气道平滑肌细胞在哮喘气道重塑中的作用

气道重塑是气道慢性炎症的结果,包括气道壁增厚和基质沉积、胶原沉积、上皮下纤维化、平滑肌增生和肥大、肌成纤维细胞增殖及黏液腺、杯状细胞化生及增生、上皮下网状层增厚、微血管生成等病理改变.在这些病理变化中,气道平滑肌的改变被认为是导致气道高反应性和哮喘加重的重要因素.有很多因素导致气道平滑肌增生及肥大,如炎症介质、生长因子、细胞因子、细胞外基质蛋白和遗传因子等.最近的研究揭示气道平滑肌也是炎症介质的重要来源.建议在哮喘发病早期应用激素吸入治疗.     

气道平滑肌细胞在哮喘气道重塑中的作用

气道重塑是气道慢性炎症的结果,包括气道壁增厚和基质沉积、胶原沉积、上皮下纤维化、平滑肌增生和肥大、肌成纤维细胞增殖及黏液腺、杯状细胞化生及增生、上皮下网状层增厚、微血管生成等病理改变.在这些病理变化中,气道平滑肌的改变被认为是导致气道高反应性和哮喘加重的重要因素.有很多因素导致气道平滑肌增生及肥大,如炎症介质、生长因子、细胞因子、细胞外基质蛋白和遗传因子等.最近的研究揭示气道平滑肌也是炎症介质的重要来源.建议在哮喘发病早期应用激素吸入治疗.     

哮喘患儿气道炎症重塑表现和上皮细胞的凋亡

目的 观察哮喘患儿气道炎症、重塑表现以及支气管上皮细胞的凋亡情况,了解小儿哮喘的病理表现.方法 1997-07-2006-05,以北京儿童医院收治的18例哮喘患儿为哮喘组,17例非哮喘肺部疾病患儿为非哮喘肺部疾病组,6例因非肺部疾病死亡进行尸解的患儿为非哮喘非肺部疾病组.对哮喘和非哮喘肺部疾病组进行了支气管黏膜活检.对3组患儿均观察上皮细胞完整性、黏膜下炎症细胞浸润;Masson染色观察基底膜厚度,分别做免疫组化分析胶原Ⅲ、Caspase-3的表达,采用图像分析结果.结果 非肺部疾病死亡的6例患儿支气管黏膜完整,黏膜下无炎症细胞浸润,Masson染色显示基底膜无增厚,平均厚度为(0.08±0.03)μm,上皮细胞无凋亡,平均灰度值为(197.66±15.35);在18例哮喘组中,全部支气管黏膜上皮脱落明显,部分仅剩基底层细胞,甚至基底膜裸露,18例支气管黏膜下局灶性淋巴细胞浸润,其中2例并存少量或偶见嗜酸性粒细胞浸润,Masson染色显示16例基底膜增厚,2例轻度哮喘或病程短者,基底膜不厚,基底膜平均厚度为(0.299±0.078)μm,18例上皮细胞均发生凋亡,Caspase-3表达的平均灰度值为(141.72±23.66),胶原Ⅲ广泛沉积,平均灰度值为(122.79±9.59).在17例非哮喘肺部疾病组中,10例患儿支气管上皮细胞部分脱落,7例支气管上皮细胞完整,17例均有支气管黏膜下灶性淋巴细胞浸润,Masson染色显示7例基底膜增厚,平均基底膜厚度为(0.143±0.051)μm,部分上皮细胞发生凋亡,Caspase-3表达的平均灰度值为(184.01±18.21),胶原Ⅲ仅在7例局部表达,平均灰度值(188.56±32.81).结论 哮喘患儿存在气道炎症和气道重塑,但大多为淋巴细胞浸润而不是嗜酸性粒细胞浸润,轻度哮喘或病程短者,基底膜无明显增厚.细胞凋亡是哮喘患儿支气管上皮细胞损伤的机制.在部分非哮喘肺部疾病中,支气管上皮细胞发生脱落和凋亡、基底膜增厚,哮喘患儿的病理表现与非哮喘肺部疾病存在交叉和重叠.     

巨噬细胞在支气管哮喘气道重塑中的作用

气道重塑是支气管哮喘典型的病理学改变,其形成是多种因素相互作用的结果。目前认为,巨噬细胞受抗原刺激后持续活化,并释放纤维性生长因子,分泌基质金属蛋白酶,改变细胞外基质的动态平衡,在哮喘气道组织损伤、修复和重塑过程中起重要作用。该文综述了巨噬细胞在哮喘气道炎症和气道重塑中的变化、作用及发生机制。     

Hes-1与哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的关系研究

目的 观察Sprague-Dawley（SD）大鼠哮喘模型中Notch 信号通路靶基因Hes-1 的表达变化及与气道炎症和气道重塑的关系,初步探讨其在支气管哮喘发病中的作用。方法 将48 只SD 大鼠随机分成对照组和哮喘组,采用卵白蛋白致敏及激发建立哮喘模型,对照组以生理盐水替代致敏液,两组依据激发后不同处理时间点各分为4 周、8 周、12 周3 个亚组,每组8 只大鼠。光镜观察肺组织病理变化并检测支气管平滑肌厚度（Wam）;ELISA 法检测大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4 和INF-γ 水平;分别采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR 检测Hes-1 蛋白及mRNA 的表达水平。结果 随着激发后时间的延长,哮喘组大鼠Wam 逐渐增加,血清和BALF 中INF-γ 水平逐渐降低、IL-4 水平逐渐增加,且与同时间点对照组相比差异均有统计学意义（均PPP结论 Hes-1 蛋白及其mRNA 的表达增加与哮喘大鼠气道炎症因子水平和气道平滑肌重塑密切相关,并可能参与了哮喘的发生。     

气道平滑肌细胞与哮喘气道重塑

支气管哮喘是由变应原或其他因素引起的支气管高反应下出现的广泛气道狭窄性疾病,是一种常见的慢性呼吸道疾病.气道炎症和气道重塑是支气管哮喘的主要特征,气道重塑是造成哮喘不可逆性气流阻塞及肺功能损害的主要病理基础.气道重塑的最主要的病理学改变是气道平滑肌细胞增殖所致的气道平滑肌层增厚,在多种细胞因子的共同作用下引起的气道平滑肌细胞的肥大及数目的增加是平滑肌层增厚的重要原因.该文就气道平滑肌细胞在气道重塑中的作用作一综述.     

过表达髓样细胞触发受体2对过敏性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的 探讨过表达髓样细胞触发受体2 （TREM-2）对哮喘模型小鼠气道炎症及气道重塑的影响。方法 将40只BALB/c小鼠随机分成空白对照组、哮喘组、空载体组和TREM-2过表达组 （n=10）。采用卵白蛋白 （OVA）致敏及激发建立哮喘模型,对照组以生理盐水替代致敏液,空载体组和TREM-2过表达组分别转染腺病毒载体和TREM-2腺病毒。采用RT-PCR和Western blot法检测TREM-2、基质金属蛋白酶 （MMP）-2、MMP-9、解整合素-金属蛋白酶 （ADAM）33和ADAM8的表达。收集各组支气管肺泡灌洗液进行细胞计数、分类。酶联免疫吸附试验 （ELISA）检测血清总IgE水平及BALF中细胞因子水平。结果 与对照组相比,哮喘组小鼠TREM-2 mRNA及蛋白水平均有所下降 （P < 0.05）;Th2细胞因子及总IgE水平升高 （P < 0.05）;总细胞数及分类细胞数增多 （P < 0.05）。与哮喘组相比,过表达TREM-2组Th2细胞因子及总IgE水平下降 （P < 0.05）;总细胞及分类细胞数减少 （P < 0.05）;与气道重塑相关的MMP-2、MMP-9、TGF-β1、ADAM8和ADAM33的mRNA及蛋白表达均下调 （P < 0.05）。结论 TREM-2过表达减轻哮喘小鼠的气道炎症和气道重塑,从而为儿童哮喘的防治提供潜在的新靶点。     

姜黄素对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的影响

目的 了解姜黄素对哮喘小鼠气道高反应性及气道炎症的影响.方法 对30只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组及姜黄素干预哮喘小鼠.应用OVA溶液建立哮喘小鼠模型;对各组小鼠进行肺功能的检测;应用Giemsa染色测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液的炎症细胞计数;HE染色及PAS染色对各组小鼠行肺组织病理学检测;ELISA方法检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液中的IgE含量.结果 哮喘组小鼠在吸入乙酰甲胆碱(Mch)6.25 g/L浓度后,Penh值显著高于正常对照组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01),而姜黄素干预哮喘组较哮喘组明显降低,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).哮喘组小鼠气道盥洗液白细胞总数及嗜酸细胞数显著高于正常对照组,两者比较差异统计学意义(P＜0.01),而姜黄素干预哮喘组白细胞及嗜酸细胞数量明显较哮喘组减少,两者比较有差异有统计学意义(P＜0.01).哮喘组小鼠中BALF的IgE含量较对照组明显升高,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);而姜黄素干预哮喘组中BALF的IgE含量较哮喘组明显降低(P＜0.01).哮喘小鼠肺组织HE染色中可见支气管和血管壁周围有大量的炎性细胞浸润,以嗜酸细胞和淋巴细胞浸润为主,姜黄素干预哮喘组较其减少.PAS染色哮喘组小鼠杯状细胞、黏液分泌明显增多,姜黄素干预哮喘组较其减少.结论 姜黄素可以减轻哮喘小鼠的气道炎症,减轻气道黏液分泌、降低气道高反应性、降低肺泡灌洗液中的IgE含量.     

神经生长因子在支气管哮喘发病机制中的作用

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经营养因子之一,来源于多种免疫细胞及肺固有细胞,对多种免疫细胞具有调节作用.近年来研究认为NGF可能在支气管哮喘的发病机制中扮演重要角色.该文综述了NGF的来源细胞及其在调节支气管哮喘的气道炎性反应、气道高反应性及气道重塑中的作用.     

细菌溶解产物及全反式维甲酸对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 通过观察细菌溶解产物（OM-85BV）及全反式维甲酸（ATRA）对哮喘小鼠气道炎症的影响,探讨OM-85BV及ATRA对哮喘小鼠气道炎症的免疫调节机制。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、OM-85BV组、ATRA组和OM-85BV+ATRA组。采用卵清蛋白（OVA）致敏及激发建立支气管哮喘小鼠模型。第25~34天于每次雾化激发前OM-85BV组、ATRA组、OM-85BV+ATRA组均予相应药物灌胃。正常对照组腹腔注射致敏及雾化吸入激发,以及正常对照组、模型组灌胃均以生理盐水代替。末次激发后24~48 h麻醉并解剖小鼠,采集小鼠右肺灌洗液（BALF）,采用ELISA法检测IL-10、IL-17表达水平;采集小鼠左肺行苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变,采用荧光定量PCR检测ROR-γT mRNA的相对表达量。结果 与正常对照组相比,模型组小鼠支气管管腔缩小,管腔内分泌物增多,支气管周围及肺泡壁可见大量炎性细胞浸润;模型组IL-10水平降低（P < 0.05）,IL-17及ROR-γT mRNA水平升高（P < 0.05）。与模型组相比,OM-85BV组、ATRA组和OM-85BV+ATRA组小鼠支气管周围及肺泡壁可见炎性细胞浸润减少;OM-85BV组BALF中IL-10水平明显增高（P < 0.05）,IL-17及ROR-γT mRNA水平均下降（P < 0.05）;ATRA组BALF中IL-17及ROR-γT mRNA水平均下降（P < 0.05）。与OM-85BV组相比,ATRA+OM-85BV组ROR-γT mRNA的相对表达量明显增加（P < 0.05）。与ATRA组相比,ATRA+OM-85BV组BALF中IL-10及IL-17水平均有升高（P < 0.05）。结论 OM-85BV和ATRA均可改善哮喘小鼠呼吸道炎症。但是二者联合用药并没有较单独用药干预有更明显的疗效。     

支气管上皮在大鼠哮喘模型气道炎症和重塑中的作用

目的探讨哮喘时支气管上皮的形态学变化及其在气道炎症和气道重塑中的作用。方法于2003-01—2003-12对北京儿童医院应用卵蛋白(OVA)致敏和激发的方法制作的SD大鼠慢性哮喘模型,采用病理学和免疫组织化学等方法进行研究。观察对照组和OVA激发后24h组、1周组、2周组和4周组,支气管上皮形态学改变以及各组在支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞和上皮细胞数、气道周围浸润的嗜酸细胞数、上皮下纤维连接蛋白(FN)沉积以及支气管上皮细胞间粘附因子1(ICAM-1)和调节激活正常T细胞表达和分泌因子(RAN-TES)以及转化生长因子β1(TGFβ1)表达的不同。结果模型各组支气管上皮在光镜下主要表现为局灶性的破坏和脱落以及杯状细胞增生,电镜下表现为上皮细胞细胞器水肿、胞浆空泡增多和纤毛损害。模型各组BALF中各种白细胞和纤毛上皮细胞的绝对数与对照组相比均显著升高;模型各组气道周围浸润的嗜酸细胞与对照组相比显著增加,其中2周模型组气道周围浸润的嗜酸细胞与BALF中纤毛上皮细胞数成正相关(r=0.782,P=0.022)。2周和4周模型组上皮杯状细胞数、上皮下FN沉积与对照组相比显著增加。模型各组上皮细胞表达ICAM-1和RANTES与对照组相比显著升高。1周、2周和4周模型组上皮TGFβ1的表达与对照组相比显著升高,2周和4周模型组上皮TGF-β1的表达与上皮下FN的沉积呈正相关(r=0.42,P=0.021;r=0.516,P=0.004)。结论在大鼠哮喘模型中支气管上皮的形态和功能发生明显改变,支气管上皮通过分泌ICAM-1和RANTES等促炎因子启动和促进了哮喘的气道炎症;通过分泌TGFβ1等促纤维化因子参与了气道重塑的形成。     

血管活性肠肽对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的探讨血管活性肠肽(VIP)对哮喘小鼠气道炎症的影响,以及对Th17细胞/调节性T细胞(Treg)失衡的调控作用。方法将30只BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组、VIP组,每组10只。利用卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作急性哮喘小鼠模型;对照组致敏和激发阶段均以生理盐水代替OVA;VIP组每次OVA激发前,先以VIP溶液(20μg/m L)雾化吸入30 min。留取各组小鼠支气管肺泡灌洗液、肺组织等标本。利用苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液中Th17/Treg相关细胞因子水平;免疫组化及Real-time PCR检测肺组织中Th17细胞特异性转录因子RORγt及Treg特异性转录因子Foxp3表达情况。结果病理组织学结果显示VIP组小鼠肺组织气道炎症表现较哮喘组减轻。哮喘组小鼠BALF中IL-17浓度高于对照组(P0.01),VIP组IL-17浓度较哮喘组降低(P0.01),但仍高于对照组(P0.01)。哮喘组BALF中IL-10浓度低于对照组(P0.01),VIP组IL-10浓度较哮喘组升高(P0.01),但仍低于对照组(P0.01)。哮喘组小鼠肺组织RORγt mRNA及蛋白表达高于对照组(P0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达低于对照组(P0.01);VIP组肺组织RORγt mRNA及蛋白表达水平低于哮喘组(P0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达水平高于哮喘组(P0.05)。结论哮喘小鼠存在Th17/Treg免疫失衡,VIP可通过调控Th17/Treg免疫失衡而改善哮喘小鼠气道炎症。     

神经激肽1受体拮抗剂对哮喘小鼠气道炎症和高反应性的影响

目的探讨神经激肽1受体拮抗剂WIN 62,577对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的影响。方法SPF级BALB/c小鼠32只,随机分为4组:对照组、哮喘组、WIN 62,577干预组、地塞米松组。哮喘组、WIN 62,577干预组、地塞米松组,分别在第0、7、14天给予OVA致敏液0.2 ml腹腔注射;在21 d^28 d每天给予OVA激发液雾化吸入30 min/次,连续7 d;WIN 62,577干预组每次激发前1 h,给予WIN 62,577300μg,腹腔注射;地塞米松组,每次激发前1 h,给予地塞米松2 mg/kg,腹腔注射。无创肺功能仪检测各组小鼠的气道反应性,肺泡灌洗液炎性细胞计数,肺组织HE染色观察小鼠气道炎症情况。结果与哮喘组比较,WIN 62,577干预组小鼠烦躁不安、直立、弓背蜷缩、抓耳挠腮、呼吸急促、口唇发绀等表现减轻。在吸入不同浓度的乙酰胆碱激发后,与哮喘组比较,WIN 62,577干预组和地塞米松组小鼠Penh值明显降低(P<0.05)。与哮喘组比较,WIN 62,577干预组和地塞米松组小鼠肺泡灌洗液中白细胞计数及嗜酸性粒细胞数显著减少(P<0.01)。HE染色显示WIN 62,577干预组小鼠肺组织病理改变明显减轻,支气管上皮无明显脱落,黏膜水肿不明显,平滑肌增生减轻,炎性细胞浸润减轻,与地塞米松组小鼠气道变化相似。结论神经激肽1受体拮抗剂WIN 62,577可减轻哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性。     

表皮生长因子受体对哮喘小鼠气道重塑的影响及机制

目的：探讨哮喘小鼠气道重塑与表皮生长因子受体（EGFR）、肝素结合性表皮生长因子（HB-EGF）的关系以及EGFR酪氨酸激酶抑制剂（AG1478）对气道重塑的干预作用。方法：建立哮喘小鼠气道重塑模型,对肺组织切片行Masson和过碘酸雪夫（PAS）染色分别显示胶原沉积和气道黏膜杯状细胞增生情况。应用免疫组化和RT-PCR方法分别检测HB-EGF的蛋白和EGFR、HB-EGF mRNA表达的变化。结果：哮喘组出现气道重塑的特征性改变,HB-EGF、EGFR表达水平增高。AG1478干预组较哮喘组气道重塑有所改善,EGFR、HB-EGF表达降低（P<0.05）。结论：EGFR参与哮喘小鼠气道重塑,其酪氨酸激酶抑制剂AG1478可缓解气道重塑过程。AG1478可能通过下调EGFR及HB-EGF的表达以及抑制依赖于EGFR下游的细胞信号转导级联反应来缓解哮喘气道重塑过程。［中国当代儿科杂志,2010,12（2）：137-140］     

甲磺司特对哮喘大鼠气道炎症及IL-5的影响

目的 探讨甲磺司特（suplatast tosilate, IPD） 对哮喘大鼠IL-5 水平及气道炎症的影响。方法 50 只雄性成年Sprague-Dawley 大鼠（4 周龄）随机分为5 组：对照组、模型组、布地奈德组、IPD 早期干预组和IPD 晚期干预组,每组10 只。采用卵清白蛋白（OVA）致敏、激发,建立支气管哮喘大鼠气道炎症模型。观察肺泡灌洗液（BALF）炎性细胞总数和EOS 百分比,RT-PCR 检测肺组织IL-5 mRNA 的表达,ELISA测定BALF 上清液中IL-5 的含量。结果 模型组BALF 中炎性细胞总数及EOS 百分比、IL-5 含量及肺组织IL-5mRNA 表达量均较对照组明显增高（PP结论 IPD 可减轻哮喘气道炎症反应,可能与其抑制 IL-5 mRNA 的转录有关。     

哮喘气道重塑大鼠气道上皮超微结构改变

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哮喘气道上皮细胞与气道重塑的关系

哮喘时气道上皮细胞受损表现为上皮细胞分化为杯状细胞、黏液细胞化生,从而导致细胞外基质增加、气道壁纤维化和黏液高分泌,这些是由许多细胞因子、生长因子和信号传导途径及基因调控的.上皮细胞中神经内分泌细胞在免疫调节中起重要作用.气道上皮细胞受损后的修复过程是个复杂的过程,受很多因素的影响.     

瞬时电位感受器香草酸受体1在哮喘小鼠气道炎症中的作用研究

目的观察瞬时电位感受器香草酸受体1(TRPV1)通道活性改变对哮喘模型小鼠气道炎症程度的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、辣椒素(TRPV1激动剂)组、辣椒平(TRPV1拮抗剂)组、地塞米松组。采用卵清蛋白-氢氧化铝混合液腹腔注射致敏并雾化激发构建哮喘小鼠模型。辣椒素、辣椒平和地塞米松组分别在每次激发前30min腹腔注射辣椒素(30μg/kg)、辣椒平(10μmol/kg)及地塞米松(2mg/kg)。采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠肺部炎症程度;ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中IL-8和IL-13的含量;Real-Time PCR法检测小鼠肺组织中TRPV1m RNA的相对含量。结果与哮喘组比较,辣椒平组和地塞米松组肺部炎症程度减轻,辣椒素组炎症程度明显加重。与对照组比较,哮喘组、辣椒素组小鼠BALF中IL-13、IL-8含量及肺组织TRPV1m RNA表达明显增加(P0.05);与哮喘组比较,辣椒平组、地塞米松组BALF中IL-13、IL-8含量及肺组织TRPV1m RNA表达明显降低(P0.05),辣椒素组BALF中IL-13、IL-8含量明显增加(P0.05)。结论 TRPV1通道激活剂和通道抑制剂可影响哮喘小鼠肺部炎症程度。地塞米松可能通过调节TRPV1水平减轻气道炎症。