萱草花总黄酮含药血清对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨萱草花总黄酮（HCBF）含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法：HepG2细胞分为空白对照组及低（900 mg·kg^-1）、中（1800 mg·kg^-1）和高（2700 mg·kg^-1）剂量HCBF组。采用MTT法检测HepG2细胞生长抑制率,倒置显微镜下观察HepG2细胞形态表现,AnnexinⅤ-PI双染和流式细胞术检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测细胞中凋亡蛋白Bax、bcl-2和Caspase-3表达水平。结果：与空白对照组比较,中和高剂量HCBF组HepG2细胞生长抑制率明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。倒置显微镜下观察,HCBF组HepG2细胞体积缩小,形状不规则,细胞核呈浓缩和破碎状态。与空白对照组比较,中和高剂量HCBF组HepG2细胞凋亡率升高（P < 0.05或P < 0.01）,bcl-2蛋白表达水平明显降低（P < 0.05或P < 0.01）,Bax蛋白表达水平明显升高（P < 0.05或P < 0.01）;高剂量HCBF组Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）。结论：HCBF含药血清可以诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与线粒体途经有关联。     

补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响,探讨补中益气汤治疗肿瘤的机制。方法：以补中益气汤给大鼠灌胃,腹主动脉采血并制备血清。MTT法检测含药血清对肺癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定肺癌细胞细胞凋亡。结果：补中益气汤不同浓度含药血清组与空白对照组比较均可明显抑制肺癌细胞体外增殖,差异有统计学意义（ P<0.05）;补中益气汤不同浓度含药血清组Lewis肺癌细胞凋亡率与空白对照组比较,明显升高,且随着含药血清浓度的增加,细胞凋亡率明显上升,具有浓度依赖性。结论：补中益气汤含药血清对肺癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且可促进肿瘤细胞凋亡。     

软坚护肝片对慢性乙肝及乙肝“大三阳”的疗效分析

应用中药软坚护肝片治疗７４例乙肝“大三阳”。结果ＨＢｒＡｇ转阴率为７８％，ＨＢｓＡｇ转阴率为４３％。对慢性乙肝或伴肝硬化的有效率为８１．５％。为证实该药的可靠性，作者进行了动物实验研究，证明软坚护肝片具有抗ＨＢＶ及护肝作用。     

复方黄黛片人含药血清对MV4-11细胞增殖和凋亡的影响

目的 探索复方黄黛片人含药血清对FMS样酪氨酸激酶3内部重复突变(FLT3-ITD)急性髓系白血病MV4-11细胞增殖和凋亡的影响。方法 收集口服复方黄黛片治疗的急性早幼粒细胞性白血病患者的含药血清和健康志愿者的健康血清,分别采用20%、40%、60%的血清浓度培养FLT3-ITD阳性的MV4-11和FLT3-ITD阴性的HL60细胞48 h后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 含药血清的血砷浓度(0.47±0.06)μmol/L,明显高于健康血清(未检出),差异有统计学意义(t=13.035,P<0.001)。MV4-11细胞的存活率随着含药血清浓度的增高而降低,各血清浓度间比较差异均有统计学意义(40%vs. 20%:t=7.137,P=0.002;60%vs. 20%:t=10.150,P<0.001;60%vs. 40%:t=3.282,P=0.030);且20%、40%、60%含药血清浓度时均明显低于健康血清,差异均有统计学意义(t=6.476、10.450、11.110,P均<0.05)。HL60细胞...     

藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响.方法 MFC细胞经不同浓度藤珠胃康颗粒含药血清处理后,采用MTT法检测藤珠胃康颗粒含药血清对细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态变化;采用流式细胞仪及AnnexinV/PI染色的方法检测对细胞凋亡的影响.结果 与对照组比较,藤珠胃康颗粒含药血清中、高剂量组细胞增殖抑制率显著增高(P＜0.05);显微镜下观察,贴壁细胞逐渐脱落、缩成圆形;与对照组比较,给药组细胞凋亡率均显著增高(P＜0.05),并呈现剂量依赖性.结论 藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡.     

郁金含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制作用的影响

目的:观察郁金含药血清对肝星状细胞-T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞增殖抑制的研究。方法:25只SD大鼠随机分5组:郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组(16.2 g·kg-1、8.1 g·kg-1、4.0 g·kg-1),秋水仙碱组(5g·kg-1)以及空白组(给予等体积生理盐水),连续灌胃给药4 d后,于第4天一次性给药1 h后,乙醚麻醉腹主动脉取血制备含药血清;将HSC-T6细胞分为6组,郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白组、秋水仙碱组、阴性对照组(加入等体积的PBS代替大鼠血清),分别取用体积分数5%、10%、20%的含药血清,同时作用于各组HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h后,采用四氮噻唑蓝法在酶标仪(490 nm波长)上检测各组OD值,分别计算其增殖率和抑制率。结果:与阴性对照组比较,除作用24 h、体积分数5%组外,大鼠血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖速度,其增殖率与大鼠血清含量呈正相关。与空白组比较,除作用24 h、体积分数5%含药血清各剂量组、低剂量20%组以及秋水仙碱20%组没有明显抑制作用外,其余各郁金剂量组均有增殖抑制作用,其中体积分数10%组的抑制效果明显高于体积分数20%组(P0.05)。作用48 h后,各干预含药血清的3个浓度组均有明显抑制作用,其中郁金体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P0.05);作用72 h后,除秋水仙碱组外,各郁金剂量组均有明显抑制作用,其中含药血清体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P0.01)。结论:大鼠郁金含药血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖;郁金含药血清在体外可以有效抑制HSC-T6细胞的增殖,但抑制率与含药血清体积分数、作用时间呈非线性关系,抑制率最为显著的是含药血清体积分数10%,作用时间48 h。     

补肾健脾方含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖和细胞凋亡的影响

目的：探讨中药补肾健脾方含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法：制备补肾健脾方含药血清,分为高、中、低浓度组;另设复方斑蝥组和甲状腺素组作为阳性对照组,并以空白细胞组作为空白对照组。培养人肝癌细胞株SMMC-7721进行体外实验,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组培养24、48、72 h时细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：各药物组含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用与浓度呈负相关、与作用时间呈正相关,在5%浓度、48 h作用下达到抑制率的高峰。中药干预组细胞凋亡率呈现浓度依赖性,高浓度组显著高于低浓度组（P〈0.05）;复方斑蝥组的细胞凋亡率略低于中药高浓度组（P〉0.05）,甲状腺素片组略高于中药低浓度组（P〉0.05）。结论：补肾健脾方含药血清可抑制人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖,具有诱导人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡的趋势。     

补肾方药含药血清对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶活性影响

目的:研究补肾方药含药血清对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:将实验动物随机分成空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组,予以分别灌胃制备含药血清。运用CCK8法测定空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组对UMR106细胞24、48、72 h增殖情况的影响;并测定UMR106细胞24、48、72 h的ALP活性情况。结果:各组自身比较后,加药干预24、48、72 h后各组细胞吸光度值与ALP活性均有增加,差异有统计学意义(P0.05);各组与空白血清组比较,中、高剂量血清组和阳性对照组加药干预24、48、72 h后,细胞吸光度值之间均较低,差异有统计学意义(P0.05),而低剂量血清组与空白血清组分别加药干预24、48、72 h的吸光度值比较均无显著差异(P0.05)。与空白血清组比较,低、中、高剂量血清组和阳性对照组加药干预24、48、72 h后,细胞ALP活性均较高,差异有统计学意义(P0.05),且剂量浓度越高,ALP活性越高。结论:表明补肾方药(骨康方)含药血清有促进UMR106细胞增殖及ALP活性的作用。随着补肾方药(骨康方)浓度的增高,其含药血清促进UMR106细胞增殖作用减弱,但ALP活性随着浓度增高而增高。     

扶正解毒汤含药血清对镍转化细胞增殖作用的影响

目的通过细胞培养方法,研究灌服中药扶正解毒汤后兔血清对镍转化细胞(Nt16HBE)增殖作用的影响。方法将扶正解毒汤血清作用于Nt16HBE细胞7d,分别以四甲基固氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪(FCM)及TRAP-PCR-ELISA法检测扶正解毒汤血清对镍转化细胞增殖及其对核转录因子-κB(NF-κB)、端粒酶活性变化的影响。结果10%体积分数的低、中、高剂量扶正解毒汤血清对Nt16HBE细胞增殖及NF-κB、端粒酶活性均有较强的抑制作用,且存在量-效和时-效关系(P<0.05,P<0.01)。结论扶正解毒汤血清可显著抑制镍转化细胞增殖,其机制与下调NF-κB、端粒酶表达有关。提示扶正解毒汤具有一定的体外拮抗镍致癌效应。     

六味地黄丸含药血清对OS-732细胞增殖分化的影响

目的：观察补肾中药对成骨样细胞增殖分化的影响。方法：制备低、中、高剂量的六味地黄丸含药血清。10％低、中、高剂量的六味地黄丸含药血清培养OS-732细胞，显微镜下观察细胞生长情况；进行细胞计数和绘制生长曲线；用MTT法检测细胞增殖；进行细胞碱性磷酸酶（ALP）活性测定。结果：含药血清组细胞生长良好，中剂量组与对照组相比P〈0．05，统计学有明显差异；在细胞增殖和细胞碱性磷酸酶（ALP）活性测定方面，中剂量组与对照组相比P〈0．05，统计学有明显差异。结论：合适剂量的补肾中药对成骨样细胞的增殖和分化有明显的促进作用。     

中药肉苁蓉含药血清对PC12细胞凋亡的影响

目的:观察中药肉苁蓉含药血清对PC12细胞凋亡的影响. 方法:采用1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium, MPP )建立PC12细胞凋亡模型,应用血清药理学方法,结合光镜荧光染色核形分析、透射电镜、流式细胞仪等检测,研究中药兔血清对PC12,细胞凋亡的保护作用. 结果:含1/2和2倍等效剂量组中药兔血清(ig剂量为肉苁蓉生药1.6, 3.2和6.4 g/kg)处理的PC12细胞经MPP 作用后,凋亡率分别为16.0%, 10.2%和2.8%,与空白组(18.6%)相比差异显著(P<0.05). 结论:肉苁蓉具有拮抗MPP 导致的细胞凋亡作用.     

平目汤含药血清对人Graves眼病眼眶脂肪细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究平目汤含药血清对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的作用,探讨其治疗Graves眼病的机制。方法:采用组织块法将人Graves眼病眼眶前脂肪细胞原代培养并传代,选用间接免疫荧光技术鉴定;用平目汤药液灌胃SD大鼠制备平目汤含药血清,并配成低(5%)、中(10%)、高(20%)三个剂量组;油红O染色观察前脂肪细胞的诱导分化作用;MTT法检测平目汤对前脂肪细胞增殖的影响;流式细胞术检测平目汤对成熟脂肪细胞凋亡率的影响。结果:(1)通过组织块法成功培养出梭形细胞,间接免疫荧光检测为前脂肪细胞。(2)成功诱导前脂肪细胞分化,油红O染色证实为成熟脂肪细胞。(3)平目汤各组均可显著抑制前脂肪细胞的分化,与空白对照组及地塞米松组比较差异明显。(4)平目汤各组均可下调前脂肪细胞增殖活性,以平目汤中剂量组、干预96 h效果最佳,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。(5)平目汤各组成熟脂肪细胞凋亡率明显高于空白对照组(P0.05),以平目汤中剂量组效果最佳。结论:平目汤含药血清可抑制人Graves眼病眼眶前脂肪细胞增殖、促进眼眶成熟脂肪细胞凋亡、减少眼眶脂肪细胞的数量,从而减少眼眶脂肪容积、改善Graves突眼症状。     

川芎含药血清对小鼠胚胎干细胞增殖和分化的影响

【目的】观察川芎含药血清对小鼠胚胎干细胞(ES细胞)增殖及分化的影响。【方法】川芎含药血清与ES细胞共培养,采用CCK-8法检测细胞活性,逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌细胞特异基因肌球蛋白重链(β-MHC)m RNA的表达水平。【结果】与大鼠血清组和胎牛血清组比较,川芎含药血清组的ES细胞活性差异无统计学意义(P0.05),川芎含药血清组心肌细胞特异基因β-MHC表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。【结论】川芎含药血清对ES细胞向心肌细胞分化有促进作用。     

MTT法分析中药含药血清对体外软骨细胞增殖影响的研究

以ＭＴＴ法观察补肾和柔肝中药含药血清对体外软骨细胞的影响。结果：在两次连续灌胃３ｈ后所取血清浓度为５％和１０％时,对软骨细胞有促进增殖的作用;血清浓度为５％时,两药之间作用无差异,而１０％时,补肾方作用优于柔肝方。为便于以下比较,将血清浓度定在５％;长时间（８ｄ）灌胃和短时间（１ｄ）所取血清对软骨细胞的增殖作用无差异;以０．５、１、５倍等效剂量灌胃所取务清对软骨细胞的增殖作用未呈量效依赖关系,其中     

益气消癥法中药含药血清对人脐静脉内皮细胞株细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的:观察益气消癥法中药含药血清对人脐静脉内皮细胞株(EA.hy926)增殖、迁移及凋亡的影响,了解其抑制子宫肌瘤血管生成的途径。方法:将体外培养的EA.hy926细胞,分为正常组、E2组、E2加ICI组、E2加中药高、中、低剂量组,采用MTT法、划痕法、流式细胞术检测细胞的增殖、迁移及凋亡率。结果:益气消癥法中药对经E2处理的EA.hy926细胞增殖和迁移具有抑制作用、对其凋亡具有促进作用,与E2组比较有显著差异(P<0.01),作用效果呈剂量相关性。结论:雌激素可促进EA.hy926细胞的增殖迁移,抑制其凋亡;益气消癥法中药能够抑制雌激素介导的EA.hy926细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,干预血管生成是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

半枝莲含药血清对肝癌H22细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：探讨中药半枝莲提取物（Scutellaria Barbata extract,ESB）含药血清对肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶（fluorouracil,5-Fu）组（阳性对照组）。应用四甲基偶氮唑盐法检测药物对细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化;碘化丙啶标记,流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况;采用荧光探针罗丹明123负载,激光扫描共聚焦显微镜下观察H22细胞的荧光强度,分析H22细胞线粒体膜电位的大小。结果：ESB含药血清有一定的抑制H22细胞增殖的作用,高、中剂量组96 h抑制率分别为（47.5±6.4）%和（36.3±4.5）%。透射电镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,ESB中、高剂量组有明显的诱导凋亡作用,其凋亡率分别为（3.15±1.12）%和（7.83±2.25）%,与空白组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。空白对照组、5-Fu组和ESB低、中、高剂量,H22细胞线粒体膜电位分别为（245.45±67.37）、（127.42±41.35）和（213.68±65.52）、（186.34±56.37）、（142.65±39.44）,各组线粒体膜电位与细胞凋亡率呈负相关（r=-0.826,P〈0.01）。结论：ESB含药血清可有效诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。     

温下方含药血清诱导肠癌细胞凋亡及对Bcl-2、p53表达的影响

目的:研究温下方含药血清诱导肠癌细胞凋亡的作用机制。方法:流式细胞技术检测肠癌细胞凋亡率及Bcl-2、p53的表达。结果:与正常血清组相比,含药血清组能明显诱导肠癌细胞凋亡,提高p53、降低Bcl-2表达(P<0.05)。结论:温下方含药血清诱导细胞凋亡的作用机制可能与提高p53、降低Bcl-2的表达有关。