炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70和核因子-κB的调控作用

目的：探讨炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70（HSP70）和核因子-κB（NF-κB）的调控作用。方法：将清洁级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组,采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型。用RT-qPCR法、SABC免疫组化方法、凝胶迁移电泳EMSA法测定大鼠肺组织HSP70 mRNA及蛋白表达、NF-κB活性,并用HE染色观察肺组织病理学改变。结果：炎调方组肺组织HSP70基因相对表达水平高于假手术组和模型组（P〈0.05）,HSP70蛋白表达量高于正常组、假手术组和模型组（P〈0.05）;正常组、假手术组、炎调方组大鼠肺组织NF-κB/P65相对灰度值均低于模型组（P〈0.01）;病理切片显示炎调方组肺组织损伤轻于模型组。结论：炎调方能上调肺HSP70表达,降低肺NF-κB活性,改善肺组织病理形态学改变,减轻脓毒症导致的肺组织损伤。     

子宫平滑肌组织GPX1、NF-κβ表达水平与产后出血的关系

目的 探讨产妇子宫平滑肌组织中谷胱甘肽过氧化酶1（glutathione peroxidase-1,GPX1）及核因子-κB（NF-κB）表达水平与宫缩乏力性产后出血的相关性。方法 选取宫缩乏力性产后出血产妇40例为病例组,另选同期无产后出血的产妇38例为对照组。以等长张力测定法检测各组产妇离体子宫平滑肌的收缩功能及缩宫素诱导的收缩潜能;以羊水压积测定法测定产后24h出血量;采用实时荧光定量（qRT-PCR）技术检测产妇子宫平滑肌组织中GPX1、NF-κB mRNA的相对表达量;采用蛋白免疫印迹（Western blot）技术检测产妇子宫平滑肌组织中GPX1、NF-κB蛋白的表达水平,并对TLR4、COX-2的表达水平及产后出血量与子宫平滑肌的收缩功能进行相关性分析。结果 病例组产妇子宫平滑肌收缩频率、收缩活动力均显著低于对照组（P<0.05）;病例组产后24h出血量显著高于对照组（P<0.05）;病例组产妇子宫平滑肌组织中GPX1mRNA及蛋白的表达均显著低于对照组（P<0.05）;病例组产妇子宫平滑肌组织中NF-κB mRNA及蛋白的表达均显著高于对照组（P<0.05）;子宫平滑肌收缩活动力与组织中GPX1 mRNA及蛋白的表达均呈显著正相关（|r|均>0.4,P均<0.05）,与组织中NF-κB mRNA及蛋白的表达均呈显著负相关（|r|均>0.4,P均<0.05）,产妇产后24h出血量与子宫平滑肌收缩活动力呈显著负相关（r=-0.528,P<0.05）。结论 病例组产妇子宫平滑肌组织中GPX1表达水平的下调及NF-κB表达水平的上调可能共同参与调控宫缩乏力性产后出血的发展。     

PKC-ε、h1 calponin在不同孕期小鼠子宫平滑肌中的表达及意义

目的 探讨蛋白激酶C epsilon( protein kinaseC epsilon,PKC-ε)及碱性调宁蛋白(h1 calponin,h1 CaP)在妊娠小鼠子宫平滑肌细胞中总蛋白和磷酸化蛋白的时空表达变化及与足月临产、早产的关系和机制.方法 建立小鼠酒精灌胃早产模型.按妊娠阶段的不同,将小鼠分为未孕组、早孕组(孕7 d)、中孕组(孕12 d)、晚孕组(孕18 d)、足月产组和早产组,每组各10例.应用Western blot检测子宫平滑肌中PKC-ε、磷酸化PKC-ε (pPKC-e)、h1 CaP、磷酸化h1 CaP( ph1 CaP)的蛋白表达.结果 足月产组和早产组PKC-ε蛋白表达均显著高于未孕、早孕、中孕组(P＜0.01),晚孕组、足月产组、早产组相比较差异无统计学意义(P＞0.05)；足月产组和早产组h1 CaP蛋白表达均显著高于未孕、早孕、中孕组(P＜0.01),晚孕组、足月产组、早产组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；足月产组和早产组pPKC-ε/PKC-ε值均显著高于未孕、早孕、中孕组及晚孕组(P＜0.01),足月产组与早产组相比较差异无统计学意义(P＞0.05)；足月产组和早产组ph1CaP/h1 CaP值均显著高于未孕、早孕、中孕组及晚孕组(P＜0.01),足月产组与早产组相比较差异无统计学意义(P＞0.05)；pPKC-e/PKC-ε的变化与ph1 CaP/h1 CaP的变化呈正相关(r=0.73,P＜0.05).结论 PKC-ε及h1 CaP蛋白表达在临产前即达到最高峰,pPKC-ε及ph1 caP水平在临产时达最高峰.PKC-ε可通过激活h1 CaP参与足月产及早产的分娩发动.     

制动致福利损伤大鼠肝细胞中NF-κB表达的研究

【摘要】 目的 研究制动导致的福利损伤大鼠肝细胞内NF-κB的表达变化。 方法 选取?70gSD大鼠,雌雄各半,使用制动的方式造成其福利损伤,记录实验过程中的体增重和饲料消耗,而后分别使用实时定量PCR和免疫印迹法检测大鼠肝细胞内NF-κB p65的mRNA量和蛋白表达水平。 结果 与对照组相比,制动组大鼠的体增重和饲料能耗比均降低,且差异极显著（P＜0.01）;肝细胞中NF-κB p65的mRNA量和蛋白表达水平均大幅提升,同样差异极显著（P＜0.01）。其中制动组雄性大鼠的NF-κB p65的mRNA量和蛋白表达水平显著高于雌性（P＜0.05）,但对照组大鼠的雄性与雌性之间未表现出差异（P＞0.05）。 结论 实验大鼠福利受损时,肝细胞中NF-κB表达水平大幅提升,提示两者之间存在一定关联,表明NF-κB参与了大鼠福利损伤过程。     

慢性高原病骨髓细胞环氧化酶2和热休克蛋白70表达及细胞凋亡研究

目的 研究慢性高原病（chronic mountain sickness,CMS）患者骨髓单个核细胞环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的表达及骨髓细胞凋亡变化,探讨它们在CMS发生发展过程中的作用。方法 20例CMS患者（CMS组）按照《慢性高原病青海诊断标准》（西宁,2004年8月）确诊,采集CMS患者骨髓标本,用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,采用RT-PCR方法半定量检测CMS患者骨髓单个核细胞表面COX-2 mRNA和HSP70 mRNA的表达,同时用TUNEL技术定量研究CMS患者骨髓单个核细胞凋亡指数,并与20名健康成人（对照组）骨髓标本研究结果比较分析。结果CMS组骨髓单个核细胞COX-2 mRNA表达量（0.97±0.45）明显高于对照组（0.32±0.15）（P＜0.05）。CMS组骨髓单个核细胞HSP70 mRNA表达量为0.60±0.19,而在对照组中无表达。TUNEL技术研究发现CMS组骨髓单个核细胞凋亡指数（10.41%±3.78%）明显低于对照组 （21.12%±8.16%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。CMS组中,COX-2 mRNA、HSP70 mRNA表达量分别与血红蛋白浓度间呈正相关（r值分别为0.51及0.58, 均P＜0.05）,COX-2 mRNA与HSP70 mRNA间呈显著正相关（r=0.81, P＜0.05）,而在对照组中COX-2 mRNA表达量与血红蛋白浓度间无明显相关性（P＞0.05）。在CMS组和对照组中,骨髓单个核细胞凋亡指数与COX-2 mRNA及HSP70 mRNA表达量之间均未发现明显相关性（均为P＞0.05）。结论 CMS患者骨髓细胞COX-2和HSP70表达升高,而骨髓细胞凋亡减少,可能在慢性高原病发病过程中发挥着一定的作用。     

OPN干预子宫内膜异位症腺上皮细胞中NF-κBp65表达及其对细胞侵袭性的影响

目的：探讨子宫内膜异位症（EMS）患者在位内膜腺上皮细胞中骨桥蛋白（OPN）对核因子κB（NF-κB）p65表达的影响及其与细胞侵袭的关系。方法原代分离培养12例EMS患者在位内膜原代腺上皮细胞。采用OPN siRNA干扰细胞24 h后收集,Western blot、RT-PCR方法分别检测干预前、后细胞中OPN、NF-κBp65蛋白及其mRNA表达情况;Transwell试验检测干预前、后细胞侵袭性的变化。采用相同剂量的无RNA酶水干预EMS患者在位内膜腺上皮细胞作为未干预组。结果与干预前比较,OPN siRNA干扰后细胞中OPN蛋白、mRNA的表达明显下降（t1＝7.92,t2＝9.87,P＜0.05）;与未干预组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;OPN siRNA干扰后细胞中NF-κBp65蛋白及mRNA的表达明显减弱（t1＝—2.13,t2＝— 8 .61,P＜0.05）,与未干预组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。OPN siRNA干扰后原代腺上皮细胞的侵袭性明显降低（t＝2.38,P＜0.05）,与未干预组比较差异无统计学意义（ P＞0.05）。O PN、N F-κBp65在 EM S患者在位内膜腺上皮细胞中的表达呈明显的正相关（ r＝0.87）。结论 OPN siRNA沉默EMS患者腺上皮细胞中的OPN后OPN、NF-κBp65的表达及细胞的侵袭性均明显降低,且二者呈明显正相关,揭示二者极有可能在异位细胞的侵袭中发挥同步协调作用。     

热休克蛋白70、NF-κB和Bcl-2的表达与人乳头瘤病毒感染的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子NF-κB和癌基因Bcl-2分别在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达,以及与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法:采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织、24例尖锐湿疣组织和26例正常宫颈组织进行HSP70、NF-κB和Bcl-2基因蛋白检测;用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行了检测.结果:HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达率显著高于正常对照组(P＜0.05);宫颈癌组HPV和HPV16/18的检出率显著高于正常对照组,尖锐湿疣组HPV和HPV6/11的检出率显著高于正常对照组(P＜0.05);HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在HPV阳性组中的表达率显著高于阴性组(P＜0.05),但它们的表达率在高危型和低危型的HPV感染组间差异无显著性(P＞0.05).结论:HSP70、NF-κB、Bcl-2的表达与宫颈癌、尖锐湿疣的发病及HPV的感染有密切关系,但与HPV的高、低危型无显著关系.     

NF-κB、COX-2在子宫腺肌病中的表达及意义

目的 探讨核因子κB（NF-κB）、环氧化酶-2（COX-2）在子宫腺肌病中的表达及意义.方法 应用免疫组化法检测NF-κB、COX-2在正常子宫内膜（对照组）、子宫腺肌病在位子宫内膜（在位内膜组）、异位子宫内膜（异位内膜组）中的表达.结果 NF-κB在子宫腺肌病异位内膜组和在位内膜组的表达均明显高于对照组（P＜0.05）,异位内膜组的表达明显高于在位内膜组（P＜0.05）;COX-2在子宫腺肌病异位内膜组和在位内膜组的表达均明显高于对照组（P＜0.05）,异位内膜组的表达明显高于在位内膜组（P＜0.05）.NF-κB、COX-2在子宫腺肌病异位内膜中的表达呈正相关（r=0.786,P＜0.05）.结论 NF-κB、COX-2在子宫腺肌病的发生发展过程中可能发挥重要作用.     

热休克蛋白70在异位子宫内膜细胞上皮间质化中的作用研究

目的 研究子宫内膜异位症患者在位内膜热休克蛋白70的表达及其对内膜细胞上皮间质化过程的影响。方法(1) 采用Real-time PCR法测定子宫内膜异位症患者在位及异位内膜组织,以及非子宫内膜异位症患者在位内膜组织中HSP70 mRNA表达量;(2) 采用半定量法分析上述三种组织HSP70蛋白含量;(3) 将HSP70与子宫内膜细胞共培养后使用免疫荧光法测定上皮间质化标志物E-cadherin和α-SMA蛋白表达量的变化,使用Real-time PCR法测定E-cadherin和α-SMA蛋白mRNA表达变化。结果(1) 内异症患者及非内异症患者分泌期内膜组织内HSP70 mRNA表达量和蛋白含量均高于增生期内膜组织(P＜0.05)。(2) 分泌期内异症患者在位和异位内膜组织内HSP70 mRNA表达量及蛋白含量高于非内异症患者(P＜0.05)。(3) 子宫内膜细胞与HSP70共培养后E-cadherin表达降低,α-SMA蛋白表达增加。结论 HSP70蛋白能够促进子宫内膜细胞上皮间质化,帮助异位内膜细胞种植转移。     

热休克蛋白70在脓毒症急性肺损伤大鼠中的表达及药物干预的研究

目的 观察脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠热休克蛋白(HSP)70的表达情况,应用地塞米松进行干预,并探讨作用机制. 方法 44只Wistar大鼠分为假手术(Sham)组(12只)、ALI组(16只)和地塞米松(DEX)组(16只).术后6、12、18、24 h后分别处死大鼠.应用反转录-聚合酶链反应测定肺组织HSP70 mRNA的表达,免疫组织化学法测定肺组织HSP70蛋白的表达. 结果 随着实验时间的延长,肺组织HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达水平呈逐渐增加趋势,至术后18 h达到高峰.ALI、DEX组在各时间点的肺组织HSP70mRNA和HSP70蛋白表达水平均显著高于Sham组(P值均＜0.01),DEX组在各时间点的肺组织HSP70mRNA和HSP70蛋白的表达水平又显著高于ALI组(P值分别＜0.05、0.01).同一组内不同时间点HSP70mRNA和HSP70蛋白表达的差异均无统计学意义(P值均＞0.05). 结论 HSP70在脓毒症ALI大鼠中的表达上调,地塞米松可能通过上调HSP70的表达改善脓毒症肺组织的损伤.     

HSP70、IL-18和S100B水平与脑出血预后的关系研究

目的探讨高血压性脑出血患者血浆及脑脊液热休克蛋白70（HSP70）、IL-18和S100B水平与预后的关系。方法对65例高血压性脑出血患者采用ELISA法检测血浆及脑脊液HSP70、IL-18和S100B水平,统计分析其与患者预后的相关性。结果血浆及脑脊液HSP70、IL-18和S100B水平与高血压性脑出血患者入院时GCS评分、血肿量、脑室积血及生存率均有显著相关性（均P〈0．05）;血浆及脑脊液HSP70、IL-1吕和SIOOB水平对脑出血后1周内死亡均有显著预测价值（均P〈0．05）,且有较高或中等的特异度和灵敏度,血浆及脑脊液S100B水平与入院时GCS评分及血肿量曲线下面积的差异无统计学意义（P〉0．05）。血浆及脑脊液HSP70和IL-18水平较入院时GCS评分及血肿量曲线下面积显著减少（均P〈0．05）。结论HSP70、IL-18和S100B共同参与了高血压性脑出血的病理生理过程,临床检测这些指标有助于早期判断高血压性脑出血患者的预后,S100B水平预测脑出血死亡有较高应用价值。     

热休克蛋白（HSP70—2）基因与氯氮平所致粒细胞减少症关联研究

目的：探讨中国人群中氯氮平所致粒细胞减少症与HSPT0—2mRNA表达及HSP70—2基因多态的关系。方法：将符合精神分裂症诊断标准的广州医学院附属精神病医院住院或门诊患者,根据单一使用氯氮平后外周血白细胞及中性粒细胞绝对计数分为氯氮平所致粒细胞减少症组（简称减少组）、服用氯氮平粒细胞正常组（简称正常组）及氯氮平所致粒细胞增多组（简称增多组）。三组精神分裂症研究组均于抽血做检测时同时抽血做氯氮平血药浓度检查,采用自行设计的调查表收集临床病史及人口学资料。采用聚合酶链反应一限制性长度片段多态性（PCR—RFLP）分析HSP70—2G1267A多态,采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测三组患者的HSP70—2mRNA表达。结果：减少组、正常组与增多组间氯氮平使用剂量、血药浓度无显著性差异（P〉0．05）;三组中性粒细胞的HSP70—2mRNA表达水平有统计学显著性差异（P〈0．01）,粒细胞增多组患者中性粒细胞的HSP70—2mRNA表达增强;HSP70—2基因1267位点各基因型及等位基因频率在三组人群的分布无显著性差异（P〉0．05）;HSP70—2G1267A三种基因型的HSP70—2mRNA表达水平无显著性差异（P〉0．05）。结论：氯氮平所致的粒细胞减少症与氯氮平使用剂量及血药浓度关无;氯氮平所致的粒细胞增多患者中性粒细胞的HSP70—2mRNA表达增强,可能由于HSP70蛋白独特的抗凋亡保护作用及其使用氯氮平后表达的增强,造成了使用氯氮平后出现的粒细胞增多现象;氯氮平所致的粒细胞减少症与HSP70—2mRNA表达无关;中国人群中的氯氮平所致的粒细胞减少症可能与HSPT0—2G1267A多态无关;HSP70—2G1267A突变对中性粒细胞中HSP70—2mRNA表达影响不大。     

P38MAPK在妊娠期糖代谢异常大鼠肾脏组织中的表达

目的初步研究P38MAPK在妊娠期糖代谢异常大鼠肾脏组织中的表达水平。方法选取雌性sD大鼠60只,雄性SD大鼠15只,分为高糖高脂饮食-孕鼠组（SFP）和非孕鼠组（SFV）,普通饮食一孕鼠组（NP）和非孕鼠组（NV）。相应组分别受孕,于妊娠第20天四组大鼠心内取血,检测血糖、胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数。用RT—PCR法检测大鼠肾脏组织中P38MAPK的表达水平。结果SFP组的空腹血糖值、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数与其他三纽相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）,证明妊娠期糖代谢异常大鼠模型建立成功;P38MAPK mRNA在肾脏组织中有表达,并且：①P38MAPKmRNA在SFP组的表达水平明显升高,与其他三组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。②P38MAPKmRNA在SFV组和NP组的表达水平均升高,但是二者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。⑧P38MAPK mRNA在SFV组和NP组的表达水平与NV组相比升高明显,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论P38MAPK可能参与了妊娠期糖代谢异常疾病的肾脏损伤过程。     

再极化肿瘤巨噬细胞对胃癌的抑制作用

目的：探讨再极化肿瘤巨噬细胞对胃癌生长的抑制作用.方法：70只雌性Balb/c小鼠分为体内实验和体外实验;体外实验分为9组,对照组、M2组、M1组,PM-LPS组、TPM-LPS组,PM-IL-12-LPS组、TPM-IL-12-LPS组,PM-IFN-γ-LPS组、TPM-IFN-γ-LPS组,用ELISA试剂盒检测各组巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素12p70（IL-12p70）和白介素10 （IL-10）,用QRT-PCT法检测巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和精氨酸酶（Arg）mRNA的表达;体内实验分为6组,PM＋ MFC组、TPM＋ MFC组、M1＋ MFC组、M2＋MFC组、IL-12-PM＋ MFC组和IL-12-TPM＋ MFC组,测量并比较各组MFC负荷瘤小鼠皮下移植瘤的体积与质量.结果：巨噬细胞上清液中,与对照组比较,M1、PM-IFN-γ-LPS、TPM-IFN-γ-LPS和TPM-IL-12-LPS组均高表达TNF-α和IL-12p70,低表达IL-10;M2和TPM-LPS组高表达IL-10,低表达TNF-α和IL-12p70（P＜0.05）;PM-IL-12-LPS与PM-LPS组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;LPS刺激后的TPM与M2组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组比较,M1组高表达iNOS mRNA,低表达Arg mRNA;M2组高表达Arg mRNA,低表达iNOSmRNA（P＜0.05）;TPM-LPS高表达Arg mRNA,低表达iNOS mRNA（P＜0.05）;M2＋ MFC组和TPM＋ MFC组小鼠肿瘤生长较快.接种后第28天,M2＋ MFC组、TPM＋ MFC组和PM＋ MFC组小鼠肿瘤体积和重量明显大于比IL-12-TPM＋ MFC组和M1＋ MFC组（P＜0.05）;M2组小鼠肿瘤最大,TPM组小鼠肿瘤大小仅次于M2组（P＜0.05）;与TPM组小鼠相比,IL-12再极化的TPM组小鼠肿瘤明显缩小（P＜0.05）.结论：再极化巨噬细胞可作为肿瘤免疫治疗的一个新途径.     

两类中药方对消化性溃疡患者热休克蛋白70及瘦素表达的影响比较

目的观察健脾温中和疏肝理气类中药对消化性溃疡(PU))患者热休克蛋白70(HSP70)及瘦素(Leptin)表达的影响。方法 2011年10月~2013年4月武装警察部队湖北省总队医院41例活动期并幽门螺杆菌(HP)阳性患者,脾胃虚寒型(对照组)19例与肝胃气滞型(治疗组)22例,均在西药基础上分别加用健脾温中和疏肝理气汤剂,6周后行胃镜及HP复查;以酶联免疫吸附分析方法(ELISA)对患者血清HSP70及Leptin进行检测。结果 HP根除率、胃镜疗效,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);HSP70及Leptin含量,治疗前两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,HSP70含量对照组增加显著高于治疗组(t=3.531,P<0.01),Leptin含量治疗组提高明显高于对照组(t=2.487,P<0.05)。结论健脾温中和疏肝理气类中药对消化性溃疡患者血清HSP70及Leptin表达促进作用存在强度区别,西医医师应重视中药的对证作用。     

热休克蛋白HSP 70、90α在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

目的研究热休克蛋白（HSP ）70、90α在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达并探讨其意义。方法应用免疫组化法检测HSP70、90α在30例NHL组织中的表达,并结合临床指标进行分析。10例坏死性淋巴结炎和12例淋巴结反应性增生组织作为对照。结果HSP70、90α在NHL、坏死性淋巴结炎和淋巴结反应性增生组织中均有高水平表达。HSP70高表达（阳性率大于50%）与NHL恶性程度、分期及治疗反应密切相关（P＜0.05）,与是否有B症状、是否累及结外无关（P＞0.05）。HSP90α高表达与上述指标无相关性（P＞0.05）。结论检测NHL组织中HSP70的表达程度有助于判断NHL的恶性程度、分期及治疗反应。     

输尿管结扎预适应通过上调热休克蛋白27的表达减轻肾脏缺血再灌注损伤

目的探讨热休克蛋白27（HSP27）在通过输尿管结扎（UO）预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注（IR）损伤中的作用及其机制。方法实验动物为雄性C57BL/6小鼠,①将小鼠随机分为3组,每组30只,对照组为正常C57BL/6小鼠,UO＋IR组小鼠经左侧输尿管结扎24 h后再通,再通48 h后行IR处理,non-UO＋IR组除不结扎左输尿管其余操作同UO＋IR组。比较3组小鼠再灌注后血清肌酐（Cr）水平,肾组织内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）mRNA表达情况。②取C57BL/6小鼠随机分为UO组与non-UO组,每组20只,UO组予以左侧UO处理24 h,再通48 h后检测左肾组织HSP27蛋白表达,并与non-UO小鼠对比。③取C57BL/6小鼠随机分为两组,每组50只,一组予以小鼠左肾注射包装有干扰HSP27表达的短发夹RNA的重组腺病毒100μL靶向抑制HSP27的表达,将该组设为HSP27干扰组,另一组小鼠予以注射空病毒100μL作为对照组,每组取10只小鼠验证HSP27干扰成功后,每组再随机分为UO＋IR及non-UO＋IR两个亚组（每个亚组20只小鼠）,观察HSP27对IR损伤和UO效应的影响,比较各组Cr水平,检测肾组织内TNF-α和IL-6 mRNA,以及凋亡效应蛋白胱天蛋白酶-3的表达水平。结果①UO＋IR组Cr水平较non-UO＋IR组显著降低（P〈0.05）,TNF-α及IL-6mRNA的表达明显低于non-UO＋IR组（P〈0.05）。②较non-UO组,UO组肾组织HSP27表达明显上调（P〈0.05）。③相对于non-UO＋IR处理,UO＋IR不能降低HSP27干扰组小鼠Cr水平（P〉0.05）、TNF-α和IL-6 mRNA的表达（P〉0.05）及胱天蛋白酶-3的表达（P〉0.05）,却可显著降低空病毒对照组小鼠以上各指标表达;且相对于空病毒对照组中UO＋IR亚组,HSP27干扰组中UO＋IR亚组以上各指标仍高表达（P〈0.05）。结论 UO通过上调HSP27表达减轻小鼠肾脏IR损伤,其机制可能与HSP27抑制炎性反应、减少细胞凋亡的作用有关。     

HSP70和MGMT在乳腺肿瘤中的表达和意义

目的：探讨乳腺肿瘤组织中热休克蛋白HSP70和DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methyguanine-DNA methytransferase,MGMT）的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测65例乳腺肿瘤组织中HSP70和MGMT的表达情况。结果：乳腺肿瘤中HSP70的阳性率为80.00%（52/65）,MGMT的阳性率为60.00%（39/65）,二者呈中度相关性（r=0.46）。其中,有淋巴结转移组的阳性率高于无转移组（P〈0.05）。结论：HSP70和MGMT的表达率与淋巴结转移情况有关。检测HSP70与MGMT对乳腺肿瘤预后和化疗方案的选择有指导意义。     

TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的影响

  目的  研究TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖的条件性位置偏好（conditioned place preference,CPP）大鼠海马的影响,同时采用特异性抑制剂TAK-242抑制Toll样4受体（Toll-like receptor 4,TLR4）,减轻MA依赖诱导的海马神经炎症。  方法  建立MA（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,分别为生理盐水组、MA组、TAK-242组、MA+TAK-242组。TAK-242组和MA+TAK-242组先分别腹腔注射抑制剂TAK-242（3 mg/kg）,1h后MA+TAK-242组再腹腔注射MA（10 mg/kg）。采用Western Blot实验和采用荧光定量PCR实验检测MA依赖CPP大鼠海马中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB-α、p-IκB-α、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达和mRNA表达。  结果  与生理盐水组相比,MA组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均升高（P < 0.001或P < 0.01）,IκB-α的蛋白和mRNA表达下降（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65的表达升高（P < 0.01或P < 0.05）;与MA组相比,MA+TAK-242组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均下降（P < 0.001、P<0.01或P < 0.05）,IκB-α的蛋白和mRNA表达升高（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65表达下降（P < 0.01或P < 0.05）。  结论  MA依赖可通过激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,诱导CPP大鼠海马神经炎症的发生,采用特异性TLR4抑制剂可以减轻MA诱导的神经炎症。