基层医院临床生化检验技术(续8)

第四章 非蛋白氮类物质测定第一节 血清尿素氮(BUN)测定一 二乙酰—肟显色改良法1 原理     

血浆尿素氮快速测定法

近年来,关于血中尿素氮的测定,国内外开始采用以血浆为标本的二乙酰—肟法、此法特点是无需制备去旦白滤液,操作比较简便快速,目前我科也改用这一方法,为了保证试验的准确性,我们做了一些实验探讨,并在原法的基础上进行了某些改进。现将具体方法和实验介绍于后。一、原理尿素与二乙酰—肟在酸性环境下,经Fe~*的催化产生缩合,并在氨基硫脲存在下,生成3-羟5、6-二甲基-1、2、4三嗪,显红色反应。 2.硫氨脲贮存液:取硫氨脲2.5克加蒸馏水至500毫升。 3.二乙酰—肟贮存液;12.5克二乙酰—肟加蒸馏水溶解至500毫升。 4.氯化铁—磷酸混合贮存液:称取氯化铁(FeCl_36H_2O)1克溶于磷酸(85％)20毫升中,用蒸馏水稀释至30毫升。 5.二乙酰—肟—酼氨脲应用液(简称DAM—TSC液):取二乙酰—肟贮存液67毫升,硫氨脲贮     

二乙酰一肟-氨基硫脲比色法测定酶转化液中的L-瓜氨酸

用二乙酰一肟-氨基硫脲比色法测定酶转化液中的L-瓜氨酸含量,并研究了测定波长、氨基硫脲用量、铁离子等因素的影响。线性范围为0.1～20mg/L（r=0.999）,回收率99.8%。     

尿素氮测定—二乙酰一肟硫氨脲方法探讨

目前尿素测定多采用二乙酰一肟·硫氨脲方法。由于对尿素和二乙酰一肟缩合物认识上的不同而导致试剂配制上的不一致,不仅影响常规应用,也影响实验室的质量控制。为此,对二乙酰一肟,硫氨脲试剂的配制进行了探讨,并对新方法的准确性进行评价。     

唾液中尿素氮的测定法

涎液尿素氮的定量测定,蔡宏道等曾作介绍,但方法较复杂,我们选用二乙酰—肟的方法对唾液中的尿素氮进行测定,结果满意。并证实了正常人和肾脏病患者的唾液中尿素氮和血液中基本接近。由于标本易取,受检者无痛苦,可供参考,介绍如下。     

诊断用新药尿素酶通过鉴定并转入生产

<正> 临床上常以血清尿素氮的多少作为测定肾功能的重要指标。国内曾用二乙酰乙肟-氨基硫脲法;当加入试剂后的加热过程中,往往产生刺激性使人恶心,还要污染环境。如采用Bechman Bun Analyzer Ⅱ测试,虽可克服上述缺点,但需用进口尿素酶(urease),并须化费外汇。 最近,尿素酶已由上海医药工业研究院研制成功,并经上海中山医院、上海仁济医院等6个单位使用证明,本品性能可完全替     

介绍一种新法测定尿素氮

<正> 目前临床实验室所用尿素氮测定法,绝大多数采用尿素酶或二乙酰——肟法。前法操作费时,需除蛋白,试剂易受重金属盐的污染;后法需煮沸加热显色,臭味大,线性关系不好的缺点。我们按Jung等介绍的方法,尿素与邻苯二甲醛缩合为异吲哚化合物,后者再与萘乙烯二胺盐酸盐生成黄红色化合物而测定之。经临床应用,认为本法操作简便,不需煮沸加热及除蛋白,试剂稳定易保存。试剂与方法一、试剂。1、0.5％硝酸溶液。2、邻苯二甲醛溶液:取800ml蒸馏水,加74ml浓硫酸,冷却后加200mg邻苯二甲醛和1ml 20％Brij-35溶     

灵芝注射液清除自由基保护肾皮质细胞的实验研究

采用顺铂损伤肾脏的动物模型,用硫代巴比妥酸比色法测定血和肾皮质丙二醛,肾上腺素自氧化法测定血、肾皮质超氧化物歧化酶,二乙酰—肟法测定血清尿素氮,苦味酸法测定血清肌酐,探讨了灵芝注射液清除自由基、保护肾皮质的作用机理。     

全唾液尿素氮含量的测定

二十年代,Morris和Corkhill等曾提出用唾液尿素氮水平作为诊断肾脏疾病的指标。由于诸种原因,至今尚未被广泛应用。新近笔者采用二乙酰一肟——铁磷酸法,测定225例正常人和29例肾脏疾病患者全唾液尿素氮的含量,现将结果报告如下: 材料及方法一、研究对象:儿童组97人,其中男50人,女47人。成人组128人,其中男74人,女54人。病人组44人,其中肾脏病患者29人,其它疾患15人。     

鸟嘌呤乙酰化混合物中一,二乙酰化物的核磁共振定量分析

本文对鸟嘌呤乙酰化混合物中一、二乙酰化物进行了核磁共振（ＮＭＲ）含量测定，并选择了非那西丁作内标物，方法快速、准确。     

克拉霉素合成与药理研究

克拉霉素合成与药理研究编辑：我们采用国产化工原料，研究比较了克拉霉素（Ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ，６－甲氧红霉素）的３种合成方法。（１）醚－硅化法：以红霉素Ａ－９－肟为起始原料，经醚化、甲基化、水解得６－甲氧红霉素Ａ－９－醚，优选弱酸性条件下脱肟，...     

利用固定在不同载体上的双酶系统一步转化头孢菌素C成为7-氨墓头孢烯酸

利用Ｄ－氨基酸氧化酶（ＤＡＯ）和戊二酰－７－氨基头孢烯酸（ＧＬ－７－ＡＣＡ）脱酰酶酶促转化头孢菌素 Ｃ（ＣＰＣ）为７－氨基头孢烯酸（７－ＡＣＡ）时，为了最大限度提高催化活性和稳定性，将这两种酶分别固定在不同载体上。反应是同时利用这两种酶以类似一步方式进行。ＤＡＯ制剂中的过氧化氢酶杂质的影响可通过外加过氧化氢解决。在最适条件下，ＣＰＣ转化为７－ＡＣＡ的转化率高于９０％，副产物形成率低于４％。这种固定化酶混合物可反复循环使用，具有显著的操作稳定性。     

应用BXC—Ⅰ型尿素传感器测定血浆尿素氮

<正> 为了能简便、迅速、准确、连续地测定血浆尿索,我们参照王厚行等[生物工程学报1988;4(4):331]研制的BXC—Ⅰ型尿素传感器(尿酶电极)测定血浆尿素,并与经典的二乙酰乙肟法和萘乙烯二胺法进行了比较,获得了比较满意的效果,现报告如下: 一、试剂及器材 1.Berthlot氏酶法测定尿素的试剂:参照文献(Am Ass Clin Chem 1982;9:357)配制。 2.BXC—Ⅰ型尿素传感器:以60或120mg脲酶/ml聚氯乙烯(PVC)胶液涂于上海电光器件厂的231型玻璃电极的电极泡,室温干燥半小时或     

RP-HPLC法测定二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的含量

目的：建立测定二乙酰氨乙酸乙二胺注射液含量的HPLC方法。方法：采用AlhimaAQ（200mm×4．6mm,5μm）色谱柱,水-磷酸-三乙胺溶液（100：0．15：0．2）为流动相,流速为1．0ml·min-1,检测波长为225nm。结果：二乙酰氨乙酸乙二胺在0．25～2．04μg（r=0．9998）范围内线性关系良好,平均加样回收率为98．6％（n=9）。结论：方法简便、准确、重复性好．可用于二乙酰氨乙酸乙二胺注射液中的含量测定。     

青霉素生物合成与代谢流量控制

在δ－（Ｌ－α氨基己二酰）－Ｌ－半胱氨酰－Ｄ－缬氨酸合成酶,异青霉素Ｎ合成酶、酰基辅酶Ａ异青霉素Ｎ酰基转移酶等酶的作用下,产黄青霉将３个前体氨基酸经中间产物－（Ｌ－α氨基己二酰）－Ｌ－半胱氨酰－Ｄ－缬氨酸（ＡＣＶ）和异青霉素（ＩＰＮ）生物合成为青霉素。这一过程在产生青霉素Ｇ或Ｖ的同时,伴 着６－氨基青霉酸（６－ＡＰＡ）、８－羟基青霉咪唑酸（８－ＨＰＡ）、６－氧哌啶２－羟酸（ＯＰＣ）和青霉噻唑酸等     

末梢血尿素氮测定

用二乙酰一肟法测定血中尿素氮灵敏度高,特异性强,但实验时必须静脉抽血,十分不便。我们采用末梢血微量血浆代替静脉血的血清测定尿素氮,经55例对照试验,取得满意结果。对象与方法:健康成人50名(男37名,女13名,年龄17～28岁)及尿毒症病人5例。于清晨空腹静脉抽血2～3毫升分离血清;同时耳垂或手指采血数滴,置含有1毫克草酸钾或12单位肝素的抗凝管内分离血浆,分别用微量进样器吸     

二乙酰单肟抑制豚鼠和鸡胚心肌细胞离子通道电导

二乙酰单肟抑制豚鼠和鸡胚心肌细胞离子通道电导佐田英明，伴隆志（日本国山口县宇部市山口大学医学部药理学讲座）ＮｉｃｈｏｌａｓＳＰＥＲＥＬＡＫＩＳ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＣｅｌｕｌａｒＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＣｏｌｅｇｅｏｆＭｅｄ...     

二乙酰氨乙酸乙二胺注射剂与维生素C注射剂的配伍稳定性考察

目的：考察二乙酰氨乙酸乙二胺注射剂与维生素C注射剂在5％葡萄糖注射液中的配伍稳定性。方法：将二乙酰氨乙酸乙二胺与维生素C配伍于5％葡萄糖注射液中,采用紫外双波长分光光度法测定配伍液中该两种组分的含量。观察和检测配伍液的外观及pH的变化。结果：与配伍即刻（0h）比较,8h内配伍液无混浊、沉淀、气体产生,外观色泽及含量无明显变化,pH变化亦不大,符合《中国药典》规定。结论：8h内二乙酰氨乙酸乙二胺与维生素C注射液配伍基本稳定。     

α—淀粉酶的2种测定方法比较

对2种测定α－淀粉酶的方法进行比较,结果表明2－氯－4－硝基苯酚－α－麦芽三糖苷（CNP－G3）法与用亚乙基封闭的对硝基苯酚－α－麦芽七糖苷（EPS或PNP－G7）法相关性良好,CNP－G3法的优点为直接、一步测定α－淀粉酶活性,不需要辅助酶,试剂稳定,CNP－G3的用量少,价格低廉,是目前较为理想的测定α－淀粉酶的方法。     

乙氧苯柳胺在家兔体内的主要代谢产物

采用高效液相色谱法对家兔口服乙氧苯柳胺（Ｎ－（４－乙氧苯基）－２－羟基苯甲酰胺）后在尿中的代谢物进行了分离与检测．用β－Ｄ－葡糖苷酸酶和该酶加专属性抑制剂葡糖二酸－１，４－内酯分别对尿样进行水解处理，发现该药的主要代谢物为β－Ｄ－葡糖醛酸结合物，其含量超过尿中代谢物总量的８０％．利用色谱保留值和紫外双波长吸收比对酶解后的主要生成物进行定性分析，证明该代谢物为乙氧苯柳胺葡糖醛酸结合物（Ｎ－（４－乙氧苯基）－苯甲酰胺－２－Ｏ－葡糖苷酸）．此外，在家兔给药后０～１２ｈ尿样中未检测出乙氧苯柳胺原形药物及其可能的代谢产物水杨酸．