Bcl-2家族与肾小球系膜细胞凋亡的研究进展

系膜细胞(GMCs)增殖与凋亡在肾小球疾病的发病机制中扮演着重要的角色,Bcl-2家族是介导细胞凋亡的重要因子,研究证明以Bcl-2为代表的一组凋亡调节基因对GMCs凋亡的调节起着极为重要的作用[1],然而关于这一具体机制仍不明了。就Bcl-2家族对GMCs的影响进行综述。     

眼针对急性脑梗塞大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响

目的 从细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达方面探讨眼针治疗急性脑缺血的作用机理。方法 用线栓法制成SD大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型，在阻塞2h，再灌注24h后，应用TUNEL法和免疫组织化学法分别对缺血对照组、缺血加眼针组、缺血加督脉电针组及假手术组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞进行观察。结果 眼针、督脉电针均可减少缺血所致DNA双链断裂(TUNEL阳性)，提高梗死周边区皮层Bcl-2／Bax的比值。结论 眼针、督脉电针对急性脑缺血的治疗作用可能通过抑制损伤而抑制细胞凋亡，从而保护脑神经细胞。     

含益髓灵兔血清诱导HL-60细胞凋亡与对Bcl-2抑制研究

目的：探讨中药复方益髓灵治疗白血病作用机理：方法：在已知益髓灵具有诱导HL-60细胞凋亡的基础上,通过血清药理学方法,选择含不同浓度益髓灵初提物的兔药血清,与人急性早幼粒白血病HL-60细胞共同孵育不同时间后,观察兔药血清对HL-60细胞凋亡的影响,并对其发生凋亡机制进行初步探讨。结果：益髓灵兔药血清有较强的诱导HL-60细胞凋亡作用,以10％兔药血清作用48h效果最好,并发现其诱导凋亡机制与抑制Bcl-2基因表达相关。结论：益髓灵进入动物体内也有诱导白血病细胞凋亡作用,其诱导白血病细胞凋亡是治疗白血病的关键机制之一。     

龟龙坚骨汤对TNF-α诱导大鼠成骨细胞凋亡中Fas和Bcl-2表达的影响

目的:探讨龟龙坚骨汤对TNF-α诱导大鼠成骨细胞凋亡中Fas和Bcl-2表达的影响。方法:将原代培养的SD大鼠颅骨成骨细胞分为中药组和对照组,中药组给予龟龙坚骨汤含药血清培养,对照组给予常规血清培养,培养7d后,用含量为30ng/mL TNF-α刺激成骨细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡,应用免疫组化结合计算机图像分析技术检测细胞Fas和Bcl-2蛋白表达。结果:TNF-α刺激成骨细胞后,中药组中Bcl-2蛋白表达升高,Fas蛋白表达不明显;而对照组的Fas蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达不明显。在细胞凋亡率方面,中药组在早期及晚期细胞凋亡率均低于对照组,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:龟龙坚骨汤能上调Bcl-2蛋白表达,对Fas蛋白表达不明显,在一定程度上可以抑制成骨细胞的凋亡,但能否促进成骨细胞的增殖,有待下一步的研究。     

癫痫发病与细胞凋亡调控因子P53、Bcl-2、Bax关系的中西医研究进展

通过对近十年中外文献的分析归纳,总结了癫痫与细胞凋亡的关系;相关凋亡调控因子P53、Bcl2、Bax在细胞凋亡及癫痫发病中的作用,以及中医药抗痫治疗对细胞凋亡因子的干预作用研究现状,结果提示:P53、Bcl2、Bax在神经细胞凋亡中发挥着重要的调控作用,但其在癫痫发病机制中对神经元凋亡调控的作用机制及中医药干预研究尚属薄弱环节,有待今后进一步加强。     

慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达的关系

目的 探讨慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达的关系.方法 采用“病证结合”方法,选择慢性浅表性胃炎脾胃湿热证、脾虚证与正常对照组,取胃窦粘膜组织,分别采用W-S染色与RUT检测HP、常规HE染色、TUNE法检细胞凋亡、SABC法检测Bcl-2蛋白表达.结果 脾胃湿热证与脾虚证在显微镜下炎性细胞浸润程度均强于正常对照组(P＜0.01),且它们之间亦有明显差异(P＜0.05).凋亡细胞见于上皮细胞、壁细胞、主细胞;Bcl-2蛋白表达于壁细胞、主细胞、上皮细胞的胞浆中.脾虚证组、脾胃湿热证组的细胞凋亡指数明显高于正常组(P＜0.05);脾虚证组的细胞凋亡指数高于脾胃湿热证组(P＜0.05).Bcl-2蛋白表达在脾虚证组、脾胃湿热证组强于正常组(P＜0.05);脾虚证组Bcl-2蛋白表达低于脾胃湿热证组(P＜0.05).脾胃湿热证组、脾虚组HP阳性感染率高于正常对照组(P＜0.05);脾胃湿热证组的HP阳性感染率显著高于脾胃气虚组(P＜0.05).炎症程度与HP感染呈正相关(P＜0.05).结论 细胞凋亡、Bcl-2可能是形成脾胃湿热证的细胞分子生物学机理之一.     

补肾醒脑方对实验性血管性痴呆大鼠脑神经细胞Fas、Bcl-2基因表达的影响

目的:探讨血管性痴呆(VD)病理机并研究补肾醒脑方对血管性痴呆大鼠脑神经细胞Fas、Bcl-2基因表达的影响。方法:采用反复夹闭双侧颈总动脉伴低血压造成拟血管性痴呆大鼠模型,通过免疫组化法检测在脑缺血再灌注后不同时间蛋白表达的变化,采用病理图文分析系统,测定Fas、Bcl-2染色阳性细胞的灰度值。结果:补肾醒脑高、低剂量组可抑制促凋亡基因Fas蛋白的表达,诱导抑凋亡基因Bcl-2蛋白的表达。结论:补肾醒脑方能抑制脑神经细胞凋亡,调节凋亡基因的表达,缓解兴奋性毒性损伤,保护大脑神经细胞,这可能是补肾醒脑方治疗VD的作用机制之一。     

温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：探讨临床有效中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法：采用盐酸异丙肾上腺素连续多点皮下注射制备大鼠心肌缺血模型。运用透射电镜技术及TUNEL法,观察温心胶囊对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的影响。结果：异丙肾上腺素所致心肌缺血损伤可明显诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,显著引发Fas基因蛋白表达增强,并轻度引发Bcl-2基因蛋白表达增强,温心胶囊可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。结论：通过调节缺血心肌Bcl-2、Fas基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,可能是中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制之一。     

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探究参红通络方对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤（MI/RI）大鼠细胞凋亡的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型（MI/RI模型）,造模成功后第1天起,空白组（生理盐水1.0 mL·kg^-1）、模型组（生理盐水1.0 mL·kg^-1）、参红通络方剂低、中、高剂量组（1.031、2.063、4.126 g·kg^-1参红通络方标准浓缩液）和辛伐他汀组（辛伐他汀0.71 mg·kg^-1）,定时灌胃给药,每日1次,连续2周。苏木素-伊红（HE）染色法观察心肌细胞病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平变化;原位末端转移酶标记技术（TUNEL）染色法检测大鼠心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和胱天蛋白酶-3（Caspase-3）表达水平。结果 与空白组比较,模型组HE染色可见心肌细胞排列紊乱,纤维不完整,心肌细胞小灶性坏死,并伴有炎性细胞浸润;血清CK-MB、IL-6和TNF-α水平明显上升（P<0.05）;心肌细胞凋亡率明显升高（P<0.05）,Bax、Caspase-3蛋白表达水平则明显升高,Bcl-2明显下降（P<0.05）;与模型组比较,参红通络方剂加减低、中、高剂量组可明显降低CK-MB、IL-6和TNF-α水平（P<0.05）;明显下调心肌细胞凋亡率（P<0.05）;Bax、Caspase-3蛋白显著降低,Bcl-2表达水平明显增加（P<0.05）。参红通络方剂加减组中Bax、Caspase-3蛋白随参红通络方给药剂量的增加而明显降低,Bcl-2表达水平随参红通络方给药剂量的增加而明显升高（P<0.05）。结论 参红通络方加减可通过减轻心肌组织病理损伤并降低心肌细胞凋亡,可能与抑制Caspase-3、Bax表达、促进Bcl-2水平表达有关。     

冠心平对急性缺血犬心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:研究冠心平对冠脉结扎导致心肌缺血犬心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:36头Beagle犬,分成假手术组,心肌缺血模型组,心可舒组,小、中及大剂量冠心平组。前两组分别给予空白胶囊,其他各组每日两次口服相应剂量的药物,连续给药10天,10天后进行冠状动脉结扎实验。结扎180min后取心肌切片保存,检测心肌细胞凋亡指数(AI),并用免疫组化法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:与模型组相比,心可舒组及冠心平小、中、大剂量组的心肌凋亡指数水平均有所下降,Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减少,与模型组比较均具有统计学意义(P0.01)。结论:冠心平具有减轻缺血心肌细胞凋亡,提高Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值的作用。提示冠心平对缺血犬具有抑制心肌细胞凋亡,减轻细胞凋亡对缺血心肌的损伤的作用。     

含碘中药复方对AIT大鼠甲状腺组织凋亡调控蛋白Fas、FasL、Bcl-2、Bax的影响

目的 观察中药复方中不同剂量含碘中药(海藻、昆布)复方对实验性自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺自身抗体(TGAb、TPOAb)、凋亡调控蛋白Fas、FasL、Bcl-2、Bax的影响,并筛选中药复方中含碘中药的最佳剂量。方法 取SD雌性大鼠75只,随机分为正常对照组,模型组,含碘中药复方低、中、高剂量组。酶联免疫法检测各组大鼠甲状腺抗体水平;免疫组化法检测各组大鼠甲状腺组织凋亡调控蛋白Fas、FasL和Bcl-2、Bax的变化。结果 含碘中药复方各剂量组与模型组比较,甲状腺自身抗体水平均降低,甲状腺组织Fas、FasL、Bax的表达均减少,Bcl-2的表达增多,差异均有统计学意义(P < 0.01);含碘中药复方中、高剂量组与低剂量组比较,差异有统计学意义(P < 0.05),但中、高剂量组组间比较无明显差异(P > 0.05)。结论 含碘中药复方能够通过降低甲状腺自身抗体水平,抑制凋亡调控蛋白Fas、FasL、Bax的表达,增加Bcl-2的表达,起到治疗AIT的作用。     

肺抑瘤膏联合DC-CIK细胞对血清中Bcl-2、caspase-3、sFas、sFasL的影响

目的通过观察肺抑瘤膏联合DC-CIK细胞治疗晚期肺腺癌患者血清中Bcl-2、caspase-3、s Fas、s Fas L水平的变化,探讨肺抑瘤膏联合DC-CIK细胞在抗肿瘤过程中对凋亡因子水平的影响和作用机制。方法随机入选晚期肺腺癌患者54例,分为DC-CIK细胞治疗组、肺抑瘤膏+DC-CIK细胞治疗组,分别治疗4个月后观察血清Bcl-2、caspase-3、s Fas、s Fas L水平的变化。结果肺抑瘤膏+DC-CIK细胞治疗前后患者血清Bcl-2、caspase-3、s Fas、s Fas L水平分别进行组内比较,差异均有统计学意义。结论肺抑瘤膏联合DC-CIK细胞治疗可能通过影响凋亡相关因子Bcl-2和Caspase-3,死亡通路Fas/Fas L系统干预细胞凋亡过程,起到治疗晚期肺腺癌的作用。     

血府逐瘀汤干预急性心肌缺血心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的实验研究

目的 观察血府逐瘀汤对心肌细胞凋亡与相关蛋白表达干预的作用。方法 采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,15条犬随机分成时照组、心肌缺血组以及血府逐瘀汤组,每组5条。分别采用HE染色、DNA末端标记法（TUNEL）以及免疫组化法观察心肌组织病理变化、心肌细胞凋亡与相关蛋白表达的变化。结果 对照组无细胞变性与坏死,仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血纽有明显心肌组织坏死,心肌细胞凋亡增多,Bcl-2的表达明显减少,Bax的表达明显增多,与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）;血府避瘀汤组心肌细胞坏死及凋亡均显著减轻,Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少,与心肌缺血组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论 血府逐瘀汤可影响Bcl-2和Bax的表达,有效地抑制心肌细胞坏死及凋亡,减轻心肌细胞损伤,对缺血心肌有保护作用。     

实验性大鼠急性心肌缺血心肌细胞凋亡与Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的药物干预相关性研究

目的:探讨三七苦碟子提取物(简称SK,下同)干预实验性大鼠急性心肌缺血细胞凋亡表达的影响。方法:将60只健康雄性Wistar大鼠随机分成空白组、模型组、SK治疗高、中、低剂量组、阳性对照组,空白、模型组每日灌服生理盐水10mL/kg,SK治疗高、中、低剂量组分别给予SK稀释液340/274.72mg/kg、170/137.86mg/kg、85/68.68mg/kg灌胃,阳性对照组给予丹参滴丸稀释液405mg/kg灌胃,给药10日,末次给药30min后,采用盐酸异丙肾上腺素(ISO)腹部多点注射复制大鼠急性心肌缺血模型,于造模成功6h后开胸取心脏,将心室肌分别切开固定,采用免疫组化法检测各组Bcl-2、Caspase-3两种蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:SK能分别增加Bcl-2、抑制Caspase-3基因的蛋白表达,抑制和阻断急性心肌缺血大鼠心肌细胞过度凋亡的发生。结论:三七苦碟子提取物抗大鼠急性心肌缺血损伤的分子病理机制可能是通过调节Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,进而抑制心肌细胞凋亡来实现的。     

阳和化岩汤对乳腺癌模型大鼠Fas、FasL和Bcl-2表达的影响

目的:观察阳和化岩汤对乳腺癌大鼠Fas、FasL和Bcl-2表达的影响。方法:应用7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)诱导大鼠建立乳腺癌模型,药物干预4周后,HE染色观察大鼠乳腺组织形态学变化,免疫组化法检测Fas、FasL、Bcl-2蛋白表达的阳性率,Q-PCR法检测Fas、Bcl-2 mRNA表达。结果:阳和化岩汤可明显降低大鼠乳腺癌的发生率(P0.05),同时可升高Fas的表达(P0.05)、降低FasL和Bcl-2的表达(P0.05)。结论:阳和化岩汤具有预防乳腺癌的作用,其作用机制可能与调控细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达相关。     

针刺通过恢复Beclin-1和Bcl-2的平衡抑制MCAO/R大鼠细胞凋亡研究

目的 通过观察针刺对大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)大鼠海马区Beclin-1和Bcl-2表达的影响,探讨针刺降低脑缺血再灌注损伤(CIRI)后细胞凋亡与恢复Beclin-1和Bcl-2平衡有关的机制。。方法 80只SD大鼠随机分为正常组(Normal组)、假手术组(Sham组)和造模组。造模组再随机将模型成功大鼠分为模型组(MCAO/R组)、依达拉奉组(ED组)和针刺组(AC组)。AC组针刺大椎、百会、水沟穴进行干预,每12 h1次,共3次;Sham组、MCAO/R组和ED组只捆绑不针刺;其中AC组、MCAO/R组、Sham组大鼠腹腔注射生理盐水(5mg/kg),ED组腹腔注射依达拉奉(5mg/kg),每12h1次,共3次。使用改良Garcia神经功能评分评估神经损伤程度、TTC染色法观察脑梗死体积,免疫组化法检测缺血侧海马组织Bcl-2、Bax表达水平,Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1表达,TUNEL染色法检测缺血侧脑组织细胞凋亡。结果 再灌注后0 h,与Normal组和Sham组比较,MCAO/R、ED和AC组的Garcia神经功能评分显著降低(P&...     

阳和化岩汤对乳腺癌癌前病变细胞凋亡关键因子Bcl-2、细胞色素C表达影响的机制研究

目的:观察阳和化岩汤对乳腺癌细胞株Bcl-2、细胞色素C的蛋白及基因表达的影响,研究阳和化岩汤治疗乳腺癌的作用机制。方法:将乳腺癌癌前病变细胞株随机分为阳和化岩汤组、拆方温阳组、拆方活血组、拆方化痰组、拆方解毒组、空白对照组、三苯氧胺组,通过Western blot、RT-PCR法分别检测七组乳腺癌癌前变细胞株Bcl-2、细胞色素C的蛋白及基因表达,观察阳和化岩汤对乳腺癌的作用效果。结果:与空白对照组比较,三苯氧胺组、阳和化岩汤组明显降低Bcl-2蛋白及mRNA表达(P<0.05),三苯氧胺组、阳和化岩汤组、化痰组、解毒组明显提高细胞色素C蛋白及mRNA表达(P<0.05)。结论:阳和化岩汤可降低Bcl-2蛋白及mRNA表达,激活细胞色素C,加速癌细胞的凋亡,阻断相关通路活化,进而抑制癌变进程。     

消渴停对胰岛B细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：探讨消渴停降血糖的疗效和机理。方法：采用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射所致糖尿病大鼠模型，应用HE染色、免疫组化、原位杂交和透射电镜技术。观察消渴停对胰岛B细胞凋亡的影响。结果：消渴停具有预防胰岛B细胞凋亡，刺激胰岛B细胞分泌胰岛素和抑制Fas蛋白表达的作用。结论：消渴停具有抑制Fas基因诱导胰岛B细胞凋亡的作用。     

黄贝平甲胶囊对Graves病小鼠Bcl-2及Bax表达的影响

目的观察黄贝平甲胶囊与他巴唑联用对Graves病(毒性弥漫性甲状腺肿)小鼠Bcl-2及Bax表达的影响。方法用BALB/c雌性小鼠建立Graves病动物模型,在用药物干预后,采用放射免疫分析检测甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素(TSH)、TSH受体抗体(TRAb)及逆转录-PCR方法测定Bcl-2、Bax表达量。结果黄贝平甲胶囊组治疗后的TT4、TRAb较模型组明显降低(P<0.05),而TSH的改变则无统计学意义。他巴唑组、黄贝平甲胶囊与他巴唑联用组治疗后,TT4、TRAb均较模型组显著降低,而TSH明显升高(P<0.05);Bcl-2较模型组显著降低(P<0.05),Bax较模型组显著升高(P<0.05),以联合用药组更为明显。结论黄贝平甲胶囊与他巴唑联用对Graves病小鼠Bcl-2及Bax的表达有明显的调节作用,较单独使用黄贝平甲胶囊更有效。     

针刺对脑缺血后细胞凋亡相关基因Bcl-2Bax调节作用的研究

目的总结针刺对脑缺血后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax的调节作用,探讨其效应特点。方法基于近10年的现代实验研究文献,简述Bcl-2、Bax基因与脑缺血后细胞凋亡的相关性,着重从整体特征、时效特点及不同针刺治疗方案的作用比较等三方面,就针刺对脑缺血后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax的调节作用进行总结评述。结果针刺对Bcl-2、Bax基因的作用具有整体、双向性的调衡特征,能促进抗细胞凋亡基因Bcl-2蛋白的表达,抑制促细胞凋亡基因Bax蛋白的表达,增大Bcl-2/Bax比值,达到抗细胞凋亡的作用。结论针刺对Bcl-2、Bax基因的调节作用具有一定的时效特点,起效快,维持时间较长,介入治疗的最佳时机应在脑缺血早期。在总体效应基本趋同的基础上,不同的选穴组方或针刺方法,其调节作用又存在优劣程度的区别。