对"碘致NOD.H-2h4小鼠自身免疫甲状腺炎的实验研究"的编后评论

我国实施全民食盐碘化(USI)以来,碘与甲状腺疾病,如甲状腺功能亢进、甲状腺结节及自身免疫性甲状腺炎(AIT)发病的关联一直备受关注,许多学者对此进行了有益的探讨.本期刊登了滕晓春等所著"碘致NOD.H-2h4小鼠自身免疫甲状腺炎的实验研究"一文,作者应用国际公认的AIT动物模型,通过饮水中加碘并与对照鼠比较,结果显示NOD.H-2h4小鼠饮用加碘水后AIT患病率呈时间依赖性升高,同时观察到炎症程度动态变化及炎性细胞类型演变规律,以及甲状腺炎性细胞的浸润程度与甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平呈明显相关性.     

碘致甲状腺滤泡上皮细胞损伤在甲状腺炎发生机制中的探讨

目的 探讨过量碘对甲状腺滤泡上皮超微结构的影响,从而探讨甲状腺损伤与自身免疫甲状腺炎之间的关系.方法 NOD.H-2h4和昆明小鼠随机分人饮用正常水组和5倍、10倍、100倍高碘水组.各组动物分别于实验开始后4、8及24周处死,锇酸固定,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色,透射电镜成像.结果碘过量造成NOD.H-2h4小鼠甲状腺上皮细胞过氧体和次级溶酶体数量增多、上皮细胞凋亡、坏死、滤泡结构破坏和炎细胞的浸润,而且这种损伤与碘剂量呈正相关.结论 碘过量对甲状腺上皮细胞的氧化损伤作用可能是自身免疫甲状腺炎产生的必要条件.     

碘致NOD.H-2h4小鼠自身免疫甲状腺炎的剂量、时间效应关系

自身免疫甲状腺炎是一种常见的器官特异性自身免疫性甲状腺疾病，其发生是遗传和环境因素等多种因素共同作用的结果，本课题组前期的流行病学研究也证实，碘作为一种重要的环境因素和免疫刺激因子可以促进自身免疫性甲状腺炎的发生和发展。NOD．H-2^h4小鼠是自身免疫甲状腺炎的高易感鼠，本研究利用其模拟自身免疫甲状腺炎的易感人群，探讨碘过量与自身免疫甲状腺炎之间的剂量、时间效应关系。[第一段]     

碘诱发NOD和Balb/c小鼠甲状腺炎的实验研究

目的 观察碘过量对不同遗传背景小鼠甲状腺炎诱发作用的异同.方法 选用NOD和Balb/c小鼠各14只,每个品系小鼠均分为对照组、碘化钠(NaI)组,分别饮用纯净水和0.05%NaI水8周.放射免疫法(RIA)和ELISA法分别检测血清中总T4(TT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和促甲状腺激素(TSH)水平,光镜下观察甲状腺形态学改变和免疫组化染色的甲状腺细胞凋亡情况,四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测颈部淋巴结和脾淋巴细胞对甲状腺球蛋白刺激的增殖反应.结果 饮碘水8周后,NOD和Balb/c小鼠甲状腺相对质量,NaI组[(104.83±14.52)、(155.79±20.77)mg/kg]较对照组[(71.80±20.42)、(105.15±21.98)mg/kg]明显增加(t值分别为-3.293、-4.429,P均<0.01),甲状腺组织表现为滤泡扩张、胶质潴留;NOD、Balb/c小鼠血清TT4水平,NaI组[(29.52±4.42)、(19.53±2.35)nmol/L]较对照组[(33.40±5.38)、(23.47±6.22)nmol/L]呈下降趋势(t值分别为1.374、1.567,P>0.05);血清TSH水平,与对照组[(3.55±1.41)、(5.55±0.56)μg/L]比较,Balb/c小鼠NaI组[(4.14±1.71)μg/L]呈升高趋势(t=-0.705,P>0.05),NOD小鼠NaI组[(6.98±0.66)μg/L]明显升高(t=-3.562,P<0.01);NOD、Balb/c小鼠NaI组TgAb(1281、1364 cpm)和TPOAb水平(2.50×103、0.14×103U/L)与对照组(1297、1220 cpm,3.17×103、0.03×103 U/L)比较没有明显变化(Z值分别为-0.081、-0.703,-0.244、-1.293,P均>0.05).NOD小鼠NaI组甲状腺细胞凋亡数量较BMb/c小鼠增加,并且甲状腺内可见大量淋巴细胞浸润,组织结构破坏和纤维化的灶性病变;NOD小鼠淋巴结和脾淋巴细胞数量,NaI组(1.100±0.014、1.076±0.033)较对照组(0.993±0.011、1.005±0.003)增加(t值分别为-11.672、-4.314,P均<0.01).结论 碘可致Balb/c鼠甲状腺肿大,功能下降;NOD鼠除七述病变外,甲状腺发生明显炎症反应,并且针对Tg产生了致敏的淋巴细胞.碘过量可诱发NOD鼠发生自身免疫性甲状腺炎.     

碘过量和甲状腺球蛋白免疫诱发NOD小鼠甲状腺炎的病变特征

目的 观察碘过量和甲状腺球蛋白(Tg)免疫诱发甲状腺炎的病变特点,进一步了解碘过量在自身免疫性甲状腺炎发病中的作用机制.方法 选用NOD小鼠,饮0.05%碘化钠(NaI)水和(或)Tg皮下免疫.观察甲状腺形态学改变和细胞凋亡情况;检测血清中TT4、TSH、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平;检测颈部淋巴结和脾脏淋巴细胞对Tg刺激的增殖反应和脾脏细胞培养上清中白细胞介素4(IL-4)和1γ-干扰素(IFN-γ)水平;实时荧光定量PCR法检测甲状腺绀织内IL-4、IFN-γ、趋化冈子配体10(CXCL10)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)mRNA的表达.结果 碘过量组甲状腺滤泡扩张、胶质潴留;大昔淋巴细胞浸润和结构破坏;滤泡上皮细胞凋亡数量增加(34.66±2.78//vs 5.1 1±0.62,P<0.01);总T4下降、TSH升高,无自身抗体产生;淋巴结和脾脏细胞对Tg刺激增殖实验呈阳性反应.脾脏细胞上清中IL-4水平无升高,而IFN-升γ高[(1.272±0.049 vs 1.139±0.025)ng/L,P<0.01];甲状腺组织中除了IL4外,IFN-γ、CXCL10、ICAM-1 mRNA表达升高(均P<0.01).而Tg组甲状腺内有少量散在淋巴细胞浸润,产生了甲状腺自身抗体,脾脏细胞上清中IL-4水平升高[(18.508±0.113绑13.368±0.016)ng/L,P<0.01].碘和Tg联合作用炎症反应加重.结论 碘过量所致的NOD小鼠甲状腺炎主要是以Th1反应为主的器官特异性自身免疫性疾病.碘过量联合Tg免疫对诱发实验性自身免疫性甲状腺炎具有协同作用.     

慢性碘过量对具有自身免疫遗传倾向的NOD.H-2h4小鼠甲状腺功能和形态影响的实验研究

探讨慢性碘过量对具有自身免疫遗传背景的NOD.H-2h4小鼠甲状腺组织形态、超微结构和功能影响的剂量、时间效应关系.碘过量以剂量依赖和时间依赖的方式导致NOD,H-2h4小鼠甲状腺肿和甲状腺上皮细胞超微结构的损伤.     

慢性碘过量对具有自身免疫遗传倾向的NOD.H-2h4小鼠甲状腺功能和形态影响的实验研究

探讨慢性碘过量对具有自身免疫遗传背景的NOD.H-2h4小鼠甲状腺组织形态、超微结构和功能影响的剂量、时间效应关系.碘过量以剂量依赖和时间依赖的方式导致NOD,H-2h4小鼠甲状腺肿和甲状腺上皮细胞超微结构的损伤.     

碘过量和多聚肌苷酸-聚胞苷酸及甲状腺球蛋白诱发小鼠甲状腺炎对Toll样受体3表达的影响

目的 观察碘过量(high iodine,HI)和多聚肌苷酸-聚胞苷酸[Polyinosinic-Polycytidylic acid,Poly (I:C),Poly]及甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)诱发小鼠甲状腺炎对Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)表达的影响,探讨TLR3在自身免疫性甲状腺炎发病中的作用.方法 NOD(Non-obese diabetic)小鼠42只,体质量(20±3)g.按体质量将小鼠随机分为6组:对照组、HI组、Poly组、TG组、HI+TG组、HI+Poly组,每组7只.对照组:饮用去离子水,腹腔注射生理盐水0.1 ml,每天1次,连续1周,在处死小鼠前1周隔日1次,同样剂量生理盐水再注射3次;HI组:饮用0.05%的碘化钠去离子水,腹腔注射生理盐水(同对照组);Poly 组:饮用去离子水,腹腔注射0.1 ml Poly(1 g/L,按5 mg/kg体质量),每天1次,连续1周,处死前1周隔日1次,同剂量Poly再注射3次;TG组:饮去离子水,腹腔注射生理盐水(同对照组),皮下免疫猪TG 0.1 mg,在喂养第4、8周时分别再加强免疫1次,剂量减半;HI+Poly组:给药方法同HI组和Poly组;HI+TG组:给药方法同HI组和TG组.喂养8周后处死小鼠,取出甲状腺组织,冰冻切片、常规HE染色,光镜下观察小鼠甲状腺组织形态学变化:根据甲状腺组织炎细胞浸润数量及浸润范围、滤泡破坏范围等进行炎症程度分级;应用TLR3抗体对甲状腺切片进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察TLR3的表达,体视学分析甲状腺TLR3阳性细胞数密度变化.结果光镜下,Poly组甲状腺未见炎细胞浸润,HI组和TG组小鼠甲状腺都有不同程度的炎细胞浸润,HI+TG组和HI+Poly组甲状腺炎症细胞浸润和甲状腺滤泡破坏严重,炎症分级均在"++"以上.免疫荧光显示.HI组和Poly组的甲状腺滤泡上皮细胞可见到TLR3表达,在HI组和HI+Poly组炎症区域出现TLR3表达强阳性的炎症细胞.体视学分析甲状腺TLR3阳性细胞数密度,对照组、HI组、Poly组、TG组、HI+TG组、HI+Poly组组间比较差异有统计学意义(F=7.870,P<0.01);与对照组[(0.062±0.025)mm2]比较,HI+Poly组[(9.287±0.522)mm2]增加最为显著(P<0.01),而且HI+Poly组高于HI组[(2.570±0.257)mm2]和Poly组[(1.361±0.148)mm2,P均<0.01],HI+TG组[(4.843±0.405)mm2]高于HI组和TG组[(1.601±0.268)mm2,P均<0.01].结论 HI和TG免疫可诱发NOD鼠发生甲状腺炎,并刺激甲状腺滤泡上皮表达TLR3,Poly加重了HI诱发的NOD鼠甲状腺炎的病理变化过程;浸润的炎症细胞中亦有TLR3强阳性的细胞,提示TLR3途径参与了自身免疫性甲状腺炎的发病过程.     

慢性碘过量对具有自身免疫遗传倾向的NOD.H-2h4小鼠甲状腺功能和形态影响的实验研究

探讨慢性碘过量对具有自身免疫遗传背景的NOD.H-2h4小鼠甲状腺组织形态、超微结构和功能影响的剂量、时间效应关系.碘过量以剂量依赖和时间依赖的方式导致NOD,H-2h4小鼠甲状腺肿和甲状腺上皮细胞超微结构的损伤.

Abstract：

To explore the dose- and time- dependent relationship between the chronic iodine excess and thyroid structure, ultrastructure, and thyroid function in autoimmune-prone NOD. H-2h4 mice. Chronic iodine excess leads to iodine-induced goiter with an ultrastructure of follicle epithelial cells injury in a dose and time dependent way.     

碘对诱发易感和非易感小鼠自身免疫性甲状腺炎的实验研究

目的：研究典对实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）易和非易感小鼠诱发EAT的影响，进一步探讨自身免疫性甲状腺疾病（AITD）发病的机理。方法：采用EAT易感（TA－1）和非易感（BALB／c）小鼠经甲状腺球蛋白（Tg）免疫，诱发为EAT实验动物模型并给予不同水平的碘饮食，观察小鼠甲状腺组织的病理改变和炎细胞润程度，血清中Tg自身抗体的水平以及低磺和高碘Tg抗原性的不同。结果：（1）2种品系小鼠经Tg诱发，均出现不同水平的Tg自身抗性和甲状腺的炎症反应，血清中Tg自身抗体的出现早于甲状腺的病理改变。（2）TA－1小鼠的甲状腺炎症反应明显高于BALB／c小鼠，高碘组中的TA－1小鼠炎症较适碘组更明显，为弥漫性伴慢性炎症（＋＋＋）。（3）高碘Tg诱发的Tg抗体与高碘Tg抗原的反应明显高于与低碘Tg抗原的反应，低碘Tg诱发的Tg抗体反之，表明二者抗原性有所不同。结论：高碘摄入会使易感小鼠EAT的发病加重，其机理除了体内的遗传因素，可能与过度碘的Tg抗原性增强有关。