N-亚硝基胆汁酸结合物对鼠伤寒沙门氏菌和人类成淋巴细胞二倍体的致突变性

许多N-亚硝基化合物对器官有特异的致癌性。N-亚硝酰胺及其有关化合物与胃肿瘤有关。N-甲基-N-亚硝基乙酰胺是大鼠前胃致癌元,N-甲基N-亚硝基脲和N-甲基N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)可在大鼠胃的几个位置诱发肿瘤。 最近我们合成两个有特征性的亚硝酰胺,即N-亚硝基牛磺胆酸(NOTC)和N-亚硝基甘氨胆酸     

人鼻咽癌DNA的转化活性

本文以鼻咽癌活检组织及CNE_1细胞株DNA为实验材料,用磷酸钙沉淀法转染了NIH/3T3 小鼠纤维母细胞、Rat-1 大鼠纤维母细胞和JB_6Cl_(41)小鼠上皮细胞,并以软琼脂培养法检测了转染后的MIH/3T3 细胞集落生成情况。实验表明:鼻咽癌及其CNE_1细胞DNA均可以诱发NIH/3T3细胞、Rat-1细胞转化,也可使NIH/3T3细胞获得在软琼脂上生长的能力,但不能使JB_6Cl_(41)细胞转化。本文还讨论了鼻咽癌及其CNE_1细胞DNA诱发的受体细胞转化与EB病毒感染间的关系,并对鼻咽癌转化基因的性质作了初步估计。     

人α-甘露糖苷酶Man2c1转基因对移植性肿瘤在小鼠体内生长和转移的影响

目的研究人α-甘露糖苷酶(hMan2c1)转基因对小鼠移植性肿瘤生长、转移的影响。方法接种肝癌细胞H22或肉瘤细胞S180于野生型ICR小鼠和3个系的转基因小鼠(28、35和54号)右侧腋窝皮下,连续测量肿瘤体积。分别于接种细胞第9天和第10天处死小鼠,称重肿瘤。分别对肿瘤组织和肺组织进行HE染色。用Tris-NH4Cl破碎脾脏中的红细胞,以Yac-1细胞为靶细胞,检测脾脏中自然杀伤(NK)细胞的活性。结果接种于3个系的转基因小鼠的H22肿瘤或S180肿瘤的体积及重量均显著高于野生型小鼠(P<0.05)。绝大多数转基因小鼠的肿瘤向周围组织侵袭,而野生型小鼠的肿瘤几乎均有包膜。54、35和28号转基因小鼠的H22肿瘤肺转移率分别为30%(3/10)、50%(5/10)和30%(3/10),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为10%(1/10);54、35和28号转基因小鼠的S180肿瘤肺转移率分别为16.7%(1/6)、50%(3/6)和33.3%(2/6),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为0(0/10)。转基因小鼠脾脏的NK细胞活性与野生型小鼠比较差异无显著性(P>0.05)。结论hMan2c1转基因促进移植性H22肿瘤及S180肿瘤在ICR小鼠的生长、侵袭和转移,hMan2c1转基因对小鼠脾脏NK细胞的活性无影响。     

人精子细胞膜结合型透明质酸酶促进人乳腺癌细胞增殖的实验观察

目的　探讨人精子细胞膜结合型透明质酸酶 (PH2 0 )促进乳腺癌细胞增殖的机制。方法　将人PH2 0cDNA转染到人乳腺癌细胞株MDA2 31中 (MDA2 31 PH2 0 ) ,对照组用pcDNA3空载体替代PH2 0重组体。将MDA2 31 PH2 0和MDA2 31 pcDNA3分别以同样数量种植到鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)上 ,种植后第 4天切取肿瘤称重 ,并用免疫组织化学方法研究肿瘤组织中血管形成的变化。另外 ,用Trans well细胞培养法研究MDA2 31 PH2 0和MDA2 31 pcDNA3细胞对牛主动脉内皮细胞 (ABAE)生长的影响 ;用Western印迹法观察这两组细胞的成纤维细胞生长因子 2 (FGF 2 )表达水平 ,并用酶联免疫吸附试验测定两组细胞的FGF 2和透明质酸 (HA)分泌量。结果　MDA2 31 PH2 0组平均肿瘤重量为4 4 7mg± 10 2mg ,MDA2 31 pcDNA3组为 2 1 3mg± 2 8mg,两组比较差异有显著意义 (t=2 4 18,P =0 0 38)。MDA2 31 PH2 0肿瘤组织中新生血管明显增多。MDA2 31 PH2 0细胞FGF 2蛋白质表达水平增高 ,同时细胞FGF含量 (8 10pg/ml± 1 5 6pg/ml)和HA含量 (12 2 0ng/ml± 2 5 4ng/ml)也均高于对照组(分别为 3 94pg/ml± 0 82pg/ml和 4 6 2ng/ml± 96ng/ml,均P <0 0 1)。结论　PH2 0可能通过促进癌细胞释放FGF 2和分解HA成小片段 ,刺激新生血管生长并促进肿瘤     

微量元素锌对人TH细胞IL2产生的增强作用

本文报道了应用改进的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测不同浓度微量元素锌对人 T_细胞 IL_3产生能力的影响。结果表明,微量元素锌在0.153～765μmol/L 浓度范围均有显著增强 IL_2产生的作用。1.53μmol/L 的锌浓度的增强作用非常显著(P<0.01)。本研究证明,锌制剂增强 IL_2产生的作用并非该制剂的直接作用所致。     

高糖状态下人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤情况以及上皮-间质转化情况评估

目的:研究高糖环境对人视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化应激损伤情况以及上皮-间质转化的影响。方法:培养人RPE细胞,并分为低糖对照组、高渗对照组、高糖干预组,分别用葡萄糖浓度为5.5mmol/L的DMEM培养基、渗透浓度为60.0mmol/L且葡萄糖浓度为5.5 mmol/L的DMEM培养基、葡萄糖浓度为60.0mmol/L的DMEM培养基处理,24 h后测定细胞中氧化应激分子、细胞凋亡分子以及间质细胞标志分子的含量。结果:高糖干预组细胞中ROS、MDA、3-NT、Nrf2、ARE、Caspase-3、Bax、JNK、c-JUN、α-SMA、Vimentin、N-cadherin的含量均显著高于低糖对照组和高渗对照组,GST、HO-1的含量均显著低于低糖对照组和高渗对照组;低糖对照组和高渗对照组细胞中ROS、MDA、3-NT、Nrf2、ARE、Caspase-3、Bax、JNK、c-JUN、α-SMA、Vimentin、N-cadherin、GST、HO-1的含量无显著性差异。结论:高糖环境能够通过增强RPE细胞的氧化应激反应来启动细胞的凋亡过程以及上皮间质转化过程。     

1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响. 方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度.分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达. 结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P＜0.05).取最佳药物作用浓度10-6 mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)％、对照组(85.23±2.08)％、GES-1细胞组(4.9±0.91)％.与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P＜0.05).RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.0095)均表达(P＞0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P＜0.05). 结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的.其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关.     

环六缩酚肽化合物体外抑制人肺癌细胞增殖活性及其机制的研究

目的 检测3种环六缩酚肽化合物对人肺部肿瘤细胞增殖活性的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 腐败菌素 B,pseudodestruxin C 和pullularin C 在3种浓度100,10和1 μmol/L分别作用于人非小细胞肺癌细胞(A549和QG-56)和人小细胞肺癌细胞(PC-6和QG-90),MTT比色...     

抗人淋巴细胞及其亚群单克隆抗体检测卵巢癌的初步观察

采用抗人淋巴细胞及其亚群单克隆抗体检测技术,对10例卵巢癌患者进行检测。结果卵巢癌组患者外周血全部T淋巴细胞(T_3)和辅助性/诱导性亚T类细胞(T_4)百分值较卵巢良性肿瘤明显降低,差异有高度显著意义。而抑制性/杀伤性T亚类细胞(T_8)百分值、T_4/T_8比值,及B细胞百分值,两组均接近(P<0.05)。提示卵巢癌患者的机体免疫应答以细胞免疫为主,癌细胞能产生对T淋巴细胞有抑制作用的因子。作者认为人外周血淋巴细胞T_3、T_4的变化在鉴别卵巢良、恶性肿瘤方面有参考价值。     

人食管痛组织中转化基因的研究

细胞癌基因激活与细胞癌变有密切关系。由肿瘤组织提取DNA转染NIH/3T3细胞,得到恶性转化细胞,从中分离属于人高度重复序列Alu,其中含有致癌活性的DNA后段即转化基因。我们用上述方法发现人食管癌组织中有转化基因。从8例林县食管癌患者手术摘除的食管癌组织、北京胎儿食管上皮和10代以下的NIH/3T3细胞(日本 Dr Terada赠)提取DNA,用提取的DNA转染NIH/3T3细胞,5％新生牛血清筛选转化灶(Foci),以转化基因中人重复序列Alu为探针进行Southern法核酸杂交。     

大鼠仔鼠肝脏中T_45′脱碘酶活性变化的研究

T_45′脱碘酶的作用是使局部组织中 T_4向 T_3,转化,巯基是其辅助因子。本实验应用放射免疫分析法研究了大鼠仔鼠肝脏中 T_45′脱碘酶活性变化及原因,结果发现。新生仔鼠肝脏中 T_45′脱碘酶活性明显低于成年大鼠,到21天左右时才达到成年水平,但在5mMDTT(二巯基苏糖醇)存在下测其活性时,则可消除这种差别。由此可知,仔鼠肝脏中 T_45′脱碘酶活性低于成年大鼠可能是由于仔鼠肝脏中巯基化合物含量少引起的,而和血中 T_3、T_4含量少无关。从而说明疏基化合物对新生仔鼠是很重要的。     

外源性TGF-β1诱导人乳腺癌MCF-7细胞的乙醛脱氢酶1 mRNA及蛋白表达

 目的 本研究旨在探讨外源性TGF β1诱导人乳腺癌MCF 7细胞对乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)mRNA及蛋白表达的影响。方法 用不同浓度(1、5 ng/mL)的TGF β1诱导体外培养的MCF 7细胞48 h后,RT PCR 检测ALDH1 mRNA的表达变化,Western blot检测ALDH1蛋白的表达变化。结果 TGF β1(1、5 ng/mL)诱导的MCF 7细胞的ALDH1 mRNA及蛋白表达均高于未诱导的MCF 7亲本细胞,差异有统计学意义(P均<0.001);高浓度(5 ng/mL)TGF β1诱导的MCF 7细胞的ALDH1 mRNA及蛋白表达均高于低浓度(1 ng/mL)TGF β1诱导的MCF 7细胞,差异有统计学意义(P均<0.001)。结论 外源性TGF β1可诱导人乳腺癌MCF 7细胞上调ALDH1 mRNA及蛋白的表达,可能诱导ALDH1+乳腺癌肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)的转化,并有一定的浓度依赖性。     

吐温化合物对人胃癌MGC803细胞生长的影响

目的　研究吐温化合物对人胃癌MGC80 3细胞生长的影响 ,确定诱导分化剂二烯丙基二硫 (DADS)的溶媒。方法　采用MTT比色、生长曲线分析、细胞活力检测和流式细胞仪观察溶媒Tween2 0、Tween 80与二烯炳基二硫 (DADS)对MGC80 3细胞生长的影响。结果　Tween 80稀释浓度由 1 0 0 0倍～ 1 60 0 0倍时 ,其他浓度组均具有抑制作用 ,并呈浓度依赖性 (IR 6.2 %～ 92 .6% ,P <0 .0 5 )。Tween2 0稀释浓度由 5 0 0 0倍～ 30 0 0 0倍时 ,均对MGC80 3细胞具有促生长作用 (PR 3.6%～ 1 6.1 % ,P <0 .0 5 )。Tween 80稀释浓度 32 0 0 0倍对MGC80 3细胞生长、生长曲线、细胞群体倍增时间、细胞周期均无影响 ,与对照组、DADS处理组细胞存活率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而以此作为溶媒的不同浓度DADS具有抑制MGC80 3细胞生长的效果 ,与对照组和Tween 80组的差异均具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,抑制率呈现时间 -效应依赖关系 (P <0 .0 5 ) ,对细胞群体倍增时间延长 (P <0 .0 5 ) ,并且可阻滞MGC80 3细胞于G2 /M期。结论　Tween 80具有抑制MGC80 3细胞生长作用 ,而Tween2 0对MGC80 3细胞具有促生长作用。选择Tween 80稀释浓度 32 0 0 0作为DADS溶媒 ,用于DADS对人胃癌MGC80 3细胞影响的研究比较合适。     

Rg3对人肺腺癌A549细胞及其内源性VEGF的影响

目的探讨人参皂甙-RG3在抑制肿瘤新生血管生成过程中的作用,对人肺腺癌A549细胞的影响及其内源性分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法培养人肺腺癌细胞株A549细胞,采用MTT法检测不同浓度RG3(10-4MOL/L,10-5MOL/L,10-6MOL/L)对人肺腺癌A549细胞增生的影响、流式细胞仪观察不同浓度RG3(3×10-7MOL/L、10-6MOL/L,3×10-6MOL/L)对A549细胞凋亡的影响、放射免疫分析法定量检测细胞培养液中加入不同浓度RG3(10-7MOL/L、10-6MOL/L、10-5MOL/L和10-4MOL/L)后内源性VEGF含量的变化。结果RG3对A549细胞的增生无明显抑制作用,3×10-6MOL/L RG3作用120H后A549细胞凋亡百分数为29.8%(P<0.05)。RG3浓度为10-5MOL/L和10-4MOL/L组的VEGF明显低于对照组(P<0.05),10-4MOL/L RG3组的VEGF低于10-7MOL/L和10-6MOL/L RG3组,作用72H的VEGF水平明显低于48H和24H组(P<0.05)。结论适当浓度的RG3作用一定时间后,可促使人肺腺癌A549细胞的凋亡,并可抑制肿瘤细胞内源性分泌的VEGF含量,RG3抑制肿瘤血管生成机制之一是通过影响细胞分泌上述因子而起作用的。     

不同麻醉方法对肺癌根治术患者T细胞亚群及IL-2、IFN-γ的影响

目的探讨不同麻醉方法对肺癌根治术患者围术期T细胞亚群及细胞因子的影响。方法择期肺癌根治术患者30例,随机分为2组:静脉丙泊酚复合硬膜外麻醉组(A组)和全凭静脉麻醉组(B组),每组15例。2组患者入室前30 min肌肉注射阿托品0.5 mg及咪达唑仑0.05 mg/kg,麻醉诱导方法相同。A组术中靶控输注丙泊酚维持镇静,硬膜外间断推注0.375%罗哌卡因维持镇痛;B组术中靶控输注丙泊酚维持镇静,靶控输注瑞芬太尼维持镇痛;2组均采用曲马多术后镇痛。分别于麻醉前(T_0)、手术开始后1 h(T_1)、术毕(T_2)、术后1 d(T_3)、术后3d(T_4)抽取外周静脉血5 ml,1 ml采用流式细胞分析技术(FCM)检测T细胞亚群,4 ml离心取血清采用ELISA法测定血清白介素-2(IL-2)及干扰素-γ(INF-γ)的浓度。结果2组CD_3~+、CD_4~+均于T_1开始下降,A组于T_3降至最低(P<0.01),B组于T_2降至最低(P<0.01)。T_4 2组有所恢复,但仍低于T_0(P<0.05)。与A组比较,B组T_1、T_2差异有统计学意义(P<0.05)。2组CD_8~+各时点差异无统计学意义,CD_4~+/CD_8~+ A组于T_2、T_3下降,B组于T_1、T_2、T_3下降(P<0.05,P<0.01)。2组血清IL-2浓度变化,与T_0比较,B组T_2、T_3、T_4差异有统计学意义,A组T_3、T_4差异有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组T_2时差异有统计学意义(P<0.05)。2组INF-γ浓度T_2、T_3降低,与T_0比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与A组比较,B组T_2时下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论静脉丙泊酚复合硬膜外麻醉对肺癌根治术患者T细胞亚群及IL-2、INF-γ浓度的影响较小,利于维持机体免疫平衡。     

叶绿酸对某些致癌物和复合物的抗转化活性研究

叶绿酸对由甲基硝基亚硝基胍、三甲基胆蒽、二甲基苯蒽、苯并a芘、黄曲霉毒素B_1以及煤尘抽提物、含烟和嚼烟提取物诱发的BALB/3T3细胞形态学转化具有抑制作用,但作用强度不同,可能由于化合物的结构、生物学活性和试验浓度等因素不同所致。叶绿酸是一种抗氧化剂,可使氧化基团失活或与一些活性基团反应,其抗转化作用可能与此有关。     

土木香根中3种倍半萜内酯化合物抑制人肺肿瘤细胞增殖活性及其构效关系的研究

目的 通过检测土木香根中提取的3种倍半萜内酯化合物Eupatolide (化合物1)、 1,5-Diacetoxy-3, 4-epoxy-9(10)-germacrane-12,8α -olide (化合物2) 和1,5-Diacetoxy1-11,13-dihydrogen-3,9-germacradien -12,8α -olide (化合物3)抑制人肺肿瘤细胞增殖活性的影响,探讨这3种倍半萜化合物的体外抑制人肺肿瘤细胞增殖作用以及化合物结构与活性之间的构效关系.方法 应用噻唑蓝法测定3种倍半萜内酯化合物对体外培养人肺肿瘤细胞增殖的影响.结果 化合物1(泽兰内酯)对人非小细胞肺肿瘤细胞(A549和QG-56)的增殖抑制作用强于顺铂,对人小细胞肺肿瘤细胞(PC-6和QG-90) 的增殖抑制作用与顺铂相同;化合物2和3对各种实验用肿瘤细胞的增殖不显示抑制活性.结论 推测A-环上的6位游离羟基是该类倍半萜内酯的体外抑制肿瘤细胞增殖作用所必需的活性基团.     

非毒性甲状腺肿瘤中T4,T3免疫组化研究

应用过氧化物酶标记抗体方法测定23例甲状腺肿瘤患者的甲状腺组织中T_4和T_3。10例滤泡状腺癌中有8例显示T_4定位,9例显示T_3定位;8例乳头状腺癌全部显示T_4和T_3定位;3例滤泡状腺癌中3例T_3定位,1例显示T_4定位。在肿瘤组织中甲状腺激素存在于类胶物中、肿瘤细胞腔面及细胞浆内。与非肿瘤甲状腺组织比较,肿瘤组织中的激素定位主要在细胞浆内。而类胶物中较少。测定甲状腺组织中的T_4和T_3,对估计甲状腺肿瘤功能活动性及确定是否来源于甲状腺恶性肿瘤有实用价值。     

姜黄素对人视网膜色素上皮细胞增殖和VEGF表达的影响

目的 探讨姜黄素对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 (1)采用不同浓度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)的姜黄素干预hRPE细胞1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d,同时设置空白对照组(不给予姜黄素干预)。采用CCK-8法检测各时间点不同浓度姜黄素对hRPE细胞增殖的影响，采用流式细胞仪检测各时间点各组细胞周期时相分布情况。(2)将hRPE细胞分为姜黄素组和对照组，姜黄素组加入10μg/mL的姜黄素，对照组加入等体积培养液，采用实时荧光半定量PCR检测各组hRPE细胞VEGF mRNA的表达水平。结果 (1)各浓度姜黄素对hRPE细胞均有抑制作用(均P<0.05),且随着药物浓度的增大、作用时间的延长，其抑制率呈升高趋势，整体呈现剂量和时间依赖性。(2)不同浓度姜黄素干预后，G₀/G₁期细胞比例均大于空白对照组，S期细胞比例和G₂/M期细胞比例均小于空白对照组(均P<0.05)。(3)姜黄素组hRPE细胞VEGF mRN...     

丙泊酚与七氟烷对重度烧伤患者围手术期应激反应的影响研究

目的:探讨丙泊酚与七氟烷两种麻醉药物对重度烧伤患者围手术期应激反应的影响。方法:选择本院2012年3月-2014年3月住院择期重度烧伤手术患者40例,采用随机数字表法分为Sev组和Pro组,每组20例。Sev组持续吸入2%~3%七氟烷(以呼气末七氟烷浓度为准);Pro组持续静脉靶控输注丙泊酚,设定效应室浓度3~4μ g/mL(Marsh模型)。观察并记录患者手术和麻醉时间、手术开始后24 h内输液及输血量、体温、镇痛效果等一般情况,于患者手术开始前(T_0)、手术开始后3 h(T_1)、6 h(T_2)、12 h(T_3)、24 h(T_4)各个时点分别记录心电图(ECG)、心率(HR)、呼吸(RR)、麻醉全程监测血氧饱和度(SpO_2)、中心静脉压(CVP)、有创平均动脉测压(IMBP)、各参数值,同时采集静脉血标本,测血浆TNF-α、IL-6及NF-κ B含量。结果:与T_0时点比较,两组TNF-α、IL-6及NF-κ B含量均有不同程度的升高,其中Pro组患者T_1、T_2、T_3和T_4的TNF-α、IL-6及NF-κ B含量均增加,差异均有统计学意义(P0.05);与Pro组比较,Sev组在T_0时TNF-α、IL-6及NF-κ B含量比较,差异无统计学意义(P0.05),在T_1、T_2、T_3和T_4降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:七氟烷对手术患者血清TNF-a、IL-6及NF-κ B的抑制作用强于丙泊酚,可能更有利于控制围手术期间的应激反应,降低全身炎症反应综合征的发生。