鼠视网膜的免疫原性

为探讨视网膜的免疫原性,选择ＤＢＡ／２鼠（ＭＨＣ为Ｈ２ｄ）为供体,Ｃ５７ＢＬ／６（ＭＨＣ为Ｈ２ｂ）或ＢＡＬＢ／Ｃ鼠（ＭＨＣ为Ｈ２ｄ）为受体,把ＤＢＡ／２鼠的半个视网膜移植于受体鼠的皮下,２周后检测迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）。结果示移植组的迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞介导的细胞毒效应（ＣＴＬ）均低于阳性对照ＤＢＡ／２鼠脾细胞组（Ｐ＜０．０１）,高于阴性对照假手术组（Ｐ＜０．０１）。提示ＤＢＡ／２鼠视网膜表达ＭＨＣⅠ类和Ⅱ类抗原及ＭｉｎｏｒＨＣ抗原,刺激受鼠产生较弱的细胞免疫应答。视网膜具有弱免疫原性。     

脑梗塞病人血浆LCAT活性与脂蛋白及红细胞膜脂质含量的关系

①目的探讨脑梗塞病人血浆卵磷脂－胆固醇酰基转移酶（ＬＣＡＴ）活性与脂蛋白及红细胞膜脂质含量的关系，②方法应用外加底物法铡定４８例脑梗塞病人和３６例健康人血浆ＬＣＡＴ括性，并检测血浆高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）和亚组分（ＨＤＬ２－Ｃ，ＨＤＬ３－Ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白Ａ－１和Ｂ（ａｐｏＡ－１，ａｐｏＢ）、红细胞膜胆固醇（ＲＢＣＭ－ＣＨ）和红细胞膜磷腊（ＲＢＣＭ－ＰＬ）的含量变化。③结果脑梗塞病人血浆ＬＣＡＴ活性、ＨＤＬ－Ｃ，ＨＤＬ２－Ｃ及ａｐｏＡ－１含量明显降低，血浆ＬＤＬ－Ｃ，ａｐｏＢ，ＲＢＣＭ－ＣＨ及ＲＢＣＭ－ＣＨ／ＲＢＣＭ－ＰＬ比值显著增高，与对照组比较差异有显著性（ｔ＝２．１４－３．２５，Ｐ＜０．０５，０．０１），血浆ＬＣＡＴ活性与ＨＤＬ－Ｃ，ＨＤＬ２－Ｃ及ａｐｏＡ－１呈正相关（ｒ＝０．３８４，Ｐ＜０．０１；ｒ＝０．２９８，Ｐ＜０．０５；ｒ＝０．３１９，Ｐ＜０．０５），而与ＬＤＬ－Ｃ，ＲＢＣＭ－ＣＨ呈负相关（ｒ＝－０．２９０，－０．３２３；Ｐ＜０．０５）。④结论脑梗塞病人脂质代谢异常与血浆ＬＣＡＴ活性降低有关。     

大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

急慢性肾功能衰竭常见血清酶的变化及其临床意义

目的探讨急慢性肾衰患者体内常见血清酶含量的变化及两者的差异性。方法急性肾衰（ＡＲＦ）和慢性肾衰（ＣＲＦ）患者及正常健康人３组各３０例,采用全自动生化分析仪检测血清中碱性磷酸酶（ＡＣＰ）,淀粉酶（ＡＭＹ）,肌酸激酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及α一羟丁酸脱氢酶（ＨＢＤＨ）。结果（１）与正常健康人比较,急慢性肾衰患者血清ＡＭＹ、ＬＤＨ、ＨＢＤＨ均显著升高（Ｐ＜０．０１）,ＣＫ次之（Ｐ＜０．０５）;血清ＡＬＰ在ＣＲＦ组明显升高（Ｐ＜０．０５）,而ＡＲＦ组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。（２）与ＣＲＦ组比较,ＡＲＦ组血清ＬＤＨ、ＨＢＤＨ明显升高（Ｐ＜０．０１）,而ＡＭＹ、ＡＬＰ明显降低（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）;血清ＣＫ两组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论血清ＡＬＰ、ＡＭＹ、ＬＤＨ和ＨＢＤＨ变化有助于临床上鉴别急、慢性肾衰。     

肌钙蛋白T定性测定对急诊科急性胸痛病人鉴别诊断的意义

分析糖尿病患者骨代谢生化指标改变的临床意义。方法：选取１８７名糖尿病住院病人,根据性别分为两大组,各组又根据糖尿病类型及正常对照分为３小组,每小组内根据年龄≤５０岁和＞５０岁再分组,测定血清中骨钙素（ｂｏｎｅ ＧＬＡ－ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ,ＢＧＰ）,降钙素（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ,ＣＴ）,甲状旁腺激素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ, ＰＴＨ）,抗酒石酸酸性磷酸酶（ｔａｒｔｒａｔｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ａｃｉｄ　 ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ,ＴＲＡＰ）,２５－羟维生素 Ｄ_３（２５ ｈｙｄｒｏｘｙ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ_３, ２５－ＯＨＶｉｔＤ３）,１,２５－双羟维生素 Ｄ３（１,２５－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ_３, １,２５－（ＯＨ）_２ＶｉｔＤ_３）。以本院同年龄,同性别正常职工６０名为正常对照。结果：Ⅰ型糖尿病≤５０岁年龄组,无论性别,血ＢＧＰ、ＣＴ、１,２５－（ＯＨ）_２　ＶｉｔＤ_３均低于正常对照和血型糖尿病组,ＰＴＨ高于正常对照组,ＴＲＡＰ、２５－ＯＨＶｉｔＤ_３与正常对照和Ⅱ型糖尿病组无差异。Ⅱ型糖尿病组与正常对照组以上各指标差异无显著性。结论：Ⅰ型糖尿病组骨代谢血生化有改变,尤其是     

41例乙型病毒性肝炎患者19项免疫指标分析

用间接免疫荧光、免疫透射比浊法检测各型乙肝患者的１９项免疫指标，结果ＣＤ％，ＣＤ／ＣＤ　比值与正常对照相比有显著差异（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。ＡＨ组ＣＤ＋ＣＤ一ＣＤ结果与ＣＡＨ，ＣＰＨ组相比均有显著差异（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。Ｂ细胞无组间差异。３组患者ＰＢＬ绝对数＞１２００／ｍｍ３；组间比较，仅ＡＨ与ＣＰＨ组差异显著（Ｐ＜０．０５）。Ｉｇ，Ｃ３，Ｃ４与正常组比较，ＩｇＧ升高（Ｐ＜０．０５），Ｃ４降低（Ｐ＜０．０ｌ）．ＣＡＨ，ＣＰＨ组ＩｇＭ较ＡＨ组高，Ｃ４较ＡＨ组低，ＣＡＨ较ＣＰＨ组更低，均具统计学意义。结果表明，ＣＤ细胞降低是引起乙肝患者肝细胞损伤首要的免疫因素。     

50例急性心肌梗塞患者血脂水平检测报告

目的：对脂质代谢与ＡＭＩ之间的关系进行研究。方法：采用酶法检测血清总胆固醇（ＴＣ）和甘油三酯（ＴＧ）；用磷钨酸钠Ｍｇ２＋一步沉淀法检测高密度脂蛋白（ＨＤＬＣ）及其亚组分（ＨＤＬ２Ｃ和ＨＤＬ３Ｃ）；用单向火箭负度电泳法检测载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）和载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）对ＡＭＩ患者（５０例）和对照组（６０例）进行取血检测。结果：疾病组血清ＴＧ，ａｐｏＢ水平比对照组明显升高，两组比较差异有显著性（ｔ＝２．１１４，３．３８９，Ｐ均＜０．０５）；而ＨＤＬＣ，ＨＤＬ２Ｃ，ａｐｏＡＩ水平及ＨＤＬ２Ｃ／ＨＤＬ３Ｃ，ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ比值比对照组明显降低，两组间比较差异均有显著意义（ｔ＝１．９９６～２．７６２，Ｐ＜０．０５，０．０１）；结论：血清ａｐｏＢ水平升高可促进冠心病动脉粥样硬化的形成和发展     

慢性嗜酒者血脂,脂蛋白,载脂蛋白A—I,B的测定及其意义

对１００例男性慢性嗜酒者进行血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、载脂蛋白Ａ－Ｉ（ＡＰＯＡ Ｉ）、载脂蛋白－Ｂ（ＡＰＯＢ）６项指标检测，并对其中２８例中、大量饮酒者改为小量或药物治疗３￣６个月后跟踪监测上述６项指标，结果表明：中、大量饮酒者血中ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ、ＡＰＯＢ升高（Ｐ〈０．０１），ＨＤＬ－Ｃ、ＡＰＯＡ Ｉ水平降低     

血清脂质和脂质过氧化物及超氧化物歧化酶水平与冠状动脉…

作者测定了５０例冠心病（ＣＡＤ）患者及６０例下深的血清总胆固醇（ＴＣ），甘油三酯（ＴＧ）６高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ），载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ），ａｐｏＢ，以及脂质过氧化物（ＬＰＯ）红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的含量，结果表明，ＣＡＤ患者与正常人相比，ａｐｏＢ及ＬＰＯ水平明显增高（Ｐ均〈０．０１），ＨＤＬ－及ａｐｏＡＩ水平明显降低（Ｐ均〈０．０１）；ａｐｏＡＩ，ａｐｏＢ，ＨＤＬ－Ｃ及ＬＰＯ     

香烟烟雾提取物对兔气道平滑肌细胞毒性损伤及对一氧化氮生成的影响

目的探讨吸烟对气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的影响。方法分别以０、５％、１０％和３０％的香烟烟雾提取物（ＣＳＥ）孵育兔ＡＳＭＣ，测定其细胞存活率、丙二醛（ＭＤＡ）含量、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出及一氧化氮（ＮＯ）稳定代谢终产物亚硝酸盐（ＮＯ－２）水平。用ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ检验及直线回归作统计学分析。结果在４８ｈＣＳＥ显著增加了ＡＳＭＣ的ＮＯ－２释放（１０％、３０％ＣＳＥ分别较对照组增加７５．７％和１１５．３％，Ｐ＜０．０１）；降低了细胞存活率，增加了细胞ＭＤＡ含量和ＬＤＨ漏出（Ｐ均＜０．０１），毒性损伤指标与ＮＯ－２的释放高度相关（ｒ分别为－０．７２１、０．７０６和０．７７３，Ｐ均＜０．０１）。结论吸烟可能对ＡＳＭＣ具有直接损伤作用，ＣＳＥ可能通过ＮＯ介导气道炎症损伤过程。     

改良的成年大鼠骨髓源性破骨细胞诱导培养体系

为在短时间内获得更多的破骨细胞,在近几年国内成年大鼠骨髓源性破骨样细胞培养的基础上加以改良,以建立一个简便、有效的诱导培养体系.收集3月龄SD大鼠股骨骨髓细胞悬液,置入含有20%胎牛血清、1,25(OH)2VitD3的培养液中.将培养体系分为4组A组为对照组,未加入粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和地塞米松(Dexamethasone);B组加入GM-CSF;C组加入Dexamethasone;D组加入GM-CSF和Dexamethasone,观察各组破骨样细胞(osteoclast-like cell,OLC)及骨陷窝形成情况,并计数比较.培养第6 d,便可见所培养细胞衍变为形态不规则、有伪足形成的多核巨细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色(+),且具有骨吸收作用,符合破骨细胞的鉴定标准.D组所形成OLC及骨陷窝数目较其它3组明显增多(P＜0.01),且OLC出现较早.结果表明成功地建立了一个以1,25(OH)2VitD3、GM-CSF、Dexamethasone为诱导分化条件的培养体系.所获得破骨细胞数量多,特征明显,且培养所需时间短.     

成人破骨细胞的体外培养

目的 建立成人破骨细胞体外培养的方法，观察成骨细胞对破骨细胞分化、增殖和功能的影响，为进一步研究补肾中药防治骨溶解和骨质疏松症提供基础。材料和方法 从成人骨髓中提取单核细胞，以1，25—(OH)2D3作为刺激因子，分3组培养：单核细胞与成骨细胞共同培养，单核细胞单独培养，单核细胞与成骨细胞条件培养液培养。生物显微镜下观察细胞的分化过程，HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)染色方法作组织化学观察，扫描电镜(SEM)观察骨吸收功能。结果 在单核细胞与成骨细胞共同培养组，可见单核细胞逐步融合成多核细胞；HE染色和Trap染色可见阳性多核细胞；扫描电镜观察可见骨片上有骨吸收陷窝形成。其他两组则未得到上述结果。结论 成人骨髓单核细胞在一定培养条件下能分化成熟为具有典型的破骨细胞表型的多核细胞：Trap染色阳性，具有骨吸收功能。与成骨细胞的直接接触是破骨细胞分化、增殖和发挥功能的必不可少的条件。     

1,25(OH)2维生素D3诱导大鼠骨髓单核细胞形成破骨细胞

目的 观察1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2 D3]诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成多核破骨细胞的作用.方法 实验分为单核细胞诱导组和全骨髓诱导组,每组各10只大鼠.密度梯度离心法分离大鼠骨髓中的单核细胞,α-MEM培养液中加入10-8 mol/L的1,25(OH)2 D3诱导单核细胞向破骨细胞分化.利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、倒置相差显微镜和扫描电镜,观察诱导不同时相TRAP阳性(TRAP )多核细胞的形态学特征、特异性酶表达、以及骨吸收陷窝.进而计数诱导的破骨细胞数量,鉴定其功能活性,并与全骨髓诱导方法比较.结果 骨髓单核细胞诱导组在培养第7 d出现TRAP 多核细胞,第14 d TRAP 多核细胞数量达峰值,第21 d TRAP 多核细胞数量开始减少.从培养第14 d到第23 d,单核细胞诱导组TRAP 多核细胞数量多于全骨髓诱导组(P＜0.05);培养第10 d到第23 d单核细胞诱导组骨吸收陷窝数量多于全骨髓诱导组 (P＜0.05).单核细胞诱导组破骨细胞数量高峰期可持续7 d,全骨髓诱导法仅持续3 d.结论 1,25(OH)2 D3能够诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成破骨细胞;所诱导的破骨细胞的数量和峰值持续时间、以及骨吸收活性均高于全骨髓诱导方法.     

两种破骨细胞培养方法的比较及其吸收骨质的动态观察

目的:比较分析破骨细胞(osteoclast, OC)体外分离培养的方法,并动态观察其形态、分化及功能,为进一步探讨药物对OC性骨吸收的作用奠定基础.方法:采用两种OC的培养方法,即从新生24 h的兔长干骨骨髓腔内壁机械分离成熟OC和1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成破骨样细胞(osteoclast-like cell, OLC)的方法,对获得的OC进行形态学和功能观察.结果: 倒置显微镜下观察,OC是一种多核巨细胞,有伪足并借助伪足的凹凸伸缩而变化形态、运动行走;HE染色均可见OC多核、胞浆有空泡;特异性抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色可见OC胞浆阳性,呈酒红色,多核.体外OC与骨片共同培养形成骨吸收陷窝,且在培养的7 d内陷窝数目和面积逐渐增大.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成OLC,其形态结构特征与成熟OC相同,诱导出的破骨样细胞数目多于机械分离的方法,但每个细胞胞核数目总体上少于机械分离的方法,而且胞核多位于细胞周边,在骨片上形成的陷窝也较小而浅;培养液上清中的钙离子含量和酸性磷酸酶(acid phosphatase ,ACP)含量在培养的1～12 d内随时间逐渐增加.结论: 针对不同实验目的可以采用不同的分离培养OC方法.从骨髓腔内壁机械分离培养的方法可获得骨吸收功能较活跃的OC.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成的OLC数量较多,适于对OC分化过程的研究.     

小檗碱对大鼠骨髓源性破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的：研究小檗碱对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响,探讨小檗碱抑制骨吸收的细胞学基础。 方法：采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-（OH）2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜观察细胞形态,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate—resistant acid phosphatase,TRAP）染色和观察骨片上骨吸收陷窝的形成鉴定破骨细胞。磷酸苯二钠法测定破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,计算机图像分析技术测定骨片上破骨性骨吸收陷窝的面积。 结果：小檗碱在0．1～10μmol／L范围内,浓度依赖性地抑制TRAP阳性多核破骨细胞的形成和TRAP活性,减少破骨性骨吸收陷窝的面积;在10μmol／L浓度下,对破骨细胞的抑制作用最强,对TRAP阳性多核破骨细胞的形成和TRAP活性的抑制率分别达到了60．45％和42．12％,骨吸收陷窝面积减少72．69％。 结论：小檗碱通过抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能减少骨质的丢失。     

1,25-二羟维生素D3对小鼠成骨细胞OPG和RANKL基因表达的影响

目的观察1,25-二羟维生素D 3[1,25(OH)2D 3]对体外培养的小鼠成骨细胞osteoprotegerin(OPG)和receptor activator of NF-κB ligand(RANKL)基因表达的作用.方法取30只出生24 h内的新生小鼠,在无菌条件下取颅盖骨,去除纤维结缔组织,用胰蛋白酶-胶原酶消化法进行成骨细胞的原代培养.取第3～5代的成骨细胞,分成对照组和实验组,在实验组培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-11 mol/L),培养48 h后,取出培养液,-70℃冻存备用.从培养瓶中贴壁细胞提取总RNA,应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达.应用EUSA方法检测培养液中OPG蛋白的浓度.结果各浓度1,25(OH)2D3作用的成骨细胞中,OPG的mRNA表达均较对照组显著减弱,并随1,25(OH)2D3浓度的增加而表达减弱,呈现明显的浓度依赖性;实验组RANKL mRNA的表达较对照组表达明显,且随1,25(OH)2D3浓度增加而增强;实验组成骨细胞中OPG蛋白的表达明显低于对照组(P＜0.05).结论1,25(OH)2D3抑制小鼠成骨细胞OPG的表达,同时增加RANKL的表达.     

1,25双羟维生素D3及转化生长因子β1对人胚成骨细胞增殖和分化的影响

目的　研究 1,2 5双羟维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 VD3 ]及人转化生长因子 β1(hTGF β1)对人胚成骨细胞增殖和分化的影响。方法　体外培养人胚成骨细胞 ,经 1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1作用后 ,通过四唑盐 (MTT)比色法观察细胞增殖 ;检测细胞培养液中碱性磷酸酶 (ALP)活性及骨钙素 (OC)含量 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法观察细胞中TGF β信号传导关键蛋白 SMAD蛋白mRNA水平的变化。结果　MTT比色发现 1,2 5 (OH) 2 VD3 组的吸光度值 (OD值 )较对照组下降 30 6 % (0 0 86±0 0 2 2比 0 12 4± 0 0 31,P <0 0 5 )。细胞培养液中ALP活性在 1,2 5 (OH) 2 VD3 组、hTGF β1组以及二者联合应用组均有显著增高 ,为对照组的 1 3～ 2 0倍 (P <0 0 5 )。其中 ,当hTGF β1浓度为 1× 10 -6g/L时 ,1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1对人胚成骨细胞ALP的分泌存在协同刺激作用。 1,2 5 (OH) 2 VD3 与 1×10 -6g/L和 1× 10 -5g/L浓度的hTGF β1合用使得细胞培养液中OC水平增加 (P <0 0 5 ) ,但未发现二者的协同作用。当 1,2 5 (OH) 2 VD3 与 1× 10 -6g/L的hTGF β1合用时SMAD3mRNA水平达高峰 ,约为对照组的 6倍。结论　 1,2 5 (OH) 2 VD3 抑制人胚成骨细胞增殖 ,促进其分化。 1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1     

淫羊藿黄酮苷及其代谢产物调控骨代谢的体外实验研究

为探讨淫羊藿黄酮苷及其代谢产物对骨形成和骨吸收的调控作用 ,利用酶水解法和酸水解法分别制备了淫羊藿黄酮苷的 2种代谢产物。采用鼠颅盖骨机械法分离和体外培养获得成骨细胞 ,采用新生兔长干骨机械分离法获得破骨细胞 ,采用VD3诱导鼠骨髓的造血干细胞分化成破骨样的多核巨细胞。实验组培养液为 1 0 %胎牛血清 +αMEM培养液 +不同浓度淫羊藿黄酮苷及代谢产物 ,对照组不加药。分别用四甲基偶氮唑盐和3H TdR法检测成骨细胞的增生和碱性磷酸酶 ,用骨钙素衡量成骨细胞的分化状态 ,用Actin ring染色观察破骨细胞形态变化 ,用图像分析仪分析体外骨吸收陷窝面积 ,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察OCL的形成 ,用RT PCR法检测和破骨样细胞形成有关的分子机制。发现 :淫羊藿黄酮苷及其代谢产物对大鼠成骨细胞的增生有明显的刺激作用 ,并能够促进成骨细胞合成分泌碱性磷酸酶 ,但对成骨细胞晚期分化指标骨钙素无显著作用。同时 ,使破骨细胞Actin ring回缩 ,从而使骨吸收陷窝面积减少。此外 ,淫羊藿黄酮苷及其代谢产物通过影响成骨细胞中RANKL和OPG的表达而达到抑制破骨样细胞形成。以上结果说明 ,淫羊藿黄酮苷及其代谢产物一方面抑制破骨样细胞形成和成熟的破骨细胞对骨基质的吸收 ,另一方面还能够通过刺激骨形成来调     

饲补肾中药大鼠血清对成骨细胞-破骨细胞共育系中破骨细胞功能的影响

目的探讨喂饲补肾中药大鼠血清在成骨细胞-破骨细胞培养体系中对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法取SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,利用共育系使二者生活在同一环境中,施加高、中、低剂量的饲补肾中药大鼠血清,并与对照组及单独培养的破骨细胞进行比较,酶动力学法测定培养上清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的活性,利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在Leica Quantimet 500图像分析仪下测定骨吸收陷窝的面积和数目。结果共育系中对TRACP活力的抑制及骨陷窝面积与数目的减少以中剂量组作用最为明显(与对照组比较P<0.01),单独培养3个剂量组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),以中剂量组作用最为明显(P<0.01)。结论饲补肾中药大鼠血清可以抑制共育系中破骨细胞的骨吸收功能。     

1,25-(OH)_2D_3及复方丹参对大鼠异基因骨髓移植后T细胞亚群和细胞因子的影响

目的 观察1,25-(OH)_2D_3及复方丹参对异基因骨髓移植(Allo-BMT)后大鼠T细胞亚群和细胞因子的影响.方法 以雄性SD大鼠为供鼠.雌性Wistar大鼠为受鼠,40只受鼠随机分成aGVHD组及干预组,干预组包括1,25-(OH)_2D_3组、复方丹参组、两约联合组,每组10只.观察各组T细胞亚群(CD4~+、CD8~+)和细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10)的变化.结果 当aGVHD表现较明显时,CD4~+、CD8~+增高,以CD4~+增高为主,与移植前比差异有统计学意义(P<0.05);经干预方案处理后CD4~+、CD8~+增高的幅度较aGVHD组低,差异有统计学意义(P<0.05),以CD4~+更为明显;动态监测显示与Th1相关的细胞因子IL-2、IFN-γ在各干预组呈下降趋势,与Th2相关的细胞因子IL-10呈上升趋势,均在第21天变化较为明显,与第0天相比有统计学差异(P＜0.05);IL-4无显著性变化.结论 1,25-(OH)_2D_3及复方丹参能够降低CD4~+T淋巴细胞的数量,具有调节Th1/Th2平衡,抑制Th1的增殖及功能发挥,促进Th2细胞增殖,发挥免疫耐受的作用.