食管鳞状细胞癌患者外周血PD-1和PD-L1的表达及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血中程序性死亡分子1 (programmed cell death 1,PD-1)、程序性死亡分子1配体(pro-grammed cell death ligand 1,PD-L1)及IFN-γ表达情况,并分析其临床意义.方法选取2016年6月至2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集研究其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1 (sPD-1)、可溶性PD-L1 (sPD-L1)及IFN-γ的表达水平.采用SPSS 24.0软件对数据进行检验和相关性分析.结果:食管鳞癌组血清中sPD-l、sPD-L1及IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);食管鳞癌组手术前血清sPD-L1、IFN-γ水平均明显高于术后(P＜0.05),而sPD-1水平两组比较无明显差异(P＞0.05).sPD-1、sPD-L1的表达水平与临床病理特征无明显相关(P＞0.05),IFN-γ的表达水平与淋巴结转移情况相关(P＜0.05),与T分期、TNM分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无明显相关(P＞0.05).血清中sPD-L1表达水平与IFN-γ无明显相关(P＞0.05).结论:食管鳞癌患者血清中sPD-L1较正常人表达升高,且术后表达较术前减少,说明血清中sPD-L1表达水平与病情发展变化有一定相关性.     

食管鳞状细胞癌PD-L1不同抗体免疫组织化学检测的一致性分析

背景与目的：程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)是食管癌免疫治疗应用最广泛的疗效预测生物标志物,准确可靠的PD-L1检测对于筛查免疫治疗的潜在受益者至关重要。本研究旨在探讨食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）患者PD-L1的表达情况以及7种不同克隆号PD-L1抗体免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）检测的一致性,为规范食管癌PD-L1 IHC检测及后续临床研究提供参考。方法：收集2020年1月—2021年12月复旦大学附属肿瘤医院的146例ESCC手术切除标本,用PD-L1 22C3、SP263、28-8、E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099和MXR006 7种克隆号抗体进行染色,并采用联合阳性评分（comprehensive positive score,CPS）、肿瘤细胞比例评分（tumor proportion score,TPS）和免疫细胞评分（immune cell proportion score,IPS）3种评分标准...     

食管鳞状细胞癌患者γδT细胞研究

 目的 探讨食管癌患者机体γδT细胞水平及与临床的关系，为γδT细胞在食管癌综合治疗中的应用提供依据。方法 采用流式细胞术测定食管癌患者外周血中和癌组织中γδT细胞水平，分析其与临床的关系。结果 癌组织中浸润γδT细胞水平显著高于癌旁组织（P = 0.045）；食管癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于正常人（P = 0.011）；食管癌术后患者外周血中γδT细胞水平显著高于术前患者（P = 0.037）。食管癌T分期、N分期、M分期、大体分型、病变部位、病变长度（3 ~ 5 cm组和5 cm组）、组织学分级各组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌患者外周血中总T细胞，各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；外周血中γδT细胞年龄、性别、病变长度（＜3 cm），各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 γδT细胞在机体抗食管癌中发挥重要作用，手术切除肿瘤后可使患者γδT细胞恢复正常水平。     

PD-1、CTLA-4、BLTA在食管鳞状细胞癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 检测食管鳞癌患者外周血中抑制性协同刺激因子受体PD-1、CTLA-4、BLTA表达情况,并分析其临床意义。方法 选取2016年6月—2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1(sPD-1)、可溶性CTLA-4(sCTLA-4)及可溶性BLTA(sBLTA)的表达水平。结果 食管鳞癌组血清中sPD-1、sCTLA-4及sBLTA水平均明显高于对照组(P＜0.05);食管鳞癌组手术前后血清中sPD-1、sCTLA-4及sBLTA水平均无统计学差异(P＞0.05)。sPD-1和sBLTA的表达水平与临床病理特征无相关性,sCTLA-4的表达水平与TNM分期相关(P＜0.05),与T分期、N分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无相关性;血清中sPD-1、sCTLA-4及sBLTA两两间无相关性(P＞0.05)。结论 食管鳞癌患者血清中sCTLA-4较正常人表达升高,且sCTLA-4的表达水平与TNM分期相关,说明血清中sCTLA-4表达水平与病情发展变化有一定相关性。     

去除N-连接糖基化对食管鳞状细胞癌及转移淋巴结中PD-L1表达影响

目的 探讨N-连接糖基化修饰对食管鳞状细胞癌(ESCC)组织程序性死亡受体-配体1(PD-L1)表达影响及其与临床病理特征关系。方法 使用PD-L1 22C3抗体标记,ESCC组织芯片、MCF-7及NCI-H226细胞切片,分别采用标准处理或经肽N-糖苷酶F(PNGase F)处理后进行免疫组化染色。采用肿瘤细胞比例评分(TPS)、联合阳性评分(CPS)或组织化学评分(H-score)评估组织和细胞切片中PD-L1表达水平。TPS≥1%、CPS≥10定义为PD-L1表达阳性。分析原发灶与转移淋巴结组织PD-L1表达一致性;同时分析原发灶组织PD-L1表达与人口学及临床病理学特征关系。结果50例患者组织样本中有24例正常食管黏膜组织、48例原发灶组织及32例转移淋巴结组织可行PD-L1表达评价。标准处理后正常食管黏膜组织PD-L1均呈阴性表达;原发灶组织PD-L1 TPS、CPS阳性率及中位H-score分别为50.00%、29.17%和1.41分;转移淋巴结组织PD-L1 TPS、CPS阳性率及中位H-score分别为50.00%、68.75%和2.02分。PNGase F处理后5例正...     

食管鳞状细胞癌免疫治疗进展

随着免疫治疗在临床应用中的拓展,其在食管鳞状细胞癌(ESCC)治疗中的价值也得以显现。程序性死亡蛋白-1(PD-1)及其配体PD-L1、细胞毒性T淋巴细胞抗原4等免疫检查点抑制剂在晚期ESCC的免疫治疗中展现出良好的抗肿瘤活性和安全性。     

食管鳞状细胞癌YES-2细胞顺铂耐药致其恶性生物学行为及PD-L1表达的变化

目的：探讨食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）YES-2 细胞顺铂（cis-dichlorodiammine platinum,CDDP）耐药后（YES-2/CDDP-R）细胞恶性生物学行为的变化和程序性死亡受体-配体1（programmed cell death-ligand 1 ,PD-L1）表达的变化。方法：用CDDP 由低质量浓度到高质量浓度（0.25~2.0 μg/ml）间断冲击（间隔15~25 d）的方法处理YES-2 细胞,建立CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R。倒置显微镜下观察YES-2/CDDP-R 细胞的形态学变化,MTT法检测细胞对CDDP敏感性的变化,划痕愈合实验检测耐药前后细胞迁移能力的变化,qPCR和Western blotting 检测耐药前后细胞中PD-L1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：经过CDDP梯度给药9 个月后成功建立YES-2/CDDP-R 细胞。显微镜下见YES-2/CDDP-R 细胞的形态大小不一、胞内空泡及黑色颗粒明显增多且出现巨大细胞。与YES-2 细胞比较,YES-2/CDDP-R细胞的IC50值显著升高,表明其对CDDP的敏感程度降低（P<0.05）;YES-2/CDDP-R 细胞的增殖和迁移能力显著增强（P<0.05 或P<0.01）,PD-L1 mRNA和蛋白表达水平显著升高（均P<0.01）。结论：成功建立的CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R 对CDDP的敏感程度降低,其增殖和迁移能力增强。YES-2/CDDP-R 细胞中PD-L1 表达水平升高,提示CDDP耐药可能通过上调YES-2细胞PD-L1表达水平促进免疫逃逸。     

食管鳞状细胞癌患者血清HMGB1和IDO水平的变化及其临床意义

目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）患者血清中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）的表达水平并探讨两者与临床病理特征及淋巴细胞亚群的相关性。方法：选取2021 年3月至2022 年8月在河北医科大学第四医院初次住院治疗的95 例ESCC 患者作为ESCC 组,另选取40 例健康体检人群作为对照组。ELISA 法检测全部研究对象的血清HMGB1和IDO水平及不同组ESCC细胞培养上清中HMGB1、IDO和p65水平,流式细胞术检测全部研究对象外周血淋巴细胞亚群水平。WB法检测仅敲低HMGB1基因表达或敲低HMGB1后再加入NF-κB信号通路激活剂对ESCC细胞HMGB1、IDO和p65表达的影响。结果：ESCC 组患者血清HMGB1 和IDO 水平明显高于对照组（均P<0.01）;血清HMGB1 和IDO 表达水平升高是ESCC 临床进展的独立危险因素（均P<0.01）,二者联合检测对ESCC 临床进展预测价值更高（P<0.01）;血清HMGB1 和IDO 与ESCC患者的T分期、N分期和临床分期有明显关联（均P<0.05）; ESCC组患者血清HMGB1与外周血CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、 B细胞和NK细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg 细胞百分率呈显著正相关（均P<0.05）,血清IDO 与外周血CD3+ T细胞百分率和绝对计数值、CD4+ T细胞百分率和绝对计数值、CD8+ T细胞和B细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg 细胞百分率呈显著正相关（均P<0.05）;血清HMGB1和IDO表达水平呈显著正相关（P<0.01）。si-HMGB1组KYSE30和ECA109 细胞及其培养上清液中IDO和p65 表达水平明显低于si-NC 组和si-HMGB1+PMA组（均P<0.05）。结论：血清HMGB1和IDO与ESCC临床进展和机体免疫功能密切相关,具有成为ESCC 肿瘤标志物和免疫治疗新靶点的潜力。HMGB1 可能通过NF-κB信号通路促进IDO表达,进行双靶点联合治疗可能会取得更好的疗效。     

肺癌患者红细胞免疫功能与外周血T淋巴细胞亚群的改变

目的：观察肺癌患红细胞免疫功能及T淋巴细胞亚群的变化。方法：应用红细胞免疫粘附花环形成法和流式细胞仪检测法。结果：（1）肺癌组（55例）红细胞C3b受体花环率（RBC－C3bRR)、CD3^ 、CD4^ 、CD^ ／CD^8 比值低下正常人（20例）（P＜0．05－0．01）,红细胞免疫复合物花环率（RBC－ICR）依次高于肺良性肿瘤组（15例）和正常人（P＜0．05－0．01）。（2）肺癌RBC－C3bRR与CD4^ /CD8^ 成直线正相关（P＜0．01,r=0.9131)。（3）Ⅲa,Ⅲb期肺癌,RBC－C3bRR,CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 比值低于Ⅰ、Ⅱ期肺癌患和正常人（P＜0．05－0．01）,而RBC－ICR高于正常人（P＜0．01）。Ⅰ、Ⅱ期病人CD3^ ,CD4^ ,CD8^ 低于正常人（P＜0．01）,RBC－ICR高于正常人（P＜0．01）。结论：肺癌患RBC免疫和T细胞亚群的测定及其相关性分析,对于肺癌的诊断、治疗及病情预后估计有一定价值。     

PD-1/PD-L1单克隆抗体治疗头颈部鳞癌的研究进展

头颈部鳞癌是以转移和局部侵袭为特征的恶性肿瘤,手术及放疗后复发率高,疾病预后及患者生存质量差。近年来,程序性死亡分子-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂被新版美国国立综合癌症网络(NCCN)指南推荐用于治疗复发、不可切除和转移性头颈部鳞癌,其疗效引人瞩目。PD-1单抗为铂类化疗难治性的晚期头颈部鳞癌患者提供了新的治疗手段,降低术后功能丧失的风险,实现改善患者生存质量的目的。本文就免疫检查点PD-1/程序性细胞死亡分子配体-1(programmed death-ligand 1,PD-L1)的结构、作用机制和其抑制剂在治疗头颈部鳞癌中的研究进展等方面进行综述。     

HIP1在食管癌中的表达及其临床意义

目的:探究亨廷顿蛋白相互作用蛋白1(Huntingtin interacting protein 1,HIP1)基因和蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测85例食管癌组织及其对应癌旁组织中HIP1蛋白的表达,并分析该表达与食管癌患者临床病理特征的关系。荧光定量PCR及Western blot法检测HIP1基因和蛋白在食管癌及其癌旁组织中的表达。结果:HIP1在食管癌组织中的阳性表达率为91.8%（78/85）,显著高于食管癌旁组织（5.9%,5/85）,差异具有统计学意义（P<0.001）。统计分析发现,HIP1在病理分级组间差异显著（P=0.03）,而在性别、年龄、TNM分期组间无统计学差异（P>0.05）。荧光定量PCR及Western blot结果发现,与食管癌旁组织相比,HIP1基因和蛋白在食管癌组织中高表达。结论:HIP1蛋白可能是食管癌组织和癌旁组织中的差异蛋白,可能是食管癌新的分子标志物。     

Tumor immune microenvironment and immune checkpoint inhibitors in esophageal squamous cell carcinoma

Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is the main prevalent histological type of esophageal cancer, predominantly constituting 90% of cases worldwide. Despite the development of multidisciplinary therapeutic approaches, its prognosis remains unfavorable. Recently, the development of monoclonal antibodies inhibiting programmed death 1 (PD‐1) or programmed death‐ligand 1 (PD‐L1) has led to marked therapeutic responses among multiple malignancies including ESCC. However, only a few patients achieved clinical benefits due to resistance. Therefore, precise and accurate predictive biomarkers should be identified for personalized immunotherapy in clinical settings. Because the tumor immune microenvironment can potentially influence the patient's response to immune checkpoint inhibitors, tumor immunity, such as PD‐L1 expression on tumors, tumor‐infiltrating lymphocytes, tumor‐associated macrophages, and myeloid‐derived suppressor cells, in ESCC should be further investigated. In this review, accumulated evidence regarding the tumor immune microenvironment and immune checkpoint inhibitors in ESCC are summarized.     

CAC1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨CAC1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测CAC1在食管鳞癌组织、癌旁组织及正常食管黏膜组织中的表达水平,对CAC1在食管鳞癌组织中的表达情况与肿瘤临床病理学特征相关性进行分析,对CAC1在食管鳞癌组织中的表达情况与增殖相关指标Ki67的表达情况进行分析。结果:CAC1在食管鳞癌组织中的表达水平显著高于其在癌旁组织及正常食管黏膜组织中的表达水平（P<0.05),CAC1表达水平与食管鳞癌的TNM分期及肿瘤分化程度显著相关（P<0.05),与食管鳞癌的发病年龄、性别及是否存在淋巴结转移无显著相关性（P>0.05),CAC1表达水平与增殖相关指标Ki67有显著相关性（P<0.05)。结论:CAC1表达与食管癌的恶性生物学特性相关,可能成为预测食管癌患者预后的指标和潜在的治疗靶点。     

食管鳞癌患者血清TK1与SCCA表达及其预后价值

目的食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是我国食管癌的主要病理类型,患者预后较差,5年生存率低,影响ESCC患者对治疗的应答以及预后的相关因素仍不清楚。本研究旨在探讨血清细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)与鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)在ESCC同步放化疗前的表达及其预后预测价值。方法选取2013-1-30-2016-10-19淮北矿工总医院收治的96例ESCC患者和100名门诊健康体检者为研究对象,分为ESCC组和对照组。采用酶联免疫吸附实验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测入组对象的血清TK1、SCCA的表达,比较2组血清TK1和SCCA表达差异,分析血清TK1和SCCA的表达与ESCC患者临床病理特征的相关性。采用ROC曲线评价血清TK1、SCCA对诊断ESCC价值,分析其与同步放化疗后24个月预后的关系。结果 ESCC组血清TK1表达高于对照组,差异有统计学意义,t=24.665,P<0.05。血清TK1表达量与年龄(t=1.783)、性别(t=0.467)、肿瘤位置(t=1.263)无统计学意义的关联,P>0.05。血清TK1水平病变长度≥5cm高于病变长度<5cm患者,t=3.481,P<0.05;Ⅲ期+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ患者,F=6.509,P<0.05;存在淋巴结转移高于无淋巴结转移患者,t=3.613,P<0.05。ESCC组血清SCCA表达高于对照组,差异有统计学意义,t=34.852,P<0.05。血清SCCA表达量与年龄(t=1.473)、性别(t=1.338)、肿瘤位置(t=1.280)无统计学意义的关联,P>0.05。血清SCCA水平病变长度≥5cm高于病变长度<5cm患者,t=3.229,P<0.05;Ⅲ期+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期患者,F=8.513,P<0.05;存在淋巴结转移高于无淋巴结转移患者,t=3.029,P<0.05。血清TK1诊断的临界值为1.97,其对应的灵敏度为75.0%,特异度为85.4%,ROC曲线下面积为0.808,95%CI为0.750~0.896;中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)TK1≥1.97pmol/L为9.3个月,<1.97pmol/L为13.6个月,P=0.004;SCCA诊断的临界值为3.54,其对应的灵敏度为83.3%,特异度为66.7%,ROC曲线下面积为0.798,95%CI为0.728~0.869。SCCA≥3.54ng/mL PFS为9.1个月,SCCA<3.54ng/mL为13.6个月,P=0.001。血清TK1、SCCA与患者PFS差异有统计学意义,P<0.05。Cox多因素回归分析显示,临床分期(HR=5.836,95%CI为1.585~21.486)、血清TK1(HR=1.024,95%CI为1.000~1.049)及SCCA(HR=1.879,95%CI为1.183~2.985)水平为影响ESCC患者PFS的独立危险因素,差异有统计学意义,P<0.05,临床分期(HR=1.060,95%CI为1.021~1.100)为影响ESCC患者总生存时间(overall survival,OS)的独立危险因素,差异有统计学意义,P<0.05。结论血清TK1与SCCA在ESCC中的表达受分期、肿瘤病变长度和淋巴结转移影响,二者联合检测对于ESCC具有一定诊断价值,血清TK1与SCCA高表达可以作为评估ESCC患者预后的潜在指标。     

Gli1在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨Hh信号通路关键因子Gli1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义,并分析其与预后的关系.方法:食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管组织各88例,采用免疫组织化学法检测Gli1的表达,另用Western-blot方法检测其中30例ESCC的Gli1的表达,Pearson卡方检验分析Gli1表达与临床病理特征之间的关系.单因素Kaplan-Meier法分析Gli1表达与预后的关系.Cox比例风险回归评估Gli1表达与预后的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中Gli1的表达在蛋白水平明显高于食管正常鳞状上皮,Gli1在ESCC中免疫组化阳性表达率为71.59％ (63/88),Gli1在癌旁正常食管鳞状上皮中免疫组化阳性表达率为6.82％ (6/88),差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法证实Gli1蛋白在ESCC组织中表达上调,与癌旁正常食管组织中的表达比较,差异有统计学意义(P ＜0.001).Gli1高表达与肿瘤病理分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).单因素分析Kaplan-Meier法提示Gli1阳性表达组与阴性表达组生存率之间的差别有统计学意义(Log-rank test,P=0.005).结论:食管鳞状细胞癌中Gli1的表达比较普遍,与ESCC的预后密切相关,可作为预测转移潜能和预后判断的有价值的指标.