酶免疫法检测PGF_(2a):生物素-链霉素亲生物素蛋白放大系统的应用

血液循环中前列腺素F-2α(PGF_(2a))通过肺部时,失活并代谢为13,14-二氢-15-酮-PGF_(2α)(PGFM)。因此,PGFM 是外周血浆中PGF_(2α)实测的指标。七十年代以后,放射免疫法(RIA)已成功地应用于前列腺素(PGs)的常规测定,具有灵敏、可靠和实用的特点,为了避免RIA 因放射性同位素的使用和管理,而带来的不便。作者发展了一种新型酶免疫系统,更替RIA 来测定PGFM,具有高度灵敏性,特异性和可重复性。实验试剂的研制:1.生物胞素-PGFM 的合成     

胰腺癌病人血清蛋白酶和抗蛋白酶浓度

作者用放免法测定了10例胰腺癌术前病人血清的胰蛋白酶,弹性蛋白酶及三种抗蛋白酶:α_2—巨球蛋白、α_1—抗胰蛋白酶和α_1—抗糜蛋白酶的浓度。发现10例病人弹性蛋白酶浓度都升高,而α_2—巨球蛋白都减少,有9例病人α_1—抗糜蛋白酶升高,8例病人α_1—抗胰蛋白酶和胰蛋白酶增加。对一例化疗期间的病人连续测定其血清中这五种酶浓度,结果表明:蛋白酶浓度大为减少,而抗蛋白酶中的α_2—巨球蛋白持续低于正常,α_1—抗胰蛋白酶和α_1—抗糜蛋白酶持续高于正常。作者认为胰腺癌病人血清α_2—巨球蛋白减少是     

凝血机制障碍时血清蛋白电泳变化的探讨

目的 通过对凝血功能障碍患者血清蛋白电泳分析探讨血浆白蛋白、α、β、γ球蛋白蛋白变化。方法 选用健康体检者及凝血酶原时间测定(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)测定、凝血酶时间(TT)测定延长的凝血机制障碍患者各20例,均分别作全自动电泳扫描分析。结果 凝血障碍组与健康组比较,其β-球蛋白、γ-球蛋白有极显著性差异(P<0.01),而α1及α2球蛋白均差异无显著意义。结论 凝血机制障碍病人血浆蛋白电泳异常。血清蛋白电泳分析可了解凝血功能异常时体内蛋白质变化概况。     

重组血小板活化因子水解酶预防ARDS的发生并降低脓毒症患者的病死率

血小板活化因子 (PAF)是诱发脓毒症和急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)的一种重要致炎介质 ,在体内由乙酰水解酶降解而失活。以往的研究表明 ,脓毒症患者体内乙酰水解酶的含量降低而导致 PAF的活性增高。最近 ,美国学者通过多中心临床随机对照试验 ,研究了重组人血小板活化因子水解酶 (r PAF AH)在治疗脓毒症和降低 ARDS发病率方面的作用。研究共纳入33家医院的脓毒症患者 137例 (无明显 ARDS症状 ) ,随机分为 3组 ,其中 4 5例的治疗 1组和 39例的治疗 2组患者分别静脉注射 r PAF AH1m g/ kg或 5 mg/ kg,每日 1次 ,连续治疗 5 d;对照…     

糖尿病尿五种微量蛋白放免检测评估早期肾损害

为探讨尿五种微量蛋白在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的价值,本文用放射免疫分析法(RIA)检测50例正常人及113例非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)患者尿液:α_1-微球蛋白(a_1-MG)、β_2一微球蛋白(β_2-MG)、Tamm-Horsfall蛋白(THP)、白蛋白(ALb)及免疫球蛋白G(IgG)含量,同时为排除尿量等因素对测定值的影响,又分别将上述尿蛋白与尿肌酐(UCr)比值做广观察     

正常人血浆中α_1T-糖蛋白的制备及部分结构特征

从正常人血浆中分离α_1T-糖蛋白(α_1T)使成免疫化学纯,对这种糖蛋白的部分氨基酸序列和糖链进行了测定,为此,用赖氨酰蛋白内切酶、V8蛋白酶、胰蛋白酶和溴化氰对某些肽进行测序以分析羧甲基化的α_1T及其N-末端序列,用化学方法测定了大量的氨基酸(460个氨基酸)残基,并与其它蛋白质的肽序列进行了比较,发现其与白蛋白家族的蛋白质具有高度的同源性,而且,这个蛋白质家族的新成员——人α-白蛋白,显示出与α_1T的氨基酸序列完全相同,表明这两种蛋白质在氨基酸序列和     

miR-223与脓毒症炎性反应的相关性

目的探讨miR-223与脓毒症炎性反应的相关性及临床意义。方法 187例脓毒症患者,根据28 d生存情况分为生存组132例和死亡组55例,采用实时荧光定量PCR法检测2组患者血浆miR-223相对表达量,采用ELISA法检测2组患者血清C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平;采用Spearman相关分析脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与急性生理学和慢性健康(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Scoring System, APACHE)Ⅱ评分及血清CRP、TNF-α、IL-1β、-6、-8、-10水平的相关性;绘制ROC曲线,评估血浆miR-223相对表达量预测脓毒症患者存活的效能。结果死亡组患者血浆miR-223相对表达量[4.898(2.591,7.327)]明显高于生存组[2.727(1.043,4.017)](P0.05);死亡组患者血清CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平高于生存组(P0.05);脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与APCHEⅡ评分(r=0.459,P0.001)、CRP(r=0.326,P0.001)、TNF-α(r=0.325,P0.001)、IL-1β(r=0.165,P=0.024)、IL-6(r=0.229,P=0.002)和IL-8(r=0.154,P=0.035)均呈正相关,与IL-10呈负相关(r=-0.289,P0.001);血浆miR-223相对表达量最佳截断值为3.975时,预测脓毒症患者存活的AUC为0.600(95%CI:0.505～0.695),灵敏度为83.5%,特异度为38.9%。结论血浆miR-223相对表达量与脓毒症患者病情严重程度及炎性反应明显相关,可作为判断脓毒症预后的生物标志物之一。     

α_2-抗纤溶酶

以前认为血浆中抗纤溶酶(anti-plasmin,AP)主要有α_2-巨球蛋白(α_2-MG)和α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)。1976～1977年从血浆分离出α_2-抗纤溶酶(α_2-AP)。它是血浆中主要抗纤溶物质。近年在日本、荷兰、美国发现3例有严重出血症状的遗传性α_2-AP缺乏症,证实了纤溶抑制物在保护血凝块不被溶解以维持止血机制中的重要作用。纤溶酶形成后立即与α_2-AP结合。当大部分纤溶酶原(PG)被激活,饱和了α_2-AP之后,过多的纤溶酶才被α_2-MG灭活。至于α_1-AT,除非加入外源纤溶酶,否则不与血浆中纤溶酶发生作用。在纯系统中,抑制纤溶酶作用的血浆成分尚有内-α-抗胰蛋白酶(inter-α-AT)、抗凝血酶Ⅲ-肝素复合物及C_1-酯酶抑制物。     

慢性肺心病急性发作及缓解期五项蛋白RIA的临床意义

慢性肺心病是老年人常见疾病之一。本文采用放射免疫分析技术(RIA)测定28例慢性肺心病患者急性发作期及21例缓解期尿5项蛋白(β_2m、THP、AIb、IgG、SIgA),同时检测血肌酐(Cr)尿素氮(BUN),并与20例正常老年人尿5项蛋白RIA检测结果进行对照,现报告如下。     

急性非淋巴细胞白血病的α_2-抗纤溶酶

作者测定21例急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者治疗前、后和化疗后再障状态骨髓增生恢复时血α_2-抗纤溶酶(α_2-AP)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)和纤溶酶原水平,以阐明出血的机理及其预后价值.按FAB分类包括M2五例、M3六例、M4五例、M5五例.10例发生弥散性血管内凝血(DIC).     

非竞争免疫酶法定量测定血浆及腹膜透析液中β_2m及Alb

长期血液透析的肾病患者血浆及组织中β_2m的蓄积是诱发淀粉样变性的重要原因.作者用灵敏的ELISA测定血液透析及持续不卧床腹膜透析(CAPD)病人血浆及透析液中β_2m及Alb.比较了腹膜对这两种蛋白的清除率.实验分为3组:血液透析组,11例肾病患者以醋酸盐缓冲液透析23±15月((?)±SD).CAPD组.11例肾病患者以15g/L葡萄糖透析22±13月.18名健康成人为对照组.透析液总蛋白测定用Lowry法.血浆及透析液中β_2m和Alb测定均采用改良非竞争ELISA法.     

肿瘤坏死因子在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用及其机制

目的研究肿瘤坏死因子(TNF)在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢中的作用,并探讨其可能的机制.方法大鼠背部30%总体表面积Ⅲ度烫伤后,立即腹腔注射内毒素(6 mg/kg)制成烧伤脓毒症动物模型,随机分为2、6、12和24小时组,另设对照组,每组15只.称重、有氧孵育大鼠伸趾长肌,利用高效液相色谱法测定肌组织总蛋白和肌纤维蛋白的降解率;并通过Northern杂交检测伸趾长肌内泛素和C2 mRNA的表达变化;放射免疫分析方法测定大鼠血浆内TNF -α含量变化.结果脓毒症大鼠伤后12小时及24小时较对照组伸趾长肌重量显著降低,差异有显著性(P均<0.01);脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白、肌纤维蛋白降解率在2小时较对照组即显著升高(P均<0.01),12小时达高峰,分别升高58%和335%,24小时仍高于对照组(P均<0.01);脓毒症大鼠伸趾长肌内泛素 mRNA (2.4 kb)和C2 mRNA的表达在各时间点均较对照组显著升高,差异有显著性(P均<0.01),其中12小时升高最显著;脓毒症大鼠血浆内TNF-α浓度在各时间点均显著高于对照组(P均<0.01).伸趾长肌肌纤维蛋白降解率与血浆内TNF-α浓度呈显著正相关(r=0.964 8,P<0.01).结论体内TNF-α分泌增多是脓毒症大鼠骨骼肌蛋白,特别是肌纤维蛋白降解显著增加的原因之一,其作用可能是在基因水平增强泛素-蛋白酶体蛋白降解途径的活性而实现.     

抗凝血酶Ⅲ的抗凝作用及其临床意义

凝血和纤溶抑制因子对机体在病理生理情况下保持凝血和纤溶系统的动态平衡起着重要作用。迄今所知,血浆中凝血和纤溶系统蛋白分解酶的抑制物有:α_2巨球蛋白(α_2-Macroglobulin,α_2-MG)、α_1抗胰蛋白酶     

结合珠蛋白的临床意义

结合珠蛋白(haptoglobin,Hp),又称触珠蛋白,亲血色蛋白。它广泛存在于人、哺乳动物及脊椎动物血液及体液中含糖的α_2球蛋白内,约占血浆α_2球蛋白的1/4。它可与血红蛋白(hemoglobin,Hb)特异结合,形成稳定的复合物。     

胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎临床诊断中的应用

目的用胰腺淀粉酶(P-Amy)和淀粉酶(α-Amy)与尿胰蛋白酶原-2进行对比分析,探讨胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎时的临床诊断价值.方法急性胰腺炎(AP)69例,非胰腺炎(NAP)31例,采用免疫层析法测定尿胰蛋白酶原-2,免疫抑制法测定胰腺淀粉酶,酶偶联法测定α-淀粉酶.结果69例急性胰腺炎中有65例尿胰蛋白酶原-2阳性;63例胰腺淀粉酶阳性,59例α-淀粉酶阳性.尿胰蛋白酶原-2的诊断敏感度是94.2%,特异性是90.3%.胰腺淀粉酶诊断敏感度是91.3%,特异性是87.1%,α-淀粉酶的诊断敏感度是85.5%,特异性是74.2%.结论尿胰蛋白酶原-2是诊断急性胰腺炎的较好指标.     

大黄对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 观察大黄对脓毒症大鼠血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,揭示大黄治疗脓毒症的机制.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,104只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(8 只)、CLP组(48只)、大黄治疗组(48只).分别在术后0、3、8、24、48及72 h活杀大鼠留取血标本,采用酶联免疫吸附法测定TNF-α和HMGB-1的含量.结果 大黄治疗组血浆TNF-α水平在8 h,HMGB1水平在24、48及72 h明显低于CLP组, 差异有统计学意义.结论 大黄通过降低血清中TNF-α和HMGB-1的水平,对脓毒症大鼠具有治疗作用.     

二甲双胍对脓毒症大鼠心肌损伤保护作用的相关机制研究

目的:研究二甲双胍对脓毒症大鼠心肌损伤保护作用的相关机制。方法:取40只Wistar雄性大鼠,随机平均分成4组:Sham组、Sham/M组、CLP组、CLP/M组。Sham组仅开腹取出盲肠翻动后还纳腹腔,不进行结扎和穿孔;Sham/M组大鼠在术前1.5h通过灌胃方式灌入二甲双胍(100 mg/kg),其他同Sham组;CLP组采用大鼠盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)方法制备脓毒症模型;CLP/M组大鼠在术前1.5h通过灌胃方式灌入二甲双胍(100 mg/kg),其他同CLP组。在术后12h、24h分别采样检测血浆cTn-I、TNF-α水平、心肌细胞中Caspase-3蛋白表达水平,同时在光镜下观察心肌结构改变。结果:(1)术后12h、24h,血浆中cTn-I、TNF-α水平在Sham组大鼠与Sham/M组中差异无统计学意义(P0.05),CLP组和CLP/M组cTn-I、TNF-α水平较Sham组明显升高(P0.01),同时CLP/M组cTn-I、TNF-α水平较CLP组显著降低(P0.01);(2)术后12h,Caspase-3蛋白表达水平在Sham组和Sham/M组中差异无统计学意义(P0.05),CLP组Caspase-3蛋白表达水平较Sham组明显升高(P0.05),CLP/M组血浆Caspase-3蛋白表达水平较CLP组有所下降(P0.05);(3)光镜下心肌组织:Sham/M组心肌形态与Sham组基本相似。CLP组:12h心肌纤维肿胀,少量溶解;24h心肌纤维溶解,排列紊乱。CLP/M组:与CLP组比较,12h及24h心肌纤维排列紊乱减轻,炎性细胞浸润较少。结论:二甲双胍通过减少心肌细胞凋亡途径来减轻脓毒症大鼠心肌细胞的损伤。     

人血清四种糖蛋白的测定及临床应用

本文用速率比浊法和免疫单向扩散法测定了100例正常成人的血清转铁蛋白(Tf),结合珠蛋白(Hp)、α_1-酸性糖蛋白(α_1-AG)和α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)的含量。还测定了61例病人血清Tf、Hp含量及43例胎儿血清Tf、α_1-AT及Hp含量,表明类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、尿毒症病人血清中Tf含量明显低于正常人;而尿毒症病人血清中Hp含量显著高于正常人;胎儿血清Tf、Hp含量都明显低于正常成人。     

脓毒症患者肠道黏膜通透性的临床研究

目的探讨脓毒症患者肠道黏膜通透性的变化。方法前瞻、随机抽取符合入选条件的脓毒症患者和健康志愿者各20例。入选的患者和健康志愿者均给予口服含乳果糖10g、甘露醇5g的测试液,用高效液相色谱仪示差折光检测器测定6h后尿中乳果糖和甘露醇水平,计算出它们的比值(L/M);留取尿液的同时抽取血液标本测定血浆D-乳酸和血清前降钙素(PCT)水平。观察并对比脓毒症患者和健康志愿者以上指标,并对尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT进行相关分析。结果脓毒症患者的尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT水平较健康志愿者明显偏高(P<0.001);而脓毒症患者的尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT呈正相关(P<0.01或P<0.001)。结论脓毒症患者的肠道黏膜通透性明显增加,肠道黏膜通透性的增高程度与脓毒症的严重程度有密切关系。     

免疫增强比浊法和免疫荧光法测定血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的比较及诊断脓毒症急性肾损伤的价值

目的比较免疫增强比浊法和免疫荧光法在测定患者血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的差异,评估血浆和尿液NGAL值对诊断脓毒症患者发生急性肾损伤(AKI)的价值。方法选择脓毒症患者35例,根据是否发生AKI分为脓毒症AKI组(n=12)和脓毒症非AKI组(n=23)。另选取同期健康体检人群8例作为对照组。留取入院24 h内的血浆和尿液标本。采用免疫增强比浊法和免疫荧光法分别测定血浆和尿液标本的NGAL值。绘制ROC曲线评估血浆NGAL值预测脓毒症AKI的诊断效率。结果采用免疫增强比浊法进行测定,脓毒症组血浆和尿NGAL值均显著高于对照组(P0.01)。脓毒症AKI组血浆NGAL显著高于脓毒症非AKI组(P0.05),但2组尿NGAL值差异无统计学意义(P0.01)。采用免疫荧光法进行测定,脓毒症组血浆NGAL值显著高于对照组(P0.01),脓毒症AKI组血浆NGAL值显著高于脓毒症非AKI组(P0.05)。ROC分析表明,免疫增强比浊法曲线下面积0.785(95%CI:0.642~0.928),免疫荧光法曲线下面积为0.853(95%CI:0.729~0.977),约登指数最大时的判断点分别为0.575和0.567。结论血浆NGAL值可判断脓毒症AKI的发生,免疫荧光法较免疫增强比浊法更为准确。