PAR-2激动剂对肝癌细胞增殖及Ca2+水平的影响

目的： 研究PAR-2激动剂对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞内Ca2+浓度（［Ca2+］c）的影响。方法: 培养人肝癌细胞HepG2, 分别利用PAR-2激动剂SLIGKV-NH2及反PAR-2激动肽VKGILS-NH2干预肝癌细胞生长,用Fura-2荧光法测定肝癌细胞内［Ca2+］c,用MTT法检测对肝癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术（FCM）检测细胞周期改变情况,RT-PCR法检测cyclinD1 mRNA表达变化。结果: 50 μmol/L SLIGKV-NH2刺激HepG2细胞后,［Ca2+］c迅速短暂升高（P<0.01）;G0/G1期比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例和细胞增殖指数(PI)明显提高（P<0.01）;cyclinD1 mRNA的表达显著增加（P<0.01）。SLIGKV-NH2在1-50 μmol/L时可以促进HepG2细胞增殖,呈剂量依赖性（P<0.01或P<0.05）。而VKGILS-NH2组与对照组相比差异无显著（P>0.05）。结论: PAR-2激动剂在体外能通过激活PAR-2,诱导HepG2细胞内［Ca2+］c升高,上调cyclinD1 mRNA的表达,加速HepG2细胞周期进程,促进DNA合成,促进肝癌细胞增殖。     

氯诺昔康对胆囊切除术患者围手术期IL-2、IL-6及IL-10水平的影响

目的 通过观察胆囊切除术患者围手术期使用氯诺昔康后血清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）水平的变化,探讨氯诺昔康对机体细胞免疫功能的影响.方法 择期行开腹胆囊切除术患者40例,术前常规使用鲁米那加阿托品.随机双盲分为A、B两组,每组20例.A组在麻醉前静脉滴注氯诺昔康8mg,术后以芬太尼行静脉自控镇痛（PCIA）;B组关腹结束即刻静脉滴注氯诺昔康8mg,术后以芬太尼行PCIA.两组分别于麻醉用药前（T1）、关腹结束后即刻用药前（T2）、术后6小时（T3）、术后24小时（T4）抽取外周静脉血,测定各个时点血清炎性细胞因子IL-2、IL-6及IL-10水平.结果 两组患者T1时点血清IL-2、IL-6、IL-10浓度差异无统计学意义（P＞0.05）,T2、T3、T4时点的IL-2、IL-6浓度B组显著高于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）;在T2、T3、T4时点的IL-10水平B组显著低于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 术前使用氯诺昔康,较术后使用更能减轻麻醉手术等因素对细胞免疫功能的抑制,并能有效抑制应激反应,有利于术后恢复.     

天麻素对CUS大鼠抑郁样行为及IL-1β和IL-6水平的影响

目的:探讨天麻素对慢性不可预见应激(CUS)大鼠抑郁样行为的改善作用及对炎症因子IL-1β、IL-6表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(Sham),模型组(CUS),模型(CUS)+天麻素低、中、高剂量组,每组8只。对照组每天腹腔注射生理盐水(1 ml/kg),连续14 d;模型组接受CUS造模,并且在造模结束后每天腹腔注射生理盐水(1 ml/kg),连续14 d;模型+天麻素低、中、高剂量组在CUS造模结束后每天腹腔注射不同剂量的天麻素(50、100或者200 mg/kg),持续14 d。随后,通过糖水偏好实验和强迫游泳实验检测各组大鼠的抑郁样行为,在行为学检测结束后处死大鼠,通过ELISA检测海马和血清中IL-1β、IL-6水平变化情况。结果:(1)慢性不可预见应激(CUS)可以导致明显的抑郁样行为,包括糖水偏好减少(P0.05)和强迫游泳不动时间增加(P0.01),CUS组大鼠海马及血浆的IL-1β、IL-6水平明显升高(P0.01)。(2)一定剂量(100和200 mg/kg)天麻素干预可以缓解CUS大鼠的抑郁行为,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.01)存在显著性差异。(3)中高剂量的天麻素可以恢复CUS大鼠海马和血清的IL-1β、IL-6水平,CUS与CUS+GAS(M)组(P0.05)以及CUS与CUS+GAS(H)组之间(P0.05)的IL-1β、IL-6水平存在显著性差异。结论:天麻素可以缓解CUS模型大鼠抑郁样行为,抑制CUS模型大鼠的IL-1β、IL-6水平升高。     

过敏性紫癜患儿血清IL-2、IL-6、IL-12急性期和恢复期的水平测定

目的通过过敏性紫癜（HSP）患儿的血清IL-2、IL-6、IL-12探讨过敏性紫癜（HSP）的免疫作用机制。方法采用双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法对48例HSP患儿组和48例正常组比较。结果HSP患儿急性期的血清IL-6明显高于正常组（t=3．68P〈0．01）,血清IL-2、IL-12则显著下降（分别为t=4．976P〈0．01,t=3．175 P〈0．01）两组比较,差异有统计学意义。而HSP患儿恢复期的血清IL-2、IL-6、IL-12与正常组无明显差别（t=分别为0．703,0．374,0．490 P〉0．05）两组比较,差异无统计学意义。结论HSP患儿血清白细胞介素水平出现异常,机体存在免疫功能紊乱。     

HIV感染者血清TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平的变化分析

人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的免疫病理机制中,细胞因子的作用及细胞因子网络失衡是其中的一个重要方面。为研究HIV感染者血清细胞因子水平的异常变化,进一步探讨有针对性的艾滋病(AIDS)治疗方案,对30例HIV感染者血清TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平进行了测定。     

创伤性颅脑损伤患者IL-1β、IL-6、IL-10水平变化及临床意义

目的 探讨创伤性颅脑损伤后不同时期脑脊液和血清中IL-1β、IL-6、IL-10的水平变化及临床意义.方法 选择79例创伤性颅脑损伤患者,其中轻型12例、 中型25、 重型42例.分别留取伤后1、2、3、7 d的脑脊液和血液标本,采用ELISA法检测伤后各时间点脑脊液和血清中IL-1β、IL-6、IL-10浓度.另取查体健康者12例为对照组.结果 与对照组相比,创伤性颅脑损伤患者脑脊液和血清中IL-1β、IL-6、IL-10水平均显著增高(P<0.01).重型颅脑损伤患者脑脊液和血清中IL-1β、IL-6、IL-10水平显著高于轻中型组(P<0.01);且脑脊液中炎性因子和抗炎因子的浓度显著高于血清中的浓度.结论 创伤性颅脑损伤后促炎因子和抗炎因子水平对TBI病情评估、 临床治疗及预后评估具有一定的临床意义.     

IL-6受体的多抗制备及其在正常大鼠脑内的分布

IL-6是神经 -免疫通讯的主要信息分子之一 ,获得其受体的抗体并研究该受体在脑内的分布对探讨 IL-6在脑内的功能是重要的基础工作。本研究用原核表达的大鼠 IL-6受体 ( IL-6R)蛋白免疫新西兰大白兔制备了其多克隆抗体 ,经 ELISA、Western blot和免疫细胞化学染色等方法进行了鉴定 ,并且将之用于免疫组织化学染色 ,观察了 IL-6R在正常成年大鼠脑内的表达。结果表明 :所获得的 IL-6R多抗具有较高的效价、特异性和亲和力 ;IL-6R在脑内的分布广泛 ,其中大脑皮质的颗粒细胞层和锥体细胞层、外侧隔核、海马、齿状回、下丘脑视上核、弓状核、小脑 Purkinje细胞以及延髓最后区都有浓染的 IL -6R阳性细胞 ;纹状体、下丘脑视前区、丘脑背侧核群、下丘脑室旁核、中脑导水管周围灰质和蓝斑等部位染色较淡 ;另外 ,胼胝体、视束和海马伞等白质内有许多胶质细胞也呈现 IL -6R阳性染色。本文观察到的 IL -6R在脑内的广泛分布表明 ,IL -6在中枢神经系统内可能具有重要的神经生物学意义     

Galectin-3缺失对银屑病小鼠模型中肥大细胞活化及皮肤损伤的影响

目的：探讨皮肤中半乳糖凝集素-3(Gal3)对银屑病小鼠模型中皮损处肥大细胞激活及银屑病皮炎损伤的影响及其潜在机制。方法：每日分别对SPF级Gal3野生型(Gal3^+/+)和Gal3基因敲除(Gal3^-/-)小鼠背部裸露皮肤处涂抹相同剂量咪喹莫特乳膏,连续5 d以构建银屑病小鼠模型。观察小鼠背部大体病变,并根据银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)进行评分,利用实时荧光定量PCR测定小鼠皮损组织细胞因子il-1、il-17表达,比较Gal3^+/+小鼠和Gal3^-/-小鼠银屑病炎症的严重程度;HE染色观察比较皮损组织病理学变化;甲苯胺蓝染色观察小鼠皮损组织中肥大细胞的形态和分布差异;免疫组织化学和图像分析技术检测肥大细胞活化标志物如类胰蛋白酶和5-羟色胺(5-HT)的表达、分布等差异。结果：连续应用咪喹莫特乳膏后,Gal3^-/-小鼠背部出现鳞屑、浸润斑块和红斑等典型银屑病临床表型,而Gal3^+/+小鼠背部出现细小鳞屑与少量浸润,Gal3^-/-     

补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍模型大鼠血清性激素以及IL-1β、IL-2、IL-6水平的影响

目的 观察补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍模型大鼠血清性激素以及IL-1β、IL-2、IL-6水平的影响.方法 将60只围绝经期大鼠按体重随机分为5组,每组12只：正常对照组（A）;围绝经期抑郁症睡眠障碍模型组（B）;围绝经期抑郁症睡眠障碍补佳乐治疗组（C）;围绝经期抑郁症睡眠障碍米氮平治疗组（D）;围绝经期抑郁症睡眠障碍中药治疗组（E）;A组为围绝经期正常大鼠,其余4组进行18天不可预知慢性应激.于应激后对造模动物进行72h连续快速眼相睡眠剥夺（REM）.每天在应激前1h按组给药.在末次灌胃24h后,颈椎脱臼法处死大鼠,取静脉血,离心血清后,采用放免法测定大鼠血清中E2、LH、FSH含量以及ELISA检测大鼠血清中IL-1β、IL-2、IL-6含量.结果 围绝经期抑郁症睡眠障碍治疗组血清E2均高于正常组及模型组,且补佳乐及中药组与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）,治疗组血清FSH均低于正常组及模型组,且米氮平及中药组与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）,补佳乐与米氮平组血清LH均显著低于模型组（P＜0.05）;围绝经期大鼠在建立抑郁症睡眠障碍模型后IL-2、IL-6、IL-1β均显著低于正常对照组（P＜0.05）,补佳乐、米氮平及中药均能提高IL-2、IL-6水平,与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）.结论 模型组大鼠IL-2、IL-6、IL-1β水平降低;补肾调肝清心方可能是通过提高血清E 2、IL-2、IL-6水平及降低血清FSH、LH水平来治疗围绝经期抑郁症睡眠障碍.     

凉血解毒汤对银屑病小鼠皮肤组织CCL20/CCR6表达的影响

目的:观察凉血解毒汤对银屑病小鼠皮肤组织中CC趋化因子配体20(CCL20)/CC趋化因子受体6(CCR6)表达的干预作用。方法:24只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、银屑病模型组、凉血解毒汤中药治疗组和趋化因子CCL20单克隆抗体(阳性药)治疗组。用咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型,采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分标准观察银屑病样小鼠皮损的变化情况。光镜下观察皮损组织形态学变化,测量表皮层厚度。采用real-time PCR检小鼠皮肤组织样本中CCL20和CCR6表达的变化。结果:银屑病模型组小鼠皮肤出现大量鳞屑和红斑,表皮增厚;与银屑病模型组小鼠比较,凉血解毒汤组小鼠银屑病样皮损程度较轻,红斑、鳞屑以及表皮增厚程度轻于模型组,PASI分数降低,皮肤组织CCL20以及CCR6的表达明显低于模型组。趋化因子CCL20单克隆抗体治疗组小鼠银屑病皮损程度较轻,红斑、鳞屑以及表皮增厚程度轻于模型组,PASI分数降低,皮肤组织CCL20以及CCR6的表达明显低于模型组。结论:凉血解毒汤可能通过下调CCL20/CCR6的表达来减轻银屑病小鼠的皮肤病变。     

类胰蛋白酶通过激活PAR-2促进肠黏膜上皮IEC-6细胞损伤

目的:观察类胰蛋白酶(tryptase)对小肠黏膜上皮细胞IEC-6的作用及机制。方法:体外培养IEC-6细胞,随机分为对照(control)组、tryptase处理组、蛋白酶激活受体2(PAR-2)抑制剂(FSLLRY-NH2,FS)处理组以及tryptase+FS处理组。采用MTT法检测细胞生存率;测定分泌的乳酸脱氢酶(LDH)活性;Western blotting测定PAR-2和cleaved-caspase 3的表达。结果:与对照组比,100μg/L和1 000μg/L类胰蛋白酶导致细胞生存率明显降低(P0.05)。与对照组相比,10μg/L到1 000μg/L类胰蛋白酶导致LDH的活性明显增加(P0.05)。与对照组相比,100μg/L和1 000μg/L类胰蛋白酶导致细胞的PAR-2及cleaved-caspase 3表达明显升高(P0.05)。与1 000μg/L tryptase处理组比较,FS能够明显增加细胞生存率、降低LDH活性及cleaved-caspase 3表达(P0.05)。结论:类胰蛋白酶通过激活PAR-2促进IEC-6细胞损伤,且这种损伤呈浓度依赖性。     

类风湿关节炎并发OP患者免疫球蛋白、淋巴细胞亚群、IL-27及IL-6水平的研究

目的:探讨免疫球蛋白、淋巴细胞亚群、白细胞介素(interleukin,IL)27和IL-6在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)合并骨质疏松(osteoporosis,OP)患者中的表达及临床意义。方法:选取2018年1月至2020年12月沭阳县中医院收治的268例RA患者为研究对象,测定所...     

狼疮肾炎PBMC高表达抗ds-DNA抗体和IL-6由MAPKERK1/2通路介导

目的：探讨有丝分裂原激活的蛋白激酶-细胞外调节激酶1/2（MAPKERK1/2）信号通路在系统性红斑狼疮合并肾炎（LN）患者外周血单个核细胞（PBMC）中自发高水平表达白细胞介素6（IL-6）和抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）中的作用。 方法： 分离培养患者PBMC，利用蛋白免疫印迹法、逆转录PCR 法和酶联免疫吸附法分别检测MAPKERK1/2磷酸化活化程度、IL-6表达和抗ds-DNA抗体水平，并与正常对照组比较。 结果： 26例LN患者与21例健康对照者比较，体外培养LN患者PBMC MAPKERK1/2信号通路呈高度活化状态，并自发表达高水平IL-6和抗ds-DNA抗体，组间有显著差异(P<0.05)。应用特异性阻断剂PD98059阻断LN患者PBMC MAPKERK1/2信号通路活化可显著抑制IL-6 和抗ds-DNA抗体的自发高表达。 结论： LN患者PBMC中MAPKERK1/2信号通路异常活化，并介导PBMC自发高水平表达IL-6 和抗ds-DNA抗体。     

润燥止痒胶囊对银屑病样皮损大鼠肠道菌群和炎症反应的影响

目的　从肠道菌群和免疫炎症调控的角度,探讨润燥止痒胶囊（Runzao Zhiyang capsule,RZC）对银屑病样皮损的药效作用。 方法 研究RZC给药对银屑病样皮损模型大鼠的作用,检测血清中细胞炎症因子（IL-6和TNF-α、IL-17和IL-10）水平,分析模型大鼠粪便重要菌落的数量。 结果 给药RZC两周后,显著改善模型大鼠的银屑病样皮损症状。RZC下调血清IL-6、TNF-α和IL-17含量,上调IL-10水平,提示对机体炎症反应的缓解作用。给药降低模型大鼠肠道的肠杆菌和肠球菌的含量,提高乳酸杆菌和双歧杆菌的数目。 结论 RZC治疗银屑病样皮损可能与其调控肠道菌群结构,缓解宿主免疫炎症反应有关。     

润燥止痒胶囊对银屑病样皮损大鼠肠道菌群和炎症反应的影响

目的　从肠道菌群和免疫炎症调控的角度,探讨润燥止痒胶囊（Runzao Zhiyang capsule,RZC）对银屑病样皮损的药效作用。 方法 研究RZC给药对银屑病样皮损模型大鼠的作用,检测血清中细胞炎症因子（IL-6和TNF-α、IL-17和IL-10）水平,分析模型大鼠粪便重要菌落的数量。 结果 给药RZC两周后,显著改善模型大鼠的银屑病样皮损症状。RZC下调血清IL-6、TNF-α和IL-17含量,上调IL-10水平,提示对机体炎症反应的缓解作用。给药降低模型大鼠肠道的肠杆菌和肠球菌的含量,提高乳酸杆菌和双歧杆菌的数目。 结论 RZC治疗银屑病样皮损可能与其调控肠道菌群结构,缓解宿主免疫炎症反应有关。     

NLR、CRP及IL-6、IL-17在子宫内膜异位症中的表达及与病情的相关性

目的探讨NLR(中性粒细胞与淋巴细胞比值)、CRP(C反应蛋白)、IL-6(白细胞介素6)、IL-17(白细胞介素17)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达水平及其与病情的相关性。方法回顾性分析2017年7月至2019年7月在唐山市妇幼保健院妇科行腹腔镜手术的126例术后病理确诊为EMs的患者作为研究对象,其中Ⅰ~Ⅱ期为轻度组(73例),Ⅲ~Ⅳ期为重度组(53例),选取同期体检的健康妇女50例作为对照组。分别测定各组CRP、IL-6、IL-17及NLR指标的水平,分析各指标的关系并应用Logistic回归分析各指标与EMs严重程度的相关性。结果EMs组患者血清中的CRP、IL-6、IL-17和NLR水平均高于对照组,IL-6分别与IL-17和CRP成正相关(r=0.348,P<0.05;r=0.308,P<0.05),CRP与NLR成正相关(r=0.297,P<0.05)其他指标间无显著相关性。重度组CRP、IL-6、IL-17水平均高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)NLR重度组与轻度组差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,CRP、IL-6、IL-17与EMs病情均密切相关(P<0.05),三者联合诊断EMs的价值最高。结论CRP、IL-6、IL-17和NLR参与了EMs的发生、发展,三个指标的检测可评估EMs的病情及预后判断,CRP、IL-6、IL-17三个指标联合检测可提高EMs诊断的灵敏度和特异性。     

支气管哮喘患儿治疗前后血清IL-2、IL-6和GM-CSF检测的临床意义

目的：探讨了支气管哮喘患儿治疗前后血清IL-2、IL-6和GM-CSF含量的变化及临床意义。方法：应用放射免疫分析对36例支气管哮喘患儿进行治疗前后血清IL-2、IL-6和GM-CSF测定,并与30名正常健康儿做比较。结果：在治疗前血清IL-6和GM-CSF水平非常显著地高于正常儿组（P〈0.01）,而IL-2水平又非常显著地低于正常儿组（P〈0.01）,经治疗一个月后则与正常儿比较无显著差异（P〉0.05）,直线相关分析显示：血清IL-2、IL-6和GM-CSF水平呈明显负相关（r=-0.5846、-0.6018,P〈0.01）。结论：血清IL-2、IL-6和GM-CSF在支气管哮喘患儿的发生、发展过程中相互作用,观察其浓度的变化对探讨其发病机理及指导用药均有重要的临床价值。     

Role of alpha chain-IL-2 complex in the formation of the ternary complex of IL-2 and high-affinity IL-2 receptor

Using anti-Tac (anti-alpha chain) and 2R-B (anti-beta chain) antibodies, we studied the roles of IL-2 receptor subunits (alpha and beta chains) in the formation of IL-2 and high-affinity IL-2 receptor complex, which is the initial event of IL-2 induced T cell growth. High-affinity IL-2 binding which was undetectable in the presence of 2R-B antibody at 4 degrees C became fully detectable when examined at 37 degrees C, which explained the lack of inhibition by 2R-B antibody of IL-2-induced proliferation of the cells expressing high-affinity IL-2 receptor. We further studied the mechanism of the 'reappearance' of high-affinity IL-2 binding in the presence of 2R-B antibody. The addition of IL-2 to the cells preincubated with radiolabeled or fluorescence-labeled 2R-B antibody resulted in a marked decrease in the antibody bound to the cells expressing high-affinity IL-2 receptor at 37 degrees C. This decrease was blocked by the presence of anti-Tac antibody, which inhibited IL-2 binding to alpha chain, but not by 7G7/B6 antibody, which recognized a non-IL-2 binding site of its chain. Furthermore, the decrease in cell-bound 2R-B antibody was not due to the internalization of beta chain-2R-B antibody complex, because the amount of cell-bound Mik-beta3 antibody recognizing a non-IL-2 binding epitope of beta chain remained unchanged, nor to the inhibition by simple competitive binding of IL-2 molecules to beta chain as judged from comparative studies of competitive binding inhibition. Taking these data together, the reappearance of high-affinity IL-2 binding was considered to be caused by the replacement of 2R-B antibody at the IL-2 binding site of beta chain by alpha chain-mediated IL-2, and it was strongly suggested that alpha chain-IL-2 complex has a key role in the formation of the ternary complex of IL-2 and high-affinity IL-2 receptor. alpha chain may function as a dimension converter of IL-2 to effectively deliver IL-2 molecules to a relatively small number of beta chains in the dynamics of the formation of high-affinity IL-2 binding in T cells.     

A Study on Isolation of Chemical Constituents from Sophora Flavescens Ait. and Their Anti-Glioma Effects

Background

Sophora flavescens Ait. is a traditional Chinese medicine with a long history in China. It is mainly used in the treatment of heat dysentery and similar ailments in the clinical. The objective of this paper was to isolate, purify and identify alkaloids from Sophora flavescens Ait. and to explore their inhibitory effects on C6 glioma cells.

Materials and Methods

Column chromatography, extraction and NMR spectroscopy were used to structurally identify the isolated compounds. MTT assay and flow cytometry were used to detect the inhibitory effect of matrine on C6 cells.

Results

Three compounds were isolated from Sophora flavescens Ait., namely matrine, oxymatrine and lupeol. Different concentrations of matrine solution all had inhibitory effects on growth of C6 cell lines, which showed apparent dose-effect relationship. Compared with the control group, proportion of G0/G1 phase cells increased in each matrine concentration group to a maximum of 79.8%; proportion of S phase cells reduced, and proportion of G2/M phase cells declined slightly to a minimum of 6.3%, suggesting that after the action of matrine proliferation of C6 cells was significantly inhibited and the cells were arrested in the G1 phase.

Conclusion

We concluded that Sophora flavescens Ait. has an inhibitory effect on C6 cell proliferation.