疫组织化学染色显示胃肠道组织中型NOS的染色强度和分布,Western blot法检测胃肠道组织中各型NOS的表达。结果 模型组大鼠胃、小肠、结肠组织 的NOS染色强度显著弱于正常对照组和L-NAME治疗组大鼠。Western blot显示在肝硬化模型大鼠胃、小肠、结肠组织中的各型NOS表达均明显降低,L-NAME治疗后又恢复至接近正常。结论 肝硬化大鼠胃肠道组织中各型NOS的表达明显减少,L-NAME对其表达有调节作用。     

氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶(NOS)表达的影响.方法:40只Brown Norway大鼠随机分为对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、氯胺酮3组(K3组),每组8只.A组用卵蛋白辅以百日咳杆菌菌苗及氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发.K1、K2、K3组大鼠以同样方法致敏,在激发前分别雾化吸入12.5、25.0、50.0 mg/ml的氯胺酮.C组注射和雾化吸入PBS.取肺组织提取RNA,以RT-PCR法分析NOS mRNA的表达,并作肺组织病理学检查.结果:A组肺组织切片显示为急性气道炎症性改变,与A组相比,K1、K2、K3组炎症状态明显减轻.iNOS mRNA的表达与C组比较,A组明显增强,并有显著性差异(P＜0.01),与A组比较,K1、K2、K3组iNOS mRNA表达明显减弱,有显著性差异(K1组P＜0.05,K2组、K3组P＜0.01).K1、K2、K3组间无明显差异.eNOS mRNA各组表达无显著性差异,nNOS在各组呈微弱表达.结论:氯胺酮雾化吸入可抑制卵蛋白所致的大鼠肺iNOS mRNA高表达,并改善肺部炎症,对肺损伤有保护作用.雾化吸入氯胺酮12.5 mg/ml已达到治疗效果.     

环氧化酶抑制剂对门高压大鼠一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨一氧化氮合酶和前列环素在门静脉高压症高动力循环中的作用。方法选取96只SD大鼠,随机分为三组:肝内型门脉高压组(n=31)、肝前型门脉高压组(n=33)和手术对照组(n=32)。短期和长期应用环氧化酶抑制剂吲哚美辛后,分别测定三组大鼠门静脉压力以及血浆前列环素和一氧化氮浓度变化,并通过分光光度法和逆转录-聚合酶链反应法分别检测各组大鼠组织中一氧化氮合酶活性和mRNA表达。结果与短期相比,长期应用环氧化酶抑制剂后,门静脉压力和一氧化氮浓度显著升高(P<0.05),与持续下降的血浆前列环素浓度相反;同时内脏和血管组织诱导型一氧化氮合酶基因表达和活性均伴有显著增加(P<0.05),但组成型一氧化氮合酶基因表达和活性无显著变化(P>0.05)。结论诱导型一氧化氮合酶引起的一氧化氮过度合成和释放可能是导致门静脉高压症高动力循环的重要相关因素,一氧化氮和前列环素之间可能存在相互作用,而前列环素可能并不参与门静脉高压症高动力循环的维持和发展。     

吡格列酮对早期糖尿病肾病大鼠血清一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的慢性并发症和主要死因,其发病机制复杂,缺乏明确有效治疗措施。文中探讨血清一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氮化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)与DN的关系及吡格列酮(P ioglitazone)对其影响。方法采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型,随机分为正常对照组、正常对照治疗组、糖尿病组、糖尿病治疗组,2治疗组给予吡格列酮10mg/(kg.d)灌胃,每组10只。第10周末测定血糖、肾重/体重、24 h尿蛋白定量;检测各组血清NO含量及总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthases,T-NOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthases,iNOS)和结构型一氧化氮合酶(constructure nitric oxide synthases,cNOS)活性。结果糖尿病治疗组与糖尿病组比较,血糖无显著差异(P>0.05),但肾重/体重和24 h尿蛋白定量明显降低(P<0.01)。糖尿病组NO水平和T-NOS、iNOS活性较正常对照组明显增加(P<0.05或0.01),糖尿病治疗组NO水平和T-NOS、iNOS活性较糖尿病组明显下降(P<0.05或0.01)。cNOS活性各组间比较无显著差异(P>0.05)。结论早期DN大鼠血清NO含量和iNOS活性明显升高。吡格列酮非降糖的肾保护作用可能与其抑制iNOS活性和减少NO生成有关。     

去势对雌性大鼠下丘脑外侧区一氧化氮合酶表达的影响

目的 通过研究去势前后大鼠下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area,LHA)一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元的分布与形态变化,进一步探讨LHA神经细胞参与生殖活动的作用机制. 方法 将20只实验大鼠分为对照组、去势组、去势给药一月组及去势给药两月组4组,每组5只.各组大鼠脑组织作冰冻切片,行免疫组织化学染色,在光学显微镜下观察LHA 的NOS阳性神经元.应用图像分析系统对各切片LHA的NOS阳性神经元进行计数并计算其密度,测定阳性神经元的灰度值. 结果 去势组LHA的NOS阳性神经元密度值和灰度值都比对照组和去势给药一月组、去势给药两月组高,差异具有统计学意义;而对照组与去势给药一月组、去势给药两月组的阳性神经元的密度以及平均灰度值比较均无统计学差异. 结论 LHA的NOS可能参与了雌激素对垂体-性腺轴的负反馈调节.     

缺血后处理对大鼠肝脏一氧化氮合酶表达的影响及意义

目的:探讨缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对大鼠肝脏一氧化氮合酶(nitric oxide sythase,NOS)表达的影响及意义。方法:建立70%大鼠肝脏缺血再灌注模型,将32只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组,n=8)、缺血再灌注组(IR组,n=12)、缺血后处理组(IPO组,n=12),IPO组于再灌注恢复血流前,给予多次短暂复灌复停处理。再灌注3h后,比较各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)变化,硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测肝脏组织内皮型NOS(eNOS)mRNA、诱导型NOS(iNOS)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织eNOS、iNOS蛋白表达,光镜观察组织病理学改变。结果:与SO组相比,其余两组血清ALT、AST、NO含量均明显升高(P<0.01),组织eNOS、iNOS表达均明显增强。与IR组相比,IPO组ALT、AST明显降低(P<0.01),NO明显升高(P<0.01),eNOS、iNOS表达增强。光镜下,IR组、IPO组呈现典型缺血再灌注...