雷公藤甲素对去势小鼠骨质疏松模型破骨细胞分化的影响

目的 探究雷公藤甲素（TP）对去势小鼠骨质疏松模型破骨细胞分化的影响，并探讨其可能的分子机制。方法 建立去势小鼠骨质疏松模型，分为假手术组（Sham组）、卵巢切除去势组（OVX组）、雷公藤甲素组（TP组）、利维爱组（Livial组），造模后第3天给予对应药物处理。治疗6周后，采用TRAP染色检测左侧股骨干骺端的破骨细胞数量。Micro-CT重建三维骨结构图像，检测左侧胫骨干骺端的骨密度（BMD）、骨小梁数目（Tb.N）、骨体积分数（BV/TV）、骨表面积组织体积比（BS/TV）、骨小梁分离度（Tb.Sp），ELISA检测外周血中IL-6、TNF-α、骨形成标志物骨钙素（OC）、骨吸收标志物抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAcp5b）含量。Western Blot检测右侧股骨组织中p65、p-p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达水平。结果 骨小梁周围破骨细胞数量比较：OVX组与Sham组相比明显增加；TP组与OVX组相比明显减少；TP组与Livial组比较，差异无统计学意义。骨参数分析：OVX组与Sham组相比，小鼠骨组织的BMD、Tb.N、BV/TV、BS/TV均显著下降，而Tb.Sp显著升高（P＜0.01）；与OVX组相比，TP组和Livial组骨组织的BMD、Tb.N、BV/TV、BS/TV均显著升高，而Tb.Sp显著下降（P＜0.01）；TP组与Livial组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-6、TNF-α、OC、TRAcp5b含量比较：OVX组的IL-6、TNF-α含量显著高于Sham组（P＜0.01）；各组间OC水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；OVX组的TRAcp5b水平显著高于Sham组（P＜0.01）。蛋白表达水平：与Sham组相比，OVX组的p65、IκBα表达水平不变，而p-p65和p-IκBα表达水平显著升高（P＜0.01）；TP处理后，p65、IκBα表达水平不变，而p-p65和p-IκBα表达水平却显著降低（P＜0.01）；TP组与Livial组比较，两者间p65、IκBα、p-p65和p-IκBα表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 TP抑制破骨细胞分化，改善了去势小鼠的骨量丢失，其分子机制可能与抑制炎症因子IL-6、TNF-α的表达及NF-κB信号通路的磷酸化水平有关。     

颗粒蛋白前体促进去卵巢小鼠的骨质疏松

目的探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对去卵巢小鼠骨质疏松的影响。方法建立野生型和PGRN敲除(PGRN~(-/-))小鼠卵巢切除骨质疏松模型,采用微型计算机断层扫描(Micro-CT)和三维重建获得小鼠骨组织微观结构并进行骨小梁数据分析, HE染色观察骨组织形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察骨组织中破骨细胞数量,免疫组织化学染色法检测骨组织核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 P65表达,荧光定量PCR检测骨组织TRAP mRNA水平, Western blot法检测骨组织基质金属蛋白酶9(MMP9)、 MMP14、 P65蛋白水平。结果与野生型小鼠相比, PGRN~(-/-)组小鼠骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)及骨小梁厚度(Tb.Th)均显著增加,骨小梁空间距(Tb.S)显著降低;在PGRN~(-/-)小鼠中观察到骨质疏松程度更轻,破骨细胞数量更少,骨组织RANKL、 TNF-α、 P65蛋白, TRAP mRNA, MMP9、 MMP14表达均低于野生型小鼠。结论 PGRN促进卵巢切除小鼠骨质疏松。     

抗骨质疏松药物应用的依据：骨生化代谢标志物及骨组织病理学

背景：目前国际上公认双能X射线吸收测定法为诊断骨质疏松症的金标准,但常由于测量部位异位骨化、骨质增生等因素使得测量结果存在误差。目的：探讨骨代谢标志物在老年骨质疏松骨折诊疗中的临床意义以及它与骨密度和骨组织形态病理学改变的相关性。方法：选取50例需行手术治疗的老年骨质疏松骨折患者,行骨生化4项检测,其中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)检测值明显增高患者25例(标记为抗酒石酸酸性磷酸酶5b升高组),骨碱性磷酸酶(BAP)检测值明显升高患者25例(标记为骨碱性磷酸酶升高组)。术中抽取两组各8例患者骨折断端部分骨组织,苏木精-伊红染色普通光镜检查和扫描电镜检查病理学改变。术后,抗酒石酸酸性磷酸酶5b升高组患者使用鲑鱼降钙素抗骨质疏松治疗,骨碱性磷酸酶升高组患者使用骨肽注射液抗骨质疏松治疗,6个月后再次检测骨密度和骨生化4项。结果与结论：两组患者术前骨密度和骨生化4项检查结果相比较差异无显著性意义(P > 0.05)。抗酒石酸酸性磷酸酶5b升高组患者骨折断端骨组织病理检查示成骨细胞减少、破骨细胞增多;骨碱性磷酸酶升高组患者骨折断端骨组织病理检查示成骨细胞减少;两组骨小梁/骨面积比值均降低,且抗酒石酸酸性磷酸酶5b升高组较骨碱性磷酸酶升高组降低程度差异有显著性意义(P < 0.05)。扫描电镜检查示两组破骨细胞都较正常组活跃,抗酒石酸酸性磷酸酶5b升高组骨小梁较骨碱性磷酸酶升高组稀松明显,吸收空泡增大。两组于术后使用抗骨质疏松药物治疗,两组治疗前与治疗后骨密度和骨生化4项检测结果差异有显著性意义(P < 0.05)。结果显示：①骨代谢标志物检测能明确患者骨组织是以成骨细胞功能和数量减低还是以破骨细胞功能和数量增加为主,以便指导临床针对性使用抗骨质疏松药物。②骨折断端骨组织形态病理学检查能更好地反映患者骨组织内成骨细胞、破骨细胞和骨小梁等状况。骨质疏松患者针对性使用抗骨质疏松药物治疗能提高疗效、降低相关并发症。     

高盐饮食通过激活破骨细胞促进小鼠骨质疏松发生

目的　明确高盐饮食对小鼠破骨细胞分化的影响及其促进骨质疏松的作用。 方法　获得C57小鼠骨髓单个核细胞,在体外定向诱导破骨分化体系中比较对照组（未加入氯化钠）、低剂量组（20 mmol/L氯化钠）及高剂量组（40 mmol/L氯化钠）破骨细胞生成数量;将24只C57小鼠随机平均分为正常组（普通饲料喂养）、卵巢切除组（切除卵巢,普通饲料喂养）、高盐饮食组（切除卵巢,8%高盐饲料+生理盐水喂养）,6周后分析3组左侧股骨破骨细胞生成数量并测定血清骨吸收及骨保护指标水平;选择右侧股骨进行显微CT扫描,比较3组骨组织形态计量学参数。 结果　体外高盐状态破骨细胞生成数量明显增加;体内高盐饮食组破骨细胞生成数量明显高于其它两组,I型胶原羧基端肽和核因子κ B受体活化因子配体不同程度增加,骨保护素水平显著降低,骨体积分数、骨皮质厚度、骨小梁数量和骨小梁厚度下降尤为明显,骨表面积/骨体积、骨小梁分离度和骨小梁模式因子不同程度增高。 结论　高盐饮食可通过激活小鼠破骨细胞分化及其功能活化增强骨吸收作用,进而诱导骨质疏松发生。     

快速进展型股骨头坏死患者血清骨代谢生化指标的变化

背景：国外研究认为快速进展型股骨头坏死的发病机制为血清关节软骨代谢及破骨细胞功能的异常。 目的：检测快速进展型股骨头坏死患者血清中骨生化标志物TRACP-5b及CTX-Ⅱ的表达。 方法：利用酶联免疫吸附试剂盒检测普通股骨头坏死患者(n=30,普通组)、快速进展型股骨头坏死患者(n=30,快速进展组)、骨质疏松症患者(n=30,骨质疏松组)、对照患者(n=30,单纯外伤后软组织缺损或单纯腘窝囊肿患者)血清中TRACP-5b及CTX-Ⅱ水平。 结果与结论：快速进展组、骨质疏松组TRACP-5b水平高于普通组、对照组(P < 0.05),普通组TRACP-5b水平稍高于对照组,但差异无显著性意义(P > 0.05)。快速进展组CTX-Ⅱ水平高于其他3组(P < 0.05),普通组、骨质疏松组CTX-Ⅱ水平稍高于对照组,但差异无显著性意义(P > 0.05)。说明：①快速进展型股骨头坏死的可能病理机制之一为TRACP-5b水平上升,破骨细胞活性增强,CTX-Ⅱ水平上升,关节软骨降解过快。②TRACP-5b及CTX-Ⅱ有可能成为诊断快速进展型股骨头坏死的指标之一。     

川陈皮素通过抑制STING/NF-κB信号通路促进骨质疏松大鼠的骨折愈合北大核心CSCD

目的 探讨川陈皮素（NOB）通过抑制干扰素基因刺激因子（STING）/核转录因子kappaB(NF-κB)信号通路对骨质疏松（OP）大鼠骨折愈合的影响。方法 通过切除卵巢+右侧股骨干骨折髓内固定术建立OP性骨折大鼠模型；将造模后的大鼠随机分为模型组、NOB高（NOB-H,30 mg/kg NOB）、中（NOB-M,20 mg/kg NOB）、低剂量（NOB-L,10 mg/kg NOB）组以及NOBH+STING激活剂（DMXAA）组（30 mg/kg NOB+25 mg/kg DMXAA），并以仅暴露卵巢的18只大鼠作为假手术组。干预结束后，对大鼠骨折愈合状况进行评估；Micro-CT检测大鼠骨小梁微结构变化；试剂盒检测血清中骨代谢相关指标[碱性磷酸酶（ALP）、钙、磷]及炎症因子（TNF-α、IL-1β）水平；HE检测股骨组织形态学变化及骨小梁面积；Western blot检测STING/NF-κB通路相关蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组骨折线清晰，骨小梁结构紊乱、且间隙较大，TNF-α、IL-1β水平、STING、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达显著增加，骨小梁面积、ALP、钙、磷水平、骨密度（BMD）、骨体积分数（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）和骨小梁厚度（Tb.Th）显著降低（P<0.05）；与模型组相比，NOB-L组、NOB-M组、NOB-H组骨折线逐渐模糊，骨小梁结构排列有序，且间隙逐渐减少，指标变化趋势与模型组相反（P<0.05）;STING激活剂减弱了NOB对OP大鼠的骨折愈合的促进作用，并增加大鼠炎症反应。结论 NOB可减少OP性骨折大鼠炎症反应，促进其骨折愈合，可能与抑制STING/NF-κB信号通路有关。     

破骨细胞释放凋亡小体微小RNA-30a对成骨活性的影响

目的 探讨破骨细胞凋亡释放凋亡小体介导成骨活性的作用。 方法 通过小鼠（n=10）骨髓单核细胞体外诱导破骨细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和细胞骨架F-actin与DAPI双标免疫荧光鉴定破骨细胞,破骨细胞与小鼠成骨细胞MC-3T3E1共培养体系,DNA片段化ELISA分析破骨细胞凋亡,凋亡小体标志物检测,骨形成标志物Real-time PCR分析,凋亡小体微小RNA (miRNA)表达谱芯片筛查。 结果 100 μmol/L 阿伦膦酸钠(ALN) 诱导成熟破骨细胞凋亡,并释放凋亡小体;Western blotting检测表明,ALN诱导凋亡小体特异性表面标志物蛋白表达增强;破骨细胞凋亡小体蛋白C3b表达增高与成骨细胞活性负相关;凋亡小体表达谱芯片筛查提示,miR-30a与骨形成标志物血清碱性磷酸酶(ALP)相关。 结论 破骨细胞凋亡释放的凋亡小体携带miR-30a抑制成骨细胞活性,凋亡小体可能参与破骨细胞与成骨细胞的对话。     

METTL14基因敲除对骨质疏松小鼠骨微结构和骨密度及氧化应激的影响

目的 研究人甲基转移酶样蛋白14(METTL14)基因敲除对骨质疏松小鼠骨微结构、骨密度及氧化应激的影响。方法 12只野生型小鼠随机分为对照组和模型组，每组6只。对照组小鼠切除卵巢附近脂肪组织；模型组小鼠切除双侧卵巢构建骨质疏松小鼠模型；另取6只切除双侧卵巢的METTL14基因敲除小鼠作为敲低组。术后8周，使用micro-CT扫描仪测量小鼠右股骨骨密度和骨微结构相关指标，使用ELISA检测小鼠血清中PINP、CTX、MDA和SOD水平。结果 模型组小鼠骨密度、BV/TV、Tb. N、Tb. Th、SOD、PINP、CTX水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。此外，敲低组小鼠骨密度、BV/TV、Tb. N、Tb. Th、SOD、PINP、CTX水平显著低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。模型组小鼠Tb. Sp、MDA水平显著高于对照组，敲低组小鼠Tb. Sp、MDA水平显著高于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 METTL14基因敲除可抑制骨质疏松小鼠骨密度，破坏骨微结构，并促进氧化应激。     

仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈骨代谢的影响

背景：用骨组织形态计量学方法探讨中药对去卵巢大鼠股骨颈骨质疏松的影响,可为采用中药防治绝经后妇女骨质疏松性股骨颈骨折提供实验依据。 目的：观察仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈松质骨的影响。 方法：3月龄SD雌鼠随机分为4组：基础对照组于实验开始时处死取材,去卵巢组和仙珍骨宝组去卵巢造模,仙珍骨宝组在去卵巢后灌胃仙珍骨宝,去卵巢组和年龄对照组灌胃生理盐水,90 d后处死,取股骨颈经不脱钙骨制片进行骨组织形态计量学参数测量。 结果与结论：与年龄对照组比较,去卵巢大鼠静态参数的骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显减少(P < 0.01),骨小梁间隙明显增大(P < 0.01);动态参数的每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度明显增加(P < 0.01),骨矿化沉积率明显减少(P < 0.01)。说明去卵巢能导致大鼠股骨颈骨量显著减少。给予仙珍骨宝治疗后,大鼠的骨小梁厚度及骨小梁面积明显增加(P < 0.05),每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度有所减少,标记周长百分数则有所增加。说明仙珍骨宝能阻止去卵巢所致的大鼠股骨颈骨量丢失。     

康力龙、泼尼松对大鼠骨组织形态学的影响

目的　探讨康力龙和泼尼松对大鼠骨组织形态学的影响。方法　 3月龄雄性SD大鼠 2 4只 ,体重 2 31 7± 33 3g随机分为三组。分别用蒸馏水、泼尼松 4 5mg·kg-1·d-1(每周二次 )和泼尼松 4 5mg·kg-1·d-1加康力龙 0 5mg·kg-1·d-1灌胃(每周 6次 ) ,持续 90天。用图像分析仪测算胫骨近端骨小梁的骨形态计量学指标 ,并在扫描电镜下观察大鼠腰椎的组织结构改变。结果　与对照组比较 ,泼尼松组大鼠胫骨的骨吸收增加 (破骨细胞数 + 92 % ) ,骨小梁间隙 (Tb .Sp)增宽 187% ,骨形成率(BFR/TV)减少 89% ,骨小梁面积 (%Tb .Ar)减少 (- 5 8% )。腰椎的骨小梁变少 ,变细 ,断裂 ,连接不紧密 ,表面常见骨吸收形成的陷窝。与泼尼松组比较 ,康力龙组骨形成增加 (BFR/TV + 75 2 % ) ,骨吸收减少 (破骨细胞数 - 41% ) ,骨量增加 (%Tb .Ar +87% ,Tb .Sp - 5 8% )。腰椎的骨小梁粗大 ,排列整齐 ,连接紧密。结论　长期使用泼尼松可导致骨质疏松 ,康力龙对此有防止作用。     

生骨再造丸对兔激素性股骨头坏死骨形态计量学指标的影响

目的 观察生骨再造丸对激素性股骨头坏死（steroid-induced osteonecrosis of the femoral head，SONFH）兔模型股骨头组织形态学及骨计量学相关指标的干预作用。 方法 将20只新西兰兔随机均分为正常组、模型组、生骨再造丸组和阳性对照药物仙灵骨葆胶囊组，除正常组外其余3组进行内毒素联合甲泼尼龙注射液造模。28 d后，生骨再造丸组以2.4 g/kg生骨再造丸灌胃，仙灵骨葆胶囊组以0.4 g/kg仙灵骨葆胶囊灌胃，正常组和模型组以10 mL生理盐水灌胃，1次/d。28 d后取各组兔双侧股骨头，Micro-CT扫描并进行骨计量学参数分析，HE染色观察股骨头组织病理学改变。 结果 与正常组比较，Micro-CT扫描分析显示模型组兔股骨头骨密度、骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度和骨小梁连接密度等骨计量学参数明显降低，骨小梁分离度和结构模型指数升高（P<0.05）；HE染色观察发现模型组空骨陷窝率和脂肪细胞面积明显增加，骨骺变形，骨小梁增生、变窄或断裂。与模型组比较，生骨再造丸组和仙灵骨葆胶囊组兔股骨头的骨计量学和组织病理学改变明显好转（P<0.05），且生骨再造丸组与仙灵骨葆胶囊组疗效无显著差异（P>0.05）。 结论 生骨再造丸可显著提升兔SONFH骨计量学指标水平，改善组织病理形态，从而达到治疗SONFH的作用。     

淫羊藿和女贞子提取物对骨质疏松症大鼠性激素功能水平的影响

目的:探讨淫羊藿和女贞子提取物对骨质疏松症(OP)大鼠性激素功能水平的影响。方法:50 只3 月龄雄性Wistar 大鼠随机分为正常组、模型组、提取物低剂量组、提取物中剂量组、提取物高剂量组共5 组,每组10 只,除正常组外,其他4 组以维甲酸灌喂15 d 制作OP 模型,造模成功后正常组和模型组灌服生理盐水,提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按50 mg/ kg、100 mg/ kg、200 mg/ kg 灌服淫羊藿和女贞子提取物混合物,均持续3 周。测量各组骨密度(BMD),左侧股骨切片采用苏木精和伊红(HE)染色观察股骨病理学改变并测定骨小梁组织形态相关参数,免疫组织化学分析激素受体蛋白表达。结果:正常组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD 显著高于模型组,提取物中剂量组和高剂量组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD 显著高于模型组,提取物低剂量组股骨全部BMD 显著高于模型组,差异均有统计学意义(P<0郾05 或P<0郾01);与模型组比较,提取物各组骨小梁数量有了显著增加,完整性、连续性明显好转,相关参数比较结果显示,正常组Tb.N、Tb.Ar、Tb.Th 显著大于模型组,Tb.Sp 显著小于模型组,提取物中剂量组和高剂量组Tb.N、Tb.Ar、Tb.Th 显著大于模型组,Tb.Sp 显著小于模型组,提取物低剂量组,Tb、Ar、Tb、Th 显著大于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05 或P<0.01);正常组AR、ER蛋白表达量明显高于模型组,而提取物高剂量组AR、ER 蛋白表达量较模型组显著上升,差异有统计学意义(P<0.05 或P<0.01)。结论:淫羊藿和女贞子提取物能够增加维甲酸诱导的OP 大鼠BMD,逆转骨组织病理结构,上调性激素受体蛋白表达,对维甲酸诱导的OP 大鼠具有潜在的保护作用。     

伊班膦酸钠对卵巢切除所致骨质疏松模型大鼠的影响及机制

文题释义：伊班膦酸钠：是最新一代即第3代双膦酸盐药物,具有高效、低毒和使用方便等优点,同时有口服和静脉两种剂型,是不可多得的双膦酸盐药物。近年来国外的研究取得了突破性进展,除了治疗恶性肿瘤骨转移外,还能预防骨转移和乳腺癌骨转移后骨骼事件的发生,并可预防和治疗骨质疏松症。 Caspases：是一类在细胞凋亡中起关键作用的蛋白酶家族,其中caspase-3在凋亡的信息传递中居于核心地位。 背景：双膦酸盐类药物是一种新型骨吸收抑制剂,能有效抑制破骨细胞的活性和功能。 目的：观察伊班膦酸钠对骨质疏松大鼠髁突软骨中牙本质基质蛋白1、Caspase3及Bcl-2、Bax表达的影响。 方法：将36只雌性大鼠随机分组为假手术组、骨质疏松组及伊班膦酸钠组,每组各12只。假手术组术中不切除卵巢,骨质疏松组和伊班膦酸钠组切除双侧卵巢,术后7 d给予伊班膦酸钠组大鼠10 μg/kg/次的伊班膦酸钠,每隔7 d腹腔注射1次,90 d后取材。microCT测量各组大鼠骨密度变化;采用甲苯胺蓝染色、TUNEL 染色观察髁突软骨变化;免疫组织化学检测牙本质基质蛋白1蛋白表达;Western blot检测Caspase3、Bcl-2、Bax蛋白表达。实验方案经南华医院动物实验伦理委员会批准(批准号为SLXD_201804010)。 结果与结论：①与假手术组或伊班膦酸钠组比较,骨质疏松组骨密度值显著降低(P < 0.05);②甲苯胺蓝染色结果,伊班膦酸钠组髁突软骨肥大层明显厚于骨质疏松组;与假手术组或伊班膦酸钠组相比,骨质疏松组大鼠髁突软骨及软骨下骨凋亡细胞数均明显上升(P < 0.05);③与假手术组比较,骨质疏松组TRAP阳性细胞数增多,而经伊班膦酸钠治疗后TRAP阳性细胞数下降(P < 0.05);④骨质疏松组牙本质基质蛋白1蛋白表达较假手术组明显下降,而经伊班膦酸钠治疗后牙本质基质蛋白1蛋白表达上升(P < 0.05);⑤与假手术组相比,骨质疏松组Caspase3、Bax表达明显上调,Bcl-2表达下降,而经伊班膦酸钠治疗后Caspase3、Bax表达水平明显下降,Bcl-2表达水平上调;⑥结果说明,伊班膦酸钠能够抑制骨质疏松状态下髁突软骨细胞凋亡及破骨细胞数量,可能与调控Caspase3、Bcl-2、Bax及牙本质基质蛋白1表达有关。 ORCID: 0000-0001-9246-765X(陈朝祥) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

ClC-3基因过表达对小鼠骨量和骨结构的影响

 目的: 研究过表达电压门控氯通道家族蛋白成员3(voltage-gated chloride channel family protein 3,ClC-3)基因对小鼠骨骼的影响。方法: 3月龄雄性FVB小鼠用鼠尾基因检测法确定基因型后分为2组:野生型(WT)组和ClC-3过表达(ClC-3 transgene)组,每组各8只。分别测量2组小鼠体重,右侧胫骨长度和重量。取胫骨上段和中段进行脱钙,石蜡包埋,切片,HE染色后,采用骨形态计量学分析胫骨上段松质骨的骨小梁面积百分数(percent trabecular area,%Tb.Ar)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁宽度(trabecular width,Tb.Wi)、骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)和胫骨中段皮质骨的骨组织总面积(total tissue area,T.Ar)、皮质骨面积(cortical area,Ct.Ar)、皮质骨面积百分数(percent cortical area,%Ct.Ar)、骨髓腔面积(marrow area,Ma.Ar)、骨髓腔面积百分数(percent marrow area,%Ma.Ar)。结果: 小鼠经鼠尾基因检测后确认为野生型或ClC-3过表达型。与WT组相比,ClC-3 transgene组小鼠体重及胫骨长度重量均减小(P<0.05);松质骨的%Tb.Ar和Tb.Wi均减小(P<0.05),Tb.Sp增大(P<0.05),Tb.N的变化无统计学意义;皮质骨的T.Ar、Ct.Ar和%Ct.Ar均减小(P<0.05),%Ma.Ar增大(P<0.05),Ma.Ar的变化无统计学意义。结论: ClC-3过表达导致小鼠的皮质骨和松质骨骨量减少,骨结构变差,提示ClC-3可能参与了骨形成和/或骨吸收。     

绝对稳定固定对骨量减少长骨骨折愈合影响的实验研究

目的探讨骨折端加压螺钉对兔骨量减少股骨骨折愈合的影响。方法36只新西兰雌兔中随机选取30只肌注甲强龙构建骨量减少模型(包括模型组6只),另外6只为对照组(肌注生理盐水)。肌注后4周,模型组和对照组行骨密度,血清P1NP、CTX,Micro-CT检测。造模成功后,24只骨量减少兔建立股骨骨折模型,分为S1组(单纯钉板系统,4周)、L1组(骨折端加压螺钉结合锁定钢板,4周)、S2组(单纯钉板系统,8周)和L2组(骨折端加压螺钉结合锁定钢板,8周),每组6只。骨折术后4、8周行X线、Micro-CT、生物力学测试、组织病理及免疫组化分析。结果肌注后4周,模型组腰椎骨密度为(216±21)mg/cm^(2),对照组为(251±21)mg/cm^(2);模型组股骨近端骨密度为(237±30)mg/cm^(2),对照组为(281±28)mg/cm^(2)。与对照组比较,模型组P1NP及CTX均有提高(P<0.05)。模型组腰椎三维骨密度为(208.61±18.75)mg/cm^(3),对照组为(243.83±21.17)mg/cm^(3)。模型组的骨体积分数、骨小梁厚度及骨小梁数量较对照组下降,骨小梁分离度及结构模型指数较对照组上升(P<0.05)。骨折术后X线示L1、L2组骨折愈合较快,S2组有1例出现骨折延迟愈合。术后4周,Micro-CT提示L1组骨痂组织的骨体积分数更高,骨小梁厚度明显、数量较多、分离度更低(P<0.05);L1组最大载荷及弹性模量更高(P<0.05);HE、Masson及番红固绿染色显示L1、L2组更早出现成熟骨组织;TRAP染色显示L1、L2组破骨细胞数量更少(P<0.05);免疫组化提示两组BMP-2表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在治疗骨量减少性长骨骨折时,骨折端加压螺钉结合锁定钢板固定有助于早期形成骨痂以及骨折的快速愈合。     

低剂量唑来膦酸对去势拔牙大鼠破骨及成骨细胞的影响

文题释义：去势大鼠：即通过去势法建立骨质疏松动物模型,该模型建造方法主要有3种：去势法、维甲酸灌胃法和糖皮质激素肌注法,而去势法是目前最常用、最成熟的造模方法,主要是通过去除大鼠双侧卵巢至少3个月,构建骨量少、骨显微结构退化而引起骨脆性增加及骨折发生率升高的一种全身性骨病,即骨质疏松疾病模型。 TUNEL细胞凋亡检测：用于检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况,其原理是生物素标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并可与连接辣根过氧化酶的链霉亲和素特异结合,在显色剂DAB的存在下,产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确定位正在凋亡的细胞。 背景：目前唑来膦酸虽能有效地预防绝经后妇女的骨丢失,但其对下颌骨的影响及其机制尚不清楚。 目的：观察去势大鼠经低剂量唑来膦酸作用后下颌骨组织病理学改变,探讨RANKL/RANK/OPG信号系统在唑来膦酸抑制骨吸收过程中的调控效应与机制。 方法：取36只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,后2组大鼠行两侧卵巢切除术,建立骨质疏松模型;对照组行假手术去除同等质量卵巢周围的脂肪。去卵巢3个月后,治疗组皮下一次性注射唑来膦酸20 μg/kg,对照组和模型组皮下注射相应剂量的盐水;用药1周后拔除大鼠左侧下颌磨牙,拔牙后4周麻醉动物取出拔牙侧下颌骨组织。通过影像学X 射线大致观察大鼠拔牙窝剩余牙槽骨状况,苏木精-伊红染色检测下颌骨皮质和骨松质的病理结构改变,TUNEL凋亡实验检测凋亡的成骨细胞数量,利用免疫组织化学技术检测下颌牙槽骨内细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)、骨保护素、细胞核转录因子(NF-κB)的表达情况,最后Western blot检测核因子κB受体活化因子配基、细胞核转录因子蛋白的表达。 结果与结论：①拔牙4周后,治疗组相较模型组牙槽骨骨吸收减少,拔牙窝底有新骨形成;②苏木精-伊红染色可见,模型组的骨皮质变薄,骨小梁结构变细,甚至出现断裂,大量骨吸收陷窝,成骨细胞较少;治疗组骨皮质增厚,骨小梁结构正常,只有少量骨吸收陷窝,成骨细胞增多;③治疗组的成骨细胞凋亡数目显著低于模型组(P < 0.001);④免疫组织化学染色可见,治疗组RANKL蛋白、NF-KB p65蛋白表达显著低于模型组(P < 0.001,P < 0.002),骨保护素蛋白表达显著高于模型组(P < 0.001);⑤Western Blot结果显示,与对照组相比较,模型组的RANKL、NF-κB蛋白高表达,治疗组其表达量显著降低(均P < 0.001);⑥结果说明,唑来膦酸可通过下调细胞核转录因子信号通路抑制破骨细胞的分化,同时调控成骨细胞的凋亡。 ORCID: 0000-0002-0300-0460(程余婷) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

自拟补肾活血颗粒对去卵巢骨质疏松症大鼠的治疗作用

目的:观察自拟补肾活血颗粒(MBHG)对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法:雌性SD大鼠,随机取10只作为假手术组(sham组),其余大鼠制备去卵巢骨质疏松症,随机分为:模型(model)组;补肾活血颗粒高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组;阳性对照组(戊酸雌二醇组)。每组10只,连续灌胃给药12周。观察大鼠骨小梁形态,测量骨小梁的面积、厚度、间距及面积百分数,全自动分析仪检测血清中钙、磷和碱性磷酸酶(ALP)含量,测量大鼠骨密度(BMD),ELISA法检测血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平。结果:与模型组比较,各给药组骨小梁显著变宽,数目增多,网状结构有部分恢复。各给药组骨小梁厚度、骨小梁面积和骨小梁面积百分数均大于模型组,骨小梁间距均小于模型组(P0.05)。各给药组血清中钙、磷、E2、OPG以及股骨BMD水平均显著高于模型组,ALP、BGP、RANK和RANKL水平均显著低于模型组(P0.01)。结论:自拟补肾活血颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症有显著的治疗作用。作用机制可能与上调OPG、抑制RANKL分泌有关。     

镁基植入体植入兔股骨后周围骨微结构变化趋势

目的研究镁基植入体植入兔股骨不同时间点周围骨微结构参数的变化规律。方法将直径2 mm、长7 mm有螺纹及无螺纹的高纯镁(99.99 wt.%)钉植入兔股骨髁,对照组为钻孔组及健康组。在术后8、12、16周进行Micro-CT扫描和分析,得到各组微结构参数,包括:骨质密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)。结果 8周时无螺纹镁钉组BMD、BV/TV显著高于健康组,Tb.N显著高于钻孔组与健康组,Tb.Sp显著低于健康组;12周时有螺纹镁钉组BMD、BV/TV、Tb.N显著高于钻孔组与健康组,Tb.Th显著高于健康者,Tb.Sp显著低于钻孔组与健康组;16周时无螺纹镁钉组的BMD、BV/TV、Tb.N显著高于钻孔组与健康组,Tb.Sp显著低于钻孔组与健康组。结论镁基植入体促使周围骨组织的BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N更高,Tb.Sp更低,说明其骨整合与骨生长状况良好,镁基植入体能有效促进骨再生。研究结果为镁基植入体的骨科临床应用提供理论依据。     

伊班膦酸钠干预骨关节炎模型大鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通路的变化

背景:丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与成骨细胞与破骨细胞的分化,与软骨下骨重建过程密切相关,在骨关节炎的发生发展中起重要作用。双膦酸盐作为骨吸收抑制剂,主要用于骨质疏松的治疗。目的:探讨伊班膦酸钠对大鼠骨关节炎的治疗效果,以及其对丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响。方法:实验方案经南华大学附属第一医院动物实验伦理委员会批准。30只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组。模型组和治疗组行双侧去卵巢及前交叉韧带切断术,假手术组大鼠只切除卵巢周围与卵巢大小相仿的脂肪组织,切开双侧膝关节腔,但不切断前交叉韧带。术后1周,治疗组予以腹腔注射伊班膦酸钠10μg/kg,模型组予以腹腔注射等量生理盐水,假手术组不作干预。12周以后,处死实验动物,进行关节软骨的组织形态学观察及Mankin评分,软骨下骨的Micro-CT扫描及骨组织显微结构定量分析,检测丝裂原活化蛋白激酶信号通路中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1)和c-Jun氨基酸末端激酶(JNK)的mRNA表达量及蛋白表达水平。结果与结论:①模型组软骨结构明显破坏,Mankin评分较假手术组明显增高,而治疗组的Mankin评分较模型组显著降低(P<0.01);②与假手术组比较,模型组中的骨密度、骨体积分数、骨小梁数量降低,骨小梁分离度显著增高(P<0.01);与模型组相比,治疗组的骨密度、骨体积分数、骨小梁数量增加,骨小梁分离度明显下降(P<0.01);③模型组中的ERK1、JNK mRNA表达和蛋白表达较假手术组明显增加(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,治疗组中的ERK1、JNK mRNA表达和蛋白表达显著降低(P<0.05);④结果说明,伊班膦酸钠可能通过抑制ERK1、JNK丝裂原活化蛋白激酶信号通路的表达改善膝骨关节炎大鼠的软骨下骨的微结构,抑制软骨的退变。