TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的影响

  目的  研究TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖的条件性位置偏好（conditioned place preference,CPP）大鼠海马的影响,同时采用特异性抑制剂TAK-242抑制Toll样4受体（Toll-like receptor 4,TLR4）,减轻MA依赖诱导的海马神经炎症。  方法  建立MA（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,分别为生理盐水组、MA组、TAK-242组、MA+TAK-242组。TAK-242组和MA+TAK-242组先分别腹腔注射抑制剂TAK-242（3 mg/kg）,1h后MA+TAK-242组再腹腔注射MA（10 mg/kg）。采用Western Blot实验和采用荧光定量PCR实验检测MA依赖CPP大鼠海马中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB-α、p-IκB-α、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达和mRNA表达。  结果  与生理盐水组相比,MA组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均升高（P < 0.001或P < 0.01）,IκB-α的蛋白和mRNA表达下降（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65的表达升高（P < 0.01或P < 0.05）;与MA组相比,MA+TAK-242组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均下降（P < 0.001、P<0.01或P < 0.05）,IκB-α的蛋白和mRNA表达升高（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65表达下降（P < 0.01或P < 0.05）。  结论  MA依赖可通过激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,诱导CPP大鼠海马神经炎症的发生,采用特异性TLR4抑制剂可以减轻MA诱导的神经炎症。     

清透邪热方对甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的 研究清透邪热方体外抗甲型H1N1流感病毒效应机制。方法 将清透邪热方制备成0.388、0.194、0.097、0.0485、0.02425mg/mL不同浓度,用H1N1甲型流感病毒感染小鼠Ana-1巨噬细胞,给予不同浓度清透邪热方及达菲进行干预,检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素诱导蛋白-10（IP-10）和白细胞介素-6（IL-6）表达,Toll样受体7（TLR7）及其下游髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB（NF-κB）mRNA和蛋白表达。结果 清透邪热方能够抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TNF-α、IP-10、IL-6的表达;其中清透邪热方0.02425mg/mL组降低H1N1病毒感染组TNF-α、IL-6显著（P＜0.01）;清透邪热方0.097mg/mL组降低IP-10显著（P＜0.01）。清透邪热方能够抑制H1N1流感病毒感染后Ana-1细胞后TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高;其中清透邪热方0.0485mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7 mRNA、MyD88 mRNA表达显著（P＜0.01）;清透邪热方0.02425mg/mL组抑制H1N1病毒感染组NF-κB mRNA表达显著（P＜0.01）;清透邪热方0.0485mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7蛋白表达升高显著（P＜0.01）,清透邪热方0.388mg/mL组抑制H1N1病毒感染组MyD88蛋白、NF-κB蛋白表达显著（P＜0.01）。结论 清透邪热方通过抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高,减少TNF-α、IP-10和IL-6表达,起到抗病毒作用。      

替格瑞洛对急性心肌梗死患者TLR4/My D88/NF-κB信号通路的影响研究

目的 探讨替格瑞洛对急性心肌梗死患者Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/NF-κB信号通路的影响。方法 选择南京中医药大学附属常州市中医医院于2021年1月至2022年6月收治的142例急性心肌梗死患者,采用随机数字表法分为观察组与对照组各71例。对照组采用常规药物治疗,观察组在对照组基础上加用替格瑞洛片治疗。治疗疗程4周。比较两组疗效,治疗前后心功能,血小板聚集率,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结果 观察组总有效率高于对照组（P<0.05）。相比治疗前,两组治疗后左心室射血分数（LVEF）均显著升高,左心室后壁厚度（LVPWT）、左心室舒张末期内径（LVDD）、血小板聚集率均显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB相对表达量均显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA蛋白表达灰度值均显著降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。治疗后观察组LVEF显著升高,LVPWT、LVDD、血小板聚集率显著降低,TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量显著降低,TLR4、MyD88和NF-κB蛋...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路异甘草素对大鼠颅脑外伤后炎症反应及Th1/Th2失衡的影响

【摘要】 目的 探讨异甘草素（ISL)通过介导Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB (NF-κB)通路对大鼠颅脑外伤 （TBI)炎症反应及Th1/Th2细胞失衡的影响。方法将SPF级大鼠随机分为模型组、ISL低剂量组（20 mg·kg-1）、ISL高剂量组（40 mg·kg-1）、阳性药物组（甘油果糖氯化钠,40 mg·kg-1）,每组10只,另设对照组。HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;比较血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,脑组织TLR4、My D88、NF-κB p65 mRNA及TLR4、My D88、NF-κB p65、磷酸化核转录因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果与对照组比较,模型组血清IL-1β、IL-4、TNF-α水平,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平升高,血清IFN-γ水平降低（均P＜0.05）;与模型组比较,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL低剂量组比较,ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL高剂量组比较,阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）。HE结果显示,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组脑组织病变较模型组出现不同程度改善,ISL高剂量组和阳性药物组改善尤为明显。结论ISL能有效改善大鼠TBI炎性反应、调节Th1/Th2细胞平衡,可能基于调控TLR4/MyD88/NF-κB通路相关mRNA和蛋白表达发挥作用。     

不同剂量天麻素对甲基苯丙胺依赖大鼠条件位置偏爱及海马小胶质细胞激活的影响

  目的  研究不同剂量天麻素（gastrodin，Gas）对甲基苯丙胺（methamphetamine，Meth）依赖大鼠条件性位置偏爱（conditioned place preference，CPP）的影响及海马小胶质细胞激活状态的改变。  方法  腹腔注射Meth（10 mg/kg，qd，14 d）建立Meth依赖大鼠CPP模型，然后采用10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg不同剂量的天麻素治疗14 d，测定不同剂量天麻素对Meth依赖大鼠CPP效应的影响；用免疫荧光技术检测不同剂量天麻素对海马小胶质细胞激活的影响。  结果  Meth依赖大鼠CPP模型建立成功。与生理盐水组相比，Meth组的CPP效应明显增强，差异有统计学意义（P < 0.05）；天麻素治疗可使大鼠在伴药箱停留时间明显缩短；与Meth组相比，10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg的天麻素治疗后，可呈剂量依赖性地降低Meth诱导的CPP效应，且100 mg/kg的天麻素可基本消除Meth诱导的CPP效应。免疫荧光检测结果显示，与生理盐水组相比，Meth组大鼠海马小胶质细胞明显被激活；经10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg的天麻素治疗后，小胶质细胞激活被明显抑制，且30 mg/kg、100 mg/kg两组剂量的天麻素治疗后抑制效果更明显。  结论  天麻素可呈剂量依赖性降低Meth依赖大鼠的CPP效应，天麻素对Meth成瘾具有改善作用。不同剂量的天麻素可抑制Meth依赖CPP大鼠海马组织小胶质细胞的激活状态。     

TLR4/MyD88/NF-κB通路基因及相关炎症因子在继发性脊髓损伤患者中的表达

目的: 探讨Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子（MyD88）/NF-κB通路基因及相关炎症因子TNF-α、IL-12、IL-6在继发性脊髓损伤（SSCI）患者中的表达及与预后的相关性。方法: 回顾性分析2017年7月至2018年6月浙江省台州医院收治的105例SSCI患者及40名健康体检者的临床资料。根据Frankel脊髓损伤分级评估结果将SSCI患者分为完全损伤组和不完全损伤组,根据日本矫形外科学会（JOA）患者神经功能改善率将SSCI患者分为预后优良组和预后不良组。对比SSCI患者与健康体检者、完全损伤组与不完全损伤组、预后优良组与预后不良组外周血单个核细胞（PBMC）中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平;采用Logistic回归分析法分析导致SSCI患者预后不良的危险因素,并采用Pearson相关性分析法分析JOA改善率与上述指标的相关性。结果: SSCI患者PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达量及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均高于健康体检者（均P < 0.01）,完全损伤组上述指标均高于不完全损伤组,且预后不良组高于预后优良组（均P < 0.01）。预后不良组Frankel分级A级、脊髓水肿或出血、脊髓损伤长度超过4 cm患者的比例均高于预后优良组（均P < 0.01）,且经Logistic回归分析证实Frankel分级、脊髓水肿或出血、脊髓损伤长度及PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量、血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均是导致SSCI患者预后不良的危险因素（P < 0.05或P < 0.01）。Pearson相关性分析结果显示,JOA改善率与PBMC中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量以及血清TNF-α、IL-12、IL-6水平均呈负相关（P < 0.05或P < 0.01）。结论: TLR4/MyD88/NF-κB通路激活及其相关炎症因子TNF-α、IL-12、IL-6表达上调参与SSCI疾病进展且与神经炎症损伤关系密切,可作为评估SSCI患者预后的参考指标。     

UC患者PBMC中TLR4、NF-κB水平的变化及其临床意义

目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单核细胞(PBMC)中TOLL样受体(TLR)4、NF-κB水平的变化及在UC发病中的可能机制.方法 选取武警浙江省总队医院嘉兴医院消化科2014年1月至2015年1月收治的UC患者30例作为观察组,另选取该院体检科健康体检者10例作为对照组.采用流式细胞仪检测外周血CD14+单核细胞表面TLR4阳性表达率,RT-PCR检测TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB(P65) mRNA表达水平,Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB(P65)蛋白水平.结果 观察组外周血CD14+单核细胞表面TLR4阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05);对照组TLR4、MyD88、NF-κB(P65) mRNA及蛋白水平明显低于观察组(P＜0.01);TLR4、MyD88、NF-κB(P65)蛋白水平与UC严重程度呈正相关.结论 UC患者PBMC中TLR4、NF-κB明显增高,临床可通过检测TLR4、NF-κB水平判断UC的发展程度.     

白细胞介素18经toll样受体4/髓样细胞分化因子88/核转录因子-κB通路促进支气管平滑肌细胞增殖与迁移

目的 探讨白细胞介素18 (IL-18)经toll样受体4 (TLR4)/髓样细胞分化因子88 (MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路促进支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖与迁移。方法 采用不同浓度IL-18、不同时间处理BSMC,确定实验条件。细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞活性,Transwell小室检测细胞迁移,Western blot法检测相关蛋白的表达。抑制剂Eritoran特异性阻断TLR4/MyD88/NF-κB通路,检测TLR4/MyD88/NF-κB通路阻断后对细胞周期、细胞增殖、细胞迁移及TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白的表达的影响。结果 IL-18可促进支气管平滑肌细胞细胞增殖,提高细胞迁移能力,上调TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。Eritoran可抑制IL-18引起的BSMC细胞增殖,上调G1期细胞百分比,下调S期、G2期细胞百分比,抑制细胞迁移,降低TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。结论 IL-18可能通过上调TLR4/MyD88/NF-κB通路中信号分子的表达,促进了平滑肌细胞增殖和迁移。     

参榆洗液调控TLR4/NF-κB信号通路促进痔术后创面愈合机制研究

目的 研究参榆洗液对肛周创面感染模型大鼠Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其促进痔术后创面愈合的作用机制。方法 将60只SD雄性大鼠采用随机数字表法分为空白组,模型组,阳性对照组,参榆洗液低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余5组建立大鼠肛周创面感染模型,造模成功后予以相应药物外用干预。通过免疫组化法检测大鼠创面组织中白细胞介素-6(IL-6)、NF-κB蛋白表达,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测大鼠脾脏中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB mRNA的相对表达量。结果 与空白组比较,模型组大鼠创面组织中NF-κB、IL-6蛋白平均光密度值明显升高,脾脏中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和参榆洗液低、中、高剂量组大鼠创面组织中IL-6蛋白平均光密度值明显降低,脾脏中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA相对表达量明显降低,阳性对照组和参榆洗液中、高剂量组大鼠创面组织中NF-κB蛋白平均光密度值明显降低...     

miR-146a经TLR4/MyD88途径加速巨噬细胞迁移所致动脉硬化的作用机制

目的 探讨微小RNA-146a(miR-146a)经Toll样受体4(TLR4)/髓系分化因子88蛋白(MyD88)途径调控巨噬细胞迁移所致动脉硬化的具体机制。 方法 RAW264.7巨噬细胞分为空白组、ox-LDL组、miR-146a mimic组、miR-146a inhibitor组、shRNA-MyD88组、shRNA-NC组、shRNA-MyD88+miR-146a mimic组、shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组,除空白组,其他各组均用50 mg/L ox-LDL进行干预;采用Western blotting法检测TLR4、MyD88、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平。采用qPCR法检测miR-146a、TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6基因表达水平。采用Transwell法检测巨噬细胞迁移能力。 结果 (1)ox-LDL组细胞内TLR4、IL-6蛋白含量及巨噬细胞迁移率均高于空白组(P均<0.01),miR-146a低于空白组(P<0.01);(2)miR-146a mimic组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL组,miR-146a mRNA相对表达量高于ox-LDL组(P均<0.01);miR-146a inhibitor组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率高于ox-LDL组,miR-146a mRNA相对表达量低于ox-LDL组(P均<0.01);(3)shRNA-MyD88组MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL组(P<0.01),miR-146a、TLR4表达无明显差异(P>0.05);shRNA-MyD88+miR-146a mimic组miR-146a表达高于shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量低于shRNA-MyD88组(P<0.01),MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P>0.05);shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组miR-146a表达低于shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量表达高于shRNA-MyD88组(P<0.01),MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P>0.05)。 结论 miR-146a是动脉粥样硬化的保护性因子,通过拮抗TLR4/MyD88途径调控炎症因子分泌进而抑制巨噬细胞迁移所致动脉粥样硬化进程,为动脉粥样硬化的防治提供新的治疗靶点。     

低剂量艾司氯胺酮通过TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻肢体缺血再灌注损伤

目的 探讨Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）/髓样分化初级反应基因88（myeloid differentiation primary response gene 88，MyD88）/核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路在低剂量艾司氯胺酮预处理的肢体缺血再灌注损伤中的作用。方法 将28只大鼠分为对照组、模型组、实验1组（艾司氯胺酮，5mg/kg）、实验2组（艾司氯胺酮，10mg/kg），每组各7只。实验组大鼠腹腔注射艾司氯胺酮，其余两组同样方法给予生理盐水，造模成功后取血清测定白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量；取骨骼肌测定湿/干重比值，测定TLR4、MyD88基因表达水平和NF-κB蛋白含量，病理切片观察骨骼肌改变。结果 与对照组相比，模型组湿/干重比值、IL-6、IL-1、TNF-α、TLR4 mRNA、MyD88 mRNA及NF-κB蛋白均显著升高（P<0.05）；与模型组相比，实验1组和实验2组的上述各项指标均显著降低（P<0.05）；而实验1组和实验2组的上述各项指标比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 艾司氯胺酮可通过TLR4/MyD88/NF-κB通路降低相关炎症因子表达，从而减轻肢体缺血再灌注损伤，且低剂量的艾司氯胺酮即可起到抗炎保护作用。     

滋肾丸含药血清对大鼠膀胱平滑肌细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的 观察滋肾丸含药血清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠膀胱平滑肌细胞表达Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体5(TLR5)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),以及MYD88非依赖型途径激活核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响.方法 用LPS(1μg/mL)刺激大鼠膀胱平滑肌细胞株,同时分别给予滋肾丸含药血清5.54、27.7 g/(kg.U)进行干预,Western-blot方法测定TLR4,TLR5和下游通路相关蛋白的表达,分析评价滋肾丸含药血清的现代药效学基础.结果 滋肾丸含药血清27.7 g/(kg.U)对LPS刺激的TLR4、TLR5及其下游通路的MyD88和NF-κB有抑制作用,滋肾丸含药血清5.54 g/(kg.U)对LPS刺激的病理性升高无抑制作用.结论 滋肾丸的药效学作用可能与抑制TLR4、TL R、MyD88和NF-κB蛋白表达有关,且与剂量呈依赖性.     

卡非佐米对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用及机制研究

目的探讨卡非佐米（CFZ）对大鼠类风湿性关节炎（RA）的治疗作用及其机制。方法采用随机抽签法将35只大鼠分为预治疗组、同时治疗组、低剂量治疗组（1.0mg/kg）、中剂量治疗组（1.5mg/kg）、高剂量治疗组（2.0mg/kg）、模型对照组和空白对照组7组,每组5只。使用弗氏佐剂诱导大鼠建立药物诱导关节炎（AIA）;在不同时机使用不同剂量CFZ对AIA大鼠进行治疗,观察比较各组间关节炎指数（AI）;免疫组化分析大鼠踝关节诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及环氧化酶-2（COX-2）表达水平;抗酒石酸酸性磷酸酶染色评估破骨细胞数;qRT-PCR法检测Toll样受体2（TLR2）、Toll样受体4（TLR4）及髓样分化因子88（MyD88）mRNA表达水平;Westernblot法检测TLR2、TLR4、NF-资B、磷酸化NF-资B（p-NF-资B）及MyD88蛋白表达水平。结果与模型对照组比较,预治疗组、同时治疗组及低、中、高剂量治疗组AI均明显降低（均P＜0.05）,iNOS和COX-2表达水平均下降（均P＜0.05）;中、高剂量治疗组破骨细胞数及积分光密度值均降低（均P＜0.05）;中剂量治疗组和预治疗组MyD88mRNA表达水平均明显下降（均P＜0.05）,高剂量治疗组TLR2、TLR4和MyD88mRNA表达水平均下降（均P＜0.05）;Westernblot结果显示CFZ可明显抑制TLR2、TLR4和NF-资B蛋白表达,在高剂量治疗组中可观察到MyD88蛋白表达抑制。结论CFZ通过下调关节iNOS及COX-2的表达,调控滑膜细胞TLRs/MyD88/NF-资B信号通路,降低关节炎症反应及抑制破骨细胞而起到抗RA效果。     

TLR4、MyD88、NF-κB在乙型肝炎病毒肝硬化患者中的表达及其临床意义

目的 探讨Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κ（NF-κB）信号通路在乙型肝炎病毒所致肝硬化中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月—2019年1月华北石油管理局总医院收治的130例乙型肝炎肝硬化患者为研究对照（肝硬化组），选择同期130例乙型肝炎患者为乙型肝炎组，选择130例健康人群为对照组。其中肝硬化组进一步根据ChildPugh分为A级（49例），B级（47例），C级（34例）；根据肝硬化程度分为：代偿期肝硬化（49例），失代偿期肝硬化（48例），原发性肝癌（33例）。比较3组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）的差异，比较3组单核细胞表面TLR4阳性率及血清MyD88、NF-κB水平，以及不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB表达水平。采用Spearman或Pearson分析法分析TLR4、MyD88、NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ALT、AST、TBIL、TLR4、MyD88及NF-κB对肝硬化致原发性肝癌的诊断价值。结果 肝硬化组、乙型肝炎组、对照组AST、ALT、TBIL水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；ChildPughA级、B级、C级患者TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB比较，差异有统计学意义（P <0.05）。TLR4、MyD88及NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL均呈正相关（P <0.05）。ROC曲线结果显示，ALT截断值为101.44 u/L时，AUC为0.738；AST截断值为136.74 u/L时，AUC为0.706；TBIL截断值为51.86 μmol/L 时，AUC为0.746；TLR4截断值为32.342%时，AUC为0.896；MyD88截断值为931.402 pg/ml时，AUC为0.897；NF-κB截断值为1 243.620 pg/ml时，AUC为0.875。结论 TLR4、MyD88、NF-κB信号通路与乙型肝炎病毒所致肝炎及肝硬化病理进程密切相关，且TLR4、MyD88、NF-κB的检测在诊断肝硬化致原发性肝癌中具有一定临床价值。     

健脾养血祛风方对树突状细胞TLRs/MyD88/NF-kB信号通路的干预机制

目的探究健脾养血祛风方对树突状细胞(DCs) Toll样受体(TLRs)经典MyD 88-NF-κB信号通路的影响。方法从小鼠骨髓分离单核细胞并诱导培养为树突状细胞。采用流式细胞术检测小鼠DCs表面分子CD80和CD86的表达情况;CCK8检测健脾养血祛风方对DCs细胞活力的影响;RT-q PCR检测TLR2、TLR3、TLR4和TLR9表达水平,同时检测下游信号相关蛋白IRAK-1、IRAK-4、TRAF6、p38、MyD 88、NF-κB表达;ELISA检测IL-4、IL-10、INF-γ、IL-12水平。结果在不影响细胞活力的前提下,50μg/mL健脾养血祛风方能明显增加TLR2、TLR3、TLR4和TLR9的表达(P<0.01),同时能促进DCs中IRAK-1、IRAK-4、TRAF6、p38、MyD 88、NF-κB水平(P<0.01)。此外,50μg/mL、75μg/mL健脾养血祛风方还可增加INF-γ、IL-12的释放(P <0.01),抑制IL-4、 IL-10的生成(P <0.01)。结论健脾养血祛风方可促进DCs的TLRs/MyD 88/NF... 更多     

姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能的改善作用及其机制

目的：研究姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能和海马组织中Toll样受体4/核转录因子κB （TLR4/NF-κB）通路的影响,探讨姜黄素治疗睡眠剥夺的机制。方法：将100只小鼠随机分为对照组,模型组,低、中和高剂量姜黄素组,每组20只。除对照组外,其他各组小鼠采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立睡眠剥夺模型;建模后,低、中和高剂量姜黄素组小鼠分别腹腔注射5、10及20 mg·kg^-1姜黄素,每天1次,共3 d。Morris水迷宫实验测定各组小鼠学习记忆能力,旷场实验测定小鼠垂直得分和水平得分,ELISA法检测各组小鼠海马组织中白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平。结果：与模型组比较,各剂量姜黄素组小鼠逃避潜伏期缩短（P<0.05）,停留原平台象限时间延长（P<0.05）,穿越原平台次数增加（P<0.05）,旷场实验垂直得分和水平得分降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB P65蛋白表达水平均降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。结论：姜黄素可能通过抑制TLR4/NF-κB通路改善睡眠剥夺小鼠的认知功能。     

TLR4/MyD88/NF-κB在克罗恩病结肠组织的表达及临床意义

目的 探讨免疫组织化学法检测CD 结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB 的表达情况,分析各组间是否存在差异,以及与疾病活动度间是否相关。方法 收集郑州大学第二附属医院住院CD 患者的结肠组织标本共17例,收集对照组结肠组织标本5 例,比较两组患者TLR4、MyD88、NF-κB 的表达有无差异及不同程度CD 组间表达有无差异。结果 CD 组TLR4、MyD88、NF-κB 在结肠组织的表达水平均高于正常对照组;TLR4 和MyD88 与ESR存在显著的中等强度相关,NF-κB 与CRP、白蛋白存在显著的中等强度相关。结论 CD 结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB 的表达高于正常结肠组织,TLR4/MyD88/NF-κB 通路在CD 发病中发挥着重要作用。TLR4、MyD88、NF-κB的表达水平与多种炎症指标间存在显著相关性。     

TLR9、MyD88及NF-κB在过敏性紫癜中的表达及意义

目的 探讨免疫上游因子TLR9、MyD88、NF-κB及免疫下游细胞因子IL-6、TNF-α在HSP组与正常对照组间的差异及相关性。方法 采用实时荧光定量PCR检测HSP患儿外周血单核细胞TLR9、MyD88及NF-κB mRNA表达量,ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α水平。结果 1HSP患儿外周血单核细胞TLR9、MyD88及NF-κB mRNA表达均显著高于正常对照组;2HSP组血浆IL-6、TNF-α水平较对照组水平显著增高;3HSP组中TLR9与MyD88、TLR9与NF-κB、MyD88与NF-κB、NF-κB与IL-6以及NF-κB与TNF-α均存在线性正相关关系。结论HSP患儿TLR9、MyD88、NF-κB、IL-6、TNF-α水平均较正常儿童显著升高。TLR9-MyD88-NF-κB信号通路参与HSP发病,并在其中起重要作用。     

针刺对急性脑出血大鼠TLR4/MyD88信号通路关键因子表达的影响

目的探讨针刺百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠TLR4/MyD88信号通路关键因子Toll样受体4(TLR-4)、髓样细胞分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将54只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺+模型组(简称针刺组),每组再以1 d、3 d、7 d时间点分为3个亚组,每组6只。自体血注入法建立脑出血大鼠模型。采用针刺百会穴透曲鬓穴干预,在1 d、3 d、7 d 3个时间点采用Longa评分法对脑出血后大鼠神经功能进行评估;采用Western-blot法检测血肿组织TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果与模型组相比,各时间点针刺组大鼠神经功能缺损明显减轻(P 0. 05)。与假手术组相比,模型组各时间点TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达显著上升(P 0. 01);与模型组相比,针刺组各时间点TLR-4、MyD88、NF-κB蛋白表达明显下调(P 0. 01)。结论针刺可能通过调控TLR4/MyD88信号通路中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达,减轻脑出血后炎性损伤,改善大鼠神经功能缺损症状,发挥脑保护作用。     

黄芪多糖对高血压病患者血清致伤血管内皮细胞TLR4、NF-κB表达的影响

目的 观察黄芪多糖(APS)对TLR-NF-κB信号转导通路的影响,探讨其对高血压病患者血清损伤的血管内皮细胞的保护机制.方法 用10%的高血压痛患者及健康人血清干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C)24 h,实时荧光定量(PCR)法检测TLR4 mRNA表达.不同浓度的APS干预脂多糖(LPS)诱导的HUVEC-C TLR4表达(24 h)及核转录因子(NF-κB)活化(2 h),PCR法检测TLR4 mRNA及NF-κB mRNA的表达,免疫印迹(Western-blot)技术检测TLR4蛋白及NF-κB蛋白的表达.结果 血清作用24 h后,高血压病组TLR4 mRNA的表达较健康组增高(P＜0.01).APS可呈剂量依赖性减少LPS诱导的TLR4 mRNA高表达,抑制LPS诱导的TLR4蛋白高表达和IκBα蛋白的降解(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 TLR-NF-κB信号途径介导的炎症反应和免疫紊乱是高血压病血管内皮损伤的机制之一,APS可通过抑制其表达保护血管内皮细胞损伤.