防御素和cathelicidins／LL-37在肺部抗感染防御中的研究现状

抗菌肽是宿主防御系统的重要组成部分。在人气道上皮中主要表达2种阳离子小分子抗菌肽,即防御素和cathelicidins／LL-37,它们通过直接杀菌、调节天然或适应性免疫、损伤修复等生物学活性对抗肺部常见病原体的侵袭。本文就防御素和cathelicidins／LL-37的来源及结构特征、表达调节、在肺部抗感染免疫防御中的作用进行综述。     

结核分枝杆菌分子分型技术研究进展

自从1882年科赫发现结核病由结核分枝杆菌感染引起以来,结核病一直是人类想要攻克的传染病之一。但是,经过百年来人们的努力,结核病仍然是影响人类健康的重要传染病之一。在上世纪九十年代,以分子分型技术为基础的分子流行病学,给研究结核病病原特征、感染传播和致病机制等提供了新的手段。尤其是结核分枝杆菌H37Rv全基因组序列测序完成后,     

干细胞与结核分枝杆菌交互作用的研究进展

结核分枝杆菌是引起人类结核病的主要病原菌。作为胞内致病菌,结核分枝杆菌在宿主细胞内潜伏或增殖,其不仅能被宿主吞噬细胞所吞入,还可入侵以造血干细胞和间充质干细胞为代表的干细胞。由于干细胞具有自我复制、多能分化、高度迁移和免疫调节等特性,其在结核病发生和发展中的作用不可忽视。作者主要从结核分枝杆菌与干细胞之间的交互作用这一角度对结核病的发病机制和防治策略进行综述和展望。     

抗菌肽LL-37在溃疡性结肠炎患者中的表达和临床意义

我国溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)发病目前呈上升趋势.肠道菌群紊乱和肠屏障功能障碍可能是UC的发病机制之一,其中抗菌肽作为天然免疫中的主要分子,对宿主肠黏膜初级屏障的形成起重要作用.本研究旨在了解UC患者结肠黏膜抗菌肽LL-37表达水平的变化,探讨抗菌肽在UC发病中的可能作用.     

间充质干细胞在结核病治疗中的应用与问题

结核病由于其高死亡率和高发病率,是世界最严重的传染病之一。尽管人体具备强大的免疫系统,但结核分枝杆菌还是逃过了宿主的免疫,建立了一种持续感染的状态。由于抗结核药物研制发展缓慢,而结核分枝杆菌又在不断发生变化,结核病的防治一直都是人类面临的重大难题。近些年,由于间充质干细胞的免疫调节等特性被逐渐发现和证实,人们发现间充质干细胞有望给临床上治疗结核病带来新的希望。作者就间充质干细胞参与结核病治疗中的应用与问题进行了综述。     

结核分枝杆菌潜伏感染相关抗原的研究进展

结核病是全世界范围内危害人类健康的主要传染病之一。结核分枝杆菌潜伏感染者是结核病的主要来源,早期发现、诊断并有效治疗潜伏感染是有效控制结核病蔓延的重要措施之一。目前,结核分枝杆菌潜伏感染抗原主要包括与结核分枝杆菌缺氧、营养缺乏及与结核分枝杆菌复苏、再激活相关的蛋白。有些潜伏感染相关抗原具有良好的T细胞免疫能力,尤其更易在被潜伏感染人群中识别,有望成为新型的结核分枝杆菌潜伏感染诊断标志物及潜伏感染候选疫苗;有些潜伏感染相关抗原对B淋巴细胞具有较强免疫原性,在结核病体液免疫诊断方面有潜在诊断价值。这些潜伏感染相关蛋白在未来结核分枝杆菌潜伏疫苗及诊断试剂开发中具有良好的应用前景。     

结核菌素皮肤试验的应用及其优化

中国是结核病和结核分枝杆菌感染高负担国家,针对感染和发病的高危人群开展预防干预是结核病防控工作的重要内容。结核菌素皮肤试验作为一种成熟的结核分枝杆菌感染的免疫学检测方法,尽管其结果受卡介苗接种、环境非结核分枝杆菌感染、宿主免疫状态等多种因素的影响,但在高危人群筛查、结核病辅助诊断、重点人群监测等工作中发挥着重要作用。结合中国国情及结核分枝杆菌感染的流行特征,通过优化应用策略可以在有效控制影响因素的基础上发挥结核菌素皮肤试验作为感染筛查手段的优势;同时,在科学数据支撑下,针对不同目标人群细化应用和结果解读也将为其更好地服务中国结核病防控工作提供质量保证。     

结核分枝杆菌靶向宿主细胞蛋白逃逸免疫杀伤的研究进展

结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力。结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与宿主靶蛋白的相互作用来影响细胞凋亡、炎性因子表达、抗原提呈等多种免疫效应,从而逃逸宿主细胞的杀伤,并在机体免疫状态低下时复发从而引起结核病。深入了解结核分枝杆菌效应蛋白和宿主靶蛋白的相互作用及分子机制,将为结核病的防治提供新的线索。     

结核病免疫治疗的研究进展

目前结核病临床治疗面临众多挑战,特别是耐多药结核病。免疫治疗可以提高机体对结核分枝杆菌感染的保护性免疫应答,是常规化学药物治疗的重要辅助。本文总结了有潜力用于结核病免疫治疗的细胞因子、免疫细胞以及免疫调节药物的研究进展,并分析了其临床应用前景,旨在为结核病的临床研究和机制探索提供思路。     

结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展

结核分枝杆菌引起的结核病是全球致死性传染病之一,结核感染期间结核分枝杆菌利用巨噬细胞脂质作为主要碳源。结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用、巨噬细胞内的免疫应答及脂质平衡密切相关。结核病患者肺内脂质含量明显增加,而外周血内胆固醇含量却明显降低。本文从巨噬细胞中结核分枝杆菌的能量代谢、结核分枝杆菌感染致肺部及血中巨噬细胞脂代谢改变等方面对结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展作一综述,以期发现结核病治疗的新靶点和新方法。     

结核分枝杆菌逃逸免疫杀伤机制的研究进展

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)是典型的胞内致病菌,感染机体后主要寄居于宿主巨噬细胞内。巨噬细胞作为机体防御系统的第一道防线,可通过介导和调控自身及其他细胞凋亡而实现其免疫调节、免疫杀伤及清除病原菌的作用。MTB感染机体后可通过多种途径使巨噬细胞不能正常凋亡,借以逃避巨噬细胞的免疫监视及清除,继而在体内衍生繁殖。进一步探讨结核分枝杆菌逃逸宿主细胞的免疫杀伤机制,对宿主细胞抗结核免疫及人们更好地防治结核病具有深远影响。     

Toll样受体在结核分枝杆菌致病机制中的作用研究进展

结核分枝杆菌是肺结核的致病菌,它可寄生在细胞内并长期存活.目前结核杆菌的致病机制及机体对其的免疫反应尚未完全阐明.Toll样受体属于模式识别受体,在结核杆菌宿主防御反应中具有极为重要的作用.Toll样受体作为连接天然免疫与获得性免疫的"桥梁",在机体免疫调节中的作用已愈来愈受关注.关于Toll样受体与结核杆菌的相关研究已成为生命科学领域的热点.     

结核分枝杆菌原核泛素蛋白酶体的研究进展

泛素-蛋白酶体系统是细胞内蛋白质降解的重要机制,并参与细胞生理功能调控。研究发现,结核分枝杆菌泛素样蛋白-蛋白酶体系统可调控并介导结核杆菌逃避宿主的免疫监视和杀灭。因此,介于结核分枝杆菌中的类泛素-蛋白酶体系统在结核分枝杆菌的生理功能及其致病过程中的重要性,且被认为是新的结核病药物治疗靶点。此文就真核生物泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system,UPS)与Mtb中的类泛素-蛋白酶体系统(Pup-proteasome system,PPS)的差异展开比较,通过辅助因子Pup,Mpa,Dop,PafA及靶蛋白在Mtb中类泛素-蛋白酶体系统中介导蛋白质降解的过程,进一步阐明辅助因子的缺失和突变对新兴的耐药结核杆菌产生的影响展开作一综述。     

巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展

巨噬细胞是结核分枝杆菌在机体内的主要宿主细胞.细胞介导的免疫反应是机体抗结核分枝杆菌的主要免疫保护机制,巨噬细胞可通过吞噬、溶酶体融合,提呈结核分枝杆菌抗原,产生多种细胞因子、反应氧中间产物和反应氮中间产物,以及细胞凋亡等多种途径来杀灭结核分枝杆菌;同时,结核分枝杆菌也可采取各种方式来逃逸巨噬细胞的免疫作用.本文就巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展作一综述.     

Antiviral Effect of hBD-3 and LL-37 during Human Primary Keratinocyte Infection with West Nile Virus

West Nile virus (WNV) is an emerging flavivirus transmitted through mosquito bites and responsible for a wide range of clinical manifestations. Following their inoculation within the skin, flaviviruses replicate in keratinocytes of the epidermis, inducing an innate immune response including the production of antimicrobial peptides (AMPs). Among them, the cathelicidin LL-37 and the human beta-defensin (hBD)-3 are known for their antimicrobial and immunomodulatory properties. We assessed their role during WNV infection of human primary keratinocytes. LL-37 reduced the viral load in the supernatant of infected keratinocytes and of the titer of a viral inoculum incubated in the presence of the peptide, suggesting a direct antiviral effect of this AMP. Conversely, WNV replication was not inhibited by hBD-3. The two peptides then demonstrated immunomodulatory properties whether in the context of keratinocyte stimulation by poly(I:C) or infection by WNV, but not alone. This study demonstrates the immunostimulatory properties of these two skin AMPs at the initial site of WNV replication and the ability of LL-37 to directly inactivate West Nile viral infectious particles. The results provide new information on the multiple functions of these two peptides and underline the potential of AMPs as new antiviral strategies in the fight against flaviviral infections.     

结核分枝杆菌H37Rv结合肽的筛选研究

目的 应用噬菌体展示随机7肽文库,筛选MTB标准株H37Rv的结合肽,并初步鉴定其与MTB的结合能力.方法 以H37Rv灭活菌体为靶分子,应用噬菌体展示随机7肽文库进行筛选,并于第2～4轮的筛选中加入耻垢分枝杆菌灭活菌体进行反筛,经4轮生物淘选后,随机选取单噬菌体进行测序,间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法鉴定阳性克隆.将亲和性最强的阳性单噬菌体所展示的短肽进行体外合成及荧光标记,观察其与16种分枝杆菌标准株及3种非分枝杆菌(铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌)的结合活性.结果 通过4轮生物淘选,能与靶分子特异性结合的噬菌体得到明显富集.单噬菌体测序分析共获得5种共同序列.间接ELISA检测出5个单噬菌体均为阳性克隆,其中单噬菌体H8与H37Rv及耻垢分枝杆菌的亲和性均较强.荧光显微镜下观察到,荧光标记H8可与H37Rv结合,与包括耻垢分枝杆菌在内的其他15种分枝杆菌有一定亲和力,而与3种非分枝杆菌均不结合.结论 利用噬菌体展示随机肽库技术淘选可获得MTB标准株H37 Rv 的结合肽,与MTB的结合活性及特异度较高,这为以标记肽为基础探索新的MTB体外检测方法提供了思路.

Abstract：

Objective To screen the Mycobacterium tuberculosis H37Rv binding peptide using phagedisplayed random peptide libraries, and to analyze the binding capacity of the peptide with Mycobacterium tuberculosis. Methods lnactive Mycobacterium tuberculosis H37 Rv was used for screening of the binding peptide from the Ph. D. -7 peptide library, and Mycobacterium smegmatis was used for reverse screening during the 2nd to 4th rounds of screening. After 4 rounds of screening, single phages were randomly selected for DNA sequencing. The selected clones were tested by indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The peptide of positive clone, which showed the highest affinity, was synthesized in vitro with fluorescent markers. The specific combination of the peptide with 16 mycobacterium standard strains and 3 other microbes ( Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Candida albicans) were observed by fluorescence microscopy. Results After 4 rounds of biopanning, remarkable enrichment of the phages that specifically bind with target molecules were observed. Single phages were randomly selected for sequencing analysis and 5 sequences were obtained. Five phages with different sequences were detected using indirect ELISA and all of them were found to be positive clones. Phage 8 showed the highest affinity with target molecule. The peptide of phage H8 was synthesized in vitro with fluorescent markers, and it was confirmed that the peptide could bind with H37Rv and other 15 mycobacterium including Mycobacterium smegmatis, but not with 3 other microbes. Conclusions By using phage-displayed random peptide libraries, we obtained the binding peptide of H37 Rv. It was shown that the peptide could bind with Mycobacterium tuberculosis specifically, which provided a new way for the detection of Mycobacterium tuberculosis in vitro.     

结核杆菌转录组学研究进展

自1998年结核分枝杆菌H37Rv菌株的全基因组测序完成以后,结核杆菌转录组学的研究就变得异常活跃,特别是随着高通量的基因芯片技术应用于结核菌转录组学的研究,结核杆菌转录组学的进展更加迅猛.结核杆菌转录组学研究经历了由体外分离株到巨噬细胞吞噬体内结核杆菌,从结核杆菌在体外的表达到在宿主体内表达,而宿主由以小鼠为模型到以人体为模型的研究过程.由于以动物为模型的便利性,当前结核杆菌转录组学研究以基因突变小鼠为模型或药物作用后的小鼠结核感染模型为主.这些研究为抗结核药物研究和临床诊断提供必要的基础信息.本文对结核杆菌的转录组学研究作一综述.     

实验性大鼠结核病模型的特点

目的　探讨感染了结核菌的Wistar大鼠的实验特点。方法 用标准人型结核菌株H₃₇Rv 0.01mg经尾静脉注入Wistar大鼠,6周后剖杀大鼠,观察肺、肝、脾组织大体病变及镜下特点,肺组织匀浆培养有无结核菌落生长。结果 实验组大鼠肺组织可见明显的结核病变,感染成功率100%,肝、脾组织无结核病变。结论 Wistar大鼠对结核菌敏感,可作为结核病实验的动物模型。     

PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制研究

目的 本研究通过诱导结核分枝杆菌在低氧环境中进入持留状态,来比较分析不同时间不同低氧环境下结核分枝杆菌中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制。方法 首先对结核分枝杆菌国际标准无毒株(H37Ra)和结核分枝杆菌国际标准强毒株(H37Rv)在不同低氧环境下进行培养,提取每个样本菌株的总RNA,并进行完整性鉴定;运用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测每个样本菌株中PhoP基因和PhoR基因的表达水平;比较分析不同时间不同低氧环境下的结核分枝杆菌菌株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异。结果 在不同时间点对低氧环境的结核分枝杆菌PhoP基因和PhoR基因的表达水平进行检测,结果显示:与第10 d相比,培养至第15 d时H37Rv菌株和H37Ra菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平均显著上调,差异有统计学意义(P＜0.05);并且培养至第25 d时,H37Rv菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平比H37Ra菌株表达均上调2.34倍,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 在不同时间点相同毒力的结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达存在差异,而且在相同时间点不同毒力结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达也存在差异,表明PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌的持留性具有调控作用。     

应用噬菌体裂解法快速鉴定结核分支杆菌

目的 研究噬菌体裂解试验对结核分支杆菌快速鉴定的意义。方法 应用结核分支杆菌噬菌斑技术快速检测结核分支杆菌、非结核分支杆菌和非分支杆菌及肺结核患者痰标本。结果 结核分支杆菌H37Rv、牛分支杆菌和非洲分支杆菌噬菌体裂解试验均为阳性,10株常见非结核分支杆菌和7株非分支杆菌均为阴性;30株结核分支杆菌临床分离株本法检测结果全部阳性;20份涂阳培阳肺结核患者痰标本,本法阳性19份（95％）;21份涂阴培阳痰标本,本法阳性15份（71％）;19份涂阴培阴痰标本,5份阳性（26％）。结论 噬菌体裂解试验可以快速鉴定结核分支杆菌,用其检测痰标本中的结核分支杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性。